Name: Optimización de la administración de vesículas extracelulares mediante un andamio bioimpreso en 3D con vaina central para el tratamiento de heridas crónicas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-28T14:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 17 s
Description: Aprende a fabricar andamios bioimpresos en 3D con vaina central para liberar vesículas extracelulares en heridas crónicas. Este método mejora la cicatrización mediante liberación controlada de agentes terapéuticos.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Boquilla cónica de precisión púrpura de 23 G</td><td>Cellink</td><td>KT0000002000</td><td>Para proporcionar una extrusión precisa de biotintas con una obstrucción mínima</td></tr><tr><td>Alginato liasa (AlgLyase)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A1603-100MG</td><td>La algiasa es una enzima que degrada el alginato.</td></tr><tr><td>Filtro ultracentrífugo Amicon, 30 kDa MWCO</td><td>Merck</td><td>UFC9030</td><td>Se utiliza para lavar el kit de ensayo BCA de EV marcado con PKH-26</td></tr><tr><td></td><td>Thermo Scientific</td><td>10678484</td><td>Para determinar la concentración de proteínas/EV</td></tr><tr><td>Sistema de bioimpresión</td><td>Regemat</td><td>V1</td><td>Para fabricar andamios de vaina central</td></tr><tr><td>Albúmina de suero bovino (BSA)</td><td>sigma-aldrich</td><td>05470-5G</td><td>Para detener la reacción PKH 26&nbsp;</td></tr><tr><td>Cloruro de calcio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C3306-100G</td><td>Para reticular y estabilizar biotintas en ingeniería de tejidos</td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Sigma</td><td>2-16P</td><td>Utilizada para el aislamiento de EVs</td></tr><tr><td>Centrífuga 5810 R</td><td>Eppendorf</td><td>22625101</td><td>Utilizada para cultivo celular</td></tr><tr><td>Clase II Gabinete de seguridad biológica</td><td>Telstar</td><td>Bio II Advance</td><td>Cell culture</td></tr><tr><td>CryoCube&nbsp; Serie F570 - Congelador ULT</td><td>Eppendorf</td><td>F571240035</td><td>Para almacenar EVs</td></tr><tr><td>microscopio fluorescente</td><td>OLYMPUS&nbsp;</td><td>IX73P1F&nbsp;</td><td>Se utiliza para comprobar el PKH-26 residual en el filtrado</td></tr><tr><td>Gentamicina (50 mg/ml)</td><td>Thermofisher</td><td>15750</td><td>Antibiótico para medios de cultivo celular</td></tr><tr><td>GlutaMAX-I CTS, (100X), líquido</td><td>Thermofisher</td><td>A12860</td><td>Suplemento de medios de cultivo celular</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>7647-01-0 Preparación de</td><td>tampón&nbsp;</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Carl Roth</td><td>Arte. No.&nbsp; 6763.3</td><td>Preparación de tampones</td></tr><tr><td>La carboximetilcelulosa de alta viscosidad (CMCh)</td><td>BDH</td><td>27929 4T</td><td>CMCh es un derivado de la celulosa soluble en agua.</td></tr><tr><td>Incubadora</td><td>New Brunswick</td><td> NB-170R</td><td>Cultivo celular</td></tr><tr><td>Imagen Invivo</td><td>PerkinElmer</td><td>IVIS Lumina XRMS Serie III</td><td>Para rastrear el lanzamiento de vehículos eléctricos, in vivo</td></tr><tr><td>Agitador magnético</td><td>SalvisLAB</td><td>MC35</td><td>Para preparación de biotintas</td></tr><tr><td>miRCURY Kits de exosomas para aislamiento de exosomas</td><td>Qiagen</td><td>76743</td><td>Aislamiento de Evs</td></tr><tr><td>NaOh</td><td>Daejung</td><td>1310-73-2 Preparación de</td><td>tampón</td></tr><tr><td>solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Thermo Scientific</td><td>J61196. AP</td><td>Cultivo celular</td></tr><tr><td>PKH 26</td><td>MCE</td><td>154214-55-8</td><td>Colorante rojo fluorescente para el etiquetado de los EV</td></tr><tr><td>Alginato de sodio (Alg)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A0682-100G</td><td>Polisacárido natural derivado de algas pardas.</td></tr><tr><td>Cloruro de sodio (NaCl)</td><td>Carl Roth</td><td>Art-Nr-P029.1</td><td>Preparación de tampón</td></tr><tr><td>StemPro BM Células madre mesenquimales</td><td>Thermofisher</td><td>A1382901</td><td>Células madre mesenquimales</td></tr><tr><td>StemPro MSC SFM XenoFree</td><td>Thermofisher</td><td>A1067501</td><td>Medios de cultivo celular</td></tr><tr><td>Tripsina 0,25%</td><td>Thermofisher</td><td>25050014</td><td>Disociación celular</td></tr><tr><td>Vortex-Mixer</td><td>Daihan Scientific</td><td>VM-10</td><td>Se utiliza para mezclar el tampón de precipitación con el medio acondicionado</td></tr></tbody></table>

optimización de la administración de vesículas extracelulares mediante un andamio bioimpreso en 3d con vaina central para el tratamiento de heridas crónicas

Optimizing Extracellular Vesicle Delivery Using a Core-Sheath 3D-Bioprinted Scaffold for Chronic Wound Management

En la Figura 1B, C, se muestra la liberación in vivo de los andamios Alg-EVs/CMCh y Alg-EVs/CMCh-AlgLyase. Como se anticipó, el andamio Alg-EVs/CMCh-AlgLyase exhibió un perfil de liberación más rápida en comparación con Alg-EVs/CMCh, particularmente en los puntos de tiempo de 2 h y 4 h. La liberación de VE a partir de hidrogeles está gobernada por una combinación de mecanismos fisicoquímicos, que incluyen difusión, hinchamiento, erosión y degradación<sup class="xref...

Optimización de la administración de vesículas extracelulares mediante un andamio bioimpreso en 3D con vaina central para el tratamiento de heridas crónicas

This study outlines a detailed protocol for the fabrication of core-sheath 3D-bioprinted scaffolds designed to enhance chronic wound healing. The protocol ...

optimizing-extracellular-vesicle-delivery-using-core-sheath-3d

Research

Investigación

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Bioengineering

Bioingeniería

Para la creación de estructuras altamente organizadas de tejido complejo, se deben ensamblar múltiples tipos de materiales y células en un compuesto integrado.  Este diseño combinatorio incorpora láminas de células estratificadas específicas de órganos con dos materiales distintos derivados de la biología que contienen una fuerte base de matriz fibrosa y células endoteliales para mejorar la formación de nuevos vasos.

Ingeniería de tejidos: Construcción de un multicelular 3D Andamios para la entrega de láminas de células en capas

Una bioimpresora cartesiana fue diseñada y fabricada para permitir la deposición de múltiples materiales en geometrías precisas y reproducibles, al tiempo que permite el control de factores ambientales. Utilizando la bioimpresora tridimensional, se pueden imprimir y reproducir fácilmente construcciones complejas y viables.

Viabilidad de Bioprinted celulares Construye El uso de un Tres Impresora cartesiana dispensador

Proporcionamos un protocolo generalizado basado en una estrategia de bioprinting de microfluidos para la ingeniería de un lecho vascular de microfibra, donde un tipo de célula secundaria podría ser más sembrado en el espacio intersticial de esta estructura de microfibra para generar organoides y tejidos vascularizados.

Vascularizado de Bioprinting de microfluidos para la ingeniería de tejidos y organitas

Este artículo demuestra la técnica de expansión de una estera de nanofibras electrospun (2D) tradicional, dos dimensiones en un andamio de tres dimensiones (3D) a través de la despresurización de subcritical CO2 líquido. Estos andamios aumentados son 3D, cerca mímica celular nanotopographic señales y preservar las funciones de las moléculas biológicas encapsuladas dentro de las nanofibras.

Extensión de esteras de nanofibras Electrospun de dos dimensiones en tres dimensiones andamios

Aquí se presenta una configuración de bioimpresión tridimensional, núcleo/cáscara, fácil de usar, para la fabricación en un solo paso de andamios huecos, adecuado para la ingeniería de tejidos de estructuras vasculares y otras estructuras tubulares.

Andamios de impresión de núcleo/concha para la ingeniería de tejidos de estructuras tubulares

Los tejidos diseñados dependen en gran medida de las redes vasculares adecuadas para proporcionar nutrientes y gases vitales y eliminar los desechos metabólicos. En este trabajo, un protocolo de siembra escalonada de células endoteliales y células de apoyo crea redes vasculares altamente organizadas en una plataforma de alto rendimiento para estudiar el comportamiento de los vasos en desarrollo en un entorno 3D controlado.

Siembra celular escalonada en andamios teselados para estudiar la brotación de los vasos sanguíneos

En este manuscrito, demostramos la preparación de una biotinta de hidrogel biohíbrida que contiene grafeno para su uso en ingeniería de tejidos periféricos. Utilizando este material biohíbrido 3D, se realiza el protocolo de diferenciación neural de las células madre. Este puede ser un paso importante para traer biomateriales similares a la clínica.

Preparación y caracterización de biotinta de hidrogel biohíbrida 3D basada en grafeno para neuroingeniería periférica

Los colgajos diseñados requieren una red vascular funcional incorporada. En este protocolo, presentamos un método de fabricación de un colgajo de tejido impreso en 3D que contiene una red vascular jerárquica y sus anastomosis microquirúrgicas directas a la arteria femoral de rata.

Fabricación de colgajos vasculares de ingeniería utilizando tecnologías de impresión 3D

Este trabajo describe un protocolo para la impresión 3D incrustada de forma libre de células madre neurales dentro de compuestos de matriz extracelular de partículas recibles autocurables. El protocolo permite el patrón programable de construcciones de tejido neural humano interconectadas con alta fidelidad.

Soporte compuesto de matriz extracelular de microgel para la impresión 3D integrada de construcciones neuronales humanas

Presentamos un protocolo para la producción de alto rendimiento de canales vasculares con tamaños flexibles y patrones deseados en una placa estándar de seis pocillos utilizando tecnología de bioimpresión 3D, conocida como vasos en una placa (VOP). Esta plataforma tiene el potencial de avanzar en el desarrollo de terapias para los trastornos asociados con el endotelio comprometido.

Método de bioimpresión de alto rendimiento para modelar la permeabilidad vascular en placas estándar de seis pocillos con flexibilidad de tamaño y patrón

Aprende a fabricar andamios bioimpresos en 3D con vaina central para liberar vesículas extracelulares en heridas crónicas. Este método mejora la cicatrización mediante liberación controlada de agentes terapéuticos.

Optimización de la administración de vesículas extracelulares mediante un andamio bioimpreso en 3D con vaina central para el tratamiento de heridas crónicas (Video) | JoVE Journal

Optimización de la administración de vesículas extracelulares mediante un andamio bioimpreso en 3D con vaina central para el tratamiento de heridas crónicas

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