Name: Mejora de la entrega y expresión génica mediante inyección intraósea de nanopartículas de quitosano Encapsulado en plásmidos de base de adenina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-16T14:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Aprende a mejorar la entrega de plásmidos al médula ósea mediante inyección intraósea de nanopartículas de quitosano encapsuladas. Este método logra alta eficiencia de transfección con mínimo daño biológico en ratones.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Tubos de PCR de 0,2 ml, tapón plano</td><td>LABSELECT</td><td>&nbsp; PT-02-C</td><td></td></tr><tr><td>Jeringa de 1 ml</td><td>Anhui Jiangnan equipo médico Co., LTD</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>1% de pentobarbital sódico</td><td>/</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Tubos de microcentrífuga de 1,5 ml</td><td>LABSELECT</td><td>MCT-001-150</td><td></td></tr><tr><td>10 &veces; Tampón de carga de ADN</td><td>Vazyme</td><td>P022-01</td><td></td></tr><tr><td>10X T4 T4 Tampón de ADN Ligasa 1 ml</td><td>TaKaRa Biotechnology (Dalian) Co., LTD</td><td>2011A</td><td></td></tr><tr><td>1250 &mu; l Punta de pipeta 102,1 mm</td><td>LABSELECT</td><td>T-001-1250</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; l Puntas de pipeta 50,55 mm</td><td>LABSELECT</td><td>&nbsp; T-001-200</td><td></td></tr><tr><td>2x Tampón Phanta Maxa</td><td>Vazyme</td><td>P505-d1</td><td></td></tr><tr><td>4 ? centrífuga</td><td>Termo Fisher</td><td>75002425</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de centrífuga de 50 ml</td><td>LABSELECT</td><td>T-012-50</td><td></td></tr><tr><td>Placas de cultivo celular de 6 pocillos</td><td>LABSELECT</td><td>11110</td><td></td></tr><tr><td>Agar-agar</td><td>Sangon Biotech</td><td>A505255-0250</td><td></td></tr><tr><td>Amperio</td><td>Abiowell</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Quitosano</td><td>Sangon Biotech</td><td>A600614-0500</td><td></td></tr><tr><td>Agitador de cultivo a temperatura constante</td><td>Shanghai Zhicheng Fabricación de instrumentos analíticos Co., LTD</td><td>ZWY-200D</td><td></td></tr><tr><td>Contador de células automatizado Countess</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Condesa II/II FL</td><td></td></tr><tr><td>Portaobjetos y soporte para cámara de recuento de células Countess, desechables</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>C10228</td><td></td></tr><tr><td>Tampón CutSmart</td><td>Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra</td><td>B7204SVIAL</td><td></td></tr><tr><td>DH5 y alfa;</td><td>Biosistemas generales</td><td>CS01010</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>C11995500BT</td><td></td></tr><tr><td>Mezcla dNTP</td><td>Vazyme</td><td>P505-d1</td><td></td></tr><tr><td>Enzima Esp3I</td><td>NEBiolabs</td><td>R0734S</td><td></td></tr><tr><td>Ácido etilendiaminotetraacético</td><td>VETEC (sigma-aldrich)</td><td>V900106</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>OriCell</td><td>FBSAD-01011-500</td><td></td></tr><tr><td>Citómetro de flujo</td><td>BD FACSCalibur</td><td>342975</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de flujo</td><td>Biotecnología Beyotime</td><td>FFC005-1de bolsa</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio de fluorescencia</td><td>Leica</td><td>427019</td><td></td></tr><tr><td>Kit de purificación Gel Maxi</td><td>TIANGEN</td><td>DP210</td><td></td></tr><tr><td>Kit de extracción de ADN genómico</td><td>TIANGEN</td><td>DP304</td><td></td></tr><tr><td>Ácido acético glacial</td><td>Corporación del Grupo Farmacéutico Nacional de China</td><td>10000218</td><td></td></tr><tr><td>Marcador de ADN GoldBand DL2,000</td><td>SÍEN</td><td>10501ES60</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de hielo</td><td>Shanghaizhengqiao</td><td>BNS-30</td><td>Laboratorio reservado</td></tr><tr><td>Búfer ImunoSep</td><td>Precision Biomedicals Co., LTD</td><td>604050</td><td></td></tr><tr><td>Megafuge 8 Serie de centrífugas de sobremesa pequeñas</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>75004250</td><td></td></tr><tr><td>MEM</td><td>Tecnología de la vida</td><td>11140050</td><td></td></tr><tr><td>NanoDrop 2000&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific, Estados Unidos</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaOH</td><td>SIGAM</td><td>S5881-500G</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>XiGene</td><td>XG3650</td><td></td></tr><tr><td>Vector PCMV-SPRY-ABE8E</td><td>/</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Aparato de amplificación de PCR</td><td>Termo Fisher</td><td>AKC96300441</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina/Estreptomicina</td><td>Solarbio</td><td>P1400</td><td></td></tr><tr><td>peptona</td><td>Sangon Biotech</td><td>A505247-0500</td><td></td></tr><tr><td>ADN polimerasa de superfidelidad Phanta Max</td><td>Vazyme</td><td>P505-d1</td><td></td></tr><tr><td>Lisado de glóbulos rojos</td><td>Tiempo de beyo.</td><td>C3702</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de sodio</td><td>Corporación del Grupo Farmacéutico Nacional de China</td><td>10019318</td><td></td></tr><tr><td>Sulfato de sodio</td><td>Aladdin</td><td>S433911</td><td></td></tr><tr><td>T-001-10 10&mu; l Puntas de pipeta 31,65 mm</td><td>LABSELECT</td><td>&nbsp; T-001-10</td><td></td></tr><tr><td>ADN ligasa T4</td><td>TaKaRa Biotechnology (Dalian) Co., LTD</td><td>2011A</td><td></td></tr><tr><td>Tris</td><td>BioFroxx</td><td>1115KG001</td><td></td></tr><tr><td>Triptona</td><td>Sangon Biotech</td><td>A505250-0500</td><td></td></tr><tr><td>Mezclador de vórtice</td><td>sigma</td><td>Z258423</td><td></td></tr><tr><td>Baño de agua</td><td>Shanghaiyiheng</td><td>DK-80</td><td></td></tr><tr><td>YeaRed Tinción en gel de ácido nucleico</td><td>SÍEN</td><td>10203ES76</td><td></td></tr><tr><td>Extracto de levadura</td><td>BBI</td><td>A610961-0500</td><td></td></tr><tr><td>Zetasizer Nano</td><td>Malvern Panalytical</td><td>Zetasizer Nano ZS</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-mercaptoetanol&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>444203</td><td></td></tr></tbody></table>

mejora de la entrega y expresión génica mediante inyección intraósea de nanopartículas de quitosano encapsulado en plásmidos de base de adenina

Enhanced Gene Delivery and Expression using Intraosseous Injection of Chitosan Nanoparticles Encapsulated Adenine Base Editor Plasmids

Los plásmidos in vitro se inyectaron en ratones mediante inyección intraósea (Figura 1A). El tamaño medio de partícula de las nanopartículas fue de unos 202,9 nm, el potencial fue de 2,77 mV y el PDI fue de 0,22 (Figura 1B). La Figura 1C muestra la forma de la superficie de las nanopartículas observadas como esféricas por microscopía electrónica. La Figura 1D m...

Mejora de la entrega y expresión génica mediante inyección intraósea de nanopartículas de quitosano Encapsulado en plásmidos de base de adenina

The delivery of exogenous plasmids into experimental animals is crucial in biomedical research, including the investigation of gene functions, the ...

enhanced-gene-delivery-expression-using-intraosseous-injection

Research

Investigación

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Bioengineering

Bioingeniería

En la transfección in vivo de ADN desnudo por la entrega de genes hidrodinámico introduce genes en el tejido de un animal con una respuesta inflamatoria mínima. Cantidades suficientes de producto génico se generan de tal manera que la función y regulación, así como la estructura y la función de la proteína del gen pueden ser analizados.

Expresión transitoria de proteínas por hidrodinámico entrega de genes en ratones

Estos estudios informan sobre la unión reversible de vectores de genes adenovirales a superficies metálicas sin recubrimiento de stents y discos de malla modelo. La liberación sostenida de partículas virales competentes para la transducción, supeditada a la hidrólisis de los reticulantes utilizados para la inmovilización de vectores, da como resultado una expresión duradera del transgén específico del sitio en las células vasculares y en las arterias con stents.

Transferencia génica vascular de Stent metálico superficies utilizando Adenoviral Vectores anclada a través hidrolizables reticulantes

La diferenciación de las células precursoras en osteoclastos está regulada por citocinas y factores de crecimiento. En este trabajo se describe una nueva técnica de transferencia génica para la diferenciación de osteoclastos in vivo y protocolos de cultivo celular para diferenciar células precursoras en osteoclastos in vitro como método para estudiar los efectos de las citocinas en la osteoclastogénesis.

A Novel In vivo Técnica de transferencia de genes y In vitro ensayos basados ​​en células para el estudio de la pérdida ósea en los trastornos musculoesqueléticos

Este protocolo describe un sistema de trasplante de células utilizando esferoides inyectables modificados genéticamente. Los esferoides celulares se cultivan en placas de cultivo con micropatrones y se recuperan después de la introducción del gen utilizando nanomicelas poliplex. Este sistema facilita la expresión prolongada de transgenes de las células trasplantadas en los animales huéspedes, manteniendo la función innata de las células.

La transfección de genes hacia células Esferoide sobre placas micropatterned Cultura para el trasplante de células genéticamente modificadas

Los métodos existentes para la modificación de plantas tienen una aplicabilidad limitada. La novedosa tecnología derivada de péptidos propuesta aquí promete simplicidad y eficiencia en la introducción de proteínas o genes exógenos en los compartimentos intracelulares deseados de plantas intactas.

Péptido derivado Método para el transporte de genes y proteínas a través de celular y Barreras Organellar en Plantas

Este protocolo es una alternativa rentable para expresar ADN plasmídico desnudo en la piel del ratón. El objetivo general del protocolo es para suministrar genes relacionados con la inmunidad en el tejido de la piel para delinear el papel funcional de un gen específico en la inflamación cutánea.

Desarrollo de un sistema de entrega de ADN económico por &quot;Acufection&quot; y su aplicación a la investigación de la piel

Este protocolo describe un método para inyectar ADN plásmido en el riñón de ratón a través de la pelvis renal para producir la expresión del transgen específicamente en el riñón.

Inyección hidrodinámica la Pelvis Renal para la no expresión de proteínas en el riñón

Este método describe la colocación de injertos de interposición de la vena en conejos, la transducción de los injertos y el logro de la expresión del transgen resistente. Esto permite la investigación de funciones fisiológicas y patológicas de los transgenes y sus productos proteicos en las venas injertadas y pruebas de terapias genéticas para la enfermedad de injerto de vena.

Un modelo de conejo de expresión del transgen Durable en la vena yugular a los injertos de interposición de la arteria carótida común

La utilización de un modelo tumoral autóctono inmunocompetente impulsado por mutaciones comunes de los pacientes para las pruebas preclínicas es fundamental para las pruebas inmunoterapéuticas. Este protocolo describe un método para generar modelos de ratón con tumores cerebrales utilizando la administración de ADN plasmídico basado en electroporación que representa mutaciones comunes de los pacientes, proporcionando así un modelo de ratón preciso, reproducible y consistente.

Modelado de tumores cerebrales in vivo mediante la administración basada en electroporación de ADN plasmídico que representa las firmas de mutación del paciente

Este protocolo describe cómo la inyección intraesplénica de ARN de horquilla pequeña administrado por AAV8 logra la misma eficiencia de eliminación de genes en el hígado que la inyección de vena porta, lo que representa un procedimiento más simple con mortalidad y complicaciones perioperatorias y postoperatorias mucho más bajas.

Eliminación eficiente de genes en el hígado a través de la inyección intraesplénica de ARN de horquilla pequeña administrado por virus adenoasociados al serotipo 8 (AAV8)

Este protocolo tiene como objetivo introducir un método para producir y purificar biomiméticos extracelulares derivados de células madre mesenquimales (MSC) para la terapia génica. La nanovesícula está confinada con bicapas lipídicas derivadas de MSC y encapsula los AAVs recombinantes que portan el gen de interés en la luz. Esta nanovesícula ofrece un vector mejorado para la entrega de genes in vivo .

Desarrollo de nanovesículas envueltas en membrana de células madre mesenquimales para mejorar la entrega génica

Aprende a mejorar la entrega de plásmidos al médula ósea mediante inyección intraósea de nanopartículas de quitosano encapsuladas. Este método logra alta eficiencia de transfección con mínimo daño biológico en ratones.

Mejora de la entrega y expresión génica mediante inyección intraósea de nanopartículas de quitosano Encapsulado en plásmidos de base de adenina (Video) | JoVE Journal

Mejora de la entrega y expresión génica mediante inyección intraósea de nanopartículas de quitosano Encapsulado en plásmidos de base de adenina

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