Name: Imágenes tridimensionales de los tejidos aórticos en la aterosclerosis (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 55 s
Description: Aprende a realizar imágenes tridimensionales de la aorta murina en aterosclerosis mediante tinción inmunológica y microscopía confocal. Este protocolo de aclarado tisular permite visualizar cambios celulares y estructurales en tejidos intactos.

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<meta charset="utf8"></head><body>Protocolos optimizados de limpieza de tejidos para la obtención de imágenes en 3D de la aorta murina

<ol><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+landscape+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The changing landscape of atherosclerosis.</a> Nature. 592 (7855), 524-533 (2021).</li>
<li>Mohanta, S., Yin, C., Weber, C., Hu, D., Habenicht, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aorta+atherosclerosis+lesion+analysis+in+hyperlipidemic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Aorta atherosclerosis lesion analysis in hyperlipidemic mice.</a> Bio Protoc. 6 (11), e1833(2016).</li>
<li>Yin, C., Mohanta, S. K., Srikakulapu, P., Weber, C., Habenicht, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artery+tertiary+lymphoid+organs%3A+Powerhouses+of+atherosclerosis+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Artery tertiary lymphoid organs: Powerhouses of atherosclerosis immunity.</a> Front Immunol. 7, 387(2016).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artery+tertiary+lymphoid+organs+contribute+to+innate+and+adaptive+immune+responses+in+advanced+mouse+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Artery tertiary lymphoid organs contribute to innate and adaptive immune responses in advanced mouse atherosclerosis.</a> Circ Res. 114 (11), 1772-1787 (2014).</li>
<li>Carmeliet, P., Tessier-Lavigne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+mechanisms+of+nerve+and+blood+vessel+wiring%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Common mechanisms of nerve and blood vessel wiring.</a> Nature. 436 (7048), 193-200 (2005).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroimmune+cardiovascular+interfaces+control+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuroimmune cardiovascular interfaces control atherosclerosis.</a> Nature. 605 (7908), 152-159 (2022).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+brain+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular brain circuits.</a> Circ Res. 132 (11), 1546-1565 (2023).</li>
<li>Hu, D., Yin, C., Luo, S., Habenicht, A. J. R., Mohanta, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+smooth+muscle+cells+contribute+to+atherosclerosis+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Vascular smooth muscle cells contribute to atherosclerosis immunity.</a> Front Immunol. 10, 1101(2019).</li>
<li>Newland, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type-2+innate+lymphoid+cells+control+the+development+of+atherosclerosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Type-2 innate lymphoid cells control the development of atherosclerosis in mice.</a> Nat Commun. 8, 15781(2017).</li>
<li>Grabner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphotoxin+beta+receptor+signaling+promotes+tertiary+lymphoid+organogenesis+in+the+aorta+adventitia+of+aged+Apoe-%2F-+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Lymphotoxin beta receptor signaling promotes tertiary lymphoid organogenesis in the aorta adventitia of aged Apoe-/- mice.</a> J Exp Med. 206 (1), 233-248 (2009).</li>
<li>Mai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+cellular+mapping+in+mouse+using+standard+igg+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Whole-body cellular mapping in mouse using standard igg antibodies.</a> Nat Biotechnol. 42 (4), 617-627 (2024).</li>
<li>Molbay, M., Kolabas, Z. I., Todorov, M. I., Ohn, T. L., Erturk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guidebook+for+disco+tissue+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Syst+Biol%22%5BJournal%5D)">A guidebook for disco tissue clearing.</a> Mol Syst Biol. 17 (3), e9807(2021).</li>
<li>Tainaka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+imaging+with+single-cell+resolution+by+tissue+decolorization%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Whole-body imaging with single-cell resolution by tissue decolorization.</a> Cell. 159 (4), 911-924 (2014).</li>
<li>Tian, T., Yang, Z., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+technique%3A+Recent+progress+and+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing technique: Recent progress and biomedical applications.</a> J Anat. 238 (2), 489-507 (2021).</li>
<li>Adolfs, Y., Raj, D. D. A., Brignani, S., Pasterkamp, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+tissue+clearing+and+3d+analysis+of+dopamine+neurons+in+the+developing+mouse+midbrain%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for tissue clearing and 3d analysis of dopamine neurons in the developing mouse midbrain.</a> STAR Protoc. 2 (3), 100669(2021).</li>
<li>Power, R. M., Huisken, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guide+to+light-sheet+fluorescence+microscopy+for+multiscale+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A guide to light-sheet fluorescence microscopy for multiscale imaging.</a> Nat Methods. 14 (4), 360-373 (2017).</li>
<li>Sun, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+approaches+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing approaches in atherosclerosis.</a> Methods Mol Biol. 2419, 747-763 (2022).</li>
<li>Chistiakov, D. A., Ashwell, K. W., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innervation+of+the+arterial+wall+and+its+modification+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Auton+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Innervation of the arterial wall and its modification in atherosclerosis.</a> Auton Neurosci. 193, 7-11 (2015).</li>
<li>Cao, Y., Wang, H., Wang, Q., Han, X., Zeng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+volume+fluorescence-imaging+of+vascular+plasticity+in+adipose+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Metab%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional volume fluorescence-imaging of vascular plasticity in adipose tissues.</a> Mol Metab. 14, 71-81 (2018).</li>
<li>Kirst, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+fine-scale+organization+and+plasticity+of+the+brain+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Mapping the fine-scale organization and plasticity of the brain vasculature.</a> Cell. 180 (4), 780-795.e25 (2020).</li>
<li>Todorov, M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+learning+analysis+of+whole+mouse+brain+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Machine learning analysis of whole mouse brain vasculature.</a> Nat Methods. 17 (4), 442-449 (2020).</li>
<li>Bhatia, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+proteomics+in+three-dimensional+intact+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Spatial proteomics in three-dimensional intact specimens.</a> Cell. 185 (26), 5040-5058.e19 (2022).</li>
<li>Mai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scalable+tissue+labeling+and+clearing+of+intact+human+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Scalable tissue labeling and clearing of intact human organs.</a> Nat Protoc. 17 (10), 2188-2215 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2,2'-tiodietanol (TDE)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>166782</td><td>Reactivo de limpieza</td></tr><tr><td>Amira</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td>Software de visualización 3D; Software de procesamiento de imágenes utilizado para la segmentación manual y el trazado en imágenes 3D</td></tr><tr><td>Alcohol bencílico</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>W213713</td><td>Reactivo de aclaración</td></tr><tr><td>Benzoato de bencilo</td><td>Sigma</td><td>B6630</td><td>Reactivo de aclarante</td></tr><tr><td>CD16/32</td><td>eBioscience</td><td>14-0161-82</td><td>Solución de bloqueo</td></tr><tr><td>Microscopio de barrido láser confocal&nbsp;</td><td>Leica Microsystems</td><td>TCS-SP8 3X</td><td>Dispositivo de imagen para la obtención de imágenes multidimensionales de alta resolución de tejidos biológicos intactos o secciones con alta especificidad a resolución subcelular.</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>D3571</td><td>Marcador de núcleos</td></tr><tr><td>Diclorometano (DCM)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>270997</td><td>Reactivo de limpieza</td></tr><tr><td>Cera negra de disección&nbsp;</td><td>Thermo Scientific&nbsp;</td><td>S17432</td><td>Disección y fijación de la aorta&nbsp;</td></tr><tr><td>Microscopio estereoscópico de disección</td><td>Leica Microsystems&nbsp;</td><td>Stemi 2000</td><td>Etanol de disección de órganos de ratón</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>E7023</td><td>Deserción&nbsp;</td></tr><tr><td>Ácido etilendiaminotetraacético (EDTA)</td><td>Roth&nbsp;</td><td>8040.1</td><td>Tampón de perfusión&nbsp;</td></tr><tr><td>Fiyi &nbsp;</td><td>(ImageJ, NIH)</td><td></td><td>Software de procesamiento de imágenes de código abierto para imágenes 2D y 3D</td></tr><tr><td>Cabra anti-Hámster IgG, Cy3</td><td>Dianova&nbsp;</td><td>127-165-099</td><td>Anticuerpo secundario</td></tr><tr><td>IgG anti-conejo de cabra, Alexa Fluor 680</td><td>Thermo Fisher Scientific / Invitrogen</td><td>A-21109</td><td>Anticuerpo secundario&nbsp;</td></tr><tr><td>Cabra anti-Rata IgG, Cy5</td><td>Dianova</td><td>712-175-150</td><td>Anticuerpo secundario</td></tr><tr><td>Hámster Anti-CD3e&nbsp;</td><td>BD Biociencia</td><td>145-2C11&nbsp;</td><td>Marcador de células Pan-T</td></tr><tr><td>Huygens</td><td>Professional Scientific Volume Imaging, Países Bajos</td><td>Versión 19.10</td><td>Software de restauración de imágenes; Software de procesamiento de imágenes utilizado principalmente para la deconvolución de imágenes 2D y 3D Estación de trabajo de</td></tr><tr><td>procesamiento</td><td>de imágenes MIFCOM&nbsp;</td><td>MIFCOM X5</td><td>Estación de trabajo de procesamiento de imágenes equipada con todo el software de procesamiento de imágenes, incluido el conjunto de aplicaciones Leica X, Fiji e Imaris para el procesamiento posterior de imágenes adquiridas por microscopios confocales, multifotónicos y de lámina de luz</td></tr><tr><td>Imaris</td><td>Bitplane</td><td>versión 8.4</td><td>Software de análisis de imágenes; Software de procesamiento de imágenes utilizado para la segmentación automatizada de imágenes 3D</td></tr><tr><td>Incubadora y rotador&nbsp;</td><td>Marshall Scientific&nbsp;</td><td>Innova 4230</td><td>Dispositivo de incubación y rotación durante el desbroce < tejidos></td></tr><tr><td>iSpacer</td><td>Sunjin Lab</td><td>IS4020</td><td>Rectangular así como el portamuestras</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Livisto</td><td></td><td>Anesthetic</td></tr><tr><td>Leica Application Suite X (LAS-X)&nbsp;</td><td>Leica Microsystems</td><td>versión 3.5</td><td>Software de procesamiento de imágenes para las imágenes adquiridas con el microscopio Leica Microscopio</td></tr> óptico <tr><td></td><td>Leica Microsystems</td><td>DM LB</td><td>Dispositivo de imagen para imágenes de archivos brillantes</td></tr><tr><td>Microscopio de hoja de luz</td><td>LaVision BioTech</td><td>Ultramicroscope II</td><td>Técnica de imagen para la obtención rápida de imágenes de alta resolución de grandes muestras biológicas o ratones enteros con baja exposición a la luz mediante la adquisición rápida de imágenes de secciones ópticas delgadas.</td></tr><tr><td>Microscopía multifotónica</td><td>Leica Microsystems</td><td>TCS-SP5II MP&nbsp;</td><td>Modalidad de imagen para la obtención de imágenes multidimensionales de alta resolución de tejidos biológicos intactos y viables a nivel subcelular y molecular durante períodos prolongados de tiempo, en profundidad en la muestra y con una invasión mínima.</td></tr><tr><td>Suero de cabra normal&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>G9023</td><td>Solución</td></tr><tr><td>de bloqueo Paraformaldehído (PFA)&nbsp;</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>P-6148 y nbsp;</td><td>Fijación&nbsp;</td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>P4417-100TAB&nbsp;</td><td>Tampón de lavado</td></tr><tr><td>Gelatina de piel de cerdo</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>G1890</td><td>Tampón de incubación</td></tr><tr><td>Quadrol</td><td>Sigma</td><td>122262</td><td>CUBIC reactivo de limpieza</td></tr><tr><td>Rabbit Anti-NF200</td><td>Sigma</td><td>N4142</td><td>Marcador panneuronal</td></tr><tr><td>Rat Anti-B220&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>RA3-6B2</td><td>Marcador de células Pan-B</td></tr><tr><td>Sacarosa</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>90M003524V&nbsp;</td><td>Deshidratación&nbsp;</td></tr><tr><td>Sytox</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>S11380</td><td>Marcador de núcleos</td></tr><tr><td>Tetrahidrofurano</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>401757</td><td>Reactivo de limpieza&nbsp;</td></tr><tr><td>Tritón X-100</td><td>Roth&nbsp;</td><td>3051.1</td><td></td></tr><tr><td>Penetración Urea Sigma</td><td>&nbsp;</td><td>U5128</td><td>Reactivo de limpieza CUBIC</td></tr><tr><td>Xileno&nbsp;</td><td>Fisher Chemical&nbsp;</td><td>X/0250/17&nbsp;</td><td>Anestésico&nbsp;</td></tr></tbody></table>

imágenes tridimensionales de los tejidos aórticos en la aterosclerosis

Three-Dimensional Imaging of Aortic Tissues in Atherosclerosis

Para demostrar la microanatomía de la aorta intacta, sana y enferma, y para revelar las conectividades físicas entre el sistema inmunitario, el sistema nervioso y el sistema cardiovascular en modelos murinos de aterosclerosis, utilizamos dos enfoques complementarios de limpieza de tejidos: la limpieza de TDE de la aorta aislada y la limpieza iDISCO de todo el ratón (Figura 1). Después de la inmunotinción de montaje completo, la aorta superficial se eliminó con una serie de soluciones de trabajo de TDE. El IR se ajusta a 1,4-1,5, dependiendo de la concentración de TDE del paso final, para lograr una transparencia óptima del tejido aórtico sin cambiar su volumen (Figura 1A). A diferencia del aclaramiento de TDE, el protocolo de aclarado iDISCO incluye pasos de decoloración y permeabilización antes de la inmunotinción de montaje completo, seguidos de desidipación y deshidratación con diferentes disolventes químicos, y la coincidencia de IR en 1,56 (Figura 1B). El claro iDISCO permite la visualización de tejido de gran tamaño e incluso de todo el cuerpo del ratón debido a la contracción del tejido.
Las imágenes 3D confocales y multifotónicas de la aorta facial de montaje completo con autorización de TDE permiten la visualización de estructuras, incluidas las placas intimal, la celularidad de la adventicia y las proyecciones neuronales de la adventicia, entre otras estructuras, mientras que las imágenes de lámina de luz del ratón despejado con iDISCO permiten la visualización y la reconstrucción del árbol arterial junto con el tejido adiposo perivascular, los ganglios linfáticos renales y los componentes neurales asociados, incluidos los nervios y los ganglios (Figura 1C). Por ejemplo, las imágenes confocales de la aorta aterosclerótica aclarada con TDE detectaron múltiples células T teñidas con CD3e en placa y una neogénesis extensa de fibras nerviosas teñidas con NF200 de diferentes diámetros en ATLO, mientras que las imágenes multifotónicas de la aorta abdominal enferma de montaje completo aclarada por TDE de ratones Apoe-/- envejecidos mostraron la territorialidad de la germinación de axones que expresan NF200 en áreas de células T B220 negativas dentro de ATLO (Figura 2A). Por el contrario, las imágenes de lámina de luz de todo el abdomen del ratón despejado con iDISCO visualizaron la relación espacial entre la aorta y los ganglios simpáticos adyacentes. La segmentación de imágenes en 3D y el trazado de axones individuales desde los ganglios hasta la superficie aórtica revelaron una reestructuración neuronal robusta, incluidos axones teñidos con NF200 recién formados en la aorta adyacente a la placa aterosclerótica (Figura 2B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67400/67400fig01.jpg"> 
Figura 1: Flujo de trabajo del estudio. (A) Aclaramiento acuoso de la aorta enfrentada . (B) Limpieza iDISCO a base de solvente de todo el mouse. (C). 3D imágenes volumétricas y procesamiento de imágenes de muestras aisladas de aorta o de ratón enteras aclaradas ópticamente. Esta figura ha sido modificada con permiso de Sun et al.17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67400/67400fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67400/67400fig02v2.jpg"> 
Figura 2: Ejemplo de imágenes 3D de tejidos aclarados con TDE e iDISCO. (A) Imágenes 3D de TDE aclarado en la aorta facial. Panel superior: Las imágenes confocales mostraron linfocitos T CD3e+ (rojo, flecha) en la placa íntima y axones nerviosos NF200+ (verde) en la adventicia de la aorta aterosclerótica (ATLO); Panel inferior: Las imágenes multifotónicas mostraron axones nerviosos NF200+ (verde, puntas de flecha), células B B220+ (rojo, triángulo abierto), generación de segundos armónicos derivados del colágeno (SHG, blanco) en ATLO de ratones machos Apoe-/- de 78 semanas de edad. Sytox (azul) y DAPI (azul) mostraron los núcleos. (B) Imágenes reconstruidas y segmentadas en 3D de iDISCO despejado todo el abdomen del ratón. Reconstrucción, segmentación y trazado en 3D de los nervios y axones NF200+ (flechas, verde) y su relación espacial con los ganglios simpáticos (puntas de flecha) de la aorta abdominal intacta. El triángulo abierto indicaba un axón recién formado adyacente a las placas ateroscleróticas. Se utilizó la autofluorescencia (auto) para obtener imágenes de la aorta y el tejido conectivo, incluida la placa (cian) y el ganglio linfático renal (RLN, azul). CG, ganglios celíacos, SycG, ganglios de la cadena simpática. Esta figura ha sido modificada con permiso de Mohanta et al.6 y Sun et al.17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67400/67400fig02largev2.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Imágenes tridimensionales de los tejidos aórticos en la aterosclerosis

Recent research has advanced the understanding of atherosclerosis as a transmural chronic inflammatory disease involving all three layers of the arterial ...

three-dimensional-imaging-of-aortic-tissues-in-atherosclerosis

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Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

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En vivo en el infrarrojo cercano fluorescencia (NIRF) imagen intravascular molecular de placa inflamatoria, un enfoque multimodal de imágenes de la aterosclerosis

El análisis ex vivo de lesiones arteriales a partir de modelos animales de enfermedad cardiovascular se basa clásicamente en técnicas histológicas e inmunohistoquímicas. Estos proporcionan mediciones bidimensionales en lesiones tridimensionales. Este manuscrito describe la generación de lesiones arteriales para análisis cuantitativo en 3 dimensiones mediante tomografía óptica de proyección.

Generación y cuantificación de 3 dimensiones de las lesiones arteriales en ratones mediante tomografía óptica de proyección

Describimos procedimientos para cuantificar y caracterizar lesiones ateroscleróticas en modelos de ratón utilizando el corte de precisión del seno aórtico y la aorta ascendente combinado con análisis histoquímico e inmunohistoquímico.

Análisis cuantitativo y caracterización de lesiones ateroscleróticas en el seno aórtico murino

Aquí, presentamos un protocolo para utilizar tres dimensiones modelos impresos para la planificación preoperatoria y reorganización intraoperatoria de localizaciones vasculares complicados al manipular una anomalía congénita de la aorta.

Impresión tridimensional de una anomalía aórtica compleja

Imágenes por ultrasonido se ha convertido en una modalidad común para determinar las dimensiones luminales de aneurismas de aorta torácicas y abdominales en ratones. Este protocolo describe el procedimiento para adquirir imágenes de ultrasonido bidimensional confiable y reproducible de la aorta ascendente y abdominal en ratones.

Imágenes por ultrasonido de la Aorta torácica y Abdominal en ratones para determinar dimensiones de aneurisma

Es necesario determinar qué lesiones ateroscleróticas progresarán en la vasculatura coronaria para guiar la intervención antes de que ocurra el infarto de miocardio. Este artículo describe el modelado biomecánico de arterias a partir de la tomografía de coherencia óptica utilizando técnicas de interacción fluido-estructura en un solucionador comercial de elementos finitos para ayudar a predecir esta progresión.

Tomografía de coherencia óptica basada en el análisis de interacción fluido-estructura biomecánica de la progresión de la aterosclerosis coronaria

La angiografía por tomografía computarizada dinámica (CTA) proporciona un valor diagnóstico adicional en la caracterización de las endofugas aórticas. Este protocolo describe un enfoque cualitativo y cuantitativo utilizando el análisis de la curva de atenuación temporal para caracterizar las endofugas. La técnica de integración de imágenes dinámicas de CTA con fluoroscopia utilizando fusión de imágenes 2D-3D se ilustra para una mejor guía de la imagen durante el tratamiento.

Angiografía por tomografía computarizada dinámica resuelta en el tiempo para la caracterización de endofugas aórticas y guía de tratamiento a través de imágenes de fusión 2D-3D

La ecocardiografía intracardíaca (ICE) precisa muestra una precisión significativa en la estimación de la estructura de la aurícula izquierda, un método de estimación de la estructura cardíaca prospectivo y prometedor. En este trabajo se propone un protocolo para el modelado tridimensional de la aurícula izquierda y las venas pulmonares con ICE y remodelación del catéter de mapeo anatómico rápido (FAM).

Modelado tridimensional de la aurícula izquierda y las venas pulmonares con un enfoque preciso de ecocardiografía intracardíaca

Este protocolo presenta una línea completa para analizar muestras obtenidas de corazones humanos que abarcan las escalas microscópica y macroscópica.

Pipeline para el estudio anatómico tridimensional multiescala del corazón humano

Describimos una plataforma basada en el chip para el cultivo en tres dimensiones de las células de micro-biorreactores. Un chip puede albergar hasta 10 millones de euros. células que pueden ser cultivadas bajo condiciones definidas con precisión en lo que respecta al flujo de fluidos, etc tensión de oxígeno en un asa estéril, cerrado de circulación.

Basada en el chip tridimensional de cultivo celular en perfundido Micro-biorreactores

Aprende a realizar imágenes tridimensionales de la aorta murina en aterosclerosis mediante tinción inmunológica y microscopía confocal. Este protocolo de aclarado tisular permite visualizar cambios celulares y estructurales en tejidos intactos.

Imágenes tridimensionales de los tejidos aórticos en la aterosclerosis

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