Name: Evaluación de la señalización de la muerte celular por inmunofluorescencia en un modelo de rata de accidente cerebrovascular isquémico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 32 s
Description: Aprende a evaluar la señalización de muerte celular mediante inmunofluorescencia en un modelo de rata con oclusión de la arteria cerebral media. Este método permite identificar blancos terapéuticos para el tratamiento del accidente cerebrovascular isquémico.

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<meta charset="utf8"></head><body>Tinción de inmunofluorescencia para estudiar la muerte celular en modelos de accidente cerebrovascular de ratas con MCAO

<table><tbody><tr><td>Akoya Vectra Polaris</td><td>Akoya Biosciences</td><td>N/A</td><td>Vectra Polaris sistema de imágenes multiespectrales</td></tr><tr><td>Etanol anhidro</td><td>Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Hospital de China Occidental</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Carprofeno</td><td>Hospital de China Occidental</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo de catepsina-B</td><td>Abcam</td><td>Ab214428</td><td></td></tr><tr><td>Criostato</td><td>LEICA&nbsp;</td><td>LEICA CM 1950</td><td></td></tr><tr><td>Cámara digital</td><td>OLYMPUS</td><td>TG-7</td><td></td></tr><tr><td>Cabra Anti-Rat IgG (H+L) (FITC conjugado)</td><td>Elabscience</td><td>&nbsp; E-AB-1021</td><td></td></tr><tr><td>Suero de cabra</td><td>Solarbio</td><td>SL038</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 10 software</td><td>N/A</td><td>https://www.graphpad-prism.cn/?c=i&a=prismdownload_cn</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>N/A</td><td>https://imagej.net/ij/</td><td></td></tr> <tr><td>Pluma de inmunohistoquímica</td><td>Biosharp</td><td>http://www.biosharp.cn/index/product/details/language/en/product_id/2828.html</td><td></td></tr><tr><td>Software InForm Software</td><td>del sistema Akoya Biosciences</td><td>Versión 2.6.0</td><td>para el sistema de imágenes multiespectrales</td></tr><tr><td>Solución desinfectante de yodóforo</td><td>Huatian Technology Industry Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>https://www.rwdstco.com/inhalation-anesthesia-solutions/</td><td></td></tr> <tr><td>Medio de montaje que contiene DAPI</td><td>Solarbio</td><td>S2110</td><td></td></tr><tr><td>Monofilamento de nailon</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>https://www.rwdstco.com/</td><td></td></tr> <tr><td>Compuesto de temperatura óptima de corte (OCT)</td><td>Epredia</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehído</td><td>Biosharp</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Solución tampón de fosfato (PBS)</td><td>Solarbio</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad&nbsp;</td><td>Versión 10</td><td></td></tr><tr><td>Proteinasa K</td><td>Tiangen</td><td>RT403-02</td><td></td></tr><tr><td>Saline</td><td>Kelun Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Ratas Sprague-Dawley</td><td>Huafukang Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sacarosa</td><td>BioFroxx</td><td>1245GR500</td><td></td></tr><tr><td>Instrumentos quirúrgicos</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Agente biológico transparente tipo TO&nbsp; &nbsp;</td><td>Beijing Solarbio Ciencia & Tecnología Co., Ltd.</td><td>http://www.solarbio.net/</td><td></td></tr> Solución de <tr><td>cloruro de trifeniltetrazolio (TTC)</td><td>Solarbio</td><td>G3005</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>BioFroxx</td><td>1139ML100</td><td></td></tr><tr><td>TUNEL kit</td><td>Elabscience</td><td>&nbsp; E-CK-A321</td><td></td></tr></tbody></table>

evaluación de la señalización de la muerte celular por inmunofluorescencia en un modelo de rata de accidente cerebrovascular isquémico

Evaluating Cell Death Signaling by Immunofluorescence in a Rat Model of Ischemic Stroke

Las ratas se someten a una isquemia de 120 min durante la MCAO, seguida de una reperfusión de 22 h. La tasa de mortalidad fue mínima durante la cirugía de MCAO y se situó en torno al 25% en el periodo de reperfusión. Se observó daño cerebral significativo en el grupo MCAO, mientras que no se observó infarto en el cerebro del grupo Sham (24,87 ± 1,21% vs. 0% de la suma del área del infarto a toda el área cerebral; MCAO [n = 3] vs. Sham [n = 3], P &lt; 0,001; Figura 1A,B).</st...

Evaluación de la señalización de la muerte celular por inmunofluorescencia en un modelo de rata de accidente cerebrovascular isquémico

Stroke is a leading cause of death and disability worldwide. Most cases of stroke are ischemic and result from the occlusion of the middle cerebral artery ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociencia

Inducción quirúrgica del daño cerebral isquémico en la rata es un modelo ampliamente utilizado para la investigación del accidente cerebrovascular. Aquí se demuestra la inducción de isquemia cerebral focal por oclusión de la arteria cerebral media. Visualización del infarto como resultado de la tinción histológica y la resonancia magnética también se indica.

Modelo de isquemia cerebral focal por oclusión endovascular de sutura de la arteria cerebral media en la rata

Varios modelos animales de isquemia cerebral han sido desarrollados para simular la condición humana de accidente cerebrovascular. Este protocolo describe la endotelina-1 (ET-1) inducida por la oclusión de la arteria cerebral media (MCAO) modelo de accidente cerebrovascular isquémico en ratas. Además, las consideraciones importantes, ventajas y deficiencias de este modelo se discuten.

La endotelina-1 inducida por la arteria cerebral media oclusión Modelo para el ictus isquémico con Orientación flujometría láser Doppler en la rata

Oclusión de la carótida bilateral junto con hipotensión sistémica produce isquemia cerebral global en la rata, lo que resulta en daños en el hipocampo con la gravedad reproducibles. Temas de animales se deterioran con patrones predecibles de daño cerebral, que se recuperan convenientemente, y las tasas de mortalidad son relativamente bajos.

2 vasos Oclusión / Hipotensión: un modelo de rata de isquemia cerebral global

Monitorización de la perfusión cerebral se ha demostrado para mejorar la precisión en modelos de ictus isquémicos. Las dificultades técnicas a menudo limitan el uso de esta herramienta esencial para la investigación cerebrovascular. En este vídeo, un sistema optimizado se muestra para obtener una monitorización hemodinámica única o multi-sitio durante la oclusión intraluminal de la arteria cerebral en ratas.

Sistema optimizado para la monitorización de la perfusión cerebral en el modelo de rata de Carrera intraluminal oclusión arteria cerebral media

Se presenta una nueva técnica de fluorescencia para selectivo etiquetado in situ de las células fagocitarias activas, que claro off cadáveres de células en el accidente cerebrovascular. El enfoque es importante para evaluar la reacción del cerebro a la isquemia debido a que sólo una pequeña proporción de los fagocitos presentes en el cerebro isquémico participar en el aclaramiento de la muerte celular.

La evaluación de Liquidación fagocítica de muerte celular en el accidente cerebrovascular experimental por ligables Fluorescent Probes

El daño cerebral resultante de la isquemia cerebral puede ser visualizado y estudiado de forma no invasiva en ratas utilizando tomografía preclínica por emisión de positrones junto con la sonda radiactiva inyectable, 18F-fluorodesoxiglucosa. Además, el uso de herramientas de software modernas que incluyen plantillas cerebrales de volumen de interés (VOI) aumenta drásticamente la información cuantitativa obtenida de estos estudios.

De imagen no invasivas y Análisis de la isquemia cerebral en ratas vivas utilizando Tomografía por emisión de positrones con<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG

Se ha notificado un método para la entrega de células madre neurales, adaptable para inyectar soluciones o suspensiones, a través de la arteria carótida común (ratón) o la arteria carótida externa (rata) después de un accidente cerebrovascular isquémico. Las células inyectadas se distribuyen ampliamente por todo el parénquima cerebral y se pueden detectar hasta 30 d después del parto.

Entrega intra-arterial de células madre neuronales a la rata y el cerebro del ratón: aplicación a la isquemia cerebral

Aquí, presentamos un protocolo para evaluar la función de las células inmunitarias después de un accidente cerebrovascular isquémico utilizando el análisis de citometría de flujo en un modelo de mini-accidente cerebrovascular. Este método permite un examen detallado de las interacciones neuroinmunes y puede adaptarse para el estudio de otras enfermedades neurodegenerativas, mejorando nuestra comprensión de las respuestas inmunes en la patología del ictus.

Aislamiento y evaluación por citometría de flujo de las interacciones neuroinmunes en un modelo murino de mini-ictus

Responder a las señales de alimentos o medicamentos por pares aumenta a lo largo de un período de abstinencia y esto puede relacionarse con una mayor susceptibilidad a las conductas recaída. Aquí detallamos un procedimiento para la evaluación de esta "incubación del deseo" en las ratas que se han auto-administrado sacarosa.

Un método general para la evaluación de incubación de sacarosa en ratas Deseo

Los cultivos neuronales embrionarios primarios disociados del hipocampo son útiles para investigar los mecanismos de señalización implicados en la muerte neuronal. El sexado de los embriones antes del aislamiento y disociación del hipocampo permite la preparación de cultivos masculinos y femeninos separados, lo que permite al investigador identificar e investigar la señalización celular específica del sexo.

Cultivos neuronales estratificados por sexo para estudiar las vías de muerte de las células isquémicas

Aprende a evaluar la señalización de muerte celular mediante inmunofluorescencia en un modelo de rata con oclusión de la arteria cerebral media. Este método permite identificar blancos terapéuticos para el tratamiento del accidente cerebrovascular isquémico.

Evaluación de la señalización de la muerte celular por inmunofluorescencia en un modelo de rata de accidente cerebrovascular isquémico (Video) | JoVE Journal

Evaluación de la señalización de la muerte celular por inmunofluorescencia en un modelo de rata de accidente cerebrovascular isquémico

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