Name: Criosección e inmunotinción de tejido del oído interno de ratón: desde la etapa embrionaria hasta la adulta (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T13:40:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: Aprende a realizar criosección e inmunotinción del oído interno de ratón en etapas embrionarias, neonatales y adultas. Este protocolo detallado facilita la investigación en neurociencia auditiva y biología del desarrollo.

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<ol><li>Bainbridge, K. E., Hoffman, H. J., Cowie, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+and+hearing+impairment+in+the+United+States%3A+Audiometric+evidence+from+the+National+Health+and+Nutrition+Examination+Survey%2C+1999+to+2004+%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Diabetes and hearing impairment in the United States: Audiometric evidence from the National Health and Nutrition Examination Survey, 1999 to 2004 .</a> Ann Intern Med. 149 (1), 1-10 (1999).</li>
<li>Baiduc, R. R., Helzner, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+diabetes+and+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Hear%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of diabetes and hearing loss.</a> Semin Hear. 40 (4), 281-291 (2019).</li>
<li>Agarwal, S., Mishra, A., Jagade, M., Kasbekar, V., Nagle, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hypertension+on+hearing%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Effects of hypertension on hearing.</a> Indian J Otolaryngol Head Neck Surg. 65 (Suppl 3), 614-618 (2013).</li>
<li>Przewoźny, T., Gójska-Grymajło, A., Kwarciany, M., Gąsecki, D., Narkiewicz, K. Hypertension and cochlear hearing loss. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPrzewo%C5%BAny%2C+T+%22Blood+Press%22">Blood Press</a>. 24 (4), 199-205 (2015).</li>
<li>Babarinde, J. A., Adeyemo, A. A., Adeoye, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+and+hypertension%3A+exploring+the+linkage%5BTitle%5D)+AND+%22The+Egyptian+Journal+of+Otolaryngology%22%5BJournal%5D)">Hearing loss and hypertension: exploring the linkage.</a> The Egyptian Journal of Otolaryngology. 37 (1), 1-6 (2021).</li>
<li>Mijovic, T., Zeitouni, A., Colmegna, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autoimmune+sensorineural+hearing+loss%3A+the+otology-rheumatology+interface%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Autoimmune sensorineural hearing loss: the otology-rheumatology interface.</a> Rheumatology (Oxford). 52 (5), 780-789 (2013).</li>
<li>Mancini, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+in+autoimmune+disorders%3A+Prevalence+and+therapeutic+options%5BTitle%5D)+AND+%22Autoimmun+Rev%22%5BJournal%5D)">Hearing loss in autoimmune disorders: Prevalence and therapeutic options.</a> Autoimmun Rev. 17 (7), 644-652 (2018).</li>
<li>Persson, F., Bjar, N., Hermansson, A., Gisselsson-Solen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+after+bacterial+meningitis%2C+a+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Hearing loss after bacterial meningitis, a retrospective study.</a> Acta Otolaryngol. 142 (3-4), 298-301 (2022).</li>
<li>Kutz, J. W., Simon, L. M., Chennupati, S. K., Giannoni, C. M., Manolidis, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+predictors+for+hearing+loss+in+children+with+bacterial+meningitis%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Clinical predictors for hearing loss in children with bacterial meningitis.</a> Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 132 (9), 941-945 (2006).</li>
<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+in+neurological+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Hearing loss in neurological disorders.</a> Front Cell Dev Biol. 9, 716300(2021).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+decline%2C+dementia%2C+Alzheimer%27s+disease+and+presbycusis%3A+Examination+of+the+possible+molecular+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cognitive decline, dementia, Alzheimer's disease and presbycusis: Examination of the possible molecular mechanism.</a> Front Neurosci. 12, 12(2018).</li>
<li>Profant, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+dysfunction+in+patients+with+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Auditory dysfunction in patients with Huntington's disease.</a> Clin Neurophysiol. 128 (10), 1946-1953 (2017).</li>
<li>Jafari, Z., Kolb, B. E., Mohajerani, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+dysfunction+in+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Auditory dysfunction in Parkinson's disease.</a> Mov Disord. 35 (4), 537-550 (2020).</li>
<li>Rybak, L. P., Ramkumar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ototoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Ototoxicity.</a> Kidney Int. 72 (8), 931-935 (2007).</li>
<li>Demirhan, M. A., Celebisoy, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+functions+in+episodic+vestibular+disorders%3A+Meniere%27s+disease+and+vestibular+migraine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vestib+Res%22%5BJournal%5D)">Cognitive functions in episodic vestibular disorders: Meniere's disease and vestibular migraine.</a> J Vestib Res. 33 (1), 63-70 (2023).</li>
<li>Shoham, N., Lewis, G., Favarato, G., Cooper, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+anxiety+disorders+and+symptoms+in+people+with+hearing+impairment%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Soc+Psychiatry+Psychiatr+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Prevalence of anxiety disorders and symptoms in people with hearing impairment: a systematic review.</a> Soc Psychiatry Psychiatr Epidemiol. 54 (6), 649-660 (2019).</li>
<li>Manley, G. A., Gummer, A. W., Popper, A. N., Fay, R. R. The cochlea: What it is, where it came from, and what is special about it. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aManley%2C+GA+%22Understanding+the+Cochlea.+Springer+Handbook+of+Auditory+Research%22">Understanding the Cochlea. Springer Handbook of Auditory Research</a>. 62, Springer. Cham. 17-32 (2017).</li>
<li>Bai, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensionally+visualized+ossification+and+mineralization+process+of+the+otic+capsule+in+a+postnatal+developmental+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope+Investig+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensionally visualized ossification and mineralization process of the otic capsule in a postnatal developmental mouse.</a> Laryngoscope Investig Otolaryngol. 8 (4), 1036-1043 (2023).</li>
<li>Dabdoub, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sox2+signaling+in+prosensory+domain+specification+and+subsequent+hair+cell+differentiation+in+the+developing+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Sox2 signaling in prosensory domain specification and subsequent hair cell differentiation in the developing cochlea.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 105 (47), 18396-18401 (2008).</li>
<li>Mann, Z. F., Chang, W., Lee, K. Y., King, K. A., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+and+function+of+scleraxis+in+the+developing+auditory+system%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Expression and function of scleraxis in the developing auditory system.</a> PLoS One. 8 (9), e75521(2013).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+purinergic+receptor+P2rx3+is+required+for+spiral+ganglion+neuron+branch+refinement+during+development%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">The purinergic receptor P2rx3 is required for spiral ganglion neuron branch refinement during development.</a> eNeuro. 7 (4), (2020).</li>
<li>Matern, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gfi1Cre+mice+have+early+onset+progressive+hearing+loss+and+induce+recombination+in+numerous+inner+ear+non-hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Gfi1Cre mice have early onset progressive hearing loss and induce recombination in numerous inner ear non-hair cells.</a> Sci Rep. 7, 42079(2017).</li>
<li>Woods, C., Montcouquiol, M., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Math1+regulates+development+of+the+sensory+epithelium+in+the+mammalian+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Math1 regulates development of the sensory epithelium in the mammalian cochlea.</a> Nat Neurosci. 7 (12), 1310-1318 (2004).</li>
<li>Zhang, K. D., Coate, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+development+and+function+of+type+II+spiral+ganglion+neurons+in+the+mammalian+inner+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the development and function of type II spiral ganglion neurons in the mammalian inner ear.</a> Semin Cell Dev Biol. 65, 80-87 (2017).</li>
<li>Brooks, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pou3f4-expressing+otic+mesenchyme+cells+promote+spiral+ganglion+neuron+survival+in+the+postnatal+mouse+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Pou3f4-expressing otic mesenchyme cells promote spiral ganglion neuron survival in the postnatal mouse cochlea.</a> J Comp Neurol. 528 (12), 1967-1985 (2020).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericytes+control+vascular+stability+and+auditory+spiral+ganglion+neuron+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Pericytes control vascular stability and auditory spiral ganglion neuron survival.</a> Elife. 12, e83486(2023).</li>
<li>Lewis, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLewis%2C+M+%22A+guide+to+selecting+control+and+blocking+reagents%22">A guide to selecting control and blocking reagents</a>. , https://www.jacksonimmuno.com/secondary-antibody-resource/technical-tips/controls-diluents-blocking/ (2018).</li>
<li>Song, L., McGee, J., Walsh, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency-and+level-dependent+changes+in+auditory+brainstem+responses+%28ABRS%29+in+developing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Acoust+Soc+Am%22%5BJournal%5D)">Frequency-and level-dependent changes in auditory brainstem responses (ABRS) in developing mice.</a> J Acoust Soc Am. 119 (4), 2242-2257 (2006).</li>
<li>Montgomery, S. C., Cox, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-mount+dissection+and+immunofluorescence+of+the+adult+mouse+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole-mount dissection and immunofluorescence of the adult mouse cochlea.</a> J Vis Exp. (107), e53561(2016).</li>
<li>Driver, E. C., Northrop, A., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+migration%2C+intercalation+and+growth+regulate+mammalian+cochlear+extension%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Cell migration, intercalation and growth regulate mammalian cochlear extension.</a> Development. 144 (20), 3766-3776 (2017).</li>
<li>Babola, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purinergic+signaling+controls+spontaneous+activity+in+the+auditory+system+throughout+early+development%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Purinergic signaling controls spontaneous activity in the auditory system throughout early development.</a> J Neurosci. 41 (4), 594-612 (2021).</li>
<li>Donadieu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+cryosections+and+specific+immunohistochemical+methods+for+detecting+hypoxia+in+mouse+and+rat+cochleae%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Histochem%22%5BJournal%5D)">Improved cryosections and specific immunohistochemical methods for detecting hypoxia in mouse and rat cochleae.</a> Acta Histochem. 109 (3), 177-184 (2007).</li>
<li>Rio, C., Dikkes, P., Liberman, M. C., Corfas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+fibrillary+acidic+protein+expression+and+promoter+activity+in+the+inner+ear+of+developing+and+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Glial fibrillary acidic protein expression and promoter activity in the inner ear of developing and adult mice.</a> J Comp Neurol. 442 (2), 156-162 (2002).</li>
<li>Ahmad, S., Chen, S., Sun, J., Lin, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connexins+26+and+30+are+co-assembled+to+form+gap+junctions+in+the+cochlea+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Connexins 26 and 30 are co-assembled to form gap junctions in the cochlea of mice.</a> Biochem Biophys Res Commun. 307 (2), 362-368 (2003).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spag6+mutant+mice+have+defects+in+development+and+function+of+spiral+ganglion+neurons%2C+apoptosis%2C+and+higher+sensitivity+to+paclitaxel%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Spag6 mutant mice have defects in development and function of spiral ganglion neurons, apoptosis, and higher sensitivity to paclitaxel.</a> Sci Rep. 7 (1), 8638(2017).</li>
<li>Gratton, M. A., Rao, V. H., Meehan, D. T., Askew, C., Cosgrove, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix+metalloproteinase+dysregulation+in+the+stria+vascularis+of+mice+with+Alport+syndrome%3A+implications+for+capillary+basement+membrane+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Matrix metalloproteinase dysregulation in the stria vascularis of mice with Alport syndrome: implications for capillary basement membrane pathology.</a> Am J Pathol. 166 (5), 1465-1474 (2005).</li>
<li>Goodyear, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+age-related+degradation+of+the+tectorial+membrane+in+the+Ceacam16%CE%B2gal%2F%CE%B2gal+null+mutant+mouse%2C+a+model+for+late-onset+human+hereditary+deafness+DFNB113%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Accelerated age-related degradation of the tectorial membrane in the Ceacam16βgal/βgal null mutant mouse, a model for late-onset human hereditary deafness DFNB113.</a> Front Mol Neurosci. 12, 147(2019).</li>
<li>Zupančič, D., Terčelj, M., Štrus, B., Veranič, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+obtain+good+morphology+and+antigen+detection+in+the+same+tissue+section%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">How to obtain good morphology and antigen detection in the same tissue section.</a> Protoplasma. 254 (5), 1931-1939 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Chemicals</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>BP151-500</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Corning, Inc.</td><td>46-013-CM</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sigma-Aldrich, LLC.</td><td>60-00-4</td><td></td></tr><tr><td>Sacarosa</td><td>VWR International, Inc.</td><td>97061-432</td><td></td></tr><tr><td>Azida de sodio</td><td>Amresco, Inc.</td><td>0639-250G</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehído</td><td>Ciencias de la microscopía electrónica</td><td>15714</td><td></td></tr><tr><td>Laboratorios</td> de <td>descontaminación de etanol, Inc.</td><td>v1001</td><td></td></tr><tr><td>Dimetilbutano&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>19387-AP</td><td></td></tr><tr><td>Compuesto de temperatura de corte óptima (OCT)</td><td>VWR International, Inc.</td><td>25608-930</td><td></td></tr><tr><td>Equipo específico</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>14-071-459</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas de disección</td><td>Ciencias de la microscopía electrónica</td><td>72700-DZ</td><td></td></tr><tr><td>Pluma de barrera hidrofóbica peroxidasa-antiperoxidasa (PAP)</td><td>Laboratorios Vector, Inc.</td>Microscopio Confocal <td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Carl Zeiss Microscopy, LLC.</td>Micropipeta <td>LSM 880</td><td></td></tr><tr><td>P20</td><td>Gilson, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de disección</td> F144056M <td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>08-951-20</td><td></td></tr><tr><td>Plato Sylgard</td><td>Microscopía Electrónica Sciences</td><td>24236-10</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Eppendorf</td><td>5424R</td><td></td></tr><tr><td>Materiales de montaje</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>17984-25</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost plus slides</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>Reactivos</td> de inmunotinción < 1255015 <td></td></tr><tr><td>fuerte> < / suero de burro fuerte ></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>normal</td><td>Jackson ImmunoResearch, Inc.</td><td>017-000-121</td><td></td></tr><tr><td>Fragmentos FAB anti-ratón</td><td>Jackson ImmunoResearch, Inc.</td><td>715-007-003</td><td></td></tr><tr><td>Laboratorios BlokHen</td><td>Aves, Inc.</td><td>BH-1001</td><td></td></tr><tr><td>Tuj1 (beta-III-tubulina) anticuerpo monoclonal de ratón</td><td>Biolegend, Inc.</td><td>MMS-435P</td><td></td></tr><tr><td>Sox2 anticuerpo policlonal de cabra</td><td>R& D Systems, Inc.</td><td>AF2018</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo policlonal de conejo Myo6</td><td>Proteus Biosciences</td><td>25&ndash; 6791</td><td></td></tr><tr><td>Myo7A anticuerpo policlonal de conejo</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>PA1-936</td><td></td></tr><tr><td>Plexina-B1 anticuerpo policlonal de cabra</td><td>R& D Systems, Inc.</td><td>AF3749</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpos secundarios (producidos en burro; Alexa-488, Cy3, Cy5)</td><td>Jackson ImmunoResearch, Inc.</td><td>Ver catálogo</td><td></td></tr></tbody></table>

criosección e inmunotinción de tejido del oído interno de ratón: desde la etapa embrionaria hasta la adulta

Cryosectioning and Immunostaining Mouse Inner Ear Tissue: From Embryonic to Adult Stages

Presentamos ejemplos de nuestro propio laboratorio del ápice y el giro basal de una cóclea de ratón embrionaria de día 16,5 (E16,5) y el giro basal de las cócleas del día postnatal 0 (P0) y P30. Estas muestras han sido seccionadas e inmunoteñidas utilizando marcadores de células ciliadas (Myo7A y Myo6), neuronas ganglionares espirales (SGNs; Tuj1), glía y células de soporte (Sox2), y Plexin-B1, que marca la membrana basal alrededor del conducto coclear y las SGN. Las secciones transversales de la cóclea en diferentes eta...

Criosección e inmunotinción de tejido del oído interno de ratón: desde la etapa embrionaria hasta la adulta

This protocol details general histology methods for preparing inner ear samples from embryonic, neonatal, and adult mice. The purpose of this protocol is ...

cryosectioning-immunostaining-mouse-inner-ear-tissue-from-embryonic

Research

Investigación

JoVE Journal

Developmental Biology

Biología del Desarrollo

Un procedimiento simple de vibratome seccionar el órgano de Corti, seguido por microscopía confocal de inmunohistoquímica y se describe. Este procedimiento permite una mejor conservación de la citoarquitectura fino del órgano de Corti de mamíferos, y por lo tanto permite la cuantificación exacta de los tipos de células.

Vibratome seccionamiento para la Preservación de Mejora de la citoarquitectura del órgano de Corti mamíferos

Presentamos un método que describe el aislamiento y cultivo de explantes cocleares del oído interno de ratones embrionarios.  También demostramos un método para la transferencia de genes a explantes cocleares a través de electroporación de onda cuadrada. El cultivo in vitro de explantes, junto con la técnica de transferencia de genes, permite a los investigadores estudiar los efectos de la alteración de la expresión génica durante el desarrollo.

Cultura de embriones de ratón explantes cocleares y Gene Transfer por electroporación

Se presenta un método para aislar el órgano de Corti adultos como tres vueltas intactas cocleares (ápice, medio y de base). También demostramos un procedimiento de inmunotinción con anticuerpos marcados con fluorescencia. En conjunto, estas técnicas permiten el estudio de las células ciliadas, células de soporte, y otros tipos de células que se encuentra en la cóclea.

Todo el montaje La disección y de inmunofluorescencia del Adulto ratón cóclea

Presentamos un protocolo para aislar la bulla auditiva, la cápsula y los huesecillos de ratones postnatales para análisis histológico y de montaje completo.

La disección de la Auditivo Bulla en ratones postnatales: Aislamiento de los huesos del oído medio y el análisis histológico

Aquí, presentamos un protocolo detallado para detectar y cuantificar los niveles de proteínas durante la morfogénesis/patogénesis craneofacial mediante inmunoutilización utilizando tejidos craneofaciales de ratón como ejemplos. Además, describimos un método para la preparación y criosección de tejidos duros no descalcificados de ratones jóvenes para inmunostaining.

Preparación de tejidos e inmunomanchación de tejidos craneofaciales de ratón y hueso no descalcificado

Este manuscrito describe un protocolo experimental para evaluar las características morfológicas y el estado funcional de las sinapsis de cinta en ratones normales. El modelo actual también es adecuado para modelos de sinaptopatía coclear inducidas por ruido y relacionados con la edad. También se discuten los resultados correlativos de estudios anteriores del ratón.

Evaluación morfológica y funcional de sinapsis de cinta en regiones de frecuencia específica de la Cóclea de Ratones

Este artículo presenta un método de preparación de superficie coclear modificado que requiere descalcificación y uso de un adhesivo celular y tisular para adherir las piezas de epitelía coclear a 10 mm de resbalones de cubierta redonda para inmunohistoquímica en cocleares de ratón adultos.

Preparación de la superficie coclear en el ratón adulto

Este estudio describe cómo diseccionar el saco endolinfático del oído interno del ratón a diferentes edades. El resultado de una disección similar se muestra en un modelo de ratón Slc26a4-null de agrandamiento del saco endolinfático. Un ratón transgénico con un indicador fluorescente expresado en el saco endolinfático se presenta como modelo para visualizar fácilmente el saco endolinfático, y herramienta educativa.

Disección del saco endolinfático de ratones

Aquí, presentamos un protocolo para un modelo de ratón de pérdida auditiva inducida por ruido (NIHL). Para inducir el NIHL, desarrollamos un dispositivo nuevo y sencillo que utiliza plástico corrugado, una jaula trampa para ratas y un altavoz. Se emplearon imágenes de inmunofluorescencia y respuesta auditiva del tronco encefálico para evaluar la función auditiva y el daño de las células ciliadas externas, respectivamente.

Condiciones experimentales modificadas para la pérdida de audición inducida por ruido en ratones y evaluación de la función auditiva y el daño de las células ciliadas externas

La estría vascular es vital para la generación de potencial endococlear. Aquí, presentamos la disección de la estría vascular del ratón adulto para la secuenciación de un solo núcleo o inmunotinción.

Disección de estrías vasculares de ratón adulto para secuenciación de un solo núcleo o inmunotinción

Se describe un protocolo para preparar criosecciones de retina en ratones y realizar inmunotinción en fotorreceptores. Este artículo permite a los investigadores producir de forma consistente secciones congeladas de retina de ratón con una morfología bien conservada y resultados de inmunotinción de alta calidad.

Criosección e inmunotinción de retina de ratón

Aprende a realizar criosección e inmunotinción del oído interno de ratón en etapas embrionarias, neonatales y adultas. Este protocolo detallado facilita la investigación en neurociencia auditiva y biología del desarrollo.

Criosección e inmunotinción de tejido del oído interno de ratón: desde la etapa embrionaria hasta la adulta

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