Name: Preparación de neutrófilos derivados de la médula ósea murina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-03T14:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 44 s
Description: Aprende a preparar neutrófilos de médula ósea murina mediante separación inmunomagnética para construir bibliotecas ATAC-seq de alta calidad. Este protocolo optimizado facilita el estudio de la accesibilidad de la cromatina y la epigenética de neutrófilos.

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<meta charset="utf8"></head><body>Protocolo ATAC-seq escalable para la accesibilidad de la cromatina en neutrófilos roedores

<ol><li>Mortaz, E., Alipoor, S. D., Adcock, I. M., Mumby, S., Koenderman, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+on+neutrophil+function+in+severe+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Update on neutrophil function in severe inflammation.</a> Front Immunol. 9, 2171(2018).</li>
<li>Lehrer, R. I., Ganz, T., Selsted, M., Babior, B. M., Curnutte, J. T. Neutrophils and host defense. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLehrer%2C+RI+%22Ann+Intern+Med%22">Ann Intern Med</a>. 109 (2), 127-142 (1988).</li>
<li>De Oliveira, S., Rosowski, E. E., Huttenlocher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+migration+in+infection+and+wound+repair%3A+Going+forward+in+reverse%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil migration in infection and wound repair: Going forward in reverse.</a> Nat Rev Immunol. 16 (6), 378-391 (2016).</li>
<li>Herrera-Uribe, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrative+profiling+of+gene+expression+and+chromatin+accessibility+elucidates+specific+transcriptional+networks+in+porcine+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Genet%22%5BJournal%5D)">Integrative profiling of gene expression and chromatin accessibility elucidates specific transcriptional networks in porcine neutrophils.</a> Front Genet. 14, 1107462(2023).</li>
<li>Kipnis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+in+sepsis%3A+Battle+of+the+bands%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Neutrophils in sepsis: Battle of the bands.</a> Crit Care Med. 41 (3), 925-926 (2013).</li>
<li>Kong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis-induced+thymic+atrophy+is+associated+with+defects+in+early+lymphopoiesis%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Sepsis-induced thymic atrophy is associated with defects in early lymphopoiesis.</a> Stem Cells. 34 (12), 2902-2915 (2016).</li>
<li>Cassatella, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-derived+proteins%3A+Selling+cytokines+by+the+pound%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-derived proteins: Selling cytokines by the pound.</a> Adv Immunol. 73, 369-509 (1999).</li>
<li>Tecchio, C., Cassatella, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-derived+cytokines+involved+in+physiological+and+pathological+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Immunol+Allergy%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-derived cytokines involved in physiological and pathological angiogenesis.</a> Chem Immunol Allergy. 99, 123-137 (2014).</li>
<li>Newburger, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autoimmune+and+other+acquired+neutropenias%5BTitle%5D)+AND+%22Hematology+Am+Soc+Hematol+Educ+Program%22%5BJournal%5D)">Autoimmune and other acquired neutropenias.</a> Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2016 (1), 38-42 (2016).</li>
<li>Skokowa, J., Dale, D. C., Touw, I. P., Zeidler, C., Welte, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severe+congenital+neutropenias%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Dis+Primers%22%5BJournal%5D)">Severe congenital neutropenias.</a> Nat Rev Dis Primers. 3, 17032(2017).</li>
<li>Burn, G. L., Foti, A., Marsman, G., Patel, D. F., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neutrophil%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">The neutrophil.</a> Immunity. 54 (7), 1377-1391 (2021).</li>
<li>Wang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis+induces+non-classic+innate+immune+memory+in+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Sepsis induces non-classic innate immune memory in neutrophils.</a> Cell Rep. 42 (9), 113044(2023).</li>
<li>Dinauer, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+immune+deficiencies+with+defects+in+neutrophil+function%5BTitle%5D)+AND+%22Hematology+Am+Soc+Hematol+Educ+Program%22%5BJournal%5D)">Primary immune deficiencies with defects in neutrophil function.</a> Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2016 (1), 43-50 (2016).</li>
<li>Shaul, M. E., Fridlender, Z. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour-associated+neutrophils+in+patients+with+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Tumour-associated neutrophils in patients with cancer.</a> Nat Rev Clin Oncol. 16 (10), 601-620 (2019).</li>
<li>Hong, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+understanding+in+neutrophil+differentiation+and+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Immune+Netw%22%5BJournal%5D)">Current understanding in neutrophil differentiation and heterogeneity.</a> Immune Netw. 17 (5), 298-306 (2017).</li>
<li>Carvalho, L. O., Aquino, E. N., Neves, A. C., Fontes, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neutrophil+nucleus+and+its+role+in+neutrophilic+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">The neutrophil nucleus and its role in neutrophilic function.</a> J Cell Biochem. 116 (9), 1831-1836 (2015).</li>
<li>Tamassia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+edge%3A+An+inactive+chromatin+configuration+at+the+il-10+locus+in+human+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cutting edge: An inactive chromatin configuration at the il-10 locus in human neutrophils.</a> J Immunol. 190 (5), 1921-1925 (2013).</li>
<li>Shiraishi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biophysical+forces+mediated+by+respiration+maintain+lung+alveolar+epithelial+cell+fate%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Biophysical forces mediated by respiration maintain lung alveolar epithelial cell fate.</a> Cell. 186 (7), 1478-1492.e15 (2023).</li>
<li>Chang, C. C., Sun, J. T., Chu, F. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+sepsis%2C+neutrophils+and+intracellular+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22QJM%22%5BJournal%5D)">Bacterial sepsis, neutrophils and intracellular organisms.</a> QJM. 110 (6), 393-394 (2017).</li>
<li>Walling, B. L., Murphy, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protean+regulation+of+leukocyte+function+by+nuclear+lamins%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Immunol%22%5BJournal%5D)">Protean regulation of leukocyte function by nuclear lamins.</a> Trends Immunol. 42 (4), 323-335 (2021).</li>
<li>Sollberger, G., Tilley, D. O., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+extracellular+traps%3A+The+biology+of+chromatin+externalization%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Neutrophil extracellular traps: The biology of chromatin externalization.</a> Dev Cell. 44 (5), 542-553 (2018).</li>
<li>Klemm, S. L., Shipony, Z., Greenleaf, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+accessibility+and+the+regulatory+epigenome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Chromatin accessibility and the regulatory epigenome.</a> Nat Rev Genet. 20 (4), 207-220 (2019).</li>
<li>Grandi, F. C., Modi, H., Kampman, L., Corces, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+accessibility+profiling+by+ATAC-seq%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Chromatin accessibility profiling by ATAC-seq.</a> Nat Protoc. 17 (6), 1518-1552 (2022).</li>
<li>Khoyratty, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+transcription+factor+networks+control+neutrophil-driven+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Distinct transcription factor networks control neutrophil-driven inflammation.</a> Nat Immunol. 22 (9), 1093-1106 (2021).</li>
<li>Fischer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safeguard+function+of+pu.1+shapes+the+inflammatory+epigenome+of+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Safeguard function of pu.1 shapes the inflammatory epigenome of neutrophils.</a> Nat Immunol. 20 (5), 546-558 (2019).</li>
<li>Ram-Mohan, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Profiling+chromatin+accessibility+responses+in+human+neutrophils+with+sensitive+pathogen+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci+Alliance%22%5BJournal%5D)">Profiling chromatin accessibility responses in human neutrophils with sensitive pathogen detection.</a> Life Sci Alliance. 4 (8), e202000976(2021).</li>
<li>Wei, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrative+analysis+of+single-cell+rna-seq+and+atac-seq+data+across+treatment+time+points+in+pediatric+AML%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Integrative analysis of single-cell rna-seq and atac-seq data across treatment time points in pediatric AML.</a> Blood. 136 (1), 29(2020).</li>
<li>Kolaczkowska, E., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+recruitment+and+function+in+health+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil recruitment and function in health and inflammation.</a> Nat Rev Immunol. 13 (3), 159-175 (2013).</li>
<li>Pillay, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+labeling+with+2H20+reveals+a+human+neutrophil+lifespan+of+5.4+days%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">In vivo labeling with 2H20 reveals a human neutrophil lifespan of 5.4 days.</a> Blood. 116 (4), 625-627 (2010).</li>
<li>Orchard, P., Kyono, Y., Hensley, J., Kitzman, J. O., Parker, S. C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification%2C+dynamic+visualization%2C+and+validation+of+bias+in+ATAC-seq+data+with+ataqv%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Syst%22%5BJournal%5D)">Quantification, dynamic visualization, and validation of bias in ATAC-seq data with ataqv.</a> Cell Syst. 10 (3), 298-306.e4 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.4% Trypan Blue</td><td>Scientific</td><td>T10282</td><td></td></tr><tr><td>1x solución salina tamponada con fosfato</td><td>Biosharp</td><td>BL302A</td><td></td></tr><tr><td>20 bp&ndash; Marcador de alineación de 5000 bp</td><td>Bioptic</td><td>C109102-100A</td><td>Analizador de fragmentos de ADN productos de soporte</td></tr><tr><td>5k Marcador de tamaño (escalera estándar de 50 bp)</td><td>Bioptic</td><td>C109101-100A</td><td>Analizador de fragmentos de ADN productos de soporte</td></tr><tr><td>Amplicons Perlas de purificación</td><td>Beckman</td><td>A63881</td><td>Amplicons Purification Beads es un kit de purificación de ácidos nucleicos para obtener productos de ADN de alta calidad.</td></tr><tr><td>Anti-Ly6G MicroBeads Ultrapure, ratón</td><td>miltenyi</td><td>130-120-337</td><td>Los MicroBeads Anti-Ly-6G UltraPure, ratón fueron desarrollados para la selección positiva o el agotamiento de neutrófilos de ratón a partir de suspensiones unicelulares de médula ósea de ratón.</td></tr><tr><td>Anti-ratón CD11b-BV605 (1:200)</td><td>BD</td><td>Cat#563015</td><td></td></tr><tr><td>Anti-ratón CD48-PE-Cy7 (1:400)</td><td>BD</td><td>Cat#560731</td><td></td></tr><tr><td>Anti-ratón Ly6G-BV510 (1:200)</td><td>BD</td><td>Cat#740157</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J ratones, tipo salvaje, 8 semanas de edad, macho</td><td>Instituto de Ciencia de Animales de Laboratorio, Academia China de Ciencias Médicas</td><td>Instituto de Ciencia de Animales de Laboratorio, Academia China de Medicina Ciencias</td> Tampón de <td></td></tr><tr><td>separación de ADN</td><td>Bioptic</td><td>C104406</td><td>analizador de fragmentos de ADN productos de soporte</td></tr><tr><td>LPS ultrapuro derivado de E. coli (serotype0111: B4)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Cat#L-2630</td><td></td></tr><tr><td>DNA Quantitative Reagent</td><td>vazyme</td><td>EQ111</td><td>DNA Quantitative Reagentt es un kit de ensayo cuantitativo de fluorescencia de ADN bicatenario (dsDNA) simple, sensible y preciso.</td></tr><tr><td>Tampón de lisis eritrocitaria (10x)</td><td>BioLegend</td><td>Cat#420301</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Gibco</td><td>Cat#10099141C</td><td></td></tr><tr><td>MS Columnas de separación</td><td>miltenyi</td><td>130-042-201</td><td>Las columnas MS están diseñadas para la selección positiva de células.</td></tr><tr><td>RPMI 1640 mediano</td><td>Gibco</td><td>C11875500BT</td><td></td></tr><tr><td>S2 Aguja de electroforesis en gel&nbsp;</td><td>Analizador de fragmentos de ADN</td> <td>bióptico</td><td>C105101</td> productos de soporte</tr><tr><td>Instrumentos quirúrgicos: bisturí, tijeras de disección, tijeras de microdisección, pinzas finas, pinzas anatómicas romas, soporte para agujas</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>https://www.fishersci.com/us/en/browse/90184247/surgical-tools Se puede comprar a otros proveedores calificados</td></tr><tr><td>Jeringa (1&nbsp; mL)</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-syringes-single-use-12/14955464</td><td>Se puede comprar a otros proveedores calificados</td></tr><tr><td>TruePrepTM DNA Library Prep Kit V2 para Illumina</td><td>vazyme</td><td>TD501-01</td><td>TruePrep DNA Library Prep Kit V2 para Illumina es un kit especialmente diseñado específicamente para la plataforma de secuenciación de alto rendimiento de Illumina. Con el kit, el ADN se puede preparar en bibliotecas de secuenciación dedicadas a la plataforma de secuenciación de alto rendimiento de Illumina.</td></tr><tr><td>TruePrepTM Index Kit V2 para Illumina</td><td>vazyme</td><td>TD202</td><td>TruePrep Index Kit V2 para Illumina es un kit para el TruePrep DNA Library Prep Kit V2 para Illumina. Se puede utilizar para preparar 96 bibliotecas de índices de doble extremo diferentes.</td></tr></tbody></table>

preparación de neutrófilos derivados de la médula ósea murina

ATAC-Seq Library Preparation of Murine Bone Marrow-Derived Neutrophils

El protocolo descrito se empleó para aislar neutrófilos de la médula ósea de ratones C57BL/6 y comparar su respectiva varianza en la accesibilidad a la cromatina antes y después de la estimulación con lipopolisacáridos (LPS) mediante ATAC-seq. Por lo general, se pueden recolectar 2 x 107 BMC de ambos fémures de un ratón C57BL/6 de 6 a 8 semanas de edad y, posteriormente, se pueden aislar 2 x 106 neutrófilos. Entre ellas, se emplean 1 x 105 células para la secuenciación ATAC, mientras que ...

Preparación de neutrófilos derivados de la médula ósea murina

Assay for Transposase-Accessible Chromatin with sequencing (ATAC-seq) is a powerful, high-throughput technique for assessing chromatin accessibility and ...

atac-seq-library-preparation-of-murine-bone-marrow-derived-neutrophils

Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

Se describe un protocolo para el aislamiento y purificación de los neutrófilos de médula ósea de ratón por centrifugación en gradiente de densidad y para el etiquetado de neutrófilos usando colorantes CellTracker. Esto representa un método sencillo, rápido, reproducible y económico para la obtención de un gran número de neutrófilos para los estudios funcionales aguas abajo o experimentos de transferencia adoptivos y seguimiento.

Aislamiento, Purificación y Etiquetado de neutrófilos de médula ósea de ratón de Estudios funcionales y experimentos de transferencia adoptivos

Este manuscrito proporciona un procedimiento técnico que puede ser utilizado para caracterizar los cultivos de células C1498 in vitro y la leucemia aguda inducida en ratones después de su inyección. Los análisis fenotípicos y funcionales se realizan mediante citometría de flujo, microscopía de inmunofluorescencia, y la tinción citoquímica de May-Grünwald Giemsa.

Un protocolo detallado para la caracterización de la línea celular murina C1498 y su modelo asociado de leucemia de ratón

Ensayo para cromatina transposasa accesible junto con secuenciación de alto rendimiento (ATAC-seq) es un método de genoma cromatina accesible de descubrir. Se trata de un protocolo de ATAC-seq paso a paso, desde el molecular al final análisis computacional, optimizado para los linfocitos humanos (Th1/Th2). Este protocolo puede ser adoptada por los investigadores sin experiencia previa en métodos de secuenciación de próxima generación.

Asignación de genoma cromatina accesible en linfocitos T humanos primarios por ATAC-Seq

Aquí, presentamos un protocolo para producir en masa las células murinas de silenciamiento génico NK usando un sistema de diferenciación libre de alimentador para estudios mecanísticos in vitro e in vivo.

Un novedoso sistema de alimentador-libre para la producción masiva de células de asesino naturales murinos In Vitro

Aquí proporcionamos un método para la identificación y aislamiento de grandes cantidades de GM-CSF por células mieloides con clasificación de celda de alta velocidad. Pueden identificarse cinco poblaciones distintas (progenitores mieloides comunes, progenitores de granulocitos/macrófagos, monocitos, macrófagos derivados de monocitos y DCs derivados de monocitos) basado en la expresión Ly6C y CD115.

Generación de un gran número de progenitores mieloides y células dendríticas precursores de médula Murine usando una célula nueva clasificación estrategia

Aquí, presentamos un protocolo para realizar un ensayo para la transposasa accesible cromatina secuenciación (ATAC-seq) en linfocitos activados CD4 + humanos. El protocolo ha sido modificado para minimizar contaminación mitocondrial ADN lee desde 50% al 3% mediante la introducción de un nuevo tampón de lisis.

Ensayo de ATAC-seq con ADN mitocondrial baja contaminación primaria humana CD4 + linfocitos T

Aquí, presentamos un protocolo para procesar la médula ósea fresca (BM) aislada del ratón o humana para el análisis de citometría de masa de alta dimensión (citometría por tiempo de vuelo, CyTOF) de células de linaje neutrófilo.

Preparación de la médula ósea entera para el análisis de citometría de masa de células de linaje neutrófilo

Esta investigación describe dos técnicas para aislar abundantes trampas extracelulares de neutrófilos (TNE) de la médula ósea de rata. Un método combina un kit comercial de aislamiento de neutrófilos con centrifugación en gradiente de densidad, mientras que el otro emplea solo centrifugación en gradiente de densidad. Ambos enfoques producen TNE funcionales que superan a los de los neutrófilos de sangre periférica.

Enfoque único para aislar neutrófilos de médula ósea de rata con capacidad comparable

El éxito de la transcriptómica y multiómica de una sola célula/núcleo único depende en gran medida de la calidad de las células/núcleos. Por lo tanto, el aislamiento de células/núcleos de los tejidos y su purificación debe estar altamente estandarizado. Este protocolo describe la preparación de núcleos del cerebro y la médula ósea para el ensayo multioma de un solo núcleo aguas abajo.

Preparación de núcleos cerebrales y de médula ósea de alta calidad para ensayos multioma de núcleos individuales

Aquí se presenta un protocolo detallado para aislar y caracterizar poblaciones microambientales de médula ósea a partir de modelos murinos de síndromes mielodisplásicos y leucemia mieloide aguda. Esta técnica identifica cambios en el nicho de la médula ósea no hematopoyética, incluidas las células endoteliales y mesenquimales del estroma, con progresión de la enfermedad.

Identificación de poblaciones microambientales de médula ósea en el síndrome mielodisplásico y la leucemia mieloide aguda

Este protocolo describe un método sencillo y no enzimático para aislar células de médula ósea de ratón neonatal de 7-9 días de edad y generar macrófagos diferenciados utilizando un sobrenadante de células L929 como fuente de factor estimulante de colonias de granulocitos (M-CSF). Los macrófagos derivados de la médula ósea se analizaron más a fondo para determinar los antígenos de superficie F4/80, CD206, CD11b y la competencia funcional.

Aislamiento de médula ósea de ratón neonatal y preparación de macrófagos derivados de la médula ósea

Aprende a preparar neutrófilos de médula ósea murina mediante separación inmunomagnética para construir bibliotecas ATAC-seq de alta calidad. Este protocolo optimizado facilita el estudio de la accesibilidad de la cromatina y la epigenética de neutrófilos.

Preparación de neutrófilos derivados de la médula ósea murina

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