Name: Técnica de biopsia conjuntival e inmunofluorescencia directa para el diagnóstico de penfigoide de mucosa (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-17T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 5 s
Description: Aprende la técnica de biopsia conjuntival e inmunofluorescencia directa para diagnosticar el penfigoide de mucosa, una enfermedad autoinmune que puede causar ceguera. Este protocolo estandarizado mejora la precisión diagnóstica.

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<ol><li>Jain, N., Jakati, S., Shanbhag, S. S., Basu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+immunofluorescence+findings+and+factors+affecting+conjunctival+biopsy+positivity+in+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Direct immunofluorescence findings and factors affecting conjunctival biopsy positivity in ocular mucous membrane pemphigoid.</a> Cornea. 43 (2), 159-165 (2024).</li>
<li>Vazirani, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cicatrizing+conjunctivitis%3A+a+review+of+the+differential+diagnosis+and+an+algorithmic+approach+to+management%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Chronic cicatrizing conjunctivitis: a review of the differential diagnosis and an algorithmic approach to management.</a> Indian J Ophthalmol. 68 (11), 2349-2355 (2020).</li>
<li>Singh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-induced+cicatrizing+conjunctivitis%3A+a+case+series+with+review+of+etiopathogenesis%2C+diagnosis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Drug-induced cicatrizing conjunctivitis: a case series with review of etiopathogenesis, diagnosis and management.</a> Ocul Surf. 24, 83-92 (2022).</li>
<li>Bocanegra-Oyola, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+characteristics+of+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Immunol+Inflamm%22%5BJournal%5D)">Clinical characteristics of ocular mucous membrane pemphigoid: a systematic review and meta-analysis.</a> Ocul Immunol Inflamm. 32 (10), 2388-2404 (2024).</li>
<li>Coco, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conjunctival+biopsy+site+in+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Conjunctival biopsy site in mucous membrane pemphigoid.</a> Am J Ophthalmol. 216, 1-6 (2020).</li>
<li>Ong, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucous+membrane+pemphigoid+with+ocular+involvement%3A+the+clinical+phenotype+and+its+relationship+to+direct+immunofluorescence+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Mucous membrane pemphigoid with ocular involvement: the clinical phenotype and its relationship to direct immunofluorescence findings.</a> Ophthalmology. 125 (4), 496-504 (2018).</li>
<li>Anesi, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+of+conjunctival+biopsy+for+diagnosis+of+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%3A+redetermination+of+the+standard+for+diagnosis+and+outcomes+of+previously+biopsy-negative+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Immunol+Inflamm%22%5BJournal%5D)">Reliability of conjunctival biopsy for diagnosis of ocular mucous membrane pemphigoid: redetermination of the standard for diagnosis and outcomes of previously biopsy-negative patients.</a> Ocul Immunol Inflamm. 29 (6), 1106-1113 (2021).</li>
<li>Dart, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autoantibody+detection+for+diagnosis+in+direct+immunofluorescence-negative+mucous+membrane+pemphigoid%3A+ocular+and+other+sites+compared%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Autoantibody detection for diagnosis in direct immunofluorescence-negative mucous membrane pemphigoid: ocular and other sites compared.</a> Ophthalmology. 128 (3), 372-382 (2021).</li>
<li>Leonard, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunofluorescent+studies+in+ocular+cicatricial+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Immunofluorescent studies in ocular cicatricial pemphigoid.</a> Br J Dermatol. 118 (2), 209-217 (1988).</li>
<li>Mehra, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+relevance+of+direct+immunofluorescence+in+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22JDDG%22%5BJournal%5D)">Diagnostic relevance of direct immunofluorescence in ocular mucous membrane pemphigoid.</a> JDDG. 13 (12), 1268-1274 (2015).</li>
<li>Shimanovich, I., Nitz, J. M., Zillikens, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+and+repeated+sampling+increases+the+sensitivity+of+direct+immunofluorescence+testing+for+the+diagnosis+of+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Acad+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Multiple and repeated sampling increases the sensitivity of direct immunofluorescence testing for the diagnosis of mucous membrane pemphigoid.</a> J Am Acad Dermatol. 77 (4), 700-705 (2017).</li>
<li>Goldich, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+of+patients+with+ocular+cicatricial+pemphigoid+referred+to+major+tertiary+hospital%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Characteristics of patients with ocular cicatricial pemphigoid referred to major tertiary hospital.</a> Can J Ophthalmol. 50 (2), 137-142 (2015).</li>
<li>Mudhar, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biopsies+of+cicatricial+conjunctivitis+cases+reveal+highly+variable+sampling+practice+among+ophthalmologists%3A+time+for+national+and+international+standardisation%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Biopsies of cicatricial conjunctivitis cases reveal highly variable sampling practice among ophthalmologists: time for national and international standardisation.</a> Br J Ophthalmol. 100 (6), 736-744 (2016).</li>
<li>Vodegel, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+diagnostic+immunofluorescence+using+biopsies+transported+in+saline%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Enhanced diagnostic immunofluorescence using biopsies transported in saline.</a> BMC Dermatol. 4, 1-7 (2004).</li>
<li>Jonkman, M. F., De Groot, A. C., Slegers, T. P., De Jong, M. C., Pas, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+diagnosis+of+pure+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%3A+indirect+immunofluorescence+versus+immunoblot%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Immune diagnosis of pure ocular mucous membrane pemphigoid: indirect immunofluorescence versus immunoblot.</a> Eur J Dermatol. 19 (5), 456-460 (2009).</li>
<li>Shimanovich, I., Nitz, J. M., Witte, M., Zillikens, D., Rose, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+diagnosis+of+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Pathol+Med%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical diagnosis of mucous membrane pemphigoid.</a> J Oral Pathol Med. 47 (6), 613-619 (2018).</li>
<li>Philip, A. M., Stephenson, A., Al-Dabbagh, A., Ramezani, K., Fernandez-Santos, C. C., Foster, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+cicatricial+pemphigoid+with+IgM-positive+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Ocular cicatricial pemphigoid with IgM-positive biopsy.</a> Cornea. 42 (12), 1503-1505 (2023).</li>
<li>Williams, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conjunctival+neutrophils+predict+progressive+scarring+in+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Conjunctival neutrophils predict progressive scarring in ocular mucous membrane pemphigoid.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 57 (13), 5457-5469 (2016).</li>
<li>Levian, B., Hussaini, S. S., Woodley, D. T., Kasperkiewicz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudopemphigoid%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22JAAD+Int%22%5BJournal%5D)">Pseudopemphigoid: a systematic review.</a> JAAD Int. 17, 170-171 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 N ácido clorhídrico</td><td>Finar&nbsp; química Limited&nbsp;</td><td>7647-01-0</td><td></td></tr><tr><td>Acetona&nbsp;</td><td>Qualigens</td><td>Pregunta 33517</td><td></td></tr><tr><td>Albúmina</td><td>DAKO</td><td>F0117</td><td></td></tr><tr><td>Fucsina básica</td><td>Qualigens</td><td>Pregunta 39402</td><td></td></tr><tr><td>C3c</td><td>Biosistemas de diagnóstico&nbsp;</td><td>F003</td><td></td></tr><tr><td>C4c</td><td>Biosistemas de diagnóstico&nbsp;</td><td>F005</td><td></td></tr><tr><td>Cartucho</td><td>Policiencias</td><td>25376-500</td><td></td></tr><tr><td>Activado por carbón vegetal</td><td>Sigma</td><td>C-5260</td><td></td></tr><tr><td>Criostato&nbsp;</td><td>Leica</td><td>CM1860UV&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Cuchillas criotomas&nbsp;</td><td>Leica</td><td>818</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Abcam&nbsp;</td><td>AB104139</td><td></td></tr><tr><td>Fibrinógeno</td><td>Biosistemas de diagnóstico&nbsp;</td><td>F006</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio de fluorescencia</td><td>Olimpo</td><td>CX43</td><td></td></tr><tr><td>Fórceps&nbsp;</td><td>Joja quirúrgica</td><td>JS1528A</td><td></td></tr><tr><td>Cámara de humedad</td><td>Biosistemas de diagnóstico&nbsp;</td><td>SM365</td><td></td></tr><tr><td>IgA</td><td>Biosistemas de diagnóstico&nbsp;</td><td>F007</td><td></td></tr><tr><td>IgG</td><td>Biosistemas de diagnóstico&nbsp;</td><td>F008</td><td></td></tr><tr><td>Igm</td><td>Biosistemas de diagnóstico&nbsp;</td><td>F009</td><td></td></tr><tr><td>IHC Portaobjetos adhesivos de vidrio</td><td>Tomo&nbsp;</td><td>33140455</td><td></td></tr><tr><td>Fórceps de Lim</td><td>Pista de carreras</td><td>S-7223</td><td></td></tr><tr><td>Medio tansport de Michel</td><td>Cinítica Fisher&nbsp;</td><td>NC0253304</td><td></td></tr><tr><td>Cubierta microscópica</td><td>Estrella azul</td><td>https://www.bluestarslides.com</td><td></td></tr><tr><td>OCT Medio&nbsp;</td><td>Criomatriz&nbsp;</td><td>6769006</td><td></td></tr><tr><td>PBS&nbsp;</td><td>DAKO</td><td>DM831</td><td></td></tr><tr><td>Ácido peryódico&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>375810-25G</td><td></td></tr><tr><td>Disulfito de potasio</td><td>Sigma</td><td>P2522-500G</td><td></td></tr><tr><td>Proparacaína 0,5%</td><td>Sunway Privado&nbsp;</td><td>G/1118A</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de Westcott</td><td>Pillig Gurgical Intruments&nbsp;</td><td>423480</td><td></td></tr></tbody></table>

técnica de biopsia conjuntival e inmunofluorescencia directa para el diagnóstico de penfigoide de mucosa

Technique of Conjunctival Biopsy and Direct Immunofluorescence for Diagnosing Mucous Membrane Pemphigoid

La interpretación del DIF requiere la confirmación de la presencia de la membrana basal en los cortes de tejido (Figura 1). En los portaobjetos teñidos con PAS, la membrana basal aparecerá como una membrana de color rosa brillante situada en la región basal del epitelio conjuntival (Figura 1C). La continuidad y arquitectura de la membrana basal también debe ser comentada. La positividad de DIF se verá como BM de color verde brillante (Figura...

Técnica de biopsia conjuntival e inmunofluorescencia directa para el diagnóstico de penfigoide de mucosa

Ocular mucous membrane pemphigoid (MMP) presents as chronic cicatrizing conjunctivitis that, if left untreated, can cause blindness. Timely diagnosis and ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

La dermatitis herpetiforme (DH) es una enfermedad inflamatoria crónica caracterizada por una reacción autoinmune entre IgA y la epidermis transglutaminasa (ETG). DH se desarrolla en una porción muy pequeña de los pacientes con sensibilidad al gluten y / o enfermedad celíaca. Los resultados de este estudio indican que DH también puede desarrollarse en una gran mono rhesus con síntomas de la dermatitis idiopática.

Reconocimiento de la transglutaminasa epidérmica por IgA y anticuerpos transglutaminasa tisular 2 en un raro caso de Rhesus Dermatitis

Existe un creciente interés en la comprensión de las funciones inmunológicas de subpoblaciones específicas de células en las placas de Peyer (PP), los sitios primarios de inducción de los tejidos linfoides asociados al intestino. Aquí resumimos los protocolos paralelos para preparar PP preparativos de célula única para el análisis de citometría de flujo y cryosections PP para inmunoticción.

Aislar y inmunoticción Los linfocitos y las células dendríticas de las placas de Peyer murinas de

Recolectamos, tiñimos y fotografiamos células de la conjuntiva del margen del párpado interno de sujetos humanos. Al caracterizar la morfología celular y la actividad metabólica, este método puede mejorar nuestra comprensión del ojo seco y el papel que puede desempeñar la fricción entre las superficies oculares en la percepción de las molestias oculares.

Citología de Impresión del Área de limpiaparabrisas tapa

La superficie ocular normal expuesta consiste en córnea y conjuntiva. Las células epiteliales, las células caliciformes y las células inmunes están presentes en la conjuntiva. Aquí, se describe una técnica no invasiva de citología de impresión usando un dispositivo de citología de impresión y citometría de flujo para analizar células inmunes en la conjuntiva.

Una forma no invasiva de aislar y células fenotípicas de la conjuntiva

Estudio de microambiente tumoral puede identificar biomarcadores pronósticos o predictivos de la respuesta clínica a la inmunoterapia. Presentado aquí, es un método innovador basado en situ de la fluorescencia multiespectral de imágenes para analizar y contar automáticamente varias subpoblaciones de CD8+ T las células. Esta técnica reproducible y confiable es adecuada para análisis de grandes cohortes.

Multiplexado de análisis de la inmunofluorescencia y la cuantificación de Intratumoral PD-1+ + de Tim-3 CD8 células+ T

Un protocolo detallado para un panel de inmunofluorescencia multiplex marcador seis es optimizado y realizado, utiliza un teñidor automático para resultados más consistentes y un menor tiempo de procedimiento. Este enfoque puede adaptarse directamente por cualquier laboratorio para estudios de inmuno-Oncología.

Panel de inmunofluorescencia Multiplex automatizado para estudios de inmuno-Oncología en los especímenes del tejido formalina-fijo Carcinoma

Aquí, presentamos un protocolo para un ensayo de inmunofluorescencia indirecta de flotación libre en secciones de biopsia de piel que permite la identificación de variantes de conformación específicas de la enfermedad de la sinucleína alfa implicadas en la enfermedad de Parkinson y múltiples proteínas de la sistema nervioso periférico.

Dirigido a agregados de alfa sinucleína en fibras nerviosas periféricas cutáneas por el ensayo de inmunofluorescencia de flotación libre

La inflamación de la superficie ocular daña los tejidos de la superficie ocular y compromete las funciones vitales del ojo. El presente protocolo describe un método para inducir inflamación ocular y recolectar tejidos comprometidos en un modelo de ratón de disfunción de la glándula de Meibomio (MGD).

Inducción de la inflamación de la superficie ocular y recolección de tejidos afectados

Las lesiones cutáneas son características comunes e importantes en muchas enfermedades reumáticas, y la biopsia con análisis patológico desempeña un papel fundamental en el diagnóstico. Este artículo proporciona una descripción detallada del procedimiento estandarizado de biopsia de piel y, utilizando como ejemplo el lupus eritematoso discoide, destaca el papel esencial de la dermatopatología en el diagnóstico de enfermedades reumáticas.

Biopsia de piel para el diagnóstico del lupus eritematoso discoide

Este artículo demuestra el funcionamiento y el efecto de la microscopía confocal in vivo en el diagnóstico y tratamiento del ojo seco e investiga la aplicación y los resultados de la microscopía confocal in vivo para proporcionar una base para futuras investigaciones.

In vivo Microscopía confocal en el diagnóstico y manejo del ojo seco: un enfoque en los protocolos de imagen y la interpretación

Aprende la técnica de biopsia conjuntival e inmunofluorescencia directa para diagnosticar el penfigoide de mucosa, una enfermedad autoinmune que puede causar ceguera. Este protocolo estandarizado mejora la precisión diagnóstica.

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