Name: Restricción para inducir estrés en ratones y ratas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 48 s
Description: Aprende a inducir estrés por restricción física en ratones y ratas para investigar los efectos neurobiológicos del estrés y su relación con trastornos por uso de sustancias. Este método validado permite evaluar alteraciones en sistemas noradrenérgicos.

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<meta charset="utf8"></head><body>Impacto del estrés de restricción en la fisiología y la neurobiología en modelos de roedores

<table><tbody><tr><td>50 mL Tubo cónico con tapón de rosca de uso general</td><td>Globe Scientific</td><td>6288</td><td></td></tr><tr><td>Cuenca de pipeta desechable</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-681-500</td><td></td></tr><tr><td>Kit ELISA para ensayos de corticosterona</td><td>Arbor</td><td>K014-H</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de restricción de venas</td><td>de cola Braintree Scientific</td><td>RTV</td><td></td></tr></tbody></table>

restricción para inducir estrés en ratones y ratas

Restraint to Induce Stress in Mice and Rats

En un estudio previamente publicado21, se utilizaron los procedimientos de estrés de restricción descritos en este manuscrito para evaluar el impacto del estrés de restricción en la regulación del cortisol y la norepinefrina, cayendo dentro de las amplias posibilidades de cambios en la neurobiología inducidos por el estrés mencionados en el protocolo 3.3. En este estudio, se utilizó el protocolo descrito anteriormente para la contención de ratones. En el manuscrito referenciado se pueden encontrar detalles adicionales que están más allá del alcance del enfoque de restricción de este artículo, por ejemplo, la justificación de la región cerebral, los parámetros de estimulación optogenética o FSCV.
Utilizamos ratones transgénicos machos y hembra (DBH:Cre+/-::Ai32+/-) que expresan canalrodopsina de forma selectiva en neuronas noradrenérgicos y medimos la liberación estimulada de norepinefrina en el núcleo del lecho de la estría terminal (BNST) con FSCV21 ex vivo. Los ratones fueron inmovilizados como se describe en el protocolo 1 de forma aguda (2 h) y crónica (2 h/día durante 5 días) o control en jaulas domiciliarias. Después de la exposición, se extrajo sangre de algunos sujetos para el análisis de corticosterona, como se describe en el protocolo 3.1. Inmediatamente después del estrés agudo de restricción, los ratones mostraron niveles elevados de corticosterona, pero la respuesta se atenuó después del estrés repetido (ver Figura 1). Se utilizaron ratones adicionales para evaluar el impacto del estrés de restricción en la liberación de norepinefrina. 24 horas después de la exposición final al estrés, el tejido cerebral se recolectó rápidamente y se cortó para registrar la liberación de norepinefrina en el BNST. Curiosamente, la restricción aguda no afectó a la liberación estimulada de norepinefrina, pero la exposición repetida al estrés provocó un aumento significativo en la liberación estimulada de norepinefrina en todos los parámetros de estimulación (véase la Figura 2). Estos resultados convergen con investigaciones previas sobre el impacto del estrés de retención en la liberación de norepinefrina en ratas utilizando los enfoques descritos en el protocolo 217,22.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67387/67387fig1.jpg"> 
Figura 1: Corticosterona en el plasma de controles en jaulas domiciliarias (naïve) y después de un estrés de sujeción agudo (único) y crónico (repetido). Después de una sola sesión de 2 horas de estrés agudo de restricción, los niveles plasmáticos de corticosterona se elevaron en comparación con los sujetos de estrés ingenuo y repetidos. Los resultados se expresan como media ± SEM. N = 5-6 ratones por grupo. **p &lt; 0,05, ***p &lt; 0,005. Esta figura ha sido modificada con permiso de Schmidt et al.21. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67387/67387fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67387/67387fig2.jpg"> 
Figura 2: La liberación de norepinefrina estimulada optogenéticamente aumenta después del estrés de restricción crónico (repetido). Al día siguiente de la exposición final al estrés, se realizó una voltamperometría cíclica de barrido rápido ex vivo para medir la liberación de norepinefrina estimulada optogenéticamente en el núcleo del lecho de la estría terminal de ratones. (A) Las variaciones de frecuencia (Hz) de 20 pulsos (20 P) de estimulaciones liberaron más norepinefrina en el grupo de estrés repetido. (B, C) Las variaciones en el número de pulsos (2-20) a una frecuencia de estimulación de 5 Hz (B) o 10 Hz (C) indicaron una mayor liberación de norepinefrina en el grupo de estrés repetido. Medios ± SEM; n = 5−6 ratones/grupo que proporcionan 7−8 cortes/grupo. *p &lt; 0,05, **p &lt; 0,05, ***p &lt; 0,005 y ****p &lt; 0,0001. Esta figura ha sido modificada con permiso de Schmidt et al.21. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67387/67387fig2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Restricción para inducir estrés en ratones y ratas

Across all animal species, exposure to stressful conditions induces stress responses. One method to study the effects of stress using rodent models is the ...

restraint-to-induce-stress-in-mice-and-rats

Research

Investigación

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociencia

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Sujeción manual y de las rutas de la administración del compuesto en ratones y ratas

Este video muestra el método de inducir estrés crónico en un ratón a través de la inmovilización repetida, lo que conduce a la liberación de corticosterona y reduce la actividad del receptor de glutamato en las neuronas, lo que resulta en un comportamiento similar a la depresión.

Inducir un comportamiento similar a la depresión en un ratón a través del estrés de inmovilización

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El protocolo de estrés leve crónico impredecible para inducir la Anhedonia en ratones

Este artículo proporciona un protocolo simplificado y estandarizado para la inducción de un comportamiento depresivo en ratones inmovilizados crónicamente mediante el uso de un restrainer. Además, se explican las técnicas fisiológicas y de comportamiento para verificar la inducción de la depresión.

Un Protocolo de Estrés de Inmovilización Crónica para Inducir el Comportamiento Similar a la Depresión en Ratones

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Restricción para inducir estrés en ratones y ratas

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