Name: In vivo Aplicación del etiquetado de proximidad basado en TurboID en Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Aprende el etiquetado de proximidad con TurboID para mapear interacciones proteicas en células germinales de Drosophila melanogaster. Este método identifica interactores conocidos y novedosos de zucchini.

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<ol><li>Kim, D. I., Roux, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Filling+the+void%3A+Proximity-based+labeling+of+proteins+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Trend+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Filling the void: Proximity-based labeling of proteins in living cells.</a> Trend Cell Biol. 26 (11), 804-817 (2016).</li>
<li>Mair, A., Xu, S. L., Branon, T. C., Ting, A. Y., Bergmann, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling+of+protein+complexes+and+cell-type-specific+organellar+proteomes+in+Arabidopsis+enabled+by+turboid%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling of protein complexes and cell-type-specific organellar proteomes in Arabidopsis enabled by turboid.</a> eLife. 8, e47864(2019).</li>
<li>Qi, Y., Katagiri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+low-abundance+Arabidopsis+plasma-membrane+protein+complexes+and+identification+of+candidate+components%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Purification of low-abundance Arabidopsis plasma-membrane protein complexes and identification of candidate components.</a> Plant J. 57 (5), 932-944 (2009).</li>
<li>Branon, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+proximity+labeling+in+living+cells+and+organisms+with+turboid%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Efficient proximity labeling in living cells and organisms with turboid.</a> Nat Biotechnol. 36 (9), 880-887 (2018).</li>
<li>Rhee, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+mapping+of+mitochondria+in+living+cells+via+spatially+restricted+enzymatic+tagging%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Proteomic mapping of mitochondria in living cells via spatially restricted enzymatic tagging.</a> Science. 339 (6125), 1328-1331 (2013).</li>
<li>Roux, K. J., Kim, D. I., Raida, M., Burke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+promiscuous+biotin+ligase+fusion+protein+identifies+proximal+and+interacting+proteins+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A promiscuous biotin ligase fusion protein identifies proximal and interacting proteins in mammalian cells.</a> J Cell Biol. 196 (6), 801-810 (2012).</li>
<li>Quantitative Proteomics. , 
 <a target="_blank" href="https://case.edu/medicine/nutrition/centers-and-collaborations/case-center-proteomics-and-bioinformatics/proteomics-and-small-molecule-mass-spectrometry-core/quantitative-proteomics">https://case.edu/medicine/nutrition/centers-and-collaborations/case-center-proteomics-and-bioinformatics/proteomics-and-small-molecule-mass-spectrometry-core/quantitative-proteomics</a> (2025).</li>
<li>Udeshi, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibodies+to+biotin+enable+large-scale+detection+of+biotinylation+sites+on+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Meth%22%5BJournal%5D)">Antibodies to biotin enable large-scale detection of biotinylation sites on proteins.</a> Nat Meth. 14 (12), 1167-1170 (2017).</li>
<li>Ummethum, H., Hamperl, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling+techniques+to+study+chromatin%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Genet%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling techniques to study chromatin.</a> Front Genet. 11, 450(2020).</li>
<li>Han, S., Li, J., Ting, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling%3A+Spatially+resolved+proteomic+mapping+for+neurobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling: Spatially resolved proteomic mapping for neurobiology.</a> Curr Opin Neurobiol. 50, 17-23 (2018).</li>
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<li>Zamudio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation+restrains+transposons+from+adopting+a+chromatin+signature+permissive+for+meiotic+recombination%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">DNA methylation restrains transposons from adopting a chromatin signature permissive for meiotic recombination.</a> Genes Dev. 29 (12), 1256-1270 (2015).</li>
<li>Cha, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+modulation+of+gsto+activity+rescues+fus-associated+neurotoxicity+via+deglutathionylation+in+als+disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Therapeutic modulation of gsto activity rescues fus-associated neurotoxicity via deglutathionylation in als disease models.</a> Dev Cell. 57 (6), 783-798.e8 (2022).</li>
<li>Pulver, S. R., Berni, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fundamentals+of+flying%3A+Simple+and+inexpensive+strategies+for+employing+Drosophila+genetics+in+neuroscience+teaching+laboratories%5BTitle%5D)+AND+%22J+Undergrad+Neurosci+Educ%22%5BJournal%5D)">The fundamentals of flying: Simple and inexpensive strategies for employing Drosophila genetics in neuroscience teaching laboratories.</a> J Undergrad Neurosci Educ. 11 (1), A139-A148 (2012).</li>
<li>Feizy, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+identification+of+Drosophila+rhodopsin+interaction+partners+by+biotin+proximity+labeling%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">In vivo identification of Drosophila rhodopsin interaction partners by biotin proximity labeling.</a> Sci Rep. 14 (1), 1986(1986).</li>
<li>Zhang, B., Zhang, Y., Liu, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+effective+proximate+labeling+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22G3%22%5BJournal%5D)">Highly effective proximate labeling in Drosophila.</a> G3. 11 (5), jkab077(2021).</li>
<li>Hudson, A. M., Cooley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+studying+oogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Methods for studying oogenesis.</a> Methods. 68 (1), 207-217 (2014).</li>
<li>Waring, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphogenesis+of+the+eggshells+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Cytol%22%5BJournal%5D)">Morphogenesis of the eggshells in Drosophila.</a> Int Rev Cytol. 198, 67-108 (2000).</li>
<li>Weil, T. T., Parton, R. M., Davis, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparing+individual+drosophila+egg+chambers+for+live+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Preparing individual drosophila egg chambers for live imaging.</a> J Vis Exp. (60), e3679(2012).</li>
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<li>Ahmadi, S., Winter, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+poly%28ethylene+glycol%29+and+poly%28ethylene+glycol%29-based+detergents+using+peptide+search+engines%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Identification of poly(ethylene glycol) and poly(ethylene glycol)-based detergents using peptide search engines.</a> Anal Chem. 90 (11), 6594-6600 (2018).</li>
<li>Zada, A., Khan, I., Zhang, M., Cheng, Y., Hu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airid-based+proximity+labeling+for+protein-protein+interaction+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Airid-based proximity labeling for protein-protein interaction in plants.</a> J Vis Exp. (187), e64428(2022).</li>
<li>Fang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lowering+sample+requirements+to+study+tyrosine+kinase+signaling+using+phosphoproteomics+with+the+tmt+calibrator+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Proteomics%22%5BJournal%5D)">Lowering sample requirements to study tyrosine kinase signaling using phosphoproteomics with the tmt calibrator approach.</a> Proteomics. 20 (24), 2000116(2020).</li>
<li>Park, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-stage+tip+method+for+tmt-based+proteomic+analysis+of+a+minimal+amount+of+cells%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">One-stage tip method for tmt-based proteomic analysis of a minimal amount of cells.</a> ACS Omega. 8 (22), 19741-19751 (2023).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turboid-based+proximity+labeling+for+in+planta+identification+of+protein-protein+interaction+networks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Turboid-based proximity labeling for in planta identification of protein-protein interaction networks.</a> J Vis Exp. (159), e60728(2020).</li>
<li>Trinkle-Mulcahy, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+proximity-based+labeling+methods+for+interactome+mapping%5BTitle%5D)+AND+%22F1000Res%22%5BJournal%5D)">Recent advances in proximity-based labeling methods for interactome mapping.</a> F1000Res. 8, Faculty Rev-135 F1000(2019).</li>
<li>Wei, X. F., Li, S., Hu, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+turboid-based+proximity+labelling+approach+for+identifying+the+DNA-binding+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">A turboid-based proximity labelling approach for identifying the DNA-binding proteins.</a> STAR Protoc. 4 (1), 102139(2023).</li>
<li>Bosch, J. A., Chen, C. L., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity-dependent+labeling+methods+for+proteomic+profiling+in+living+cells%3A+An+update%5BTitle%5D)+AND+%22WIREs+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Proximity-dependent labeling methods for proteomic profiling in living cells: An update.</a> WIREs Dev Biol. 10 (1), e392(2021).</li>
<li>Rayaprolu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+type-specific+biotin+labeling+in+vivo+resolves+regional+neuronal+and+astrocyte+proteomic+differences+in+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Cell type-specific biotin labeling in vivo resolves regional neuronal and astrocyte proteomic differences in mouse brain.</a> Nat Commun. 13, 2927(2022).</li>
<li>Uckun, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+profiling+of+the+alk+proximitome+in+the+developing+Drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">In vivo profiling of the alk proximitome in the developing Drosophila brain.</a> J Mol Biol. 433 (23), 167282(2021).</li>
<li>Xiong, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+proteomic+mapping+through+gfp-directed+proximity-dependent+biotin+labelling+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">In vivo proteomic mapping through gfp-directed proximity-dependent biotin labelling in zebrafish.</a> Elife. 10, e64631(2021).</li>
<li>Holzer, E., Rumpf-Kienzl, C., Falk, S., Dammermann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+turboid+approach+identifies+tissue-specific+centriolar+components+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">A modified turboid approach identifies tissue-specific centriolar components in C. elegans.</a> PLoS Genet. 18 (4), e1010150(2022).</li>
<li>Artan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactome+analysis+of+Caenorhabditis+elegans+synapses+by+turboid-based+proximity+labeling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Interactome analysis of Caenorhabditis elegans synapses by turboid-based proximity labeling.</a> J Biol Chem. 297 (3), 101094(2021).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turboid-based+proximity+labeling+reveals+that+ubr7+is+a+regulator+of+n+nlr+immune+receptor-mediated+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Turboid-based proximity labeling reveals that ubr7 is a regulator of n nlr immune receptor-mediated immunity.</a> Nat Comm. 10 (1), 3252(2019).</li>
<li>Baumgartner, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+zad+zinc+finger+protein+kipferl+guides+rhino+to+pirna+clusters%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">The Drosophila zad zinc finger protein kipferl guides rhino to pirna clusters.</a> eLife. 11, e80067(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td><fuerte>Anticuerpos</fuerte></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo secundario anti-IgG (H+L) anti-cabra de cabra, HRP</td><td>Invitrogen</td><td>31430</td><td>Anticuerpo secundario de grado analítico,</td></tr><tr><td>anti-IgG (H+L) anti-conejo de cabra altamente adsorbida de forma cruzada, alexa fluor plus 488</td><td>Invitrogen</td><td>A32731</td><td>Anticuerpo secundario de grado analítico, anti-IgG</td></tr><tr><td>(H+L) de cabra sensible a la luz, HRP</td><td>Invitrogen</td><td>31460</td><td>Grado analítico,</td></tr><tr><td>anticuerpo HSP90</td> sensible a la luz (conejo)<td>Tecnología de señalización celular</td><td>4874</td><td>Anticuerpo policlonal</td></tr><tr><td>Pierce Proteína de estreptavidina, HRP</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>21126</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Estreptavidina, Alexa Fluor 594 conjugado</td><td>Invitrogen</td><td>S11227</td><td>Sensible a la luz, grado analítico</td></tr><tr><td>Anticuerpo V5-tag (ratón)</td><td>Invitrogen</td><td>R960-25</td><td>Anticuerpo monoclonal</td></tr><tr><td>Anticuerpo V5-tag (conejo) (D3H8Q)</td><td>Tecnología de señalización celular</td><td>13202</td><td>Anticuerpo monoclonal</td></tr><tr><td>Fly Lines</td><td>Company</td><td>Número de catálogo</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>pUASp Tom20 V5-TurboID/ TM3</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2373-2</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>pUASp Zucchini V5-TurboID/Cyo</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2188</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>pUASP_attB_V5-TurboID-NES/Cyo</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2635-4</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>w[*]; P{w[+mC]=matalpha4-GAL-VP16}V2H</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>7062</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>Equipments and Consummables</td><td>Company</strong</td><td>>Número de catálogo</strong</td><td>>Comments/Description</td></tr><tr><td>Analytical Balance</td><td>Mettler</td><td>Toledo ME204</td><td>0.1 mg legibilidad</td></tr><tr><td>Membranas de transferencia Western de nitrocelulosa Amersham Protran 0.45 NC (300 mm y tiempos; 4 m)</td><td>Cytiva</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>10600002-Axygen 1.7 mL MaxyClear Snaplock Microcentrifuge Tube</td><td>Corning</td><td>MCT-175-C</td><td>Copolímero</td></tr><tr><td>MARCA&nbsp; Cubierta de vidrio (22 mm x 22 mm)</td>Puntas de pipeta a granel <td>de vidrio de borosilicato</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>BR470055 (10 &micro; L)</td> Puntas de pipeta a granel de <td>propileno</td> <td>Vertex</td><td>4110N00</td></tr><tr><td>(1000 &micro; L)</td> Puntas de pipeta a granel de <td>propileno</td> <td>Vertex</td><td>4330N00</td></tr><tr><td>(200 &micro; L)</td><td>Vertex</td><td>4230N00</td> Placa de cultivo celular <td>de propileno</td></tr><tr><td>(96 pocillos)</td><td>SPL</td><td>300096</td><td>Poliestireno, centrífuga de fondo plano</td></tr><tr><td>(con rotor del tamaño de un tubo de 1,5-2 ml)</td><td>Eppendorf</td><td>5424 R</td><td>Centrífuga refrigerada de ángulo fijo</td></tr><tr><td>(con rotor del tamaño de un tubo de 5 ml)</td><td>Eppendorf</td><td>5425 R</td><td>Cuchara química refrigerada de ángulo fijo</td></tr> <tr><td></td><td>-</td><td>- </td><td>Sistema</td></tr> de <tr><td>imágenes ChemiDoc</td> de acero inoxidable Sistema de imágenes <td>Biorad</td><td>12003153</td><td>Western blot</td></tr><tr><td>CO2 almohadilla de mosca</td><td>-</td><td>-</td><td>Placa anestésica</td></tr><tr><td>CO2 tanque y regulador</td><td>-</td><td>-</td><td>Precaución de gas a alta presión y mareos</td></tr><tr><td>Incubadora compacta</td><td>JSR JSGI-10T</td><td></td><td>Precaución de alta temperatura</td></tr><tr><td>Microscopio de barrido láser confocal</td><td>Zeiss</td><td>LSM 710</td><td>Precaución con el rayo láser intenso</td></tr><tr><td>Tubo cónico (15 mL)</td><td>SPL</td><td>50015</td><td>Polipropileno /Polietileno de alta densidad&nbsp;</td></tr><tr><td>Tubo cónico (50 mL)</td><td>SPL</td><td>50050</td><td>Polipropileno /Polietileno de alta densidad&nbsp;</td></tr><tr><td>Balanza digital</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>Temporizador digital</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>Plato de disección</td><td>-</td><td>-</td><td>Pinzas</td></tr><tr><td>de #5SF Dumont de</td> silicona<td>Herramientas de ciencia fina</td><td>11252-00</td><td>Puntas súper finas, precaución de objetos afilados</td></tr><tr><td>Imán DynaMag-2</td><td>Invitrogen</td><td>12321D</td><td>Para tubos de microcentrífuga de tamaño 1.5-2 mL</td></tr><tr><td>Fisherbrand&nbsp; Portaobjetos de microscopio Superfrost Plus (25 mm x 75 mm)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td>Precaución con objetos afilados</td></tr><tr><td>Botellas de comida para moscas (con tapón de papel)</td><td>Hansol Tech</td><td>FFB-21010-Viales</td> <td>de</td></tr> <tr><td>comida para moscas (con tapón de algodón)</td><td>Hansol Tech</td><td>FFV-11010-Ultrasonido</td><td></td></tr> <tr><td>focalizado</td><td>Covaris</td><td>M220</td><td>Precaución con las ondas ultrasónicas</td></tr><tr><td>Cuchillo de gel</td><td>Invitrogen</td><td>EI9010</td><td>Acero inoxidable con mango de plástico</td></tr><tr><td>Papel secante Chr de grado 3MM (46 cm y tiempos; 57 cm)</td><td>Cytiva</td><td>3030-917</td><td>Papel Whatmann</td></tr><tr><td>Homogeneizador de mano y mortero de plástico</td><td>Kimble</td><td>749540-0000</td><td>Motor inalámbrico</td></tr><tr><td>Bloque de calor</td><td>PCR fina</td><td>ALB6400</td><td>Precaución con el</td></tr><tr><td>tejido sin pelusa</td> a alta temperatura <td>Yuhan-Kimberly</td><td>41112</td><td>- </td></tr><tr><td>Nitrógeno líquido</td><td>-</td><td>-</td><td>Precaución de congelación y quemadura</td></tr><tr><td>Espectrofotómetro de microplacas</td><td>Agilent Technologies</td><td>Epoch</td><td>Óptica basada en monocromador</td></tr><tr><td>Microondas</td><td>-</td><td>-</td><td>Precaución de alta temperatura</td></tr><tr><td>miliTUBE 1 mL fibra AFA</td><td>Covaris</td><td>PN 520135</td><td>Vidrio</td></tr><tr><td>Mini tanque de gel</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A25977</td><td>Precaución con</td></tr><tr><td>los geles de proteína mini NuPAGE Bis-tris de alta temperatura, 4&ndash; 12%, 1.0&ndash; 1,5 mm, 10 pocillos</td><td>Invitrogen</td><td>NP0323BOX</td><td>Contienen poliacrilamida, precaución de toxicidad</td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-tris mini geles proteicos, 4&ndash; 12%, 1.0&ndash; 1,5 mm, 15 pocillos</td><td>Invitrogen</td><td>NP0321BOX</td><td>Contiene poliacrilamida, precaución con la toxicidad</td></tr><tr><td>Pincel (&Oslash; 1,8 mm)</td><td>Hwa hong</td><td>791240-Pipetman</td><td></td></tr> <tr><td>L (P1000L)</td><td>Gilson</td><td>FA10006M</td><td>Micropipeta monocanal con eyector de metal</td></tr><tr><td>Pipetman L (P200L)</td><td>Gilson</td><td>FA10005M</td><td>Micropipeta monocanal con eyector de metal</td></tr><tr><td>Pipetman L ( P20L)</td><td>Gilson</td><td>FA10003M</td><td>Micropipeta monocanal con eyector metálico</td></tr><tr><td>Pipetman L (P2L)</td><td>Gilson</td><td>FA10001M</td><td>Micropipeta monocanal con eyector metálico</td></tr><tr><td>Fuente de alimentación</td><td>Major science</td><td>MP-310</td><td>Precaución con la electricidad de alto voltaje</td></tr><tr><td>Rotador programable</td><td>Biosan</td><td>RS-24-Protein</td><td></td></tr> <tr><td>LoBind&nbsp; tubos</td><td>Eppendorf</td><td></td> <td>30108302-Hoja de</td></tr> <tr><td>afeitar</td><td>Dorco</td><td>304020</td><td>Acero inoxidable, precaución con objetos afilados</td></tr><tr><td>Rodillo</td><td>-</td><td>--</td><td></td></tr> <tr><td>Pipeta serológica (10 ml)</td><td>SPL</td><td>91010</td> Pipeta serológica de <td>poliestireno</td></tr><tr><td>(25 ml)</td><td>SPL</td><td>91025</td> Pipeta serológica de <td>poliestireno</td></tr><tr><td>(5 ml)</td><td>SPL</td><td>91005</td> Pipeta serológica de <td>poliestireno</td></tr><tr><td>(50 ml)</td><td>SPL</td><td>91050</td><td></td></tr><tr><td>Tubos de microcentrífuga de baja retención con tapón a presión de poliestireno (1,5 ml)</td><td>Thermo Scientific</td><td>3451PK</td><td></td></tr><tr><td>Almohadilla de esponja</td> de polipropileno <td>Invitrogen</td><td>EI9052-Microscopio</td><td></td></tr> <tr><td>estereoscópico</td><td>Zeiss</td><td>Stemi 508</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ThermoMixer&nbsp; C</td><td>Eppendorf</td><td>5382000015</td><td>Con bloques de 1,5 y 5 ml</td></tr><tr><td>Pinzas</td><td>Aven Tools</td><td>18526</td><td>Plástico, puntas planas</td></tr><tr><td>Mezclador de vórtice</td><td>Scientific Industries</td><td>SI-0236-XCell</td><td></td></tr> <tr><td>II Módulo de transferencia</td><td>Invitrogen</td><td>EI9051</td><td>Precaución con altas temperaturas</td></tr><tr><td>XCell&nbsp; Minicelda SureLock</td><td>Invitrogen</td><td>EI0001</td><td>Precaución de alta temperatura</td></tr><tr><td>Chemicals</td><td>Company</td><td>Número de catálogo</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>Acetone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>650501</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Acetonitrilo</td><td>Supelco</td><td>1.00029.1000</td><td>Grado LC-MS, precaución con la toxicidad por inhalación y</td></tr><tr><td>ampollas estándar de albúmina inflamables (que contienen albúmina de suero bovino (BSA) a 2 mg/ml en solución salina al 0,9 % y azida sódica al 0,05 %)</td><td>Thermo Scientific</td><td>23209</td><td>Parte de los kits de ensayo de proteínas Pierce BCA (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Albúmina, suero bovino</td><td>Bioshop</td><td>ALB001</td><td></td></tr><tr><td>Bicarbonato de amonio</td> de grado analítico <td>Sigma-Aldrich</td><td>09830</td><td>Biotina de grado analítico</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B4639</td><td>Grado de cultivo de células y tejidos</td></tr><tr><td>Cloruro de calcio (CaCl2)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5670</td><td>Grado de cultivo celular</td></tr><tr><td>Sustrato ECL occidental de claridad</td><td>Biorad</td><td>1705060</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MBD0015</td><td></td></tr><tr><td>Ditiothreitol (DTT)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>R0861</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Corning</td><td>35-015-CV Grado de</td><td>cultivo celular</td></tr><tr><td>Ácido fórmico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0507</td><td>Grado reactivo, precaución de toxicidad por inhalación</td></tr><tr><td>Medio de insectos</td> de <td>Grace Gibco</td><td>11595030</td><td>Grado de cultivo celular</td></tr><tr><td>Levadura seca instantánea</td><td>Sin marca</td><td>N1019</td><td>-</td></tr><tr><td>Yodoacetamida</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I1149</td> Metanol <td>sensible a la luz de grado analítico</td></tr><tr><td></td><td>Carlo Erba</td><td>41484</td><td>Esmalte</td></tr> <tr><td>de</td> <td>uñas</td> <td>de</td> grado analítico - <td>Tampón de</td></tr><tr><td>muestra Novex Tris-glycine SDS de tipo transparente (2X)</td><td>Invitrogen</td><td>LC2676</td><td></td></tr><tr><td>Tampón de funcionamiento NuPAGE MOPS SDS (20X)</td><td>Invitrogen</td><td>NP0001</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>PageRuler Escalera de proteínas pretipificadas</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>26616</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Fluoruro de fenilmetanosulfonilo</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>36978</td><td></td></tr><tr><td>Tampón de fosfato de grado analítico solución salina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4417</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Pierce 16 % de formaldehído (p/v)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>28908</td> Kits de ensayo de proteínas Pierce BCA <td>sensibles a la luz y de grado analítico</td></tr><tr><td></td><td>Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Reactivo A de Pierce BCA (que contiene carbonato de sodio, bicarbonato de sodio, ácido bicinconínico y tartrato de sodio en hidróxido de sodio 0,1 M)</td><td>Thermo Scientific</td><td>23228</td><td>Parte de los kits de ensayo de proteínas Pierce BCA (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Reactivo B de Pierce BCA (que contiene un 4 % de sulfato cúprico)</td><td>Thermo Scientific</td><td>1859078</td><td>parte de los kits de ensayo de proteínas Pierce BCA (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Ácido propiónico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>402907</td><td>Conjunto de</td></tr><tr><td>cóctel inhibidor de proteasa de</td> grado ACS III <td>Calbiochem</td><td>539134</td><td>Grado de cultivo de células y tejidos</td></tr><tr><td>SlowFade Gold Antifade Mountant</td><td>Invitrogen</td><td>S36936</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de sodio sensible a la luz (NaCl)</td><td>Bioneer</td><td>C-9025</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Desoxicolato de sodio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D6750</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Dodecil sulfato de sodio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71736</td><td>Grado molecular</td></tr><tr><td>Hidróxido de sodio (NaOH)</td><td>Biosesang</td><td>SR2018-100-00</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Agua triple destilada</td><td>-</td><td>-</td><td>Ultrapura (tipo 1)</td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con tris</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>94158</td><td></td></tr><tr><td>Tampón de transferencia de tris-glicina</td> de grado analítico <td>Koma Biotech</td><td>K0341001</td><td></td></tr><tr><td>Tris-HCl de</td> grado analítico, pH 8 <td>Bioneer</td><td>C-9006</td><td>Grado analítico</td></tr><tr><td>Triton x-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>93443</td><td>Tripsina de grado molecular</td></tr><tr><td></td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>20233</td><td>Grado de cultivo celular</td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9416</td><td>Urea de grado molecular</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>U5378</td><td>Molecular y grado de cultivo celular</td></tr></tbody></table>

in vivo aplicación del etiquetado de proximidad basado en turboid en drosophila melanogaster

In Vivo Application of TurboID-based Proximity Labeling in Drosophila melanogaster

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In vivo Aplicación del etiquetado de proximidad basado en TurboID en Drosophila melanogaster

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Aquí ilustramos cómo sola molécula de microscopía de localización foto-activado puede llevarse a cabo en la terminal del nervio motor de un vivo Drosophila melanogaster tercer instar de la larva.

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In vivo Aplicación del etiquetado de proximidad basado en TurboID en Drosophila melanogaster

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