Name: Modelado del consumo de alcohol en roedores mediante el consumo de alcohol en jaulas caseras de dos botellas y análisis microestructural (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 45 s
Description: Aprende a modelar el consumo de alcohol en ratas mediante un paradigma de dos botellas con análisis microestructural. Este método permite capturar patrones de consumo con alta resolución temporal.

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Los autores agradecen a Joseph Pitock y Katie Przybysz, PhD por su asistencia técnica durante el desarrollo de LIQ HDR. También agradecemos a Nicholas Petersen y Marie Doyle, PhD, por muchas conversaciones útiles durante el desarrollo de LIQ HDR. Este trabajo fue apoyado por el Instituto Nacional sobre el Abuso del Alcohol y el Alcoholismo de los Institutos Nacionales de Salud (P50 AA022538 y R01 AA029130 a EJG).

Intermittent-Access Two-Bottle Choice Drinking with Lick Detection in Rats

<ol><li>GBD 2016 Alcohol Collaborators. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alcohol+use+and+burden+for+195+countries+and+territories%2C+1990-2016%3A+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2016%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Alcohol use and burden for 195 countries and territories, 1990-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016.</a> Lancet. 392 (10152), 1015-1035 (2018).</li>
<li>Fillmore, K. M., Stockwell, T., Chikritzhs, T., Bostrom, A., Kerr, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+alcohol+use+and+reduced+mortality+risk%3A+systematic+error+in+prospective+studies+and+new+hypotheses%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Moderate alcohol use and reduced mortality risk: systematic error in prospective studies and new hypotheses.</a> Annals Epidemiol. 17 (5 Suppl), S16-S23 (2007).</li>
<li>GBD 2020 Alcohol Collaborators. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population-level+risks+of+alcohol+consumption+by+amount%2C+geography%2C+age%2C+sex%2C+and+year%3A+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2020%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Population-level risks of alcohol consumption by amount, geography, age, sex, and year: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2020.</a> Lancet. 400 (10347), 185-235 (2020).</li>
<li>Esser, M. B., Sherk, A., Liu, Y., Naimi, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deaths+from+excessive+alcohol+use+-+United+States%2C+2016-2021%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+Mortality+Weekly+Rep%22%5BJournal%5D)">Deaths from excessive alcohol use - United States, 2016-2021.</a> Morbidity Mortality Weekly Rep. 73, 154-161 (2024).</li>
<li>Melendez, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+%28every-other-day%29+drinking+induces+rapid+escalation+of+ethanol+intake+and+preference+in+adolescent+and+adult+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Intermittent (every-other-day) drinking induces rapid escalation of ethanol intake and preference in adolescent and adult C57BL/6J mice.</a> Alcohol Clin Exp Res. 35 (4), 652-658 (2011).</li>
<li>Wise, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+ethanol+intake+in+rats+following+exposure+to+ethanol+on+various+schedules%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacologia%22%5BJournal%5D)">Voluntary ethanol intake in rats following exposure to ethanol on various schedules.</a> Psychopharmacologia. 29 (3), 203-210 (1973).</li>
<li>Simms, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+access+to+20%25+ethanol+induces+high+ethanol+consumption+in+Long-Evans+and+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Intermittent access to 20% ethanol induces high ethanol consumption in Long-Evans and Wistar rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 32 (10), 1816-1823 (2008).</li>
<li>Carnicella, S., Ron, D., Barak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+ethanol+access+schedule+in+rats+as+a+preclinical+model+of+alcohol+abuse%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Intermittent ethanol access schedule in rats as a preclinical model of alcohol abuse.</a> Alcohol. 48 (3), 243-252 (2014).</li>
<li>Loi, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increase+in+alcohol+intake%2C+reduced+flexibility+of+alcohol+drinking%2C+and+evidence+of+signs+of+alcohol+intoxication+in+Sardinian+alcohol-preferring+rats+exposed+to+intermittent+access+to+20%25+alcohol%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Increase in alcohol intake, reduced flexibility of alcohol drinking, and evidence of signs of alcohol intoxication in Sardinian alcohol-preferring rats exposed to intermittent access to 20% alcohol.</a> Alcohol Clin Exp Res. 34 (12), 2147-2154 (2010).</li>
<li>Rhodes, J. S., Best, K., Belknap, J. K., Finn, D. A., Crabbe, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+simple+model+of+ethanol+drinking+to+intoxication+in+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behavior%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a simple model of ethanol drinking to intoxication in C57BL/6J mice.</a> Physiol Behavior. 84 (1), 53-63 (2005).</li>
<li>Thiele, T. E., Navarro, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%26%2334%3BDrinking+in+the+dark%26%2334%3B+%28DID%29+procedures%3A+a+model+of+binge-like+ethanol+drinking+in+non-dependent+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">&#34;Drinking in the dark&#34; (DID) procedures: a model of binge-like ethanol drinking in non-dependent mice.</a> Alcohol. 48 (3), 235-241 (2014).</li>
<li>Rimondini, R., Sommer, W., Heilig, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+temporal+threshold+for+induction+of+persistent+alcohol+preference%3A+behavioral+evidence+in+a+rat+model+of+intermittent+intoxication%5BTitle%5D)+AND+%22J+Studies+Alcohol%22%5BJournal%5D)">A temporal threshold for induction of persistent alcohol preference: behavioral evidence in a rat model of intermittent intoxication.</a> J Studies Alcohol. 64 (4), 445-449 (2003).</li>
<li>Sommer, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Upregulation+of+voluntary+alcohol+intake%2C+behavioral+sensitivity+to+stress%2C+and+amygdala+crhr1+expression+following+a+history+of+dependence%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Upregulation of voluntary alcohol intake, behavioral sensitivity to stress, and amygdala crhr1 expression following a history of dependence.</a> Biol Psychiatry. 63 (2), 139-145 (2008).</li>
<li>Nentwig, T. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lateral+habenula+is+not+required+for+ethanol+dependence-induced+escalation+of+drinking%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">The lateral habenula is not required for ethanol dependence-induced escalation of drinking.</a> Neuropsychopharmacol. 47 (12), 2123-2131 (2022).</li>
<li>Becker, H. C., Lopez, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+ethanol+drinking+after+repeated+chronic+ethanol+exposure+and+withdrawal+experience+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Increased ethanol drinking after repeated chronic ethanol exposure and withdrawal experience in C57BL/6 mice.</a> Alcohol Clin Exp Res. 28 (12), 1829-1838 (2004).</li>
<li>Lopez, M. F., Becker, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+pattern+and+number+of+chronic+ethanol+exposures+on+subsequent+voluntary+ethanol+intake+in+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Effect of pattern and number of chronic ethanol exposures on subsequent voluntary ethanol intake in C57BL/6J mice.</a> Psychopharmacology. 181 (4), 688-696 (2005).</li>
<li>Griffin, W. C., Lopez, M. F., Becker, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intensity+and+duration+of+chronic+ethanol+exposure+is+critical+for+subsequent+escalation+of+voluntary+ethanol+drinking+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Intensity and duration of chronic ethanol exposure is critical for subsequent escalation of voluntary ethanol drinking in mice.</a> Alcohol Clin Exp Res. 33 (11), 1893-1900 (2009).</li>
<li>Hwa, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+escalation+of+alcohol+drinking+in+C57BL%2F6J+mice+with+intermittent+access+to+20%25+ethanol%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Persistent escalation of alcohol drinking in C57BL/6J mice with intermittent access to 20% ethanol.</a> Alcohol Clin Exp Res. 35 (11), 1938-1947 (2011).</li>
<li>Vierkant, V., Xie, X., Wang, X., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+alcohol+use+disorder+and+their+application+for+pathophysiological+investigations%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Prot%22%5BJournal%5D)">Experimental models of alcohol use disorder and their application for pathophysiological investigations.</a> Curr Prot. 3 (6), e831(2023).</li>
<li>Greenfield, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risks+of+alcohol+use+disorders+related+to+drinking+patterns+in+the+U.S.+general+population%5BTitle%5D)+AND+%22J+Studies+Alcohol+Drugs%22%5BJournal%5D)">Risks of alcohol use disorders related to drinking patterns in the U.S. general population.</a> J Studies Alcohol Drugs. 75 (2), 319-327 (2014).</li>
<li>Rehm, J., Greenfield, T. K., Rogers, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Average+volume+of+alcohol+consumption%2C+patterns+of+drinking%2C+and+all-cause+mortality%3A+results+from+the+US+National+Alcohol+Survey%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Average volume of alcohol consumption, patterns of drinking, and all-cause mortality: results from the US National Alcohol Survey.</a> Am J Epidemiol. 153 (1), 64-71 (2001).</li>
<li>Grant, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drinking+typography+established+by+scheduled+induction+predicts+chronic+heavy+drinking+in+a+monkey+model+of+ethanol+self-administration%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Drinking typography established by scheduled induction predicts chronic heavy drinking in a monkey model of ethanol self-administration.</a> Alcohol Clin Exp Res. 32 (10), 1824-1838 (2008).</li>
<li>Nathan, P. E., O'Brien, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+analysis+of+the+behavior+of+alcoholics+and+nonalcoholics+during+prolonged+experimental+drinking%3A+A+necessary+precursor+of+behavior+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Ther%22%5BJournal%5D)">An experimental analysis of the behavior of alcoholics and nonalcoholics during prolonged experimental drinking: A necessary precursor of behavior therapy.</a> Behav Ther. 2 (4), 455-476 (1971).</li>
<li>Godynyuk, E., Bluitt, M. N., Tooley, J. R., Kravitz, A. V., Creed, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+open-source%2C+automated+home-cage+sipper+device+for+monitoring+liquid+ingestive+behavior+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">An open-source, automated home-cage sipper device for monitoring liquid ingestive behavior in rodents.</a> eNeuro. 6 (5), (2019).</li>
<li>Frie, J. A., Khokhar, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+open+source+automated+two-bottle+choice+test+apparatus+for+rats%5BTitle%5D)+AND+%22HardwareX%22%5BJournal%5D)">An open source automated two-bottle choice test apparatus for rats.</a> HardwareX. 5, e00061(2019).</li>
<li>Melo, M. C., Alves, P. E., Cecyn, M. N., Eduardo, P. M. C., Abrahao, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+eight+wireless+automated+cages+system+with+two+lick-o-meters+each+for+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Development of eight wireless automated cages system with two lick-o-meters each for rodents.</a> eNeuro. 9 (4), (2022).</li>
<li>Wong, K., et al. Socially integrated polysubstance (SIP) system: An open-source solution for continuous monitoring of polysubstance fluid intake in group housed mice. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWong%2C+K+%22Addiction+Neurosci%22">Addiction Neurosci</a>. , (2023).</li>
<li>Frie, J. A., Khokhar, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FARESHARE%3A+An+open-source+apparatus+for+assessing+drinking+microstructure+in+socially+housed+rats%5BTitle%5D)+AND+%22NPP-Digit+Psychiatry+Neurosci%22%5BJournal%5D)">FARESHARE: An open-source apparatus for assessing drinking microstructure in socially housed rats.</a> NPP-Digit Psychiatry Neurosci. 2 (1), 1-7 (2024).</li>
<li>Zhao, Z., et al. INGEsT: An open-source behavioral setup for studying self-motivated ingestive behavior and learned operant behavior. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZhao%2C+Z+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2024).</li>
<li>Petersen, N., Adank, D. N., Raghavan, R., Winder, D. G., Doyle, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LIQ+HD+%28Lick+Instance+Quantifier+Home+Cage+Device%29%3A+An+open-source+tool+for+recording+undisturbed+two-bottle+drinking+behavior+in+a+home+cage+environment%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">LIQ HD (Lick Instance Quantifier Home Cage Device): An open-source tool for recording undisturbed two-bottle drinking behavior in a home cage environment.</a> eNeuro. 10 (4), (2023).</li>
<li>Trujillo, J. L., Roberts, A. J., Gorman, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+timing+of+ethanol+exposure+exerts+enduring+effects+on+subsequent+ad+libitum+consumption+in+C57+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Circadian timing of ethanol exposure exerts enduring effects on subsequent ad libitum consumption in C57 mice.</a> Alcohol Clin Exp Res. 33 (7), 1286-1293 (2009).</li>
<li>Nentwig, T. B., Margaret Starr, E., Judson Chandler, L., Glover, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+compulsive+drinking+phenotype+in+adult+male+rats+exposed+to+ethanol+in+a+binge-like+pattern+during+adolescence%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Absence of compulsive drinking phenotype in adult male rats exposed to ethanol in a binge-like pattern during adolescence.</a> Alcohol. 79, 93-103 (2019).</li>
<li>Patwell, R., Yang, H., Pandey, S. C., Glover, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+operant+ethanol+self-administration+paradigm+that+discriminates+between+appetitive+and+consummatory+behaviors+reveals+distinct+behavioral+phenotypes+in+commonly+used+rat+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">An operant ethanol self-administration paradigm that discriminates between appetitive and consummatory behaviors reveals distinct behavioral phenotypes in commonly used rat strains.</a> Neuropharmacology. 201, 108836(2021).</li>
<li>Bito-Onon, J. J., Simms, J. A., Chatterjee, S., Holgate, J., Bartlett, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Varenicline%2C+a+partial+agonist+at+neuronal+nicotinic+acetylcholine+receptors%2C+reduces+nicotine-induced+increases+in+20%25+ethanol+operant+self-administration+in+Sprague-Dawley+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Addict+Biol%22%5BJournal%5D)">Varenicline, a partial agonist at neuronal nicotinic acetylcholine receptors, reduces nicotine-induced increases in 20% ethanol operant self-administration in Sprague-Dawley rats.</a> Addict Biol. 16 (3), 440-449 (2011).</li>
<li>Mill, D. J., Bito-Onon, J. J., Simms, J. A., Li, R., Bartlett, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fischer+rats+consume+20%25+ethanol+in+a+long-term+intermittent-access+two-bottle-choice+paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Fischer rats consume 20% ethanol in a long-term intermittent-access two-bottle-choice paradigm.</a> PloS One. 8 (11), e79824(2013).</li>
<li>Carnicella, S., Amamoto, R., Ron, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excessive+alcohol+consumption+is+blocked+by+glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Excessive alcohol consumption is blocked by glial cell line-derived neurotrophic factor.</a> Alcohol. 43 (1), 35-43 (2009).</li>
<li>Moore, C. F., Lynch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alcohol+preferring+%28P%29+rats+as+a+model+for+examining+sex+differences+in+alcohol+use+disorder+and+its+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Alcohol preferring (P) rats as a model for examining sex differences in alcohol use disorder and its treatment.</a> Pharmacol Biochem Behav. 132, 1-9 (2015).</li>
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<li>Carnicella, S., Yowell, Q. V., Ron, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+operant+oral+ethanol+self-administration%3A+a+dose-response+curve+study+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Regulation of operant oral ethanol self-administration: a dose-response curve study in rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 35 (1), 116-125 (2011).</li>
<li>De Oliveira Sergio, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-+and+estrous-related+response+patterns+for+alcohol+depend+critically+on+the+level+of+compulsion-like+challenge%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neuro-Psychopharmacol+Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Sex- and estrous-related response patterns for alcohol depend critically on the level of compulsion-like challenge.</a> Prog Neuro-Psychopharmacol Biol Psychiatry. 133, 111008(2024).</li>
<li>Foo, J. C., Skorodumov, I., Spanagel, R., Meinhardt, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-+and+age-specific+effects+on+the+development+of+addiction+and+compulsive-like+drinking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Sex+Diff%22%5BJournal%5D)">Sex- and age-specific effects on the development of addiction and compulsive-like drinking in rats.</a> Biol Sex Diff. 14 (1), 44(2023).</li>
<li>Moolten, M., Kornetsky, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+self-administration+of+ethanol+and+not+experimenter-administered+ethanol+facilitates+rewarding+electrical+brain+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Oral self-administration of ethanol and not experimenter-administered ethanol facilitates rewarding electrical brain stimulation.</a> Alcohol. 7 (3), 221-225 (1990).</li>
</ol>

Todos los autores declaran no tener conflictos de intereses.

El protocolo actual proporciona instrucciones paso a paso para capturar datos de consumo de etanol utilizando un procedimiento de jaula casera de dos botellas de acceso intermitente. Este método se puede implementar con relativa facilidad y con poco o ningún costo o necesidad de equipo de investigación especializado. Utilizando los procedimientos proporcionados aquí para construir e implementar LIQ HDR, un sistema de detección de lamidas para su uso en ratas, los investigadores pueden capturar datos de microestructura de consumo de alta resolución además de medidas estándar de ingesta y preferencia.
El programa de acceso intermitente descrito en el protocolo actual es un procedimiento ampliamente utilizado en gran parte porque es bien sabido que genera niveles más altos de ingesta de etanol que muchos programas alternativos de acceso al etanol. De hecho, investigaciones anteriores han demostrado que las ratas con acceso en un horario intermitente tienen una ingesta diaria promedio de etanol más alta que las ratas con acceso continuo de 24 h 6,7. Sin embargo, pueden ser deseables diferentes programas de acceso al etanol dependiendo de la pregunta de investigación u otros parámetros de diseño experimental. Los investigadores pueden modificar muy fácilmente el protocolo actual para adaptarse a diferentes horarios (por ejemplo, acceso continuo, beber en la oscuridad, etc.) simplemente cambiando la hora y los días de encendido / apagado de la botella.
Aunque el consumo de dos botellas es un paradigma relativamente simple de implementar, pueden surgir problemas que tienen el potencial de comprometer la recopilación de datos. Por lo tanto, es crucial que los experimentadores inspeccionen los datos a diario para identificar rápidamente posibles problemas. En particular, los investigadores deben prestar mucha atención a los cambios muy grandes o muy pequeños en el peso de las botellas que pueden ser indicativos de un sorbo con fugas u obstruido, respectivamente. Detectar signos de estos problemas a tiempo puede evitar la exclusión de todos los datos de un tema determinado del análisis. De hecho, si los investigadores notan cambios drásticos (o ausencia de cambios) en el peso de la botella durante un período de 24 horas, un simple cambio a una nueva botella puede ayudar a confirmar si una botella determinada debe retirarse de la circulación. Por estas razones, es aconsejable tener botellas y sorbos adicionales a mano. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que algunas ratas exhiben naturalmente niveles muy bajos de consumo de etanol, por ejemplo,35. Esto es particularmente cierto para las ratas de ciertas cepas, ver8 para una revisión. Por lo tanto, los investigadores no deben alarmarse si una pequeña población de animales en un experimento determinado tiene un consumo de etanol bajo o nulo. Del mismo modo, algunos animales son propensos a jugar con el sorbo/botella de manera que pueda promover el derrame. Aunque son raros, los casos repetidos de cambios altos en el peso de la botella que no están asociados con el consumo pueden requerir que un animal en particular sea retirado del experimento.
Nuestro detallado protocolo paso a paso demuestra la facilidad de implementación y uso del sistema LIQ HDR para ratas. Los investigadores sin conocimientos o habilidades previas en electrónica y programación de microcontroladores pueden adaptar fácilmente este sistema a sus necesidades experimentales con poca o ninguna modificación. Nuestros datos representativos demuestran aún más su aplicación exitosa para estudios de consumo de agua en jaulas caseras de ratas y su poderosa capacidad para capturar numerosas medidas de microestructura de consumo de agua a alta resolución temporal. LIQ HDR incluye varias modificaciones de diseño en relación con su predecesor de mouse30. Esto se hizo no solo como una necesidad para una adaptación exitosa para su uso en ratas, sino también para mejorar la funcionalidad y la experiencia del usuario. Los componentes de la jaula, incluido el portabotellas impreso en 3D, el bloqueador de sorbos y los componentes electrónicos, se reubican en la parte superior de la jaula para protegerlos contra la masticación, lo que puede provocar una pérdida frecuente y significativa de datos y rotación de hardware. La adición de un panel acrílico cortado con láser ayuda a prevenir la destrucción de estos componentes vulnerables. Aparte del panel acrílico, que es el mismo material que una jaula de ratas de caja de zapatos estándar, todos los demás componentes LIQ HDR son inaccesibles para el animal desde el interior de la jaula o solo accesibles por un breve momento durante el cambio de botella. Este diseño limita el potencial de destrucción de los componentes del dispositivo y el riesgo para el animal a través de la ingestión de artículos no alimentarios. A diferencia de las botellas hechas a medida que requieren mucha mano de obra utilizada en el diseño LIQ HD, el portabotellas impreso en 3D de LIQ HDR está diseñado para ser compatible con las botellas comerciales para roedores listas para usar. Las botellas se instalan en la parte superior de la jaula y son accesibles para las ratas de la misma manera que se aplican las botellas para beber durante el cuidado y la cría estándar. La adición de bloqueadores de sorbos es una solución simple pero efectiva que mejora la confiabilidad del sistema y evita la pérdida de datos valiosos que, en ausencia del bloqueador, puede resultar de la bebida que ocurre antes de iniciar la captura de datos en la interfaz Arduino o las medidas erróneas de lamido que ocurren cuando las ratas interactúan con los sorbos durante la calibración diaria. Si bien las jaulas para ratas considerablemente más grandes requieren aumentar el tamaño del diseño de hardware original, el uso de cables significativamente más largos puede afectar negativamente la sensibilidad y precisión de la detección capacitiva debido a la interferencia, así como la integridad de la comunicación I2C entre las placas de sensores conectadas en cadena y la interfaz Arduino. Evitamos este problema con la adopción del sistema de comunicación diferencial I2C para lograr una transmisión de señal de ultra largo alcance y casi sin pérdidas a través de cables Ethernet. Los materiales utilizados para los componentes de la jaula permiten una fácil limpieza y desinfección entre usos. El lickómetro se puede esterilizar y limpiar con una solución de EtOH al 70%, mientras que se debe tener cuidado para garantizar que los componentes eléctricos, como la cinta de cobre conductora, permanezcan intactos. Los equipos no eléctricos que están en contacto directo con el animal, como el bloqueador de sorbos y el panel acrílico, se pueden lavar a fondo con agua tibia y jabón.
La confiabilidad y efectividad de cualquier sistema de detección de lamidas requiere una construcción e instalación adecuadas, así como pruebas exhaustivas, monitoreo diligente de errores y resolución de problemas efectiva. Todos los componentes de bricolaje deben fabricarse y ensamblarse con habilidad y cuidado. Esto es especialmente importante para los pasos que involucran soldadura, que pueden requerir práctica para principiantes. Independientemente, se requieren pruebas exhaustivas de todos los lickómetros antes de su uso en experimentos reales. Si el sistema debe modificarse para adaptarse a las necesidades experimentales individuales, es posible que sea necesario ajustar aún más la configuración del sensor (por ejemplo, los umbrales de toque y liberación) para una detección precisa de lamidos. Para los usuarios primerizos, sugerimos probar el sistema en un breve estudio piloto de muestra pequeña utilizando una solución altamente apetecible que generará altos niveles de consumo de alcohol. La detección de lamidas se puede verificar en tiempo real inspeccionando visualmente la placa del sensor mientras el LED parpadea cada vez que se registra una lamida. Las correlaciones fuertes, significativas y consistentes entre el número de lamidas y el cambio en el peso de la botella deben usarse como punto de referencia para la configuración adecuada del hardware y el software. Incluso después de finalizar la configuración, recomendamos iniciar la grabación de un experimento determinado en un día en que las ratas reciben dos botellas que contienen agua para solucionar problemas del equipo que pueden ser evidentes al comienzo de un experimento. También puede ser ventajoso probar la función del lickómetro en el día del agua asociado con el cambio de jaula, ya que esto requiere que los lickómetros se desconecten y se vuelvan a conectar al sensor. La falla aleatoria del lickómetro o sensor individual, que daría como resultado datos atípicos muy obvios (por ejemplo, no se detectaron o se detectaron pocos licks a pesar de un cambio sustancial en el peso de la botella) de manera consistente para el mismo lickometer, es indicativo de componentes defectuosos. Recomendamos preparar con anticipación los componentes adicionales para cada elemento del sistema de lickometer para permitir un fácil reemplazo según sea necesario. Finalmente, no se puede exagerar la importancia de asegurarse de que los cables de los sensores no se superpongan o se doblen excesivamente. Si lo hace, puede resultar en casos aleatorios de detección deficiente de lamidos, evidentes por un número de lamidos irrazonablemente bajo para un cambio dado en el peso de la botella o duraciones de lamido extremadamente grandes (cerca de 60,000 ms para un contenedor de 1 minuto) que abarcan minutos u horas. Sin embargo, las pequeñas pérdidas de datos son inevitables en los estudios que recopilan datos durante 24 horas para muchos animales durante muchos días utilizando el enfoque estándar o equipado con un lickómetro. Los investigadores pueden excluir datos erróneos para las raras sesiones de bebida cuando los pesos de las botellas y / o lamidas claramente no reflejan la ingesta (por ejemplo, obstrucción del sorbo, error de calibración, etc.). En ocasiones como estas, el valor promedio para una medida determinada (por ejemplo, ingesta (g / kg), lamidas, etc.) durante el período de estudio para ese sujeto en particular puede sustituirse por el valor faltante durante el análisis de datos. El ANOVA de efectos mixtos también se puede utilizar como alternativa para acomodar los puntos de datos faltantes.
Una de las ventajas del paradigma de consumo de dos botellas es el aspecto voluntario de la ingesta de etanol. Esto ofrece una excelente validez aparente, particularmente a la luz de los hallazgos que muestran que el alcohol administrado por el experimentador puede producir efectos significativamente diferentes sobre la función cerebral y el comportamiento en comparación con el alcohol autoadministrado voluntariamente42. Además, la naturaleza voluntaria del paradigma permite a los investigadores capturar diferencias individuales en la ingesta similares a la variabilidad en la preferencia por el alcohol y los patrones de consumo observados en los humanos. Estas diferencias individuales pueden proporcionar una poderosa oportunidad para que los investigadores correlacionen el consumo (ingesta y/o patrones) con la magnitud de los efectos patológicos observados.
Sin embargo, se deben considerar algunas limitaciones del paradigma de beber en jaulas caseras de dos botellas. Por ejemplo, aunque la variabilidad individual en la ingesta de etanol puede ser ventajosa para algunos experimentos, puede ser una desventaja en otros experimentos en los que puede ser deseable un nivel constante de intoxicación o exposición al etanol. Esto es particularmente cierto para los experimentos que examinan las consecuencias de la dependencia y la abstinencia de la exposición crónica al etanol. Es importante destacar que el consumo de alcohol de dos botellas no se caracteriza como un modelo de dependencia, incluso en ratas con acceso a etanol durante períodos prolongados de tiempo. Por lo tanto, en ausencia de síntomas acompañantes de abstinencia, los investigadores deben tener cuidado al interpretar las consecuencias del consumo prolongado de etanol como efectos de dependencia y/o abstinencia. De hecho, es posible, si no plausible, que las ratas que beben cantidades relativamente grandes de etanol durante el procedimiento de elección de dos botellas presenten síntomas de abstinencia, pero que las ratas que beben volúmenes totales más bajos en un período dado de 24 h no muestren signos similares de dependencia. Los patrones de bebida también pueden desempeñar un papel importante en esta consideración, ya que dos animales que beben la misma cantidad durante un período de 24 h pueden experimentar niveles muy diferentes de intoxicación (es decir, BEC) dependiendo del patrón de su ingesta de etanol22. Esto destaca la utilidad de LIQ HDR en el procedimiento de elección de dos botellas, ya que puede identificar fácilmente a las ratas que consumen una dosis determinada de etanol a un ritmo rápido (es decir, trago) frente a aquellas que consumen la misma dosis a un ritmo mucho más lento (es decir, sorbo). Aunque es potencialmente indeseable para los estudios que investigan los efectos de una dosis controlada de etanol, la detección de cambios en los patrones de consumo (p. ej., reducción de episodios de atracones) después de una intervención experimental en particular tiene un valor traslacional significativo dado el enfoque de reducción de daños que se persigue cada vez más en la clínica. Finalmente, no se requiere esfuerzo para que los animales obtengan acceso al etanol en los paradigmas de consumo de jaulas domésticas, incluido el que se describe aquí. Por lo tanto, la utilidad de este paradigma se limita al análisis de la bebida sola, mientras que los métodos operantes se favorecen para los casos en que los investigadores están interesados en examinar la búsqueda de alcohol, una característica importante del AUD.
En resumen, el protocolo descrito aquí proporciona a los investigadores toda la información y los recursos necesarios para medir la ingesta de etanol en ratas en el entorno de jaulas domésticas. Presentamos opciones para enfoques de resolución relativamente baja y alta que brindan a los investigadores la flexibilidad de elegir el método que sea más adecuado para sus necesidades de investigación.

Aunque el consumo moderado de alcohol se ha asociado históricamente con beneficios moderados para la salud, recientes estudios exhaustivos a gran escala han revelado que ninguna cantidad de consumo de alcohol es segura1,2. De hecho, el consumo de alcohol es el7º factor de riesgo principal de muerte y discapacidad a nivel mundial1 y las personas que beben incluso pequeñas cantidades de alcohol tienen un mayor riesgo de cáncer, enfermedades infecciosas y lesiones1,3. En los Estados Unidos, las muertes por consumo de alcohol aumentaron casi un 30% entre 2016 y 20214. Es importante destacar que el riesgo de muerte y discapacidad aumenta monótonamente con el aumento del consumo1.
Aunque los estudios en humanos han proporcionado información valiosa sobre la neurobiología del uso y abuso del alcohol, el control experimental proporcionado por los modelos animales es crucial para una comprensión profunda de los mecanismos que subyacen al comportamiento de consumo y el riesgo de consumo excesivo de alcohol. Estos modelos también son herramientas valiosas para el desarrollo de tratamientos destinados a reducir el consumo descontrolado. El consumo de alcohol en jaulas en casa con dos biberones es uno de los paradigmas preclínicos más utilizados para estudiar el consumo de alcohol en roedores. Esto se debe, en gran parte, a su facilidad de implementación, ya que permite medir el consumo voluntario total de alcohol y la preferencia sin necesidad de equipos de investigación especializados o análisis complejos. Con este enfoque, los investigadores pueden recopilar mediciones a intervalos deseados (por ejemplo, horas, días, semanas) calculando el cambio en el peso de la botella desde el principio hasta el final de una sesión de bebida. Las variaciones de este método básico han sido utilizadas por muchos en el campo para facilitar los niveles bajos a moderados o atracones de ingesta de alcohol durante períodos cortos y largos de tiempo. Por ejemplo, se han utilizado procedimientos continuos e intermitentes de elección de dos botellas para facilitar niveles bajos y moderados de ingesta de alcohol, respectivamente, tanto en ratones5 como en rats6,7,8. Los mismos paradigmas pueden promover altos niveles de ingesta en cepas que prefieren el alcohol7,9. Alternativamente, se ha demostrado que una adaptación de este método que limita el acceso al alcohol a 2-4 horas diarias a partir de aproximadamente 3 horas después del inicio del ciclo de oscuridad genera atracones de bebida en ratones (es decir, beber en la oscuridad)10,11. Se han utilizado variaciones adicionales de estos métodos junto con métodos que facilitan la dependencia del alcohol (es decir, la exposición crónica intermitente al vapor de etanol) para examinar la escalada del consumo voluntario de alcohol durante la abstinencia12,13,14,15,16,17,18,19.
Aunque ampliamente adoptado por el campo, el enfoque estándar de medir la ingesta de alcohol por cambio en el peso de la botella se limita en resolución al consumo total por sesión de bebida. En consecuencia, este enfoque es incapaz de capturar los patrones de consumo, que se sabe que afectan tanto el riesgo como la gravedad del trastorno por consumo de alcohol (AUD)20,21,22. De hecho, la ingesta media de un individuo a lo largo del tiempo puede ser consecuencia de varios episodios de consumo excesivo de alcohol o de muchos episodios de bebida, cada uno de ellos asociado a un consumo relativamente bajo, y estos matices pasan desapercibidos cuando el consumo se mide como la ingesta total por sesión de bebida. Es importante destacar que se observan significativamente más episodios de consumo de alcohol asociados con grandes episodios de bebida (es decir, tragar) en individuos con AUD en relación con controles sanos23 y los datos en primates no humanos sugieren que los individuos que establecen un patrón de consumo de alcohol que incluye grandes episodios de bebida al principio de su historial de consumo de alcohol tienen un riesgo significativo de AUD22. Además, los episodios de consumo de alcohol que incluyen grandes episodios de consumo aumentan significativamente el riesgo de morbilidad y mortalidad independientemente del diagnóstico de AUD21. En conjunto, estos datos han llevado a un mayor interés en examinar los patrones de bebida, además de los niveles de ingesta general en modelos preclínicos, y han impulsado el desarrollo de una serie de sistemas de diversa complejidad que son capaces de capturar datos de bebida a nivel de lamidas individuales.
Entre los primeros se encuentra el desarrollo de un sistema de dos botellas equipado con detección de lamido de fotohaz diseñado para su uso en ratones24. Este sistema fue adaptado posteriormente por un grupo separado para su uso en rats25. En los años transcurridos desde entonces, se han utilizado variaciones sobre este tema para desarrollar sistemas similares contenidos en alojamientos personalizados para roedores26, que permiten la detección de lamidas de animales individuales alojados socialmente27,28, y que capturan tanto el comportamiento de alimentación como de bebida29. Entre estos, LIQ HD (Lick Instance Quantifier Home cage Device)30 ha atraído una atención significativa por ofrecer un sistema para su uso en ratones que es paralelo a la facilidad de implementación y asequibilidad del sistema desarrollado por Godnyuck et al.24. Este sistema utiliza la detección capacitiva para detectar directamente el contacto entre la lengüeta y el tubo de sorbo de metal conductor, a diferencia de las medidas indirectas como el enfoque o la interacción del sorbedor que se proporcionan mediante el sistema de detección de fotohaz. Los autores proporcionan datos que demuestran que su sistema de detección capacitiva ofrece una precisión y sensibilidad significativamente mayores en la detección de lamidos, produciendo correlaciones más fuertes entre el número de lamidos y el cambio en el peso de la botella que la detección de fotohaz. Los autores demuestran además la capacidad de utilizar este sistema junto con un paradigma de acceso continuo de dos botellas para capturar medidas de la microestructura del consumo de alcohol, además de medidas de la ingesta diaria general30.
Aquí, describimos los procedimientos para el consumo de alcohol en jaula en casa con dos botellas utilizando un enfoque estándar, así como métodos que permiten la detección de lamidos (Figura 1). También presentamos métodos para construir e implementar LIQ HDR, una adaptación de LIQ HD30 para su uso en ratas que incluye modificaciones de hardware para acomodar tamaños de jaula más grandes y un portabotellas rediseñado impreso en 3D compatible con botellas estándar listas para usar. Estos métodos proporcionan a los investigadores la flexibilidad necesaria para utilizar un enfoque estándar o equipado con un lickómetro, en función de sus recursos experimentales y de sus necesidades de recopilación de datos.
A continuación se muestra una descripción de los materiales necesarios e instrucciones paso a paso para capturar el consumo de alcohol en jaula en casa utilizando el procedimiento de bebida de elección de dos botellas de acceso intermitente adaptado de Simms et al.7. En este procedimiento, las ratas tienen acceso las 24 horas del día a dos botellas de bebida, 7 días a la semana. Los lunes, miércoles y viernes (MWF), las ratas reciben una botella que contiene agua (H2O) y otra botella que contiene etanol (EtOH). Estas botellas se retiran los martes, jueves y sábados (TRS) y se reemplazan con dos botellas de agua. Las ratas beben de las mismas dos botellas de agua los sábados y domingos. Tenga en cuenta que estos métodos se pueden ajustar fácilmente para horarios alternativos de acceso al etanol (por ejemplo, continuo, atracón, etc.) si lo desea. Se proporcionan instrucciones separadas para los enfoques estándar y equipados con lickómetros.

<table><tbody><tr><td><fuerte>Componentes disponibles en el mercado</fuerte></td><td></td><td></td><td><fuerte>Cantidad</fuerte></td></tr><tr><td>12 teclas Conexión del sensor táctil capacitivo (MPR121)</td><td>Adafruit</td><td>1982</td><td>3</td></tr> pares <tr><td>de cable de 2 pines (JST XH 2.5mm paso)</td><td>Adafruit</td><td>4872</td><td>18</td></tr><tr><td>Puente de placa de pruebas de 4 pines (Qwiic)</td><td>SparkFun</td><td>PRT-17912</td><td>1</td></tr><tr><td>Cable de 4 pines (Qwiic de 100 mm)</td><td>SparkFun</td><td>PRT-17259</td><td>1</td></tr><tr><td>cable de 4 pines (Qwiic de 50 mm)</td><td>SparkFun</td><td>PRT-17260</td><td>3</td></tr><tr><td>Salida de cambio de nivel de 5 V a 3 V</td><td>Adafruit</td><td>5637</td><td>1</td></tr><tr><td>Pantalla táctil capacitiva (2,8 pulgadas)</td><td>Adafruit</td><td>1947</td><td>1</td></tr><tr><td>Cinta conductora de cobre (1/4 de pulgada)</td><td>DigiKey</td><td>4393-CFT-1/4-ND</td><td>1</td></tr><tr><td>Datos escudo de registro</td><td>Adafruit</td><td>1141</td><td>1</td></tr><tr><td>Kit de conexión de comunicación diferencial I2C (QwiicBus)</td><td>SparkFun</td><td>KIT-17250</td><td>1</td></tr><tr><td>Cinta aislante</td><td>DigiKey</td><td>3M156004-ND</td><td>1</td></tr><tr><td>Tubo termorretráctil (3/16 pulgadas varios colores)</td><td>Bridas y más</td><td>HS357-S10</td><td>6</td></tr><tr><td>Kit de tubos termorretráctiles (4 pulgadas negro)</td><td>Jameco</td><td>2095963</td><td>1</td></tr><tr><td>Batería de botón de litio (3V 12.5mm)</td><td>DigiKey</td><td>1908-CR1220JAUCHSB-ND</td><td>1</td></tr><tr><td>arandela plana M5</td><td>Grainger</td><td>54FN66</td><td>1</td></tr><tr><td>tuerca hexagonal M5</td><td>Grainger</td><td>6CA72</td><td>1</td></tr> tornillo <tr><td>de máquina M5 (12mm)</td><td>Grainger</td><td>6GU88</td><td>1</td></tr> tornillo <tr><td>de máquina M5 (25mm)</td><td>Grainger</td><td>&nbsp; 6GU91</td><td>2</td></tr><tr><td>Cable de puente macho/macho</td><td>Adafruit</td><td>1957</td><td>1</td></tr><tr><td>Placa de microcontrolador (Arduino Mega 2560 Rev3)</td><td>DigiKey</td><td>1050-1018-ND</td><td>1</td></tr><tr><td>filamento PETG (plata de 2.85mm)</td><td>MatterHackers</td><td>M-DDH-UZR2</td><td>2</td></tr><tr><td>filamento PLA (2.85mm negro)</td><td>Filamento MatterHackers</td><td>M-SEW-RUAW</td><td>2</td></tr><tr><td>PLA (plata de 2.85mm)</td><td>MatterHackers</td><td>M-66P-6CLE</td><td>1</td></tr><tr><td>Fuente de alimentación (DC 9V 1A)</td><td>Newegg</td><td>9SIBPPKJYR5991</td><td>1</td></tr><tr><td>tarjeta de memoria SD/microSD (8GB)</td><td>Adafruit</td><td>1294</td><td>1</td></tr><tr><td>Cabezales de apilamiento</td><td>Shield Adafruit</td><td>85</td><td>1</td></tr><tr><td>Cable de núcleo sólido (22AWG rojo)</td><td>Adafruit</td><td>288</td><td>1</td></tr><tr><td>Cable de núcleo trenzado (22AWG negro)</td><td>Adafruit</td><td>2976</td><td>1</td></tr><tr><td>Alambre de núcleo trenzado (22AWG rojo)</td><td>Adafruit</td><td>3068</td><td>1</td></tr><tr><td>Tubo sorbedor de tapa giratoria con bola</td><td>Diseño alternativo</td><td>TCCN8.5-ST2.5SB</td><td>38</td></tr><tr><td>Botella de agua (8oz)</td><td>Diseño alternativo</td><td>WB8FS</td><td>38</td></tr><tr><td>Componentes impresos en 3D personalizados</td><td></td><td></td><td>Cantidad</fuerte></td></tr><tr><td>Fondo de caja Arduino impreso en 3D</td><td>N/A</td><td>ARDUINO_Bottom.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>tapa de caja Arduino impresa en 3D</td><td>N/A</td><td>ARDUINO_Top.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>pinza de cable impresa en 3D L</td><td>N/A</td><td>CLIP_L.stl</td><td>18</td></tr><tr><td>tuerca de clip de cable impresa en 3D</td><td>N/A</td><td>CLIP_Nut.stl</td><td>18</td></tr><tr><td>pinza de cable impresa en 3D</td> R <td>N/</td><td>A CLIP_R.stl</td><td>18</td></tr><tr><td>portabotellas de lickómetro impreso en 3D</td><td>N/A</td><td>LICKOMETER_Bottle Holder.stl</td><td>19</td></tr><tr><td>Protector de cable de lickómetro impreso en 3D L</td><td>N/A</td><td>LICKOMETER_Cable Protector_L.stl</td><td>6</td></tr><tr><td>Protector de cable de lickómetro impreso en 3D R</td><td>N/</td><td>A LICKOMETER_Cable Protector_R.stl</td><td>12</td></tr><tr><td>letras de lickómetro impresas en 3D</td><td>N/A</td><td>LICKOMETER_Letters.stl</td><td>19</td></tr><tr><td>tornillo de montaje impreso en 3D</td><td>N/A</td><td>Tornillo de montaje.stl</td><td>4</td></tr><tr><td>Caja de sensor impresa en 3D A inferior</td><td>N/A</td><td>SENSOR_A_Bottom.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>Caja de sensor impresa en 3D A top</td><td>N/A</td><td>SENSOR_A_Top.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>caja de sensor impresa en 3D B inferior</td><td>N/A</td><td>SENSOR_B_Bottom.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>caja de sensor impresa en 3D B top</td><td>N/A</td><td>SENSOR_B_Top.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>caja de sensor impresa en 3D C inferior</td><td>N/A</td><td>SENSOR_C_Bottom.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>Caja de sensor impresa en 3D C top</td><td>N/A</td><td>SENSOR_B_Top.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>Letras de la caja del sensor impresa en 3D</td> N<td>/A</td><td>SENSOR_Letters.stl</td><td>1</td></tr><tr><td>Bloqueador de sorbos impreso en 3D</td><td>N/A</td><td>SIPPER_Blocker.stl</td><td>36</td></tr><tr><td>Base de bloqueador de sorbos impresa en 3D</td><td>N/A</td><td>SIPPER_Base.stl</td><td>18</td></tr><tr><td>Engranaje de bloqueo de sorbos impreso en 3D</td><td>N/A</td><td>SIPPER_Gear.stl</td><td>18</td></tr><tr><td>Tuerca bloqueadora de sorbos impresa en 3D</td><td>N/A</td><td>SIPPER_Nut.stl</td><td>18</td></tr><tr><td>Gusano bloqueador de sorbos impreso en 3D</td><td>N/A</td><td>SIPPER_Worm.stl</td><td>18</td></tr><tr><td>Panel acrílico de lickómetro cortado con láser</td><td>N/A</td><td>LICKOMETER_Acrylic Panel_Sketch.dxf</td><td>19</td></tr></tbody></table>

modelado del consumo de alcohol en roedores mediante el consumo de alcohol en jaulas caseras de dos botellas y análisis microestructural

Modeling Alcohol Consumption in Rodents Using Two-Bottle Choice Home Cage Drinking and Microstructural Analysis

La elección de dos botellas para beber en jaulas en casa es uno de los paradigmas más utilizados para estudiar el consumo de etanol en roedores. En su forma más simple, los animales tienen acceso a dos botellas de bebida, una de las cuales contiene agua del grifo regular y la otra etanol, con una ingesta diaria medida por el cambio en el peso de la botella durante el período de 24 horas. En consecuencia, este enfoque no requiere equipo de laboratorio especializado. Si bien esta facilidad de implementación es probablemente el mayor contribuyente a su adopción generalizada por parte de los investigadores preclínicos del alcohol, la resolución de los datos de consumo de alcohol adquiridos con este enfoque está limitada por el número de veces que el investigador mide el peso de la botella (por ejemplo, una vez al día). Sin embargo, el deseo de examinar los patrones de consumo de alcohol en el contexto de la ingesta general, las intervenciones farmacológicas y las manipulaciones neuronales ha impulsado el desarrollo de sistemas de detección de lamidos en jaulas caseras que pueden adquirir datos a nivel de lamidos individuales. Aunque varios de estos sistemas se han desarrollado recientemente, el sistema de código abierto, LIQ HD (Lick Instance Quantifier Home cage Device), ha atraído una atención significativa en el campo por su asequibilidad y facilidad de uso. Aunque emocionante, este sistema fue diseñado para su uso en ratones. Aquí, revisamos los procedimientos apropiados para el consumo de agua en jaula en casa estándar y equipado con un lickómetro de dos botellas. También introducimos métodos para adaptar el sistema LIQ HD a las ratas, incluidas modificaciones de hardware para acomodar un tamaño de jaula más grande y un soporte de botella impreso en 3D rediseñado compatible con botellas de bebida estándar listas para usar. Con este enfoque, los investigadores pueden examinar los patrones diarios de bebida, además de los niveles de ingesta en muchas ratas en paralelo, aumentando así la resolución de los datos adquiridos con una inversión mínima en recursos adicionales. Estos métodos proporcionan a los investigadores la flexibilidad de utilizar botellas estándar o un aparato equipado con un lickómetro para interrogar los mecanismos neurobiológicos que subyacen al consumo de alcohol, en función de sus necesidades experimentales precisas.

Este protocolo describe un paradigma estándar de consumo de alcohol en jaula en casa de acceso intermitente y dos botellas para modelar el consumo de alcohol en ratas. Además, proporciona instrucciones paso a paso para aumentar el protocolo estándar con un sistema de detección de lamidos de bricolaje que permite el análisis microestructural del comportamiento de la bebida.

Modelado del consumo de alcohol en roedores mediante el consumo de alcohol en jaulas caseras de dos botellas y análisis microestructural

Two-bottle choice home cage drinking is one of the most widely used paradigms to study ethanol consumption in rodents. In its simplest form, animals are ...

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Neurociencia

Trastorno de uso de alcohol (AUD) es un problema de salud nacional y el desarrollo de tratamientos más eficaces es necesaria para compensar las necesidades de esta población de pacientes. Para ello, el siguiente protocolo utiliza dos modelos de consumo roedores simple para evaluar la eficacia preclínica de compuestos de plomo contra el alcohol.

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Este informe demuestra una técnica para aislamiento mecánico de las neuronas individuales viable mantener unido boutons presináptica. Vibrodissociated neuronas tienen la ventaja de una rápida producción, el control farmacológico excelente y mejora del espacio-clamp sin la influencia de las células vecinas. Este método puede ser utilizado para obtener imágenes de los elementos sináptica y la grabación de patch-clamp.

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La visualización y la manipulación genética de las dendritas y espinas en la corteza cerebral y el hipocampo del ratón usando<em&gt; En el útero</em&gt; La electroporación

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Modelado del consumo de alcohol en roedores mediante el consumo de alcohol en jaulas caseras de dos botellas y análisis microestructural (Video) | JoVE Journal

Modelado del consumo de alcohol en roedores mediante el consumo de alcohol en jaulas caseras de dos botellas y análisis microestructural

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