Name: Cuantificación de la modulación de la actividad de la enzima elastasa mediante análisis colorimétrico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 30 s
Description: Aprende a cuantificar la actividad de la enzima elastasa mediante un ensayo colorimétrico in vitro. Este método permite evaluar extractos vegetales naturales y superar los desafíos de su coloración compleja.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Medición de la modulación de la elastasa: un ensayo colorimétrico para obtener información terapéutica

<ol><li>Imokawa, G., Ishida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+mechanisms+underlying+the+ultraviolet+radiation-induced+formation+of+skin+wrinkling+and+sagging+I%3A+Reduced+skin+elasticity%2C+highly+associated+with+enhanced+dermal+elastase+activity%2C+triggers+wrinkling+and+sagging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Biological mechanisms underlying the ultraviolet radiation-induced formation of skin wrinkling and sagging I: Reduced skin elasticity, highly associated with enhanced dermal elastase activity, triggers wrinkling and sagging.</a> Int J Mol Sci. 16 (4), 7753-7775 (2015).</li>
<li>Voynow, J. A., Shinbashi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+elastase+and+chronic+lung+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Neutrophil elastase and chronic lung disease.</a> Biomolecules. 11 (8), 11081065(2021).</li>
<li>Whitcomb, D. C., Lowe, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+pancreatic+digestive+enzymes%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Human pancreatic digestive enzymes.</a> Dig Dis Sci. 52 (1), 1-17 (2007).</li>
<li>Heinz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastic+fibers+during+aging+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Elastic fibers during aging and disease.</a> Ageing Res Rev. 66, 101255(2021).</li>
<li>Antonicelli, F., Bellon, G., Debelle, L., Hornebeck, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastin-elastases+and+inflamm-aging%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Elastin-elastases and inflamm-aging.</a> Curr Top Dev Biol. 79, 99-155 (2007).</li>
<li>Desmiaty, Y., Faizatun, F., Noviani, Y., Ratih, H., Ambarwati, N. S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+natural+products+in+inhibiting+premature+skin+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Appl+Pharm%22%5BJournal%5D)">Potential of natural products in inhibiting premature skin aging.</a> Int J Appl Pharm. 14 (Special Issue 3), 1-5 (2022).</li>
<li>Bhatiya, M., Pathak, S., Jothimani, G., Duttaroy, A. K., Banerjee, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+study+on+the+anti-cancer+effects+of+quercetin+and+its+epigenetic+modifications+in+arresting+progression+of+colon+cancer+cell+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Immunol+Ther+Exp+%28Warsz%29%22%5BJournal%5D)">A comprehensive study on the anti-cancer effects of quercetin and its epigenetic modifications in arresting progression of colon cancer cell proliferation.</a> Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 71 (1), 6(2023).</li>
<li>Shen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computational+analysis+of+curcumin-mediated+alleviation+of+inflammation+in+periodontitis+patients+with+experimental+validation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Computational analysis of curcumin-mediated alleviation of inflammation in periodontitis patients with experimental validation in mice.</a> J Clin Periodontol. 51 (6), 787-799 (2024).</li>
<li>Yücel, Ç, Karatoprak, G. Ş, Yalçıntaş, S., Böncü, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethosomal+%28%E2%88%92%29-epigallocatechin-3-gallate+as+a+novel+approach+to+enhance+antioxidant%2C+anti-collagenase+and+anti-elastase+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Beilstein+J+Nanotechnol%22%5BJournal%5D)">Ethosomal (−)-epigallocatechin-3-gallate as a novel approach to enhance antioxidant, anti-collagenase and anti-elastase effects.</a> Beilstein J Nanotechnol. 13, 491-502 (2022).</li>
<li>Wojtkiewicz, A. M., Oleksy, G., Malinowska, M. A., Janeczko, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+synthesis+of+a+skin+active+ingredient+-+glochidone+by+3-ketosteroid+dehydrogenase+from+Sterolibacterium+denitrificans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Steroid+Biochem+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Enzymatic synthesis of a skin active ingredient - glochidone by 3-ketosteroid dehydrogenase from Sterolibacterium denitrificans.</a> J Steroid Biochem Mol Biol. 241, 106513(2024).</li>
<li>Amnuaykan, P., Juntrapirom, S., Kanjanakawinkul, W., Chaiyana, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+antioxidant%2C+anti-aging%2C+anti-tyrosinase%2C+and+anti-inflammatory+properties+of+Vanda+coerulea+griff.+ex+lindl.+protocorm+through+elicitations+with+chitosan%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Enhanced antioxidant, anti-aging, anti-tyrosinase, and anti-inflammatory properties of Vanda coerulea griff. ex lindl. protocorm through elicitations with chitosan.</a> Plants. 13 (13), 13131770(2024).</li>
<li>Petcharaporn, K., Thongkao, K., Thongmuang, P., Sudjaroen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutritional+composition%2C+capsaicin+content+and+enzyme+inhibitory+activities+from+%26%2334%3BBang+Chang%26%2334%3B+thai+cultivar+chili+pepper+%28capsicum+annuum+var.+acuminatum%29+after+drying+process%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm+Qual+Assur%22%5BJournal%5D)">Nutritional composition, capsaicin content and enzyme inhibitory activities from &#34;Bang Chang&#34; thai cultivar chili pepper (capsicum annuum var. acuminatum) after drying process.</a> Int J Pharm Qual Assur. 14 (3), 707-711 (2023).</li>
<li>Jeon, D. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antioxidant+activity+and+inhibitory+effects+of+whitening+and+wrinkle-related+enzymes+of+Polyozellus+multiplex+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Food+Meas+Charact%22%5BJournal%5D)">Antioxidant activity and inhibitory effects of whitening and wrinkle-related enzymes of Polyozellus multiplex extracts.</a> J Food Meas Charact. 17 (2), 1279-1288 (2023).</li>
<li>Putri, I. R., Handayani, R., Elya, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-elastase+activity+of+rumput+teki+%28Cyperus+rotundus+L.%29+rhizome+extract%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+J%22%5BJournal%5D)">Anti-elastase activity of rumput teki (Cyperus rotundus L.) rhizome extract.</a> Pharmacogn J. 11 (4), 754-758 (2019).</li>
<li>Liyanaarachchi, G. D., Samarasekera, J. K. R. R., Mahanama, K. R. R., Hemalal, K. D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tyrosinase%2C+elastase%2C+hyaluronidase%2C+inhibitory+and+antioxidant+activity+of+Sri+Lankan+medicinal+plants+for+novel+cosmeceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Ind+Crops+Prod%22%5BJournal%5D)">Tyrosinase, elastase, hyaluronidase, inhibitory and antioxidant activity of Sri Lankan medicinal plants for novel cosmeceuticals.</a> Ind Crops Prod. 111, 597-605 (2018).</li>
<li>Apraj, V. D., Pandita, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+skin+anti-aging+potential+of+Citrus+reticulata+blanco+peel%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of skin anti-aging potential of Citrus reticulata blanco peel.</a> Pharmacogn Res. 8 (3), 160-168 (2016).</li>
<li>Pandey, B. P., Pradhan, S. P., Adhikari, K., Nepal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bergenia+pacumbis+from+Nepal%2C+an+astonishing+enzymes+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Med+Ther%22%5BJournal%5D)">Bergenia pacumbis from Nepal, an astonishing enzymes inhibitor.</a> BMC Complement Med Ther. 20 (1), 198(2020).</li>
<li>Dharwal, V., Sandhir, R., Naura, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP-1+inhibition+provides+protection+against+elastase-induced+emphysema+by+mitigating+the+expression+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">PARP-1 inhibition provides protection against elastase-induced emphysema by mitigating the expression of matrix metalloproteinases.</a> Mol Cell Biochem. 457 (1-2), 41-49 (2019).</li>
<li>Jugniot, N., Voisin, P., Bentaher, A., Mellet, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+elastase+activity+imaging%3A+Recent+approaches+in+the+design+and+applications+of+activity-based+probes+and+substrate-based+probes%5BTitle%5D)+AND+%22Contrast+Media+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Neutrophil elastase activity imaging: Recent approaches in the design and applications of activity-based probes and substrate-based probes.</a> Contrast Media Mol Imaging. 2019, (2019).</li>
<li>Stone, P. J., Morris, S. M., Thomas, K. M., Schuhwerk, K., Mitchelson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repair+of+elastase-digested+elastic+fibers+in+acellular+matrices+by+replating+with+neonatal+rat-lung+lipid+interstitial+fibroblasts+or+other+elastogenic+cell+types%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Repair of elastase-digested elastic fibers in acellular matrices by replating with neonatal rat-lung lipid interstitial fibroblasts or other elastogenic cell types.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 17 (3), 289-301 (1997).</li>
<li>Weiss, F. U., Budde, C., Lerch, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specificity+of+a+polyclonal+fecal+elastase+ELISA+for+CELA3%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Specificity of a polyclonal fecal elastase ELISA for CELA3.</a> PLoS ONE. 11 (7), 0159363(2016).</li>
<li>Thring, T. S. A., Hili, P., Naughton, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-collagenase%2C+anti-elastase+and+anti-oxidant+activities+of+extracts+from+21+plants%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Altern+Med%22%5BJournal%5D)">Anti-collagenase, anti-elastase and anti-oxidant activities of extracts from 21 plants.</a> BMC Complement Altern Med. 9 (1), 27(2009).</li>
<li>Donà, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+restraint+by+green+tea%3A+Inhibition+of+inflammation%2C+associated+angiogenesis%2C+and+pulmonary+fibrosis+1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil restraint by green tea: Inhibition of inflammation, associated angiogenesis, and pulmonary fibrosis 1.</a> J Immunol. 170, 4335-4341 (2003).</li>
<li>Michailidis, D., Angelis, A., Nikolaou, P. E., Mitakou, S., Skaltsounis, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploitation+of+vitis+vinifera%2C+foeniculum+vulgare%2C+cannabis+sativa+and+punica+granatum+by-product+seeds+as+dermo-cosmetic+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Exploitation of vitis vinifera, foeniculum vulgare, cannabis sativa and punica granatum by-product seeds as dermo-cosmetic agents.</a> Molecules. 26 (3), 26030731(2021).</li>
<li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curcumin+attenuates+elastase-+and+cigarette+smoke-induced+pulmonary+emphysema+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Curcumin attenuates elastase- and cigarette smoke-induced pulmonary emphysema in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 296 (4), L614-L623 (2009).</li>
<li>Brás, N. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+pancreatic+elastase+by+polyphenolic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Inhibition of pancreatic elastase by polyphenolic compounds.</a> J Agric Food Chem. 58 (19), 10668-10676 (2010).</li>
<li>Álvarez-Martínez, F. J., Díaz-Puertas, R., Barrajón-Catalán, E., Micol, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant-derived+natural+products+for+the+treatment+of+bacterial+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+of+Experimental+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Plant-derived natural products for the treatment of bacterial infections.</a> Handbook of Experimental Pharmacology. , (2024).</li>
<li>Álvarez-Martínez, F. J., Barrajón-Catalán, E., Herranz-López, M., Micol, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial+plant+compounds%2C+extracts+and+essential+oils%3A+An+updated+review+on+their+effects+and+putative+mechanisms+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Antibacterial plant compounds, extracts and essential oils: An updated review on their effects and putative mechanisms of action.</a> Phytomedicine. 90, 153626(2021).</li>
<li>Saganuwan, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+modified+Michaelis-Menten+equations+for+determination+of+enzyme+inducing+and+inhibiting+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Application of modified Michaelis-Menten equations for determination of enzyme inducing and inhibiting drugs.</a> BMC Pharmacol Toxicol. 22 (1), 57(2021).</li>
<li>AlShaikh-Mubarak, G. A., Kotb, E., Alabdalall, A. H., Aldayel, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+survey+of+elastase-producing+bacteria+and+characteristics+of+the+most+potent+producer%2C+Priestia+megaterium+gasm32%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A survey of elastase-producing bacteria and characteristics of the most potent producer, Priestia megaterium gasm32.</a> PLoS ONE. 18, 0282963(2023).</li>
<li>Sánchez-Moreiras, A. M., Reigosa, M. J. Advances in plant ecophysiology techniques. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aS%C3%A1nchez-Moreiras%2C+AM+%22Adv+Plant+Ecophysiol+Tech%22">Adv Plant Ecophysiol Tech</a>. , Springer International Publishing. (2018).</li>
<li>Dharwal, V., Sandhir, R., Naura, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP-1+inhibition+provides+protection+against+elastase-induced+emphysema+by+mitigating+the+expression+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">PARP-1 inhibition provides protection against elastase-induced emphysema by mitigating the expression of matrix metalloproteinases.</a> Mol Cell Biochem. 457 (1-2), 41-49 (2019).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+molecular+probes+for+in+vivo+near-infrared+fluorescence%2Fphotoacoustic+duplex+imaging+of+human+neutrophil+elastase%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Engineering molecular probes for in vivo near-infrared fluorescence/photoacoustic duplex imaging of human neutrophil elastase.</a> Anal Chem. 94 (7), 3227-3234 (2022).</li>
<li>Ahn, C. M., Sandler, H., Saldeen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+lung+hyaluronan+in+a+model+of+ARDS+in+the+rat%3A+Effect+of+an+inhibitor+of+leukocyte+elastase%5BTitle%5D)+AND+%22Ups+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Decreased lung hyaluronan in a model of ARDS in the rat: Effect of an inhibitor of leukocyte elastase.</a> Ups J Med Sci. 117 (1), 1-9 (2012).</li>
<li>Vanga, R. R., Tansel, A., Sidiq, S., El-Serag, H. B., Othman, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+performance+of+measurement+of+fecal+elastase-1+in+detection+of+exocrine+pancreatic+insufficiency%3A+Systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Diagnostic performance of measurement of fecal elastase-1 in detection of exocrine pancreatic insufficiency: Systematic review and meta-analysis.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 16 (8), 1220-1228 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Placa de cultivo celular de 96 pocillos</td><td>Corning Incorporated</td><td>3599</td><td>Fondo plano con tapa, poliestireno</td></tr><tr><td>Lector multimodo de imágenes celulares</td><td>Agilent</td><td>BioTek Cytation 1</td><td>Utilizado con el software Gen5</td></tr><tr><td>Elastase de páncreas porcino</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7885</td><td>CAS 39445-21-1; 25,9 kDa</td></tr><tr><td>Isopropanol 99,5%</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC184130010</td><td>CAS 67-63-0; C3H8O; 60,10 g/mol</td></tr><tr><td>N-Succinil-(Ala)3-nitroanilida</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S4760</td><td>CAS 52299-14-6; C19H25N5O8 ; 451,43 g/mol</td></tr><tr><td>Medidor de pH</td><td>Hach Lange</td><td>sensION+ PH31</td><td>Con agitador magnético y soporte</td></tr><tr><td>para sensor Fluoruro de fenilmetanosulfonilo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7626</td><td>CAS 329-98-6; C7H7FO2S; 174,19 g/mol</td></tr><tr><td>Tris para biología molecular</td><td>PanReac AppliChem</td><td>A2264</td><td>CAS 77-86-1; C4H11NO3; 121,14 g/mol</td></tr></tbody></table>

cuantificación de la modulación de la actividad de la enzima elastasa mediante análisis colorimétrico

Quantifying the Modulation of Elastase Enzyme Activity Through Colorimetric Analysis

Una vez completado el protocolo, se pueden obtener los datos de absorbancia necesarios para realizar los cálculos pertinentes y cuantificar la capacidad de las muestras para modular la actividad de la elastasa. En la Figura 3 se destaca la ubicación de los pozos con los diferentes controles y muestras. En el caso de muestras coloreadas, como la utilizada en este ejemplo, es necesario agregar controles de color para minimizar la interferencia espectrofotométrica, ya que el color puede interfe...

Cuantificación de la modulación de la actividad de la enzima elastasa mediante análisis colorimétrico

Elastase, a serine protease, plays an essential role in elastin degradation. Elastin is an extracellular protein that helps maintain tissue elasticity in ...

quantifying-modulation-elastase-enzyme-activity-through-colorimetric

Research

Investigación

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

El kit de detección fluorescente de la proteasa se ha diseñado para la medición de la actividad de la proteasa con fluorometría. También es adecuado para la detección de trazas de contaminación de la proteasa. El método se basa en la hydroysis proteolítica de una fórmula propia de un sustrato marcado con FITC caseína.

El uso del kit de la proteasa detección fluorescente para determinar la actividad de la proteasa

Un protocolo para detectar tricotecenos (micotoxinas de interés para la salud humana), utilizando un método de selección de nuevo desarrollo basado en un método competitivo inmunoquímica y un final de la detección electroquímica se demuestra.

ELIME (Enzyme Linked Inmuno magnética químicos) Método para la detección de micotoxinas

En este video, realizamos zimografía, una técnica electroforética, para analizar la actividad proteolítica dentro de muestras biológicas.

Zimografía de péptidos fluorescentes: una técnica modificada para detectar la actividad de la proteasa utilizando sustratos fluorogénicos en geles de zimograma

Este video muestra un ensayo in vitro para cuantificar la actividad de la serina proteasa de neutrófilos en muestras de esputo. La muestra que contiene la proteasa secretada se incuba con un indicador fluorescente con un motivo de reconocimiento. La escisión del motivo por la proteasa permite la emisión de fluorescencia individual por el fluoróforo donante y aceptor del reportero, lo que indica la actividad de la proteasa en la muestra.

Ensayo in vitro para medir la actividad de la serina proteasa de neutrófilos mediante un indicador fluorescente

Este video muestra el ensayo de liberación de colorante para cuantificar la actividad enzimática de las proteínas antimicrobianas. La proteína antimicrobiana degrada la pared celular marcada con el tinte de las bacterias y libera las moléculas de colorante que hacen que la solución se vuelva azul. La absorbancia de la solución se correlaciona con la actividad enzimática de la proteína antimicrobiana.

Un ensayo de liberación de colorante para cuantificar la actividad enzimática de las proteínas antimicrobianas

Describimos un ensayo colorimétrico cuantitativo simple que mide específicamente la actividad proteolítica de Granzima B (GzmB) humana, de ratón o de rata. Este protocolo se puede adaptar fácilmente para determinar la actividad proteasa de otras proteasas de serina en gránulos mediante la hidrólisis de otros sustratos peptídicos sintéticos con una secuencia de reconocimiento adecuada.

Un ensayo colorimétrico que mide específicamente granzima B actividad proteolítica: La hidrólisis de Boc-Ala-Ala-Asp-S-Bzl

Aquí, presentamos protocolos para cribar y caracterizar rápidamente la actividad antimicrobiana de las enzimas. El ensayo de difusión de microportaobjetos y el ensayo de liberación de colorante utilizan sustratos bacterianos objetivo para la evaluación cualitativa y cuantitativa de la actividad enzimática.

Los ensayos cualitativos y cuantitativos para la detección y caracterización de proteínas de antimicrobianos

Aquí, presentamos un protocolo detallado para una técnica de zymographic modificada en la que se utilizan péptidos fluorescentes como el substrato degradable en lugar de proteínas nativas. Electroforesis de muestras biológicas en isoenzimáticos péptido fluorescente permite la detección de una gama más amplia de las proteasas que las anteriores técnicas de zymographic.

Detección de actividad de la proteasa por Zymography péptido fluorescente

Los protocolos aquí descritos proporcionan una guía para visualizar y cuantificar la actividad de las proteasas de neutrófilos en el esputo humano. Las aplicaciones de este tipo de análisis abarcan desde la evaluación de tratamientos antiinflamatorios hasta la validación de biomarcadores, el cribado de fármacos y los estudios clínicos de cohortes grandes.

Monitoreo De La ElastasA NeutrófiloS Y La Actividad De La Catepsina G En Muestras De Esputo Humano

En este trabajo se presentan métodos ecotoxicológicos estandarizados para la evaluación de biomarcadores en especies de anuros neotropicales. Específicamente, este artículo detalla varias metodologías a diferentes escalas de evaluación ecotoxicológica, como los niveles genético, celular-histológico, bioquímico, morfológico e individual.

Metodologías ecotoxicológicas para evaluar biomarcadores a diferentes escalas en anuros neotropicales

Este estudio presenta un ensayo FRET radiométrico simple y fácil de usar para la detección y evaluación cuantitativa de la actividad de la ADNasa, y demuestra su aplicación en el análisis de una nucleasa débil.

Evaluación de la actividad de la ADNasa mediante transferencia de energía de resonancia de fluorescencia radiométrica

Aprende a cuantificar la actividad de la enzima elastasa mediante un ensayo colorimétrico in vitro. Este método permite evaluar extractos vegetales naturales y superar los desafíos de su coloración compleja.

Cuantificación de la modulación de la actividad de la enzima elastasa mediante análisis colorimétrico

Explorar más videos