Name: Desarrollo y Evaluación de Modelos de Infección Intracelular por Staphylococcus aureus (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-17T14:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: Aprende a desarrollar modelos de infección intracelular por Staphylococcus aureus usando cultivos celulares y edición génica. Este método permite estudiar mecanismos de supervivencia bacteriana y optimizar estrategias terapéuticas.

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<meta charset="utf8"></head><body>Modelos in vivo optimizados para estudios de infección intracelular por S. aureus

<ol><li>Sutton, J. A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+aureus+cell+wall+structure+and+dynamics+during+host-pathogen+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus aureus cell wall structure and dynamics during host-pathogen interaction.</a> PLoS Pathog. 17 (3), e1009468(2021).</li>
<li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+flow+assay+of+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+using+bacteriophage+cellular+wall-binding+domain+as+recognition+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Lateral flow assay of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using bacteriophage cellular wall-binding domain as recognition agent.</a> Biosens Bioelectron. 182, 113189(2021).</li>
<li>Howden, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+aureus+host+interactions+and+adaptation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus aureus host interactions and adaptation.</a> Nat Rev Microbiol. 21 (6), 380-395 (2023).</li>
<li>Guo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofilm+and+small+colony+variants-an+update+on+Staphylococcus+aureus+strategies+toward+drug+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Biofilm and small colony variants-an update on Staphylococcus aureus strategies toward drug resistance.</a> Int J Mol Sci. 23 (3), 1241(2022).</li>
<li>Huitema, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+escape+strategies+of+Staphylococcus+aureus+in+persistent+cutaneous+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Intracellular escape strategies of Staphylococcus aureus in persistent cutaneous infections.</a> Exp Dermatol. 30 (10), 1428-1439 (2021).</li>
<li>Pidwill, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+population+expansion+of+Staphylococcus+aureus+occurs+due+to+escape+from+a+finite+number+of+intraphagocyte+niches%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Clonal population expansion of Staphylococcus aureus occurs due to escape from a finite number of intraphagocyte niches.</a> Sci Rep. 13 (1), 1188(2023).</li>
<li>Wang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+in+Staphylococcus+aureus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Autophagy in Staphylococcus aureus infection.</a> Front Cell Infect Microbiol. 11, 750222(2021).</li>
<li>Arya, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+an+antivirulence+agent+targeting+the+master+regulator+of+virulence+genes+in+Staphylococcus+aureus%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Identification of an antivirulence agent targeting the master regulator of virulence genes in Staphylococcus aureus.</a> Front Cell Infect Microbiol. 13, 1268044(2023).</li>
<li>Münzenmayer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+sae-regulated+and+agr-regulated+factors+on+the+escape+of+Staphylococcus+aureus+from+human+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Influence of sae-regulated and agr-regulated factors on the escape of Staphylococcus aureus from human macrophages.</a> Cell Microbiol. 18 (8), 1172-1183 (2016).</li>
<li>Chin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+lugdunensis+uses+the+agr+regulatory+system+to+resist+killing+by+host+innate+immune+effectors%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus lugdunensis uses the agr regulatory system to resist killing by host innate immune effectors.</a> Infect Immun. 90 (10), e0009922(2022).</li>
<li>Podkowik, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quorum-sensing+agr+system+of+Staphylococcus+aureus+primes+gene+expression+for+protection+from+lethal+oxidative+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Quorum-sensing agr system of Staphylococcus aureus primes gene expression for protection from lethal oxidative stress.</a> Elife. 12, RP89098(2024).</li>
<li>Purves, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Air+pollution+induces+Staphylococcus+aureus+usa300+respiratory+tract+colonization+mediated+by+specific+bacterial+genetic+responses+involving+the+global+virulence+gene+regulators+agr+and+sae%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Air pollution induces Staphylococcus aureus usa300 respiratory tract colonization mediated by specific bacterial genetic responses involving the global virulence gene regulators agr and sae.</a> Environ Microbiol. 24 (9), 4449-4465 (2022).</li>
<li>Wittekind, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+novel+protein+scra+acts+through+the+saers+two-component+system+to+regulate+virulence+gene+expression+in+Staphylococcus+aureus%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The novel protein scra acts through the saers two-component system to regulate virulence gene expression in Staphylococcus aureus.</a> Mol Microbiol. 117 (5), 1196-1212 (2022).</li>
<li>Pidwill, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+macrophages+in+Staphylococcus+aureus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">The role of macrophages in Staphylococcus aureus infection.</a> Front Immunol. 11, 620339(2020).</li>
<li>Lang, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+photoconvertible+reporter+system+for+bacterial+metabolic+activity+reveals+that+Staphylococcus+aureus+enters+a+dormant-like+state+to+persist+within+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">A photoconvertible reporter system for bacterial metabolic activity reveals that Staphylococcus aureus enters a dormant-like state to persist within macrophages.</a> mBio. 13 (5), e0231622(2022).</li>
<li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+between+macrophages+and+biofilm+during+Staphylococcus+aureus-associated+implant+infection%3A+Difficulties+and+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Innate+Immun%22%5BJournal%5D)">Interactions between macrophages and biofilm during Staphylococcus aureus-associated implant infection: Difficulties and solutions.</a> J Innate Immun. 15 (1), 499-515 (2023).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcal+virulence+factor+hlgb+targets+the+endoplasmic-reticulum-resident+e3+ubiquitin+ligase+amfr+to+promote+pneumonia%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Staphylococcal virulence factor hlgb targets the endoplasmic-reticulum-resident e3 ubiquitin ligase amfr to promote pneumonia.</a> Nat Microbiol. 8 (1), 107-120 (2023).</li>
<li>Mulcahy, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manipulation+of+autophagy+and+apoptosis+facilitates+intracellular+survival+of+Staphylococcus+aureus+in+human+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Manipulation of autophagy and apoptosis facilitates intracellular survival of Staphylococcus aureus in human neutrophils.</a> Front Immunol. 11, 565545(2020).</li>
<li>Cai, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+aureus+facilitates+its+survival+in+bovine+macrophages+by+blocking+autophagic+flux%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus aureus facilitates its survival in bovine macrophages by blocking autophagic flux.</a> J Cell Mol Med. 24 (6), 3460-3468 (2020).</li>
<li>Ahmad-Mansour, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+aureus+toxins%3A+An+update+on+their+pathogenic+properties+and+potential+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus aureus toxins: An update on their pathogenic properties and potential treatments.</a> Toxins. 13 (10), 677(2021).</li>
<li>Davis, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+I+manage+a+patient+with+MRSA+bacteremia%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Microbiol+Infect%22%5BJournal%5D)">How I manage a patient with MRSA bacteremia.</a> Clin Microbiol Infect. 28 (2), 190-194 (2022).</li>
<li>Fait, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+aureus+response+and+adaptation+to+vancomycin%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Microb+Physiol%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus aureus response and adaptation to vancomycin.</a> Adv Microb Physiol. 85, 201-258 (2024).</li>
<li>Kelly, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+accumulation+of+antibiotics+to+Staphylococcus+aureus+in+phagosomes+of+live+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Angew+Chem+Int+Ed+Engl%22%5BJournal%5D)">Measurement of accumulation of antibiotics to Staphylococcus aureus in phagosomes of live macrophages.</a> Angew Chem Int Ed Engl. 63 (3), e202313870(2024).</li>
<li>Rowe, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recalcitrant+Staphylococcus+aureus+infections%3A+Obstacles+and+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Recalcitrant Staphylococcus aureus infections: Obstacles and solutions.</a> Infect Immun. 89 (4), e00694-e00720 (2021).</li>
<li>Lehar, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+antibody-antibiotic+conjugate+eliminates+intracellular+S.+aureus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Novel antibody-antibiotic conjugate eliminates intracellular S. aureus.</a> Nature. 527 (7578), 323-328 (2015).</li>
<li>Peyrusson, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+Staphylococcus+aureus+persisters+upon+antibiotic+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Intracellular Staphylococcus aureus persisters upon antibiotic exposure.</a> Nat Commun. 11 (1), 2200(2020).</li>
<li>Pollitt, E. J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+aureus+infection+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus aureus infection dynamics.</a> PLoS Pathog. 14 (6), e1007112(2018).</li>
<li>Sanders, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aseptic+laboratory+techniques%3A+plating+methods%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Aseptic laboratory techniques: plating methods.</a> J Vis Exp. 11 (63), e3064(2012).</li>
<li>Qin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody-antibiotic+conjugate+targeted+therapy+for+orthopedic+implant-associated+intracellular+S.+aureus+infections%5BTitle%5D)+AND+%22J+Adv+Res%22%5BJournal%5D)">Antibody-antibiotic conjugate targeted therapy for orthopedic implant-associated intracellular S. aureus infections.</a> J Adv Res. 65, 239-255 (2024).</li>
<li>Andie, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Dis+Primers%22%5BJournal%5D)">Methicillin-resistant Staphylococcus aureus.</a> Nat Rev Dis Primers. 31 (4), 18034(2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Placa de 24 pocillos</td><td>Corning Incorporated, EE. UU.</td><td>3524</td><td></td></tr><tr><td>Solución de paraformaldehído al 4 %</td><td>BBI, Reino Unido</td><td>E672002-0500</td><td></td></tr><tr><td>Placa de 6 pocillos</td><td>Corning Incorporated, EE. UU</td>. <td>3516</td><td></td></tr><tr><td>Extracto de carne de vacuno</td><td>en polvo BBI, Reino Unido</td><td>A600114-0500</td><td></td></tr><tr><td>Equipo de seguridad contra riesgos biológicos</td><td>Fuerza de curación, China</td><td>VS-1300L-u</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora de células</td><td>ESCO, Singapur</td><td>CCL-170B-8</td><td></td></tr><tr><td>Raspador de células</td><td>Nest</td><td>710001</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga M1416R</td><td>RWD, China</td><td>M1416R</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de centrífuga</td><td>Guanghou Labselect, China</td><td>CT-002-50A</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio de barrido láser confocal (CLSM)</td><td>Zeiss, Alemania</td><td>880</td><td></td></tr><tr><td>Placa</td> <td>de Petri ConfocalBiosharp, China</td><td>BS-20-GJM</td><td></td></tr><tr><td>DAPI tinte</td><td>Shanghai Beyotime, China &nbsp;</td><td>Fluido de trabajo C1006</td><td></td></tr><tr><td>DIL</td><td>Shanghai Beyotime, China &nbsp;</td><td>C1991S</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s Águila modificada Medio</td><td>Thermo Gibco, EE. UU.</td><td>C11995500BT</td><td></td></tr><tr><td>Hiclón</td> de<td>suero bovino fetal</td><td>SV30208.02</td><td></td></tr><tr><td>Gentamicina</td><td>Shanghai Sangon, China</td><td>B540724-0010</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora</td><td>Shanghai Hengzi, China</td><td>HDPF-150</td><td></td></tr><tr><td>Lysozyme</td><td>Beijing Solarbio, China</td><td>L9070</td><td></td></tr><tr><td>MRSA252</td><td>Tercera Militar Universidad de Medicina, China</td><td>nula</td><td></td></tr><tr><td>MRSA252(GPF)</td><td>Tercera Universidad Médica Militar, China</td><td>nula</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina y Estreptomicina</td><td>Shanghai Beyotime, China&nbsp;</td><td>C0222</td><td></td></tr><tr><td>Solución tampón de fosfato</td><td>Shanghai Beyotime, China &nbsp;</td><td>ST476</td><td></td></tr><tr><td>Solución salina</td><td>Sichuan Kelun, China</td><td>nulo</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de sodio</td><td>Shanghai Macklin, China</td><td>S805275</td><td></td></tr><tr><td>Almidón soluble</td><td>Shanghai Sangon, China</td><td>A500904-0500</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Shanghai Beyotime, China &nbsp;</td><td>P0096-100ml</td><td></td></tr><tr><td>Placas de agar de soja tríptica (TSA)</td><td>Beijing AOBOX Biotechnology Co., LTD, China</td><td>02-130</td><td></td></tr><tr><td>Caldo de soja tríptico (TSB) medio</td><td>Beijing AOBOX Biotechnology Co., LTD, China</td><td>02-102K</td><td></td></tr><tr><td>Triptona</td><td>OXOID, Reino Unido</td><td>LP0042B</td><td></td></tr><tr><td>Vancomicina</td><td>Shanghai Beyotime, China &nbsp;</td><td>ST2807-250mg</td><td></td></tr><tr><td>RAW264.7 célula</td><td>EE. UU., ATCC</td><td>nulo</td><td></td></tr></tbody></table>

desarrollo y evaluación de modelos de infección intracelular por staphylococcus aureus

Development and Assessment of Intracellular Infection Models for Staphylococcus aureus

Los modelos de infección intracelular de S. aureus se establecieron con éxito tanto in vitro como in vivo. Al optimizar las condiciones experimentales para la fagocitosis y extender tanto la concentración como la duración del tratamiento con antibióticos, algunos S. aureus sobrevivieron dentro de los macrófagos (Figura 1). Para evaluar aún más la resistencia a los antibióticos de S. aureus, los macrófagos infectado...

Desarrollo y Evaluación de Modelos de Infección Intracelular por Staphylococcus aureus

S. aureus can invade and persist within host cells, including immune cells, which allows it to evade immune detection and clearance. This intracellular ...

development-assessment-intracellular-infection-models-for

Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

La piel murina y el modelo de infección de los tejidos blandos se utiliza para evaluar la función de la virulencia de Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) y la respuesta inmune de acogida. Aquí, presentamos un modelo de infección subcutánea de la piel y la infección de tejidos blandos.

Subcutánea infección de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina (MRSA)

Modelo experimental de rata endocarditis por estafilococos resistentes...

Modelo experimental de endocarditis Resistente a la Meticilina<em&gt; Staphylococcus aureus</em&gt; (SARM) en la rata

Source: Zhang, C. et al. Development and Assessment of Intracellular Infection Models for Staphylococcus aureus. J. Vis. Exp. (2025)This video demonstrates the quantification of intracellular survival of a methicillin-resistant bacterial pathogen in mouse peritoneal macrophages. It outlines the steps involved in infection, extracellular bacterial clearance, host cell lysis, and colony enumeration to assess bacterial survival within host macrophages.

Assessing the Survival of a Bacterial Pathogen in Mouse Peritoneal Macrophages

Source: Zhang, C., et al., Development and Assessment of Intracellular Infection Models for Staphylococcus aureus. J. Vis. Exp. (2025)The video demonstrates the isolation of kidneys containing Staphylococcus aureus-infected macrophages, followed by tissue homogenization to release intracellular bacteria. It quantifies bacterial persistence within macrophages in control and antibiotic-treated groups by counting colony-forming units.

Assessing Intracellular Bacterial Persistence and Antibiotic Resistance in a Mouse Model

El presente estudio describe un modelo de embrión de pez cebra para visualización in vivo y análisis intravital de infecciones asociadas a biomateriales en el tiempo basado en microscopía de fluorescencia. Este modelo es un sistema prometedor complementando modelos animales mamíferos como los modelos de ratón para el estudio de las infecciones asociadas a biomateriales en vivo.

Un modelo de embrión de pez cebra para In Vivo visualización y análisis Intravital de Biomaterial asociados Staphylococcus aureus infección

Se describe un enfoque para la detección en tiempo real de la respuesta inmune innata a heridas cutáneas y la infección de Staphylococcus aureus de los ratones. Por que comparan LysM-EGFP ratones (que poseen fluorescentes neutrófilos) con un LysM-EGFP mestizas cepa de ratón inmunodeficiente, avanzar en nuestra comprensión de la infección y el desarrollo de enfoques para combatir la infección.

Un modelo de ratón para evaluar respuesta inmune innata a la infección por Staphylococcus aureus

El medio de esputo sintético para fibrosis quística (SCFM2) se puede utilizar en combinación con microscopía de barrido láser confocal y clasificación celular activada por fluorescencia para observar agregados bacterianos a alta resolución. Este documento detalla los métodos para evaluar las poblaciones agregadas durante el tratamiento antimicrobiano como plataforma para futuros estudios.

Herramientas para la evaluación en tiempo real de un modelo de infección por Pseudomonas aeruginosa

Este protocolo tiene como objetivo describir cómo estudiar el alcance de la internalización de Staphylococcus aureus y su capacidad para sobrevivir dentro de la célula huésped humana, así como la eficacia intracelular de los compuestos antimicrobianos.

Ensayo de protección enzimática mejorado para estudiar la internalización de Staphylococcus aureus y la eficacia intracelular de compuestos antimicrobianos

El presente protocolo describe el estudio de las interacciones neutrófilos-biofilm. Las biopelículas de Staphylococcus aureus se establecen in vitro y se incuban con neutrófilos humanos derivados de sangre periférica. La respuesta de explosión oxidativa de los neutrófilos se cuantifica, y la localización de neutrófilos dentro de la biopelícula se determina mediante microscopía.

Ensayos in vitro estandarizados para visualizar y cuantificar las interacciones entre neutrófilos humanos y biopelículas de Staphylococcus aureus

El protocolo describe un método paso a paso para establecer un modelo de piel herida ovina ex vivo infectado con Staphylococcus aureus. Este modelo de alto rendimiento simula mejor las infecciones in vivo en comparación con las técnicas microbiológicas convencionales y presenta a los investigadores una plataforma fisiológicamente relevante para probar la eficacia de los antimicrobianos emergentes.

Un nuevo modelo de herida cutánea ovina ex vivo de alto rendimiento para probar antibióticos emergentes

El presente protocolo describe un modelo de ratón que emplea la implantación dorsal subcutánea para investigar infecciones asociadas a implantes, lo que permite una investigación exhaustiva de los mecanismos fisiopatológicos y apoya el desarrollo de criterios diagnósticos con estrategias terapéuticas específicas.

Modelo animal de infecciones asociadas a implantes en ratones

Aprende a desarrollar modelos de infección intracelular por Staphylococcus aureus usando cultivos celulares y edición génica. Este método permite estudiar mecanismos de supervivencia bacteriana y optimizar estrategias terapéuticas.

Desarrollo y Evaluación de Modelos de Infección Intracelular por Staphylococcus aureus

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