Name: Establecimiento y análisis histológico de organoides esofágicos que modelan la progresión de tejidos normales a cancerosos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Aprende a establecer y analizar organoides esofágicos que modelan la progresión tumoral desde tejidos normales hasta cancerosos mediante tinción de inmunofluorescencia multiplex. Este método permite estudiar cambios morfológicos y moleculares en cáncer.

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<ol><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+initiation+and+early+tumorigenesis%3A+Molecular+mechanisms+and+interventional+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Tumor initiation and early tumorigenesis: Molecular mechanisms and interventional targets.</a> Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 149(2024).</li>
<li>Sánchez-Danés, A., Blanpain, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deciphering+the+cells+of+origin+of+squamous+cell+carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Deciphering the cells of origin of squamous cell carcinomas.</a> Nat Rev Cancer. 18 (9), 549-561 (2018).</li>
<li>Abnet, C. C., Arnold, M., Wei, W. -Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+esophageal+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of esophageal squamous cell carcinoma.</a> Gastroenterology. 154 (2), 360-373 (2018).</li>
<li>Bray, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cancer+statistics+2022%3A+Globocan+estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Global cancer statistics 2022: Globocan estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA Cancer J Clin. 74 (3), 229-263 (2024).</li>
<li>Lin, D. -C., Wang, M. -R., Koeffler, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+and+epigenomic+aberrations+in+esophageal+squamous+cell+carcinoma+and+implications+for+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Genomic and epigenomic aberrations in esophageal squamous cell carcinoma and implications for patients.</a> Gastroenterology. 154 (2), 374-389 (2018).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+cells+activate+fibroblasts+to+promote+esophageal+cancer+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Epithelial cells activate fibroblasts to promote esophageal cancer development.</a> Cancer Cell. 41 (5), 903-918.e8 (2023).</li>
<li>Chang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+alterations+driving+precancerous+to+cancerous+lesions+in+esophageal+cancer+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Genomic alterations driving precancerous to cancerous lesions in esophageal cancer development.</a> Cancer Cell. 41 (12), 2038-2050.e5 (2023).</li>
<li>Lo, Y. -H., Karlsson, K., Kuo, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+organoids+for+cancer+biology+and+precision+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cancer%22%5BJournal%5D)">Applications of organoids for cancer biology and precision medicine.</a> Nat Cancer. 1 (8), 761-773 (2020).</li>
<li>Loewa, A., Feng, J. J., Hedtrich, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+disease+models+in+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Human disease models in drug development.</a> Nat Rev Bioeng. 1 (8), 545-559 (2023).</li>
<li>Tang, X. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+organoids+in+basic+research+and+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Human organoids in basic research and clinical applications.</a> Signal Transduct Target Ther. 7 (1), 168(2022).</li>
<li>Xu, H., Jiao, D., Liu, A., Wu, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+organoids%3A+Applications+in+cancer+modeling+and+potentials+in+precision+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Tumor organoids: Applications in cancer modeling and potentials in precision medicine.</a> J Hematol Oncol. 15 (1), 58(2022).</li>
<li>Yan, H. H. N., Chan, A. S., Lai, F. P. -L., Leung, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+cultures+for+cancer+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid cultures for cancer modeling.</a> Cell Stem Cell. 30 (7), 917-937 (2023).</li>
<li>Jiang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+mouse+and+human+oral+esophageal+organoids+to+investigate+the+tumor+immune+response%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Establishing mouse and human oral esophageal organoids to investigate the tumor immune response.</a> Dis Model Mech. 17 (1), dmm050319(2024).</li>
<li>Drost, J., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids+in+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Organoids in cancer research.</a> Nat Rev Cancer. 18 (7), 407-418 (2018).</li>
<li>Ko, K. -P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+genetic+determinants+driving+esophageal+squamous+cell+carcinoma+initiation+and+immune+evasion%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Key genetic determinants driving esophageal squamous cell carcinoma initiation and immune evasion.</a> Gastroenterology. 165 (3), 613-628.e20 (2023).</li>
<li>Kornepati, A. V. R., Vadlamudi, R. K., Curiel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+death+ligand+1+signals+in+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Programmed death ligand 1 signals in cancer cells.</a> Nat Rev Cancer. 22 (3), 174-189 (2022).</li>
<li>Jiang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+tumor+microenvironment+in+PD-L1%2FPD-1-mediated+tumor+immune+escape%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer%22%5BJournal%5D)">Role of the tumor microenvironment in PD-L1/PD-1-mediated tumor immune escape.</a> Mol Cancer. 18 (1), 10(2019).</li>
<li>Magré, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+organoid-immune+co-culture+models+for+cancer+research%3A+From+oncoimmunology+to+personalized+immunotherapies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunother+Cancer%22%5BJournal%5D)">Emerging organoid-immune co-culture models for cancer research: From oncoimmunology to personalized immunotherapies.</a> J Immunother Cancer. 11 (5), e006290(2023).</li>
<li>Kijima, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+organoids+reveal+therapy+resistance+of+esophageal+and+oropharyngeal+squamous+cell+carcinoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional organoids reveal therapy resistance of esophageal and oropharyngeal squamous cell carcinoma cells.</a> Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 7 (1), 73-91 (2019).</li>
<li>Fujii, M., Sekine, S., Sato, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoding+the+basis+of+histological+variation+in+human+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Decoding the basis of histological variation in human cancer.</a> Nat Rev Cancer. 24 (2), 141-158 (2024).</li>
<li>Zhao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Organoids.</a> Nat Rev Methods Primers. 2 (1), 94(2022).</li>
<li>Tong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+in+precision+cancer+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Med%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids in precision cancer medicine.</a> Med. 5 (11), 1351-1377 (2024).</li>
<li>Grönholm, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+for+precision+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids for precision cancer immunotherapy.</a> Cancer Res. 81 (12), 3149-3155 (2021).</li>
<li>Sun, C. -P., Lan, H. -R., Fang, X. -L., Yang, X. -Y., Jin, K. -T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+models+for+precision+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Organoid models for precision cancer immunotherapy.</a> Front Immunol. 13, 770465(2022).</li>
<li>Kobayashi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+and+contribution+of+cancer-associated+fibroblasts+in+colorectal+carcinogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">The origin and contribution of cancer-associated fibroblasts in colorectal carcinogenesis.</a> Gastroenterology. 162 (3), 890-906 (2022).</li>
<li>Du, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+stemness+of+cancer+stem+cells+to+fight+colorectal+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cancer+Biol%22%5BJournal%5D)">Targeting stemness of cancer stem cells to fight colorectal cancers.</a> Semin Cancer Biol. 82, 150-161 (2022).</li>
<li>Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+development+and+disease+with+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Modeling development and disease with organoids.</a> Cell. 165 (7), 1586-1597 (2016).</li>
<li>Camp, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+cerebral+organoids+recapitulate+gene+expression+programs+of+fetal+neocortex+development%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Human cerebral organoids recapitulate gene expression programs of fetal neocortex development.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (51), 15672-15677 (2015).</li>
<li>Lau, H. C. H., Kranenburg, O., Xiao, H., Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+models+of+gastrointestinal+cancers+in+basic+and+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Organoid models of gastrointestinal cancers in basic and translational research.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 17 (4), 203-222 (2020).</li>
<li>Han, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Landscape+of+human+organoids%3A+Ideal+model+in+clinics+and+research%5BTitle%5D)+AND+%22The+Innovation%22%5BJournal%5D)">Landscape of human organoids: Ideal model in clinics and research.</a> The Innovation. 5 (3), 100620(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.22 &mu; Filtro m</td><td>Merck</td><td>Cat#SLGPR33RB</td><td></td></tr><tr><td>placa de 24 pocillos</td><td>Corning</td><td>Cat#3524</td><td></td></tr><tr><td>4% Paraformaldehído</td><td>Beyotime</td><td>Cat# P0099</td><td></td></tr><tr><td>70 &mu; colador estéril Falcon</td><td></td><td>Cat#352350</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Tocris Bioscience</td><td>Cat# 2939</td><td></td></tr><tr><td>Advanced DMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>Cat# 12634028</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>Solarbio</td><td>Cat# A8190</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Anti (Antibiótico-Antimicótico)</td><td>Gibco</td><td>Cat# 15240062</td><td></td></tr><tr><td>suplemento B-27</td><td>Gibco</td><td>Cat# 17504044</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora de CO2</td><td>Thermo&nbsp;</td><td>Cat#371GPCN</td><td></td></tr><tr><td>Colgenasa IV</td><td>Gibco</td><td>Cat# 17104019</td><td></td></tr><tr><td>Cryostor</td><td>STEMCELL</td><td>Cat# 07930</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Corning</td><td>Cat# 10-013-CV</td><td></td></tr><tr><td>EGF</td><td>Gibco Cat</td><td># PHG0313</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Cell Technologies</td><td>Cat# 30070</td><td></td></tr><tr><td>G-418</td><td>Sigma</td><td>Cat# A1720</td><td></td></tr><tr><td>Gelatina</td><td>Solarbio</td><td>Cat# G8061</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>Cat# 35050061</td><td></td></tr><tr><td>Factor de crecimiento reducido Matrigel</td><td>Corning</td><td>Cat# 354230</td><td></td></tr><tr><td>Kit de tinción HE</td><td>Beijing Yili Fine Chemicals Co., Ltd</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Gibco</td><td>Cat# 15630080</td><td></td></tr><tr><td>Pluma histológica</td><td>Zsbio</td><td>Cat#ZLI-9305</td><td></td></tr><tr><td>Higromicina B</td><td>Sigma</td><td>Cat# 400050</td><td></td></tr><tr><td>Kit de tinción inmunohistoquímica</td><td>ZSGB-BIO</td><td>PV-8000</td><td></td></tr><tr><td>L-WRN</td><td>ATCC</td><td>CRL-3276; RRID:CVCL_DA06</td><td></td></tr><tr><td>Suplemento de N-2</td><td>Gibco</td><td>Cat# 17502048</td><td></td></tr><tr><td>Goma neutra&nbsp;</td><td>Zsbio</td><td>Cat#ZLI-9555</td><td></td></tr><tr><td>Opal 5-Color Manual IHC Kit</td><td>PANOVUE</td><td>Cat# 10144100100</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>MeilunBio</td><td>Cat#MA0015</td><td></td></tr><tr><td>Rabbit Monoclone anti-PD-L1</td><td>CST</td><td>Cat# 13684; RRID:AB_2687655</td><td></td></tr><tr><td>Conejo Policlonal anti-Ki67</td><td>Abcam</td><td>Cat# ab16667; RRID:AB_302459</td><td></td></tr><tr><td>Conejo Policlonal anti-KRT6A</td><td>Proteintech</td><td>Cat# 10590-1-AP; RRID: Suero de</td> oveja AB_2134306 <td></td></tr><tr><td></td><td>Zsbio</td><td>Cat#ZLI-9056</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express</td><td>Gibco</td><td>Cat# 12604021</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE-EDTA</td><td>Gibco</td><td>Cat#15400-054</td><td></td></tr><tr><td>Escáner de imágenes de portaobjetos completos</td><td>Hamamatsu</td><td>Cat#C13210</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>Selleck Chemicals</td><td>Cat# S1049</td><td></td></tr></tbody></table>

establecimiento y análisis histológico de organoides esofágicos que modelan la progresión de tejidos normales a cancerosos

Establishment and Histological Analysis of Esophageal Organoids Modeling the Progression from Normal to Cancerous Tissues

Este protocolo describe el muestreo de organoides y el análisis histológico en diferentes estadios de la tumorigénesis ESCC (Figura 1). Mediante el muestreo de mucosa esofágica normal, neoplasia intraepitelial de bajo grado (LGIN), neoplasia intraepitelial de alto grado (HGIN) y tejidos tumorales de pacientes con ESCC, se pueden construir organoides que representan diferentes etapas de la tumorigénesis. Además, se realizó la inclusión en parafina y el corte de estos organoides, seguido de la...

Establecimiento y análisis histológico de organoides esofágicos que modelan la progresión de tejidos normales a cancerosos

Organoids have emerged as a pivotal tool for advancing the understanding of tumorigenesis and cancer therapy. By generating human organoid models ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

Este manuscrito describe la producción, caracterización y usos potenciales de un constructo de ingeniería tisular esofágico 3D preparado a partir de fibroblastos humanos primarios normales de esófago y las células epiteliales escamosas sembradas dentro de un andamio-de cellularized porcino. Los resultados demuestran la formación de un epitelio estratificado maduro similar al esófago humano normal.

Producción, Caracterización y posibles usos de un Humano esofágica mucosas Modelo ingeniería tisular 3D

Este protocolo describe los métodos de subcultivo y criopreservación de organoides del adenocarcinoma de esófago con y sin digestión unicelular para permitir a los investigadores elegir estrategias apropiadas basadas en su diseño experimental.

Subcultivo y criopreservación de organoides del adenocarcinoma esofágico: pros y contras para la digestión unicelular

Este protocolo discute un enfoque para generar organoides epiteliales a partir de tejido mamario primario normal y tumoral a través de centrifugación diferencial. Además, se incluyen instrucciones para el cultivo tridimensional, así como imágenes inmunofluorescentes de organoides incrustados.

Generación y obtención de imágenes de organoides epiteliales humanos y de ratón a partir de tejido mamario normal y tumoral sin pasar

Este protocolo describe los pasos clave para generar y caracterizar organoides 3D oralesesofágicos murinos que representan lesiones de carcinoma de células escamosas normales, preneoplásicas y escamosas inducidas a través de carcinogénesis química.

Modelado del carcinoma de células escamosas oral-esofágico en organoides 3D

Los cocultivos organoide-fibroblastos proporcionan un modelo para estudiar el nicho de células madre in vivo . Aquí, se describe un protocolo para los cocultivos organoide-fibroblastos esofágicos. Además, se utilizan imágenes de montaje completo para visualizar la interacción fibroblasto-organoide.

Caracterización funcional y visualización de fibroblastos esofágicos mediante cocultivos organoides

Los organoides gástricos derivados de pacientes encuentran un uso cada vez mayor en la investigación, sin embargo, faltan protocolos formales para generar organoides gástricos humanos a partir de digestión de una sola célula con densidad de siembra estandarizada. Este protocolo presenta un método detallado para crear organoides gástricos de forma fiable a partir de tejido de biopsia obtenido durante la endoscopia superior.

Establecimiento y caracterización de organoides gástricos derivados de pacientes a partir de biopsias de cuerpo gástrico benigno y epitelio antral

Aquí, se proporciona un protocolo para el cultivo de organoides esofágicos humanos y el cultivo de interfaz aire-líquido. El cultivo de la interfaz aire-líquido de los organoides esofágicos se puede utilizar para estudiar el impacto de las citocinas en la barrera epitelial esofágica.

Modelos de cultivo celular tridimensional para investigar la barrera epitelial en la esofagitis eosinofílica 

Este protocolo describe un método para aislar simultáneamente organoides cancerosos, fibroblastos asociados al carcinoma (CAFs) y fibroblastos (CF) no asociados al tumor del mismo paciente con carcinoma escamoso esofágico (ESCC). El uso de estos materiales compatibles con pacientes podría evitar problemas derivados de la variabilidad entre pacientes y proporcionar una plataforma experimental adecuada para la investigación en ESCC.

Establecimiento de organoides tumorales, fibroblastos asociados al carcinoma y fibroblastos equivalentes del mismo paciente con cáncer de esófago

La presencia de células madre del cáncer (CSC) en sarcomas óseos se ha vinculado recientemente a su patogénesis. En este artículo, presentamos el aislamiento de células madre cancerosas a partir de cultivos celulares primarios obtenidos de biopsias humanas de osteosarcoma convencional (OS) utilizando la capacidad de las células madre cancerosas de crecer bajo condiciones no adherentes.

Establecimiento de Cultivos Celulares del Cáncer Humano de osteosarcoma convencional Tallo

Un modelo animal es necesario para descifrar el papel de las células del tumor (CTC) en la promoción de la colonización durante la metástasis del cáncer de pulmón en circulación. Aquí, hemos establecido y realizado con éxito un en vivo ensayo a prueba específicamente el requisito de fibronectina poliméricos (polyFN) Asamblea CTC para la colonización del pulmón.

El establecimiento de un ensayo de colonización pulmonar para la visualización de células tumorales en tejidos pulmonares de la circulación

Aprende a establecer y analizar organoides esofágicos que modelan la progresión tumoral desde tejidos normales hasta cancerosos mediante tinción de inmunofluorescencia multiplex. Este método permite estudiar cambios morfológicos y moleculares en cáncer.

Establecimiento y análisis histológico de organoides esofágicos que modelan la progresión de tejidos normales a cancerosos

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