Name: Imagen longitudinal intravital de la dinámica vascular en la médula ósea del calvario (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 49 s
Description: Aprende a realizar imagen intravital longitudinal de la dinámica vascular en la médula ósea del calvario utilizando microscopía de dos fotones. Este método permite visualizar cambios vasculares en tejido vivo y estudiar su respuesta en hematopoyesis patológica.

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<ol><li>Lo Celso, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live-animal+tracking+of+individual+haematopoietic+stem%2Fprogenitor+cells+in+their+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Live-animal tracking of individual haematopoietic stem/progenitor cells in their niche.</a> Nature. 457 (7225), 92-96 (2009).</li>
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<li>Itkin, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+bone+marrow+blood+vessels+differentially+regulate+haematopoiesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Distinct bone marrow blood vessels differentially regulate haematopoiesis.</a> Nature. 532 (7599), 323-328 (2016).</li>
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<li>Upadhaya, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+imaging+reveals+motility+of+adult+hematopoietic+stem+cells+in+the+bone+marrow+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Intravital imaging reveals motility of adult hematopoietic stem cells in the bone marrow niche.</a> Cell Stem Cell. 27 (2), 336-345.e4 (2020).</li>
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<li>Duarte, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+in+vivo+characteristics+of+acute+myeloid+leukemia+cells+behavior+by+intravital+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Defining the in vivo characteristics of acute myeloid leukemia cells behavior by intravital imaging.</a> Immunol Cell Biol. 97 (2), 229-235 (2019).</li>
<li>Passaro, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+vascular+permeability+in+the+bone+marrow+microenvironment+contributes+to+disease+progression+and+drug+response+in+acute+myeloid+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Increased vascular permeability in the bone marrow microenvironment contributes to disease progression and drug response in acute myeloid leukemia.</a> Cancer Cell. 32 (3), 324-341.e6 (2017).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FLT3+inhibitors+upregulate+CXCR4+and+E-selectin+ligands+via+ERK+suppression+in+AML+cells+and+CXCR4%2FE-selectin+inhibition+enhances+anti-leukemia+efficacy+of+FLT3-targeted+therapy+in+AML%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">FLT3 inhibitors upregulate CXCR4 and E-selectin ligands via ERK suppression in AML cells and CXCR4/E-selectin inhibition enhances anti-leukemia efficacy of FLT3-targeted therapy in AML.</a> Leukemia. 37 (6), 1379-1383 (2023).</li>
<li>Pendleton, E. G., Tehrani, K. F., Barrow, R. P., Mortensen, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Second+harmonic+generation+characterization+of+collagen+in+whole+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Second harmonic generation characterization of collagen in whole bone.</a> Biomed Opt Express. 11 (8), 4379-4396 (2020).</li>
<li>Dispositif de liaison d'un animal de laboratoire à au moins un système d'expérimentation, et procédé de fixation d'un tel dispositif. France patent. , WO/2021/123449 (2021).</li>
<li>Horton, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myeloid+leukemia+induced+by+MLL-ENL+is+cured+by+oncogene+ablation+despite+acquisition+of+complex+genetic+abnormalities%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Acute myeloid leukemia induced by MLL-ENL is cured by oncogene ablation despite acquisition of complex genetic abnormalities.</a> Blood. 113 (20), 4922-4929 (2009).</li>
<li>Scott, M. K., Akinduro, O., Lo Celso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+4-dimensional+tracking+of+hematopoietic+stem+and+progenitor+cells+in+adult+mouse+calvarial+bone+marrow%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">In vivo 4-dimensional tracking of hematopoietic stem and progenitor cells in adult mouse calvarial bone marrow.</a> J Vis Exp. (91), e51683(2014).</li>
<li>Jung, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+imaging+of+mouse+bone+marrow%3A+Hemodynamics+and+vascular+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Intravital imaging of mouse bone marrow: Hemodynamics and vascular permeability.</a> Methods Mol Biol. 1763, 11-22 (2018).</li>
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<li>Kolabas, Z. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+molecular+profiles+of+skull+bone+marrow+in+health+and+neurological+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Distinct molecular profiles of skull bone marrow in health and neurological disorders.</a> Cell. 186 (17), 3706-3725.e9 (2023).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Amira</td><td>Thermo ScientificTM</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anestesia</td><td></td><td></td><td>Isoflurano 2% a 3%</td></tr><tr><td>Mascarilla anestésica (detección de animales)</td><td>Minerve</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Unidad anestésica</td><td>Minerve</td><td></td><td></td></tr><tr><td>B6. Cg-Gt(ROSA)26Sortm9(CAG-tdTomato)Hze</td><td>Laboratorios Jackson</td><td>MGI:3809523</td><td></td></tr><tr><td>CalvariaVue</td><td>Ymetría</td><td>https://ymetry.com/site/head-fixation-implants/44-mouse-head-fixation-implant-for-calvaria.html</td><td></td></tr><tr><td>Cemento dental</td><td>Kemdent</td><td>SUN527</td><td></td></tr><tr><td>Dextrano 500 kDa-Cy5&nbsp;</td><td>Tebu-bio</td><td>DX500-S5-1</td><td>3 mg/ratón</td></tr><tr><td>Dextrano 70 kDa-TRITC</td><td>Sigma</td><td>T1162</td><td>3 mg/ratón</td></tr><tr><td>Desinfectante</td><td>MP-Labo</td><td>Dermidina-60ml</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de afeitar</td><td>Escular</td><td>Isis</td><td></td></tr><tr><td>Gel para ojos</td><td>Ocry-gel</td><td>10g</td><td></td></tr><tr><td>Fiji&nbsp;</td><td>https://imagej.net/software/fiji/downloads</td><td>v 17 Mayo 30</td><td></td></tr><tr><td>Fiji conecta con Imaris</td><td>https://imagej.net/software/fiji/downloads</td><td>Imaris_Bridge96.jar ; ImarisBridgeUtils.jar</td><td></td></tr><tr><td>Caja calefactora</td><td>Dátilesy</td><td>Thermacage</td><td></td></tr><tr><td>Almohadilla térmica para cirugía</td><td>Minerve</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Almohadilla térmica de imágenes y sonda rectal</td><td>F. Haer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Imaris v9.6.0</td><td>Instrumentos Oxford</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gel intrasitio</td><td>Chinoxia</td><td>2390766</td><td></td></tr><tr><td>LAS AF Software</td><td>Leica</td><td>LAS X 3.5.7.23225</td><td></td></tr><tr><td>Medicación</td><td></td><td></td><td>Buprecare, 0,01 mg/kg</td></tr><tr><td>Objetivo HCX IRAPO L 25x/0.95 AGUA</td><td>Leica</td><td>506374</td><td></td></tr><tr><td>Tampón salino (PBS 1x)</td><td>Sigma</td><td>P4417</td><td>Esterilizar en autoclave</td></tr><tr><td>Microscopio multifotónico SP8 DIVE FALCON&nbsp;</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mascarilla estereotóxica</td><td>Minerve</td><td>1201261</td><td></td></tr><tr><td>Perlas esterilizadoras</td><td>Sigma</td><td>Z742555</td><td></td></tr><tr><td>Herramientas quirúrgicas</td><td>Moria</td><td>4877A; 2183</td><td></td></tr><tr><td>Manta de supervivencia</td><td>SECURIMED</td><td>11006</td><td></td></tr><tr><td>Hisopos / Pañuelos</td><td></td><td></td><td>Esterilizar en autoclave</td></tr><tr><td>Jeringa 1 mL 26 G</td><td>BD Plastipak</td><td>305501</td><td></td></tr><tr><td>Controlador de temperatura</td><td>F. Haer</td><td>40-90-5D-02</td><td></td></tr><tr><td>Tg(Nes-EGFP)33Ratones Enik&nbsp;</td><td>Laboratorios Jackson</td><td>MGI:5523870</td><td></td></tr><tr><td>Tg(Pdgfb-icre/ERT2)1Frut ratones</td><td>Laboratorios Jackson</td><td>MGI:3793852</td><td></td></tr><tr><td>Tg(Cdh5-cre/ERT2)1Rha ratones</td><td>Laboratorios Jackson</td><td>MGI:3848982</td><td></td></tr><tr><td>Gel de ultrasonido</td><td>Laboratorios Parker</td><td>Aquasonic 100</td><td></td></tr></tbody></table>

imagen longitudinal intravital de la dinámica vascular en la médula ósea del calvario

Intravital Longitudinal Imaging of Vascular Dynamics in the Calvarial Bone Marrow

En la Figura 1 y la Figura 2, se muestra el modelo CAD de un implante de fijación de cabeza de titanio colocado en un cráneo de ratón escaneado, que está diseñado para seguir la estructura anatómica del cráneo y proporcionar un dispositivo liviano y biocompatible capaz de sujetarse firmemente a la etapa del microscopio asegurando la estabilidad a nivel celular. Siguiendo este protocolo paso a paso, el implante se adhiere de forma estable al cráneo del ratón y puede fijarse firmemente al soporte del microscopio mediante su cola de milano, lo que permite una zona de imagen plana para la retención de líquidos y la observación intravital a lo largo del tiempo. Se puede cerrar con una cubierta para minimizar cualquier daño o infección de la herida, lo que permite la repetición de imágenes de la misma área de tejido durante semanas. Una vez despierto, el ratón con un implante en la cabeza puede caminar, alimentarse y tener una rutina regular libremente.
La Figura 3 muestra una vista de escaneo de la vasculatura BM del calvario hecha de capilares heterogéneos, que incluyen arteriolas, capilares de transición y sinusoides. Los vasos están incrustados en un microambiente de tejido complejo en estrecho contacto con la superficie ósea y las células mesenquimales perivasculares. Durante el desarrollo de la leucemia, se pueden detectar células leucémicas aisladas individuales dentro del microambiente BM en estrecha proximidad con los vasos, y su injerto aumenta con el tiempo, llenando la pantorrilla en las últimas etapas de la enfermedad.
En la Figura 4 se muestra cómo las imágenes obtenidas con este protocolo pueden proporcionar datos cuantitativos, que pueden ser analizados con métodos estadísticos. Mostramos cómo segmentar vasos con la herramienta de filamento IMARIS y medir la longitud y el diámetro de los fragmentos vasculares, así como su rectitud. También se puede evaluar la correlación de estos parámetros.
La figura 5 muestra la adquisición de imágenes longitudinales de dos posiciones diferentes de la MO de la pantorrilla durante la progresión de la LMA en los días 4, 7 y 10, y el día 10 se asocia con un injerto de ~50% de la MO con células leucémicas, medido mediante citometría de flujo (no se muestra). Podemos observar una importante remodelación del tamaño de los vasos preexistentes, así como la formación de nuevos vasos en zonas específicas asociadas a la pérdida ósea local.
Finalmente, en la Figura 6, mostramos cómo se puede medir la permeabilidad vascular como un parámetro dinámico con imágenes de lapso de tiempo que muestran la capacidad de diferentes barreras vasculares para retener un tinte fluorescente a lo largo del tiempo.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67332/67332fig01.jpg"> 
Figura 1: Diseño y producción de un soporte de cabezal biocompatible a base de titanio. (A) Partes del implante in situ: 1 anillo de observación, 2 características de cementación, 3 anclajes estabilizadores, 4 colas, 5 colas de milano, 6 orificios roscados, 7 Bregma. (B) Conexión del implante de la cabeza al soporte: 8 cuerpos de fijación, 9 abrazaderas, 10 palancas excéntricas, 11 estructuras, 12 objetivos de microscopio. (C) Deformación del implante contra carga mediante simulación FEM donde el desplazamiento máximo es de 0,23 μm contra una fuerza de 0,04 N. (D) Tapa protectora y su tornillo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/67332fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67332/67332fig02.jpg"> 
Figura 2: Preparación del ratón para la obtención de imágenes intravitales. (A) Vista del implante de la cabeza y el área de imagen expuesta quirúrgicamente antes de la obtención de imágenes. (B) Implante de cabeza firmemente unido al cráneo del ratón. (C) Ratón despierto en la jaula de recuperación con la cubierta cerrada en el implante de la cabeza. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/67332fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67332/67332fig03.jpg"> 
Figura 3: Imagen intravital de la vasculatura de la calvaria. (A) Proyección z de la vista de escaneo de mosaico de la vasculatura de la calvaria marcada por cdh5-DSRED. (B) Acérquese a las áreas representadas para describir diferentes tipos de vasos representados por flechas, arteriolas por flechas rojas, capilares de transición por flechas naranjas, sinusoides por flechas amarillas. (i) y (ii) proyecciones z de tejido X μm; (iii) rebanada única. (C) Cortes individuales de varios campos de visión de los vasos BM, que muestran la superficie ósea (SHG), las células perivasculares (nes-GFP+) y la luz vascular (dextran-TRITC). (D) Nicho vascular asociado con la progresión de la LMA. Segmentos representativos de puntos de tiempo tempranos (superiores) y tardíos (inferiores) del desarrollo de AML. La leucemia MLL-AF9 se marca con tdTOMATO (flechas rojas), mientras que los vasos se marcan con pdgfb-GFP (flechas verdes), la superficie ósea con SHG y los macrófagos con amarillo (autofluorescencia, asterisco amarillo). Barras de escala = 200 μm (A), 40 μm (B,D-panel inferior), 50 μm (C). Abreviaturas: BM = médula ósea; GFP = proteína verde fluorescente; LMA = leucemia mieloide aguda; EC= Células endoteliales. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/67332fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67332/67332fig04.jpg"> 
Figura 4: Cuantificación de parámetros vasculares. (A) Medición de parámetros vasculares a través de la herramienta de filamento IMARIS en una proyección z representativa de vasos de médula ósea marcados con TRITC-dextrano. Se muestran representaciones de líneas y conos. (B) Cuantificación de los parámetros del recipiente en la imagen que se muestra en A. (C) Correlación entre parámetros vasculares que muestran una correlación opuesta entre la rectitud y la longitud del vaso (negativo, Spearman r = -3523; p &lt; 0,0001; R2 = 0,2102) vs diámetro (positivo; Lancero r = 0,4110; p &lt; 0,0001; R2 = 0,1299). Barras de escala = 100 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/67332fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67332/67332fig05.jpg"> 
Figura 5: Imagen longitudinal de dos posiciones diferentes de la médula ósea de la calvaria sobre el desarrollo de la LMA. Las células endoteliales que recubren los vasos se marcan con cdh5-GFP, la superficie ósea con SHG y los macrófagos en amarillo (autofluorescencia). Se muestra la remodelación de vasos preexistentes (flechas rojas) y la formación de nuevos vasos (flechas amarillas). Barras de escala = 100 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/67332fig05large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67332/67332fig06.jpg"> 
Figura 6: Permeabilidad vascular. (A) Esquemas de la medición de la permeabilidad vascular a través de la herramienta de superficie IMARIS. (B) Proyección Z de la misma área fotografiada longitudinalmente durante 1 h. (C) Cuantificación de la permeabilidad vascular dentro de las áreas como se muestra en A. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/67332fig06large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Figura suplementaria S1: Cráneo preparado. En el plano mediano, crea un eje tangencial a la calvaria y, a continuación, guarda el cráneo preparado. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/Sup_fig_1_JoVE67332R1_screenfile5_prepared_skull.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Figura suplementaria S2: Planos espaciados 2 mm. Cómo crear un conjunto de planos igualmente espaciados (espaciado de 2 mm) a lo largo del cráneo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/Sup_fig_2_JoVE67332R1_screenfile4_plans_2mm_spaced.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Figura suplementaria S3: Contorno de superficie observable. Cree un boceto en el plano del calvario y cree una spline en forma de pera de AP +6,5 a -2,6 mm de ancho en AP 0,0. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/Sup_fig_3_JoVE67332R1_screenfile3_Observable_Surface_Contour.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Figura suplementaria S4: Vino de observación. Cree un boceto en el plano de la pantorrilla y dibuje una forma de C de 0,5 mm de grosor que se conecte a la ventana de observación . <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/Sup_fig_4_JoVE67332R1_screenfile1_1.4.1.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Figura complementaria S5: Haga clic en nuevo estudio. Vaya a la pestaña Simulación (si está visible) o vaya a Simulación | Estudio. En el cuadro de diálogo Estudio , elija Estático como tipo de estudio. Haga clic en Aceptar para crear el nuevo estudio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/Sup_fig_5_JoVE67332R1_screenfile2_clic_new_study.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Figura complementaria S6: Haga clic con el botón derecho para crear la malla. Refinar la malla en las áreas donde se espera una alta tensión o deformación. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67332/Sup_fig_6_JoVE67332R1_screenfile6_right_clic_create_mesh.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>

Imagen longitudinal intravital de la dinámica vascular en la médula ósea del calvario

Intravital longitudinal fluorescence microscopy imaging has emerged as a crucial technique for studying dynamic biological processes, notably in the ...

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Investigación

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Los monocitos son reguladores clave de la inmunidad innata y desempeñan un papel crítico en la renovación del sistema fagocítico mononuclear periférico y en caso de inflamación. Este manuscrito describe el procedimiento de obtención de imágenes en tiempo real de la médula ósea calvaria del ratón para estudiar el mecanismo de movilización de monocitos.

Seguimiento de médula ósea de ratón monocitos<em&gt; En Vivo</em

La implantación de injertos óseos autólogos y alogénicos constituyen aceptó enfoques para tratar la importante pérdida de masa ósea craneofacial. Sin embargo, el efecto de la composición de injerto en la interacción entre la neovascularización, la diferenciación celular y la formación de hueso no está claro. Se presenta un protocolo de imagen multimodal destinado a dilucidar la interdependencia angiogénesis osteogénesis en la proximidad del injerto.

Tomografía Computarizada e Imagen Óptico de Acoplamiento-Osteogénesis angiogénesis para evaluar la integración de craneales hueso autoinjertos y aloinjertos

Este artículo describe un método mediante el cual se puede cuantificar la arquitectura vascular en el cerebro utilizando microscopía de dos fotones in vivo y ex vivo.

Cuantificación de Cerebral Vascular Arquitectura utilizando microscopía de dos fotones en un modelo de ratón de la neuroinflamación inducida por el VIH

Este manuscrito describe un procedimiento para realizar un seguimiento de la remodelación de la vasculatura cerebral durante la acumulación de placa amiloide in vivo usando longitudinal microscopía de dos fotones. Una preparación-cráneo adelgazada permite la visualización de los tintes fluorescentes para evaluar la progresión del daño cerebrovascular en un modelo de ratón de la enfermedad de Alzheimer.

Longitudinal<em&gt; En Vivo</em&gt; Obtención de imágenes de la vasculatura cerebral: Importancia de las enfermedades del sistema nervioso central

El objetivo de este artículo es presentar un método que permite una reconstrucción 3 dimensional del árbol cerebrovascular en ratones después micro tomografía computada y determinación de volúmenes de segmentos de todo buque que pueden utilizarse para cuantificar el vasoespasmo cerebral en modelos murinos de hemorragia subaracnoidea.

Un método volumétrico para la cuantificación de vasoespasmo Cerebral en un modelo murino de hemorragia subaracnoidea

Describimos aquí el método para obtener imágenes de megacariocitos y proplatados en la médula del hueso del cráneo de ratones vivos utilizando microscopía de dos fotones.

In Vivo Imágenes de dos fotones de megacariocitos y proplatatos en la médula ósea del cráneo del ratón

Este protocolo presenta pasos para adquirir y analizar imágenes de calcio fluorescente de pericitos que envuelven el cerebro y datos de flujo sanguíneo de vasos sanguíneos cercanos en ratones anestesiados. Estas técnicas son útiles para estudios de fisiología de células murales y se pueden adaptar para investigar transitorios de calcio en cualquier tipo de célula.

Calcio de pericitos cerebrales e imágenes hemodinámicas en ratones transgénicos in vivo

El reclutamiento de leucocitos y plaquetas constituye un componente esencial necesario para el crecimiento efectivo de las arterias colaterales durante la arteriogénesis. La microscopía multifotónica es una herramienta eficiente para rastrear la dinámica celular con alta resolución espacio-temporal in vivo y menos fototoxicidad para estudiar el reclutamiento y extravasación de leucocitos durante la arteriogénesis.

Imágenes intravitales multifotónicas para la monitorización del reclutamiento de leucocitos durante la arteriogénesis en un modelo de extremidades posteriores murinas

Aprende a realizar imagen intravital longitudinal de la dinámica vascular en la médula ósea del calvario utilizando microscopía de dos fotones. Este método permite visualizar cambios vasculares en tejido vivo y estudiar su respuesta en hematopoyesis patológica.

Imagen longitudinal intravital de la dinámica vascular en la médula ósea del calvario

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