Name: Células de la cresta neural craneal Protocolo de diferenciación tridimensional in vitro para ensayos multiplexados (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-14T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: Aprende a diferenciar células de la cresta neural craneal en 3D usando células madre embrionarias de ratón. Este protocolo reduce la variabilidad en el tamaño de neuroesferas y permite ensayos multiplexados para estudiar el desarrollo craneofacial.

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<ol><li>Rothstein, M., Bhattacharya, D., Simoes-Costa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+neural+crest+axial+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of neural crest axial identity.</a> Dev Biol. 444, S170-S180 (2018).</li>
<li>Smeriglio, P., Zalc, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cranial+neural+crest+cells+contribution+to+craniofacial+bone+development+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Osteoporos+Rep%22%5BJournal%5D)">Cranial neural crest cells contribution to craniofacial bone development and regeneration.</a> Curr Osteoporos Rep. 21 (5), 624-630 (2023).</li>
<li>Zalc, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivation+of+the+pluripotency+program+precedes+formation+of+the+cranial+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reactivation of the pluripotency program precedes formation of the cranial neural crest.</a> Science. 371 (6529), eabb4776(2021).</li>
<li>Perera, S. N., Kerosuo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+road+again%3A+Establishment+and+maintenance+of+stemness+in+the+neural+crest+from+embryo+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">On the road again: Establishment and maintenance of stemness in the neural crest from embryo to adulthood.</a> Stem Cells. 39 (1), 7-25 (2021).</li>
<li>Nguyen, B. H., Ishii, M., Maxson, R. E., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culturing+and+manipulation+of+O9-1+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Culturing and manipulation of O9-1 neural crest cells.</a> J Vis Exp. (140), e58346(2018).</li>
<li>Ishii, M., Arias, A. C., Liu, L., Chen, Y. B., Bronner, M. E., Maxson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stable+cranial+neural+crest+cell+line+from+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Dev%22%5BJournal%5D)">A stable cranial neural crest cell line from mouse.</a> Stem Cells Dev. 21 (17), 3069-3080 (2012).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Prescott, S., Brugmann, S. A., Swigut, T., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenomic+annotation+of+enhancers+predicts+transcriptional+regulators+of+human+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenomic annotation of enhancers predicts transcriptional regulators of human neural crest.</a> Cell Stem Cell. 11 (5), 633-648 (2012).</li>
<li>Cederquist, G. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specification+of+positional+identity+in+forebrain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Specification of positional identity in forebrain organoids.</a> Nat Biotechnol. 37 (4), 436-444 (2011).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Swigut, T., Brugmann, S. A., Flynn, R. A., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+unique+chromatin+signature+uncovers+early+developmental+enhancers+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A unique chromatin signature uncovers early developmental enhancers in humans.</a> Nature. 470 (7333), 279-283 (2011).</li>
<li>Prescott, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancer+divergence+and+cis-regulatory+evolution+in+the+human+and+chimp+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Enhancer divergence and cis-regulatory evolution in the human and chimp neural crest.</a> Cell. 163 (1), 68-83 (2015).</li>
<li>Chaddah, R., Arntfield, M., Runciman, S., Clarke, L., van der Kooy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+neural+stem+cells+from+human+embryonic+stem+cell+colonies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Clonal neural stem cells from human embryonic stem cell colonies.</a> J Neurosci. 32 (23), 7771-7781 (2012).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHD7+cooperates+with+PBAF+to+control+multipotent+neural+crest+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">CHD7 cooperates with PBAF to control multipotent neural crest formation.</a> Nature. 463 (7283), 958-962 (2010).</li>
<li>Sipahi, R., Zupanc, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stochastic+cellular+automata+model+of+neurosphere+growth%3A+Roles+of+proliferative+potential%2C+contact+inhibition%2C+cell+death%2C+and+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Theor+Biol%22%5BJournal%5D)">Stochastic cellular automata model of neurosphere growth: Roles of proliferative potential, contact inhibition, cell death, and phagocytosis.</a> J Theor Biol. 445, 151-165 (2018).</li>
<li>Mori, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+neurosphere+size+on+the+growth+rate+of+human+neural+stem%2Fprogenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of neurosphere size on the growth rate of human neural stem/progenitor cells.</a> J Neurosci Res. 84 (8), 1682-1691 (2006).</li>
<li>Kress, C., Vandormael-Pournin, S., Baldacci, P., Cohen-Tannoudji, M., Babinet, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonpermissiveness+for+mouse+embryonic+stem+%28ES%29+cell+derivation+circumvented+by+a+single+backcross+to+129%2FSv+strain%3A+establishment+of+ES+cell+lines+bearing+the+Omd+conditional+lethal+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Genome%22%5BJournal%5D)">Nonpermissiveness for mouse embryonic stem (ES) cell derivation circumvented by a single backcross to 129/Sv strain: establishment of ES cell lines bearing the Omd conditional lethal mutation.</a> Mamm Genome. 9 (12), 998-1001 (1998).</li>
<li>Simões-Costa, M., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+neural+crest+identity%3A+a+gene+regulatory+recipe%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Establishing neural crest identity: a gene regulatory recipe.</a> Development. 142 (2), 242-257 (2015).</li>
<li>Memberg, S. P., Hall, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dividing+neuron+precursors+express+neuron-specific+tubulin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Dividing neuron precursors express neuron-specific tubulin.</a> J Neurobiol. 27 (1), 26-43 (1995).</li>
<li>Kim, C. N., Shin, D., Wang, A., Nowakowski, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+molecular+dynamics+of+the+developing+human+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal molecular dynamics of the developing human thalamus.</a> Science. 382, eadf9941(2023).</li>
<li>Grimaldi, A., Comai, G., Mella, S., Tajbakhsh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+bipotent+progenitors+that+give+rise+to+myogenic+and+connective+tissues+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22ELife%22%5BJournal%5D)">Identification of bipotent progenitors that give rise to myogenic and connective tissues in mouse.</a> ELife. 11, e70235(2022).</li>
<li>To, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multiomic+atlas+of+human+early+skeletal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A multiomic atlas of human early skeletal development.</a> Nature. 635 (8039), 657-667 (2024).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+stages+of+rapid+and+uniform+neuralization+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Molecular stages of rapid and uniform neuralization of human embryonic stem cells.</a> Cell Death Differ. 16 (6), 807-825 (2009).</li>
<li>Kerosuo, L., Nie, S., Bajpai, R., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crestospheres%2C+Long-term+maintenance+of+multipotent%2C+premigratory+neural+crest+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Crestospheres, Long-term maintenance of multipotent, premigratory neural crest stem cells.</a> Stem Cell Reports. 5 (4), 499-507 (2015).</li>
<li>Abe, S., Yamaguchi, S., Sato, Y., Harada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphere-derived+multipotent+progenitor+cells+obtained+from+human+oral+mucosa+are+enriched+in+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sphere-derived multipotent progenitor cells obtained from human oral mucosa are enriched in neural crest cells.</a> Stem Cells Transl Med. 5 (1), 117-128 (2016).</li>
<li>Jensen, J. B., Parmar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengths+and+limitations+of+the+neurosphere+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Strengths and limitations of the neurosphere culture system.</a> Mol Neurobiol. 34 (3), 153-161 (2006).</li>
<li>Ziegler, L., Grigoryan, S., Yang, I. H., Thakor, N. V., Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+generation+of+Schwann+cells+from+human+embryonic+stem+cell-derived+neurospheres%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Rev+Rep%22%5BJournal%5D)">Efficient generation of Schwann cells from human embryonic stem cell-derived neurospheres.</a> Stem Cell Rev Rep. 7 (2), 394-403 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,22 y mu; m filtros de jeringa</td><td>ClearLine</td><td>146560</td><td></td></tr><tr><td>15 mL Tubo cónico de polipropileno de alta claridad</td><td>Falcon</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>200 &micro; L ClearLine Plus Puntas de filtro de baja encuadernación</td><td>Dutscher</td><td>713263</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro; m filtros</td><td>Falcon</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Pipeta serológica</td><td>Starstedt</td><td>86.1253.001</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Polipropileno de alta claridad Tubo cónico</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Merck-Sigma</td><td>A6964</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 burro anti conejo IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21206</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 burro anti ratón IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21203</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 burro anti cabra IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A31571</td><td></td></tr><tr><td>Solución antibiótica-antimicótica&nbsp;</td><td>Merck-Sigma</td><td>A5955</td><td></td></tr><tr><td>B27 PLUS suplemento</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Albúmina sérica bovina (BSA)</td><td>Merck-Sigma</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>Cloroformo</td><td>Carlo Erba</td><td>438601</td><td></td></tr><tr><td>Colagenasa Tipo IV</td><td>Thermofisher Scientific, Gibco</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>Costar 6 pocillos transparentes Placas de pocillos múltiples tratadas con TC</td><td>Corning</td><td>3516</td><td></td></tr><tr><td>Cubreobjetos, redondos</td><td>VWR</td><td>&nbsp; 630-2113 y nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>DMEM KnockOut</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10829018</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12+Glutamax</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10565018</td><td></td></tr><tr><td>DMEM alta glucosa</td><td>Merck-Sigma</td><td>D0822</td><td></td></tr><tr><td>DNA LoBind&nbsp; Tubos, 2 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30108078</td><td></td></tr> agua <tr><td>destilada sin DNasa/RNasa</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10977-035</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s Solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Tubos Safe-Lock, 0,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30121023</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Tubos Safe-Lock, 2 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30120094</td><td></td></tr><tr><td>ESGRO mLIF Medium Supplement</td><td>Merck-Sigma</td><td>ESG1107</td><td></td></tr><tr><td>Etanol 70%</td><td>Carlo Erba</td><td>528170</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Suero bovino</td><td>Merck-Sigma</td><td>F7524</td><td></td></tr><tr><td>Fibronectina</td><td>Merck-Sigma</td><td>F085-2MG</td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td></td></tr><tr><td>Solución de gelatina</td><td>Merck-Sigma</td><td>ES-006-B</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Humano EGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15-500UG</td><td></td></tr><tr><td>FGF humano-básico</td><td>Peprotech</td><td>100-18B</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo SOX9 humano</td><td>R& Dsystems</td><td>AF3075</td><td></td></tr><tr><td>Insulina de páncreas bovino</td><td>Merck-Sigma</td><td>I6634</td><td></td></tr><tr><td>iScript Kit de síntesis de ADNc Biorad</td><td></td><td>1708891</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo monoclonal antihumano AP-2 alfa de ratón, no conjugado</td><td>DSHB</td><td>3B5</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo monoclonal PAX7 de ratón antihumano no conjugado</td> Suplemento <td></td><td></td> DSHB PAX7 <td></td></tr><tr><td>N2</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Medio Neurobasal</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>21103049</td><td></td></tr><tr><td>Placa tratada con cultivo sin tejido, 96 pocillos, fondo plano</td><td>Falcon</td><td>351172</td><td></td></tr><tr><td>Placa tratada con cultivo sin tejidos, 96 pocillos, Falcon 351177</td><td></td><td></td><td></td>con fondo en U</tr><tr><td>Solución de paraformaldehído al 16%, grado em</td><td>Ciencias de la Microscopía Electrónica 15710</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Propan-2-ol</td><td>Carlo Erba</td><td>415154</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Tubulina purificada y beta; 3 (TUJ1)</td><td>Anticuerpo Biolegend</td><td>MMS-435P</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1.47</td><td>Sunjin Lab</td><td>RC147001</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1.52</td><td>Sunjin Lab RC152001</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Escocés Doble Cara 12,7 mm &veces; 22,8 m</td><td></td><td></td><td>Cinta adhesiva transparente sin fibra de doble cara</td></tr><tr><td>SensiFAST SYBR No-ROX</td><td>Kit Meridian Bioscience</td><td>BIO-98020</td><td></td></tr><tr><td>Bisturíes quirúrgicos desechables estériles</td><td>Swann-Morton</td><td>05XX</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus Portaobjetos de microscopio de adhesión</td><td>Epredia J1800AMNZ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A16046. </td><td></td>AP</tr><tr><td>TRIzol Reactivo</td><td>FisherScientific</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina-EDTA (0.05%)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Fisher Scientific</td><td>10113103</td><td></td></tr><tr><td>TWIST1 Rabbit mAb (IF Formulated)</td><td>Tecnología de señalización celular</td><td>E7E2G</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-mercaptoetanol</td><td>Thermofisher Scientific</td><td></td><td></td>31350010</tr></tbody></table>

células de la cresta neural craneal protocolo de diferenciación tridimensional in vitro para ensayos multiplexados

Cranial Neural Crest Cells Three-Dimensional In Vitro Differentiation Protocol for Multiplexed Assay

Siguiendo el protocolo, se disociaron las colonias de mESC y se sembraron 3000 células en placas de 96 pocillos con fondo en U no tratadas con TC. En el día 2, los NS agregados se transfirieron a placas de 96 pocillos de fondo plano no tratadas con TC para permitir que se adhirieran. En la Figura 1A se proporciona una visualización simplificada del protocolo de agregación NS. Los SN se cultivaron hasta el día 9 y luego se procesaron para la tinción con inmunofluorescencia. Las células que mi...

Células de la cresta neural craneal Protocolo de diferenciación tridimensional in vitro para ensayos multiplexados

With their remarkable capacity to generate both ectodermal and mesenchymal derivatives, cranial neural crest cells (CNCC) have attracted a lot of interest ...

cranial-neural-crest-cells-three-dimensional-vitro-differentiation

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Para cultivar las células troncales de la cresta neural (NCSC) in vitro, un medio especial (NCSCM) es necesario. Parte esencial de NCSCM es el extracto de embrión de pollo (CEE). Se describen las técnicas precisas para producir una cantidad al máximo de calidad en estado puro y de alta CEE, incluyendo detalles como el aislamiento, la maceración, la centrifugación, y los procesos de filtración.

La producción de extracto de embrión de pollo para el Cultivo de murino crestas de células neurales madre

Aislamiento de cresta neural embrionario del tubo neural facilita el uso...

Aislamiento y cultivo de células de la cresta neural de embriones murinos del Tubo Neural

Este video ilustra una técnica para aislar los pliegues neurales craneales de la región del mesencéfalo de embriones de pollo. Presenta un proceso de disección detallado de los pliegues neurales, su colocación y fijación en cubreobjetos recubiertos de fibronectina, seguido de la observación de la migración de las células de la cresta neural desde los pliegues neurales.

Aislamiento de pliegues neurales craneales de un embrión de pollo para un cultivo de células de cresta neural

Las células de la cresta neural (NC) derivadas de células madre pluripotentes humanas (HPSC) tienen un gran potencial para modelar el desarrollo humano y las enfermedades y para las terapias de reemplazo celular. Aquí, una adaptación libre del alimentador ampliamente utilizado en la...

Derivación-Feeder libres de Células Progenitoras de la cresta neural Pluripotentes Células Madre

Con la intención de caracterizar los cambios en los miRNAs en células madre neurales humanas diferenciadas (hNSCs) describimos la diferenciación de hNSC en un sistema tridimensional, la evaluación de los cambios en la expresión de microRNA por la matriz de PCR de miRNA, y el análisis computacional para la predicción de objetivos de miRNA y su validación por ensayo de luciferasa dual.

La diferenciación de una línea de células madre neurales humanas en las Tres Culturas de dimensiones, Genes Análisis de microARN y putativo objetivo

Se describe una técnica para el uso de células madre embrionarias murinas para generar dos o tres cuerpos embrioides dimensionales. A continuación, explicamos cómo inducir la diferenciación neural de las células del cuerpo embrioides por ácido retinoico, y cómo analizar su estado de diferenciación de células progenitoras por inmunofluorescencia marcador e inmunotransferencia.

Análisis de inducida por ácido retinoico Neural diferenciación de células madre embrionarias de ratón en cuerpos embrioides dos y tres dimensiones

Este protocolo describe la disección y el cultivo de células de la cresta neural craneal a partir de modelos de ratón, principalmente para el estudio de la migración celular. Describimos las técnicas de imagen en vivo utilizadas y el análisis de la velocidad y los cambios en la forma celular.

Disección, cultivo y análisis de células de cresta neural craneal primarias de ratón para el estudio de la delaminación y migración de células de cresta neuronal

Aquí se presenta un protocolo para la generación de un cultivo de una sola célula de células madre embrionarias humanas y su posterior diferenciación en células progenitoras neuronales. El protocolo es simple, robusto, escalable y adecuado para aplicaciones de detección de drogas y medicina regenerativa.

Diferenciación neuronal eficiente utilizando el cultivo monocelular de células madre embrionarias humanas

En este protocolo, describimos una estrategia de diferenciación estable y altamente eficiente para la generación de neuronas simpáticas postgangliónicas a partir de células madre pluripotentes humanas. Este modelo hará que las neuronas estén disponibles para el uso de estudios de múltiples trastornos autonómicos.

Diferenciación eficiente de las neuronas simpáticas postgangliónicas utilizando células madre pluripotentes humanas bajo condiciones de cultivo sin alimentador y definidas químicamente

Aquí, establecimos un método de bajo costo y fácil de operar que dirige la diferenciación rápida y eficiente de las células madre embrionarias a las neuronas. Este método es adecuado para la popularización entre laboratorios y puede ser una herramienta útil para la investigación neurológica.

Diferenciación neuronal de las células madre embrionarias del ratón in vitro

Este protocolo versátil describe el aislamiento de células de la cresta neural premigratoria (NCC) a través de la escisión de pliegues neurales craneales de embriones de pollo. Tras el recubrimiento y la incubación, las NCC migratorias emergen de los explantes del pliegue neural, lo que permite la evaluación de la morfología celular y la migración en un entorno 2D simplificado.

Preparación y análisis morfológico de cultivos de células de cresta neural craneal de pollo

Aprende a diferenciar células de la cresta neural craneal en 3D usando células madre embrionarias de ratón. Este protocolo reduce la variabilidad en el tamaño de neuroesferas y permite ensayos multiplexados para estudiar el desarrollo craneofacial.

Células de la cresta neural craneal Protocolo de diferenciación tridimensional in vitro para ensayos multiplexados

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