Estudio de la exposición crónica de ratones a la radiación ultravioleta B

El protocolo describe un estudio de los efectos sistémicos y locales en la piel de la exposición a los rayos ultravioleta B en ratones.

Estamos investigando los efectos sistémicos de la exposición de la piel a dosis bajas de radiación UVB, específicamente a niveles inferiores a los que causan eritema. Nuestro protocolo permitirá comprender los efectos sistémicos de la exposición a bajas dosis de UVB más allá de los efectos directos o locales en la piel. Nuestro método imita de cerca la exposición crónica de bajo grado a los rayos UVB por debajo de los niveles de eritema. Por lo tanto, podemos estudiar los efectos endógenos de los rayos UVB.

[Narrador] Para comenzar, coloque el ratón anestesiado en una plataforma de trabajo y afeite entre el 50 y el 60% de su región dorsal. Después de quitar el pelaje con crema depilatoria, coloque al ratón en una jaula de recuperación limpia y seca con ropa de cama de jaula. Deje que el ratón descanse en la jaula de la casa con comida y agua ad libitum. Para comenzar, use una camisa de manga larga, pantalones, una bata de laboratorio, zapatos cerrados, guantes dobles y un protector facial para garantizar la seguridad personal. Realice la irradiación ultravioleta B dentro de una campana biológica con la cubierta de plexiglás de 10 milímetros bajada y una pantalla protectora en su lugar. Coloque la lámpara Ultraviolet B en la cámara de plexiglás transparente. Encienda la lámpara Ultraviolet B y déjela funcionar hasta que la intensidad se estabilice. A continuación, encienda el radiómetro Ultraviolet X, equipado con un cabezal de medición Ultraviolet B para controlar la intensidad. Coloque la cámara de exposición limpia dentro de la cámara de plexiglás transparente con dos cámaras mientras la lámpara ultravioleta está encendida o apagada para las respectivas exposiciones ultravioleta o simuladas. Utilice una calculadora para determinar el tiempo requerido para exponer el mouse a la intensidad ultravioleta B deseada. Transfiera el ratón de la jaula de casa a la cámara de exposición durante el tiempo de exposición deseado. Exponga al ratón a una dosis ultravioleta B de 50 milijulios por centímetro cuadrado, que es una dosis suberitemática. Para validar la eficiencia de la radiación, mida la pigmentación de la oreja y la cola con un espectrofotómetro dérmico. Calibre el dispositivo del espectrofotómetro estableciendo la línea de base con papel blanco limpio. Una vez completada la calibración, coloque el sensor de medición en la oreja o la cola del ratón y registre las lecturas de intensidad de melanina. Se observaron aumentos graduales y significativos en los niveles de melanina en ratones machos y hembras expuestos a la radiación ultravioleta B durante cuatro semanas en comparación con los controles, lo que confirma la inducción exitosa de la pigmentación de la piel.