Name: Aislamiento y cultivo de células primarias de Müller en la retina de ratas Sprague-Dawley (SD) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-17T14:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: Aprenda a aislar y cultivar células de Müller retinianas primarias de ratas Sprague-Dawley neonatales mediante digestión con tripsina y centrifugación. Este protocolo estandarizado alcanza alta pureza celular para investigar biología retiniana y modelar patologías oculares.

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<ol><li>Bringmann, A., Pannicke, T., Grosche, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((M%C3%BCller+cells+in+the+healthy+and+diseased+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Müller cells in the healthy and diseased retina.</a> Prog Retin Eye Res. 25 (4), 397-424 (2006).</li>
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<li>Wang, M., Ma, W., Zhao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+M%C3%BCller+cell+responses+to+microglial+activation+mediate+neuroprotection+and+coordinate+inflammation+in+the+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Adaptive Müller cell responses to microglial activation mediate neuroprotection and coordinate inflammation in the retina.</a> J Neuroinflammation. 8, 173(2011).</li>
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<li>McCarthy, K. D., de Vellis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+separate+astroglial+and+oligodendroglial+cell+cultures+from+rat+cerebral+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Preparation of separate astroglial and oligodendroglial cell cultures from rat cerebral tissue.</a> J Cell Biol. 85 (3), 890-902 (1980).</li>
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<li>Guidry, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+characterization+of+porcine+M%C3%BCller+cells.+Myofibroblastic+dedifferentiation+in+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Isolation and characterization of porcine Müller cells. Myofibroblastic dedifferentiation in culture.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 37 (5), 740-752 (1996).</li>
<li>Qiu, A. W., Wang, N. Y., Yin, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+M%C3%BCller+cell-released+exosomal+miR-92a-3p+delivers+interleukin-17A+signal+by+targeting+Notch-1+to+promote+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Retinal Müller cell-released exosomal miR-92a-3p delivers interleukin-17A signal by targeting Notch-1 to promote diabetic retinopathy.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 66 (1), 1(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.1% Triton X-100</td><td>Solarbio</td><td>T8200</td><td></td></tr><tr><td>0.25% Tripsina-EDTA</td><td>Hiclone&nbsp;</td><td>SH30042.01B</td><td></td></tr><tr><td>1% ácido clorhídrico alcohol</td><td>BIOSYSTEMS</td><td>3803651E</td><td></td></tr><tr><td>4% Paraformaldehído</td><td>Solarbio</td><td>P1110</td><td></td></tr><tr><td>45&mu; malla de nailon m (malla 300)</td><td>Solarbio</td><td>YA0926</td><td></td></tr><tr><td>placa de 6 pocillos</td><td>Servicebio</td><td>IMC202302001</td><td></td></tr><tr><td>Placa de Petri de vidrio de 6 cm</td><td>Normax</td><td>5058541</td><td></td></tr><tr><td>75% de alcohol</td><td>KESHI</td><td>GEA004</td><td></td></tr><tr><td>Acuaporina-4 (AQP4)</td><td>Proteintech Group, Inc</td><td>16473-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>BSA</td><td>Servicebio</td><td>GC305010</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora de cultivos celulares</td><td>Proteína termo</td><td>FORMA311</td><td></td></tr><tr><td>de unión a retinaldehído celular (CRALBP)</td><td>Centrífuga de</td><td>HA721330</td><td></td>HUABOI</tr><tr><td></td><td>Hunan Xiangyi</td><td>TDZ5-WS</td><td></td></tr><tr><td>Banco limpio</td><td>ZHICHENG</td><td>ZHJH-C12</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras corneales</td><td>Jinzhong</td><td>BXGJ</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Solarbio</td><td>G1012</td><td></td></tr><tr><td>D-Hank solution</td><td>Solarbio</td><td>H1045</td><td></td></tr><tr><td>DMEM&nbsp; medio alto en glucosa</td><td>Gibco</td><td>C11995500BT</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td><td>Sbjbio life Sciences</td><td>BC-SE-FBS01</td><td></td></tr><tr><td>FIX& PERM Medio A</td><td>MultiSciences</td><td>GAS006/2</td><td></td></tr><tr><td>FIX& Medio PERM B</td><td>MultiSciences</td><td>GAS006/2</td><td></td></tr><tr><td>tampón de tinción por citometría de flujo</td><td>MultiSciences</td><td>S1001</td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount-G Medios de montaje fluorescentes</td><td>SourthernBiotech</td><td>0100-01</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo policlonal glutamina sintetasa</td><td>Proteintech Group, Inc</td><td>PTG-11037-2-AP-50ul</td><td></td></tr><tr><td>Cabra 324 Anti-Rabbit IgG H& L PE</td><td>Bioss</td><td>bs-0295G-PE</td><td></td></tr><tr><td>Cabra Anti- 323 Conejo IgG H& L FITC</td><td>Bioss</td><td>bs-0295G-FITC</td><td></td></tr><tr><td>Kit de tinción de hematoxilina-eosina (HE)</td><td>Solarbio</td><td>G1120</td><td></td></tr><tr><td>máquina de desinfección de alta presión</td><td>zealway(xiamen) instrument Inc</td><td>GI80DS</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio de fluorescencia invertida</td><td>Nikon&nbsp;</td><td></td><td></td>SMZ1500</tr><tr><td>Microscopio de contraste de fase invertida</td><td>Leica&nbsp;</td><td>Rectificador de entrada DMIL</td><td></td></tr><tr><td>canal de potasio 4.1 (Kir4.1)</td><td>Proteintech Group, Inc</td><td>12503-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Resina neutra</td> Solución de penicilina-estreptomicina <td>Solarbio</td><td>G8590-100</td><td></td></tr><tr><td>(100&veces;)</td>Solución salina tampón <td>de fosfato SV30010</td><td></td><td></td>hiclona</tr><tr><td>(PBS) (pH 7.2- 7.4)</td><td>Solarbio</td><td>P1020-500ml</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo secundario (anti-conejo de cabra marcado con FITC)</td><td>Servicebio</td><td>GB22303</td><td></td></tr><tr><td>ratas Sprague-Dawley&nbsp;</td><td>Animales Experimentales de Chengdu Dashuo Co., Ltd.</td><td>Número de licencia de producción: SCXK [Sichuan] 2020-0030</td><td></td></tr><tr><td>T25 Matraz de cultivo</td><td>Cornning&nbsp;</td><td></td><td></td>430639</tr><tr><td>Tubos Tornado: 15mL</td><td>WHB&nbsp;</td>Tubos de tornado <td>WHB-15-1</td><td></td></tr><tr><td>: 50 ml</td><td>de WHB</td><td>WHB-50-1</td><td></td></tr><tr><td>esterilizador de desinfección ultravioleta</td><td>GEMEISI</td><td>xd06</td><td></td></tr><tr><td>Vimentin</td><td>Abcam</td><td>ab92547</td><td></td></tr></tbody></table>

aislamiento y cultivo de células primarias de müller en la retina de ratas sprague-dawley (sd)

Isolation and Culture of Primary Retinal M&#252;ller Cells from Sprague-Dawley (SD) Rats

Después de que las células primarias se siembran en el matraz de cultivo, los cambios de medio y el paso posteriores ayudan a eliminar las RMC poco adherentes y eliminan los restos celulares generados durante el paso, enriqueciendo así la población de RMC en el cultivo. Las RMC se identificaron en función de su morfología utilizando un microscopio óptico invertido (Figura 1) y tinción con hematoxilina y eosina (H&amp;E) (Figura 2...

Aislamiento y cultivo de células primarias de Müller en la retina de ratas Sprague-Dawley (SD)

Retinal M&#252;ller cells (RMCs) play a crucial role in providing structural support and regulating various functions within the retina. As a core ...

isolation-culture-primary-retinal-mller-cells-from-sprague-dawley-sd

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

En este video, vamos a demostrar cómo aislar las células madre de la retina del epitelio ciliar del ojo del ratón y hacer crecer en cultivo de forma clonal esferas de retina. Las esferas que se encuentran aisladas poseen las propiedades cardinales de las células madre: la auto-renovación y multipotencialidad.

Aislamiento de células madre de la retina del ojo del ratón

Millones de personas sufren de enfermedades degenerativas retinianas que resultan en ceguera irreversible. Un elemento común de muchas de estas enfermedades es la pérdida de células ganglionares de la retina (RGCs). Este protocolo detallado describe el aislamiento de los RGC murinos primarios mediante selección positiva y negativa con citometría de flujo.

Aislamiento de células primarias de ganglio retiniano murino (RGC) por citometría de flujo

El epitelio retiniano del pigmento (RPE) es un epitelio de múltiples funciones del ojo. Aquí presentamos un protocolo para establecer cultivos celulares primarios derivados del RPE murino.

Cultivos celulares primarios de células del epitelio pigmentario de la retina del ratón

Este protocolo, que fue reportado originalmente por Fernandez-Godino et al. en 20161,describe un método para aislar eficientemente y cultivo de células RPE del ratón, que forman una monocapa RPE funcional y polarizada dentro de una semana en las placas Transwell. El procedimiento dura aproximadamente 3 horas.

Disección eficiente y cultivo de células epiteliales de pigmento retiniano de ratón primario

Este manuscrito describe un protocolo simplificado para el aislamiento de las células del epitelio pigmentado de la retina (EPR) de los ojos de ratón de una manera gradual. El protocolo incluye la enucleación y disección de los ojos del ratón, seguida del aislamiento, la siembra y el cultivo de células del EPR.

Aislamiento de células primarias del epitelio pigmentado de la retina del ratón

Este protocolo describe el procedimiento para obtener y cultivar células epiteliales pigmentarias primarias de la retina (EPR) a partir de ojos porcinos de origen local. Estas células sirven como una alternativa de alta calidad a las células madre y son adecuadas para la investigación in vitro de la retina.

Aislamiento de células epiteliales pigmentarias primarias de la retina porcina para modelado in vitro

Este manuscrito describe un protocolo detallado para aislar células de Müller gliales de la retina de ojos de ratón. El protocolo comienza con la enucleación y disección de los ojos de los ratones, seguida del aislamiento, la siembra y el cultivo de las células de Müller.

Aislamiento de células Müller gliales retinianas primarias de ratón

El epitelio pigmentario de la retina (EPR) actúa como una barrera crucial entre la coroides y la retina, promoviendo la salud y la función de los tipos de células de la retina, como los fotorreceptores. En este trabajo se describe un protocolo sencillo y eficaz para el aislamiento y cultivo de EPR murino adulto.

Un método simplificado para el aislamiento y cultivo de células epiteliales pigmentarias de la retina de ratones adultos

La disección y el crecimiento de las células de un área del cerebro individuales facilita la investigación de los parámetros celulares y fisiológicos. Se describe un método para el cultivo de células primarias que produce neuronas enriquecido las culturas en un ambiente libre de suero.

Cultivo primario de neuronas del hipocampo de ratas recién nacidas P0

Hepatocitos primarios proporcionará una herramienta valiosa para evaluar las funciones bioquímicas, moleculares y metabólicos en un sistema experimental fisiológicamente relevantes. Se describe un protocolo fiable para la rata en la perfusión del hígado in situ, que constantemente genera hepatocitos viables hasta to1.0 ×...

Aislamiento y cultivo primario de células hepáticas de ratas

Aprenda a aislar y cultivar células de Müller retinianas primarias de ratas Sprague-Dawley neonatales mediante digestión con tripsina y centrifugación. Este protocolo estandarizado alcanza alta pureza celular para investigar biología retiniana y modelar patologías oculares.

Aislamiento y cultivo de células primarias de Müller en la retina de ratas Sprague-Dawley (SD)

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