Restricción para inducir estrés en ratones y ratas

Mi investigación se centra en los mecanismos neurobiológicos que influyen en los efectos del estrés, los efectos conductuales de las drogas de abuso y la intersección entre ambos. En resumen, mi laboratorio trata de responder cómo las experiencias de estrés contribuyen a los trastornos por uso de sustancias y cómo podemos desarrollar intervenciones para abordar esta relación. Mi investigación ha demostrado que la exposición al estrés altera los sistemas noradrenérgicos de una manera que persiste más allá de la experiencia del estrés.

Estos aumentos en la señalización noradrenólica pueden subrayar las respuestas de excitación intensificadas características del TEPT y otros trastornos. En comparación con otros enfoques que inducen estrés, la restricción es económica, fácil de realizar, útil para modelar aspectos de los trastornos humanos, como la ansiedad, la depresión, el trastorno por uso de sustancias y el trastorno de estrés postraumático, y se puede adaptar con una amplia gama de parámetros. En el futuro, mi laboratorio se centrará en los mecanismos subyacentes a los cambios en el comportamiento inducido por las drogas como resultado del estrés o la exposición.

Para empezar, asigne aleatoriamente a los ratones a los grupos de control de jaula doméstica, estrés de restricción agudo o estrés de restricción crónica. Determine la duración de la exposición al estrés en función del grupo asignado. A continuación, modifique los tubos cónicos de 50 mililitros para crear orificios de ventilación con un taladro eléctrico con una broca de 1/8 de pulgada.

Separe uniformemente los orificios para permitir el flujo de aire a través del tubo, asegurando que el mouse pueda respirar independientemente de la posición. En una sala de pruebas separada del alojamiento de los animales y de las áreas de pruebas de comportamiento, coloque el ratón asignado en el tubo cónico modificado. Coloque la tapa de forma segura para confinar al animal durante el período de restricción designado.

Luego, coloque el tubo de restricción horizontalmente sobre una superficie plana. Si es necesario, asegure el tubo con cinta de laboratorio o un recipiente de pipeta para evitar que ruede. Monitoree al animal inmovilizado cada 20 minutos para detectar comportamientos inusuales.

Después de la exposición al estrés, regrese el ratón a la jaula de casa. Asigne aleatoriamente a la rata a los grupos de control de jaula doméstica, estrés de restricción agudo o estrés de restricción crónica. En el caso de los tubos de sujeción disponibles en el mercado, inserte la rata en el dispositivo, ajuste el tapón para que se ajuste perfectamente al tamaño del sujeto y bloquéelo en su lugar.

Asegúrese de que la rata esté correctamente confinada para evitar que la cabeza se mueva hacia la cola y permitir la respiración normal. En una sala de pruebas separada del alojamiento de animales y las pruebas de comportamiento, coloque a las ratas asignadas en sus tubos de sujeción durante la longitud de sujeción designada. Coloque cada tubo horizontalmente sobre una superficie plana.

Después de la sesión de estrés, regrese a la rata a su jaula de origen con libre acceso a comida y agua. La concentración plasmática de corticosterona fue significativamente mayor después de una sola exposición al estrés que los controles naïve, pero esta elevación se redujo en los ratones sometidos a estrés repetido. La exposición repetida al estrés aumentó significativamente la liberación de norepinefrina en varios parámetros de estimulación optogenética.