Name: Aislamiento de células que contienen retinoides pulmonares mediante clasificación celular (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: Aprenda a aislar células pulmonares con retinoides mediante clasificación celular por fluorescencia en ratones. Este método revela la complejidad del metabolismo de la vitamina A y su papel protector en lesiones pulmonares.

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<table><tbody><tr><td>Pipeta serológica de 10 ml</td><td>Avantor/VWR</td><td>76452-284</td><td></td></tr><tr><td>100 &micro; colador m</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542000</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de halcón de 15 mL</td><td>Corning</td><td>352099</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro; colador m</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542040</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de halcón de 50 ml</td><td>Corning</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Placa de cultivo celular, 35 mm &agudo; 10 mm</td><td>Corning</td><td>430165</td><td></td></tr><tr><td>Medios de clasificación celular</td><td>Gibco</td><td>A59688DJ</td><td></td></tr><tr><td>Colagenasa tipo IV&nbsp;</td><td>Worthington Biochemical Corporation</td><td>LS004188&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de clasificación de células Cytek Aurora&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dispasa II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4693</td><td></td></tr><tr><td>DNasa I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de fondo redondo de polipropileno de 5 ml de la marca Falcon, 12 mm &agudo; 75 mm</td><td>Tubo</td><td></td> de fondo redondo de poliestireno de 5 ml de la marca Corning 352063 <td></td></tr><tr><td>Falcon con tapa de filtro de celdas, 12 mm &agudo; 75 mm</td><td></td><td>Corning 352235</td><td></td></tr><tr><td>Software FlowJo&nbsp;</td><td>Software de citometría de flujo</td> <td>Becton Dickinson</td><td></td></tr><tr><td>HBSS con Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14925-092</td><td></td></tr><tr><td>HBSS sin Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14175-095</td><td></td></tr><tr><td>Filtros desechables estériles de flujo rápido Nalgene</td><td>ThermoFisher</td><td>595-3320</td><td></td></tr><tr><td>Lisis de glóbulos rojos tampón</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R7757</td><td></td></tr><tr><td>SpectroFlo CS software&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td>Versión 1.3.0</td><td></td></tr><tr><td>Diseño quirúrgico Royaltek Cuchillas de bisturí quirúrgico de acero inoxidable</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-079-683</td><td></td></tr><tr><td>SYTOX Tinción de células muertas verde</td><td>Invitrogen</td><td>S34860</td><td></td></tr><tr><td>Tamoxifeno</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T2859</td><td></td></tr></tbody></table>

aislamiento de células que contienen retinoides pulmonares mediante clasificación celular

Isolation of Lung Retinoid-Containing Cells by Cell Sorting

Aislamiento de células pulmonares que contienen retinoides pulmonares Los pulmones de ratón (de Lrat+/+ y Lrat-/-) se digierieron enzimáticamente, y las suspensiones unicelulares se prepararon y sometieron a FACS de acuerdo con el procedimiento descrito anteriormente. La clasificación celular y la adquisición de datos se realizaron en un sistema clasificador de células Cytek Aurora™ operado por el software SpectroFlo C...

Aislamiento de células que contienen retinoides pulmonares mediante clasificación celular

Retinoids (vitamin A and its metabolites) are an essential lipid component of the alveolar microenvironment, and cell-type specific retinoid metabolism is ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Una preparación altamente purificada de células dendríticas del pulmón del ratón se describe. Especial énfasis se da al aislamiento de subgrupo de células dendríticas convencionales.

Aislamiento de células dendríticas del pulmón de ratón

Este video muestra el procedimiento para aislar células ganglionares primarias de la retina (RGCs) murinas mediante citometría de flujo. Este método permite el estudio futuro de las RGCs, con el objetivo de comprender mejor la importante disminución de la agudeza visual que resulta de la pérdida de RGCs funcionales en las enfermedades neurodegenerativas.

Aislamiento de células ganglionares de la retina murinas mediante clasificación celular activada por fluorescencia

Aquí, proporcionamos un protocolo optimizado para el aislamiento y clonación de la escasa entidad de células T periféricas Vδ1+CD4+ que es, como demostramos recientemente, un progenitor de células T αβ extratímicas. Esta técnica permite aislar, clonar y expandir eficientemente estas células en cultivo ex vivo.

Aislamiento y<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Cultura de Vδ1<sup&gt; +</sup&gt; CD4<sup&gt; +</sup&gt; Las células γδ T, una célula αβT Progenitor Extrathymic

Este protocolo describe una técnica de aislamiento para obtener células mesenquimales del estroma residentes de pulmón primarios de ratas, mediante el uso de la digestión enzimática, la separación por gradiente de densidad, la adherencia de plástico y CD146 + selección de perlas magnéticas.

Aislamiento de CD146<sup&gt; +</sup&gt; Las células estromales mesenquimales de pulmón Residente de los pulmones de ratas

lesiones hepáticas están acompañados por la expansión de células progenitoras que representa una población heterogénea de células. clasificación Novel de este compartimento celular permite la distinción de varios subconjuntos. El método descrito aquí ilustra el flujo de análisis de citometría de alto aislamiento y pureza de varios subconjuntos que se pueden utilizar para más ensayos.

El aislamiento y enriquecimiento de hígado progenitoras subconjuntos identificados por una combinación de marcadores de superficie Novel

Millones de personas sufren de enfermedades degenerativas retinianas que resultan en ceguera irreversible. Un elemento común de muchas de estas enfermedades es la pérdida de células ganglionares de la retina (RGCs). Este protocolo detallado describe el aislamiento de los RGC murinos primarios mediante selección positiva y negativa con citometría de flujo.

Aislamiento de células primarias de ganglio retiniano murino (RGC) por citometría de flujo

Este artículo proporciona una metodología detallada para los enfoques de disociación tisular y fraccionamiento celular que permiten el enriquecimiento de células epiteliales viables de las regiones proximal y distal del pulmón humano. En este caso, estos enfoques se aplican para el análisis funcional de células progenitoras epiteliales pulmonares mediante el uso de modelos de cultivo de organoides 3D.

Aislamiento y enriquecimiento de células progenitoras epiteliales pulmonares humanas para cultivo de organoides

Este protocolo describe un método para el aislamiento de células endoteliales retinianas postnatales murinas optimizadas para el rendimiento, la pureza y la viabilidad celular. Estas células son adecuadas para los enfoques de secuenciación de próxima generación.

Aislamiento de células endoteliales retinianas murinas para secuenciación de próxima generación

Aunque es un desafío, el aislamiento de las células endoteliales pulmonares es esencial para los estudios sobre la inflamación pulmonar. El presente protocolo describe un procedimiento para el aislamiento de alto rendimiento y alta pureza de células endoteliales macrovasculares y microvasculares.

Aislamiento y purificación de células endoteliales microvasculares y macrovasculares a partir de muestras derivadas de pulmón

Aquí se presenta un método reproducible, asequible y robusto para el aislamiento y la expansión de células epiteliales bronquiales primarias para biobancos a largo plazo y la generación de células epiteliales diferenciadas por cultivo en la interfaz aire-líquido.

Aislar células epiteliales bronquiales del tejido pulmonar resecado para biobancos y establecer cultivos de interfaz aire-líquido bien diferenciados

Este protocolo detalla el aislamiento de poblaciones vivas inmunes y no inmunes del pulmón de ratón en un estado estacionario y después de la infección por influenza. También proporciona estrategias de activación para identificar subconjuntos de células epiteliales y mieloides.

Aislamiento de poblaciones vivas de células mieloides y epiteliales del pulmón de ratón

Aprenda a aislar células pulmonares con retinoides mediante clasificación celular por fluorescencia en ratones. Este método revela la complejidad del metabolismo de la vitamina A y su papel protector en lesiones pulmonares.

Aislamiento de células que contienen retinoides pulmonares mediante clasificación celular

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