Name: Entrega efectiva y segura de genes al riñón de ratón mediante inyección lenta retrógrada en la pelvis renal de vectores de virus adenoasociados (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 24 s
Description: Aprende a realizar inyección retrógrada lenta en la pelvis renal para entrega de genes con vectores AAV en riñón de ratón. Este método seguro logra transducción eficiente de túbulos proximales sin daño tisular.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0.45 &mu;m PVDF syringe filter</td><td>MilliporeSigma</td><td>SLHVR33RS</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL microcentrifuge tube&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-408-129</td><td></td></tr><tr><td>15 mL polypropylene tube</td><td>Corning</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>16% paraformaldehyde (PFA)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>250 mL centrifuge bottle</td><td>Fisher Scientific</td><td>055641S24</td><td></td></tr><tr><td>2F Silicone tubing</td><td>Sai Infusion Technologies</td><td>SIL-2-50&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>25G butterfly needle</td><td>Medex Supply</td><td>26708</td><td></td></tr><tr><td>2-methylbutane</td><td>MilliporeSigma</td><td>MX0760</td><td></td></tr><tr><td>2x qPCR reaction buffer</td><td>Fisher Scientific</td><td>43-676-59</td><td>Power SYBR Green PCR Master Mix</td></tr><tr><td>30G needle</td><td>Becton-Dickinson &amp; Co</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>50 mL polypropylene tube</td><td>Corning</td><td>430291</td><td></td></tr><tr><td>5-0 monofilament suture</td><td>Ethicon</td><td>Y463G</td><td></td></tr><tr><td>5 M NaCl</td><td>Lonza</td><td>51202</td><td></td></tr><tr><td>6-0 absorbable suture</td><td>Ethicon</td><td>J489G</td><td></td></tr><tr><td>7.5% Mini-PROTEAN TGX Precast Protein Gels, 10-well, 30 &micro;L</td><td>Bio-Rad</td><td>4561023</td><td></td></tr><tr><td>Amersham ImageQuant 800 Western Blot Imaging System (Cytiva)</td><td>Cytiva</td><td>29459405</td><td></td></tr><tr><td>Amicon 100 kDa MWCO, 15 mL tube</td><td>Millipore Sigma</td><td>UFC910024</td><td></td></tr><tr><td>Anti-aquaporin 2 (AQP2) antibody</td><td>Abcam</td><td>ab199975</td><td>Un marcador para las células de los conductos colectores</td></tr><tr><td>Anti-Na-K-2Cl cotransporter 2 (NKCC2) antibody</td><td>StressMarq Biosciences</td><td>SPC-401</td><td>Un marcador para las células del asa ascendente gruesa </td></tr><tr><td>Anti-rabbit IgG Alexa Fluor 647 antibody</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>111-605-144</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Wilms Tumor 1 (WT1) antibody</td><td>Abcam</td><td>ab89901</td><td>Un marcador para los podocitos</td></tr><tr><td>Beckman Coulter OptiSeal Tube, Polypropylene, 29.9 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9691210</td><td></td></tr><tr><td>Beckman Coulter OPTISEAL TUBES</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9611575</td><td></td></tr><tr><td>Benzonase</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1016970001</td><td></td></tr><tr><td>Bovine serum albumin (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>5470</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugal ultrafiltration tube</td><td>MilliporeSigma</td><td>UFC9100</td><td>Amicon 100 kDa MWCO, 15 mL</td></tr><tr><td>Ceramic bead tube</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-154</td><td></td></tr><tr><td>Cesium chloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3032-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Clamp applying forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>00071-14</td><td></td></tr><tr><td>Closed-loop heat pad</td><td>Stryker Medical</td><td>8002-062-012</td><td></td></tr><tr><td>Cotton-tipped applicator</td><td>Puritan</td><td>806-WC</td><td></td></tr><tr><td>Cover glass</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-541B</td><td></td></tr><tr><td>Cryostat microtome</td><td>Tanner Scientific</td><td>TN50</td><td></td></tr><tr><td>Curved forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>Curved-type micro vessel clip</td><td>Kleinert-Kutz</td><td>65145</td><td>Pinza para la arteria renal y la vena renal</td></tr><tr><td>Dialysis cassette</td><td>Fisher Scientific</td><td>PIA52976</td><td></td></tr><tr><td>DNA extraction kit</td><td>Qiagen</td><td>57704</td><td>QIAamp MinElute Virus Spin Kit</td></tr><tr><td>D-Sorbitol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S6021-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle Medium- high glucose</td><td>Corning</td><td>15-013-CV</td><td>DMEM-high glucose (4.5 g/L)</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-575-020</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Decon Laboratories</td><td>2716GEA</td><td></td></tr><tr><td>Fetal bovine serum (FBS)</td><td>VWR</td><td>89510-186</td><td></td></tr><tr><td>Gas-tight glass syringe</td><td>Hamilton</td><td>1710 TLL</td><td></td></tr><tr><td>Glutaraldehyde solution</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td></td></tr><tr><td>Heat therapy pump</td><td>Kent Scientific</td><td>HTP-1500</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H4034-100G</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Invitrogen</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>Homogenizer</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-163</td><td></td></tr><tr><td>Human embryonic kidney (HEK) 293 cells</td><td>Agilent</td><td>240073</td><td></td></tr><tr><td>Ice bucket</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-210-104</td><td></td></tr><tr><td>Infusion syringe pump</td><td>Harvard Apparatus</td><td>70-4507</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Critical Care</td><td>NDC 66794-017-10</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamine</td><td>Fisher Scientific</td><td>25030-081</td><td></td></tr><tr><td>Liquid blocker pen</td><td>Ted Pella</td><td>22309</td><td></td></tr><tr><td>Lotus tetragonolobus lectin (LTL)- Fluorescein</td><td>Vector Laboratories</td><td>FL-1321-2</td><td>Un marcador para los túbulos proximales</td></tr><tr><td>Magnesium chloride (MgCl2)</td><td>MilliporeSigma</td><td>M1028</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>VetOne</td><td>NDC 86136-012-10</td><td>Analgésico</td></tr><tr><td>Microscope glass slide</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td></td></tr><tr><td>Mounting medium</td><td>SouthernBiotech</td><td>0100-01</td><td></td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12501-13</td><td></td></tr><tr><td>OCT compound</td><td>Sakura Finetek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Ophthalmic ointment</td><td>Bausch &amp; Lomb</td><td>NDC 24208-313-34</td><td></td></tr><tr><td>PE-10 polyethylene tube</td><td>BD</td><td>427401</td><td>Diámetro interior: 0,28 mm</td></tr><tr><td>Penicillin &amp; Streptomycin Mix</td><td>Fisher Scientific</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate-buffered saline (PBS)</td><td>Fisher Scientific</td><td>10010-049</td><td></td></tr><tr><td>Plastic cryomold</td><td>Sakura Finetek</td><td>4566</td><td></td></tr><tr><td>Poloxamer 188 Non-ionic Surfactant (10%)</td><td>Fisher Scientific</td><td>24-04

entrega efectiva y segura de genes al riñón de ratón mediante inyección lenta retrógrada en la pelvis renal de vectores de virus adenoasociados

Effective and Safe Gene Delivery to the Mouse Kidney via Slow Retrograde Renal Pelvis Injection of Adeno-Associated Virus Vectors

Entrega efectiva y segura de genes al riñón de ratón mediante inyección lenta retrógrada en la pelvis renal de vectores de virus adenoasociados

The development of effective in vivo tools and methods for gene delivery to the kidney is crucial for advancing basic kidney research and gene therapy for ...

effective-safe-gene-delivery-to-mouse-kidney-via-slow-retrograde

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

En este video, demostramos la entrega de genes basados en virus adenoasociados recombinantes en la cría de ratón. Este método ayuda a estudiar la expresión génica en las células objetivo.

Entrega de genes basada en virus adenoasociados recombinantes: una técnica para la administración de transgenes y la expresión específica del corazón en modelos de roedores

Fuente:Pourshafie, N., et al. Administración sistémica de microARN utilizando virus adenoasociados recombinantes serotipo 9 para tratar enfermedades neuromusculares en roedores. J. Vis. Exp. (2018).En este video, un ratón afectado por atrofia muscular espinal y bulbar o SBMA se somete a una inyección en la vena de la cola de vectores AAV (vectores adenoasociados) recombinantes que llevan un plásmido que codifica microARN terapéutico. El vector produce microARN que se une al AR-ARN mutante...

Inyección de vectores adenoasociados recombinantes en un modelo de ratón con atrofia muscular espinal y bulbar

Implantación de células de cáncer en el órgano de origen puede servir como un modelo preclínico útil para evaluar nuevas terapias. Células de carcinoma de vejiga MB49 se pueden cultivar dentro de la vejiga después de la instilación intravesical. Este protocolo demuestra la cateterización de la vejiga de ratón para el propósito de la implantación del tumor y la entrega adenoviral.

Un modelo ortotópico de cáncer de vejiga de Estudios de liberación de genes

El abordaje quirúrgico postauricular descrito permite una administración rápida y directa en el lápido timpático coclear del ratón, al tiempo que minimiza la pérdida de sangre y la mortalidad animal. Este método se puede utilizar para la terapia coclear mediante la administración molecular, farmacológica y viral a ratones posnatales a través de la membrana de la ventana redonda.

Método quirúrgico para la entrega de genes mediada por virus de la oreja del ratón Interior a través de la ventana de membrana Ronda

En este manuscrito, se describe un método para preparar vectores recombinantes del virus adenoasociado 9 (rAAV9) para manipular la expresión génica en el corazón del ratón.

Preparación de rAAV9 que sobreexpresan o una caída en los genes de ratón Corazones

Aquí describimos la entrega de microRNA usando un serotipo de virus adeno-asociado recombinante 9 en un modelo de ratón de una enfermedad neuromuscular. Una sola administración periférica en ratones dio lugar a la sobreexpresión de miRNA sostenida en el músculo y neuronas del motor, proporcionando una oportunidad de estudio miRNA función y potencial terapéutico en vivo.

Entrega sistémica de microARN mediante Virus Adeno-asociado recombinante serotipo 9 para tratar enfermedades neuromusculares en roedores

El objetivo del presente estudio fue desarrollar y validar la potencia y la seguridad de la entrega del gen mediado por el virus adeno-asociado al virus espinal 9 (AAV9) mediante el uso de una nueva técnica de administración génica subpial en ratones adultos.

Adenovirus Subagonal Asociado 9 (AAV9) Vector Entrega en Ratones Adultos

Este protocolo describe un método para inyectar ADN plásmido en el riñón de ratón a través de la pelvis renal para producir la expresión del transgen específicamente en el riñón.

Inyección hidrodinámica la Pelvis Renal para la no expresión de proteínas en el riñón

Se describe un método novedoso para la entrega de plásmido de DNA en las células uroteliales del ratón vejiga en vivo a través de la cateterización de la uretra y electroporación. Ofrece una manera rápida y conveniente para la generación de modelos de ratón autóctonas de enfermedades de la vejiga.

Novedoso método de plásmido ADN entrega al urotelio de la vejiga de ratón por electroporación

Aquí detallamos un protocolo optimizado para la inyección de venas laterales de cola en ratones para administrar sistémicamente virus adenoasociados (AAV) en ratones adultos. Además, describimos los protocolos de los ensayos comúnmente utilizados para evaluar la transducción de AAV.

Liberación consistente de virus adenoasociados a través de la inyección lateral de la vena de la cola en ratones adultos

Este protocolo describe cómo la inyección intraesplénica de ARN de horquilla pequeña administrado por AAV8 logra la misma eficiencia de eliminación de genes en el hígado que la inyección de vena porta, lo que representa un procedimiento más simple con mortalidad y complicaciones perioperatorias y postoperatorias mucho más bajas.

Eliminación eficiente de genes en el hígado a través de la inyección intraesplénica de ARN de horquilla pequeña administrado por virus adenoasociados al serotipo 8 (AAV8)

Aprende a realizar inyección retrógrada lenta en la pelvis renal para entrega de genes con vectores AAV en riñón de ratón. Este método seguro logra transducción eficiente de túbulos proximales sin daño tisular.

Entrega efectiva y segura de genes al riñón de ratón mediante inyección lenta retrógrada en la pelvis renal de vectores de virus adenoasociados (Video) | JoVE Journal

Entrega efectiva y segura de genes al riñón de ratón mediante inyección lenta retrógrada en la pelvis renal de vectores de virus adenoasociados

Explorar más videos