Name: Explorando los eventos celulares secuenciales de fagocitosis desencadenados por Godanti Bhasma en células de mamíferos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T15:50:00.000+00:00
Duration: 10 min 10 s
Description: Descubre la fagocitosis de partículas Godanti Bhasma en células 3T3-L1 mediante microscopía de lapso de tiempo. Este método sin marcadores permite visualizar directamente la internalización y degradación celular.

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<ol><li>Stuart, L. M., Ezekowitz, R. A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phagocytosis+and+comparative+innate+immunity%3A+learning+on+the+fly%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Phagocytosis and comparative innate immunity: learning on the fly.</a> Nat Rev Immunol. 8 (2), 131-141 (2008).</li>
<li>Underhill, D. M., Goodridge, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Information+processing+during+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Information processing during phagocytosis.</a> Nat Rev Immunol. 12 (7), 492-502 (2012).</li>
<li>Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phagocytosis%3A+An+immunobiologic+process%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Phagocytosis: An immunobiologic process.</a> Immunity. 44 (3), 463-475 (2016).</li>
<li>Flannagan, R. S., Jaumouillé, V., Grinstein, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cell+biology+of+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol+Mech+Dis%22%5BJournal%5D)">The cell biology of phagocytosis.</a> Annu Rev Pathol Mech Dis. 7, 61-98 (2012).</li>
<li>Kinchen, J. M., Ravichandran, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phagosome+maturation%3A+Going+through+the+acid+test%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Phagosome maturation: Going through the acid test.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 9 (10), 781-795 (2008).</li>
<li>Segal, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+neutrophils+kill+microbes%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">How neutrophils kill microbes.</a> Annu Rev Immunol. 23, 197-223 (2005).</li>
<li>Huynh, K. K., Grinstein, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+vacuolar+pH+and+its+modulation+by+some+microbial+species%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol+Mol+Biol+Rev%22%5BJournal%5D)">Regulation of vacuolar pH and its modulation by some microbial species.</a> Microbiol Mol Biol Rev. 71 (3), 452-462 (2007).</li>
<li>Méresse, S., Gorvel, J. P., Chavrier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rab7+GTPase+resides+on+a+vesicular+compartment+connected+to+lysosomes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">The rab7 GTPase resides on a vesicular compartment connected to lysosomes.</a> J Cell Sci. 112 (21), 3195-3204 (1999).</li>
<li>Caponegro, M. D., Thompson, K. K., Tayyab, M., Tsirka, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Rigorous+Quantitative+Approach+to+Analyzing+Phagocytosis+Assays%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">A Rigorous Quantitative Approach to Analyzing Phagocytosis Assays.</a> Bio Protoc. 10 (15), e3698(2020).</li>
<li>de Neergaard, T., Sundwall, M., Wrighton, S., Nordenfelt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Sensitivity+Assessment+of+Phagocytosis+by+Persistent+Association-Based+Normalization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">High-Sensitivity Assessment of Phagocytosis by Persistent Association-Based Normalization.</a> J Immunol. 206 (1), 214-224 (2021).</li>
<li>Chu, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+quantification+of+discrete+phagocytic+events+by+live+cell+time-lapse+high-content+microscopy+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">High-resolution quantification of discrete phagocytic events by live cell time-lapse high-content microscopy imaging.</a> J Cell Sci. 133 (5), jcs237883(2020).</li>
<li>Park, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+Flow+Cytometry+Protocols+for+Examining+Phagocytosis+of+Microplastics+and+Bioparticles+by+Immune+Cells+of+Aquatic+Animals%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Imaging Flow Cytometry Protocols for Examining Phagocytosis of Microplastics and Bioparticles by Immune Cells of Aquatic Animals.</a> Front Immunol. 11, 203(2020).</li>
<li>Kapellos, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+real+time+imaging+platform+to+quantify+macrophage+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">A novel real time imaging platform to quantify macrophage phagocytosis.</a> Biochem Pharmacol. 116, 107-119 (2016).</li>
<li>Li, Q., Jagannath, C., Rao, P. K., Singh, C. R., Lostumbo, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+phagosomal+proteomes%3A+from+latex-bead+to+bacterial+phagosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Proteomics%22%5BJournal%5D)">Analysis of phagosomal proteomes: from latex-bead to bacterial phagosomes.</a> Proteomics. 10 (22), 4098-4116 (2010).</li>
<li>Blum, J. S., Wearsch, P. A., Cresswell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathways+of+antigen+processing%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Pathways of antigen processing.</a> Annu Rev Immunol. 31, 443-473 (2013).</li>
<li>Das, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Godanti+bhasma+%28anhydrous+CaSO4%29+induces+massive+cytoplasmic+vacuolation+in+mammalian+cells%3A+A+model+for+phagocytosis+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Godanti bhasma (anhydrous CaSO4) induces massive cytoplasmic vacuolation in mammalian cells: A model for phagocytosis assay.</a> Methods. 230, 158-168 (2024).</li>
<li>Huss, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proton+translocation+by+V-ATPase%3A+molecular+mechanism+and+target+for+inhibition+by+Bafilomycin+A1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bioenerg+Biomembr%22%5BJournal%5D)">Proton translocation by V-ATPase: molecular mechanism and target for inhibition by Bafilomycin A1.</a> J Bioenerg Biomembr. 34, 243-250 (2002).</li>
<li>Méndez-Alejandre, A., Raymond, B. B. A., Trost, M., Marín-Rubio, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bi-functional+particles+for+real-time+phagosome+acidification+and+proteolysis+multiplex+assay+in+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Bi-functional particles for real-time phagosome acidification and proteolysis multiplex assay in macrophages.</a> Front Immunol. 14, 1204223(2023).</li>
<li>Lancaster, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phagosome+resolution+regenerates+lysosomes+and+maintains+the+degradative+capacity+in+phagocytes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Phagosome resolution regenerates lysosomes and maintains the degradative capacity in phagocytes.</a> J Cell Biol. 220 (9), e202005072(2021).</li>
<li>Krendel, M., Gauthier, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Building+the+phagocytic+cup+on+an+actin+scaffold%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Building the phagocytic cup on an actin scaffold.</a> Curr Opin Cell Biol. 77, 102112(2022).</li>
<li>Barger, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane-cytoskeletal+crosstalk+mediated+by+myosin-I+regulates+adhesion+turnover+during+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Membrane-cytoskeletal crosstalk mediated by myosin-I regulates adhesion turnover during phagocytosis.</a> Nat Commun. 10 (1), 1249(2019).</li>
<li>Ghosh, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+determination+of+phagocytosis+using+pH-sensitive+fluorescent+bioparticles%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Quantitative determination of phagocytosis using pH-sensitive fluorescent bioparticles.</a> J Vis Exp. (125), e56093(2017).</li>
<li>Rashidfarrokhi, A., Richina, V., Tafesse, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+Early+Stages+of+Phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Visualizing the Early Stages of Phagocytosis.</a> J Vis Exp. (120), e54646(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Frascos de cultivo de 25 cm2</td><td>NEST, India</td><td>707001</td><td></td></tr><tr><td>Placas de 96 y 6 pocillos</td><td>Tarsons India Pvt. Ltd., Calcuta, India; Thermo Scientific, India</td><td>980040; 140675</td><td></td></tr><tr><td>Naranja de acridina</td><td>SRL, India</td><td>82407</td><td></td></tr><tr><td>Antibióticos y solución de tripsina-EDTA</td><td>Alta Prensa, India</td><td>628242; 655111</td><td></td></tr><tr><td>Líneas celulares: HeLa, 3T3-L1 y RAW-264.7</td><td>Centro Nacional de Ciencia Celular (NCCS), Pune, Maharastra</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Platos de cultivo (35mm)&nbsp;</td><td>SPL Lifesciences, India</td><td>101350</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s medio Eagle modificado (DMEM)</td><td>MP Biomedicles, India</td><td>1033126</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino (FBS)</td><td>Alta Prensa, India</td><td>651257</td><td></td></tr><tr><td>Citómetro de flujo</td><td>Millipore, Estados Unidos</td><td>Amnis</td><td>Citómetros de flujo de imágenes Amnis,</td></tr><tr><td>Microscopio fluorescente</td><td>DiGi Lab, India</td><td>Modelo: DiGi 110 Infinity</td><td></td></tr><tr><td>Godanti Bhasma</td><td>Patanjali Ayurved</td><td>240002</td><td></td></tr><tr><td>Tinte rojo neutro</td><td>CDH, India</td><td>593630</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio de lapso de tiempo</td><td>NanoEnTek Inc. Seúl, Corea.</td><td>Juli</td><td>Analizador de células fluorescentes inteligente JuLi,</td></tr><tr><td>Microscopio de lapso de tiempo</td><td>LEEDZ MICRO IMA. Reino Unido</td><td>S.No. LIM225552358A58</td><td>EA PRIME Microscopio invertido</td></tr></tbody></table>

explorando los eventos celulares secuenciales de fagocitosis desencadenados por godanti bhasma en células de mamíferos

Exploring the Sequential Cellular Events of Phagocytosis Triggered by Godanti Bhasma in Mammalian Cells

El estudio destaca las respuestas celulares clave a las partículas GB en células de mamíferos. Utilizamos un citómetro de flujo de imágenes para investigar la internalización de partículas GB en células 3T3-L1 (Figura 1). Las células se expusieron a partículas durante períodos que oscilaron entre 30 minutos y 12 horas. Después de 30 min, observamos las partículas en la superficie celular (Figura 1B), y la membrana celular comenzó a plegarse hacia adentro en los ...

Explorando los eventos celulares secuenciales de fagocitosis desencadenados por Godanti Bhasma en células de mamíferos

Phagocytosis is a vital cellular mechanism through which cells engulf and degrade foreign particles, pathogens, or debris, playing a key role in immune ...

exploring-sequential-cellular-events-phagocytosis-triggered-godanti

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

En este artículo se describe un método que utiliza multi-espectral citometría de flujo de imágenes para cuantificar la internalización de nanopartículas polianhídrido o bacterias de las células RAW 264.7.

El análisis de la internalización celular de nanopartículas y bacterias en un Multi-espectral de Citometría de Flujo de imágenes

Se describen métodos para la microscopia de vídeo en vivo de células...

Vídeo en vivo de células Microscopía de fagocitosis hongo patógeno

Phagocytic cells play a major role in the innate immune system by removing and eliminating invading microorganisms in their phagosomes. Phagosome ...

Estudio de fagolisosoma Biogénesis en macrófagos en directo

Describimos una configuración experimental para visualizar con una formación y cierre de fagosomas de alta resolución sin precedentes en tres dimensiones en macrófagos vivos, utilizando microscopía de fluorescencia de reflexión interna total. Permite el seguimiento de la base de la copa fagocítica, los pseudópodos en expansión, así como el sitio preciso de la escisión del fagosoma.

&quot;Fagosoma Cierre de ensayo&quot; para visualizar Fagosoma Formación en tres dimensiones utilizando la reflexión interna total fluorescente Microscopía (TIRFM)

Aquí describimos una técnica basada en microscopio para visualizar y cuantificar las cascadas tempranas de eventos durante la fagocitosis de patógenos como los hongos Candida albicans y partículas que miden más de 0,5 μm, incluyendo zymosan y perlas recubiertas de IgG.

La visualización de las primeras etapas de la fagocitosis

Aquí describimos un método simple y rápido para el aislamiento de Salmonella typhimurium-con fagosomas de los macrófagos en cubriendo las bacterias con biotina y estreptavidina.

Aislamiento de Salmonella typhimurium-que contienen fagosomas de los macrófagos

Aquí describimos los métodos usando microscopia confocal de disco de spinning solo eventos fagocíticas imagen por residente macrófagos peritoneales de ratón. Los protocolos pueden ampliarse a otras células fagocíticas.

Proyección de imagen 3D Time-lapse de la fagocitosis por macrófagos de ratón

El mecanismo asociado con la fagocitosis en la infección por Leishmania sigue siendo poco conocido. Aquí, describimos métodos para evaluar los eventos tempranos que ocurren durante la interacción de Leishmania con las células huésped.

Investigación de la fagocitosis de Leishmania mediante microscopía confocal

A continuación se describe un ensayo que emplea el poder de la microinyección, junto con...

Análisis de la cinética de exportación nuclear de ARNm en células de mamífero por microinyección

La aplicabilidad del ensayo para evaluar la viabilidad clonigénicas reproductiva se ha establecido desde hace más de 50 años. Aquí se demuestra el procedimiento general para llevar a cabo el ensayo clonogénico con células adherentes.

Ensayo clonigénicas: las células adherentes

Descubre la fagocitosis de partículas Godanti Bhasma en células 3T3-L1 mediante microscopía de lapso de tiempo. Este método sin marcadores permite visualizar directamente la internalización y degradación celular.

Explorando los eventos celulares secuenciales de fagocitosis desencadenados por Godanti Bhasma en células de mamíferos

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