Name: Fibroblastos asociados al cáncer de tumores mamarios de ratón como herramientas para estudios moleculares y computacionales (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-03T13:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: Aprende análisis computacional de fibroblastos asociados al cáncer en tumores mamarios de ratón. Este método integra transcriptómica y organoides tumorales para identificar mecanismos moleculares y dianas terapéuticas en cáncer de mama.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<table><tbody><tr><td>Escalera de ADN de 1Kb más</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>10787018</td><td></td></tr><tr><td>Placa de 24 pocillos</td><td>Sarstedt</td><td>833922</td><td></td></tr><tr><td>Placa de 96 pocillos</td><td>Sarstedt</td><td>833924</td><td></td></tr><tr><td>Ácido acético</td><td>Sigma Aldirch</td><td>695092</td><td></td></tr><tr><td>EdadI-HF</td><td>Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra</td><td>Referencia R3552</td><td>Almacenar a -20 &grados; C</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Meda Pharma</td><td>23907076</td><td></td></tr><tr><td>B&uuml; Cámara de escrutinio rker</td><td>VWR</td><td>40443703</td><td></td></tr><tr><td>Cauterización de baja temperatura FineTip Disp</td><td>Keeler</td><td>AX10339KL</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Eppendorf</td><td>5810R</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cónico 15 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62554502</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cónico 50 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62547254</td><td></td></tr><tr><td>Microtubos Cryopure de 2 ml</td><td>Sarstedt</td><td>72380992</td><td></td></tr><tr><td>Violeta cristal</td><td>Sigma Aldirch</td><td>C0775</td><td>Almacenar en RT, usar en una campana extractora&nbsp;</td></tr><tr><td>Placa de cultivo de 100 mm de diámetro</td><td>Sarstedt</td><td>833902</td><td></td></tr><tr><td>Placa de cultivo de 60 mm de diámetro</td><td>Sarstedt</td><td>833920</td><td></td></tr><tr><td>ddH20</td><td>Casero</td><td></td><td>Almacenar en RT, usar en una campana biológica</td></tr><tr><td>Calibrador digital</td><td>Preciva</td><td>02-301-2</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio digital</td><td>Leica</td><td>DM6B</td><td></td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido</td><td>Sigma Aldirch</td><td>D8418</td><td>Uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Dulbecco' s Águila modificada' s Medio (DMEM)</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td>Almacenar a 4 ° C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>EcoRI-HF</td><td>Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra</td><td>Referencia R3101</td><td>Almacenar a -20 &grados; C</td></tr><tr><td>Ácido etilendiaminotetraacético (EDTA)</td><td>Sigma Aldirch</td><td>E6758</td><td>Almacenar en RT, usar en una campana biológica</td></tr><tr><td>Suero fetal bovino (FBS)</td><td>Gibco</td><td>16000044</td><td>Almacenar a 4 ° C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Puntas filtradas 10 &micro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703010255</td><td></td></tr><tr><td>Puntas filtradas 100 &micro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703030255</td><td></td></tr><tr><td>Puntas filtradas 1000 &micro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703060255</td><td></td></tr><tr><td>Puntas filtradas 20 &micro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703030265</td><td></td></tr><tr><td>Puntas filtradas 200 &micro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703031255</td><td></td></tr><tr><td>Filtropur S Plus 0,20 &micro; m&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>831826102</td><td></td></tr><tr><td>Filtropur S Plus 0,45 &micro; m&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>831826</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras finas</td><td>2Biol</td><td>1406009</td><td></td></tr><tr><td>Pinza</td><td>2Biol</td><td>1102412</td><td></td></tr><tr><td>Geneticina</td><td>Gibco</td><td>10131035</td><td>Almacenar a 4 ° C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Reactivo de transfección Lipofectamine 2000</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11668019</td><td>Almacenar a 4 ° C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Cámaras de invasión de Matrigel con 8 &mu; m Membrana de PET&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354480</td><td></td></tr><tr><td>Lector de microplacas (absorbancia de 600 nm)</td><td>Promega</td><td>GM3500</td><td></td></tr><tr><td>Microtubos 1,5 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>7269001</td><td></td></tr><tr><td>Optimem</td><td>Gibco</td><td>31985047</td><td>Almacenar a 4 ° C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Paraformaldehído (PFA)</td><td>Sigma Aldirch</td><td>158127</td><td>Almacenar en RT, usar en una campana extractora</td></tr><tr><td>pBABE-neo largeTcDNA&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>1780</td><td>Almacenar a -20 &grados; C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>pCL-Ampho</td><td>Novus Biological&nbsp;</td><td>18746853</td><td>Almacenar a -20 &grados; C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>pCMV-R8.74</td><td>Addgene</td><td>22036</td><td>Almacenar a -20 &grados; C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>pCMV-VSVG&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>8454</td><td>Almacenar a -20 &grados; C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Penicilina-Estreptomicina (Estreptoestreptopluma de pluma, 10,000 &mu; g/mL)&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>Almacenar a 4 ° C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Microscopio de contraste de fases&nbsp;</td><td>Olimpo&nbsp;</td><td>BX42</td><td></td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Casero</td><td></td><td>Almacenar en RT, usar en una campana biológica</td></tr><tr><td>pLKO.1-Puro&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>10878</td><td>Almacenar a -20 &grados; C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Solución de poli-L-lisina</td><td>Sigma Aldirch</td><td>P8920</td><td>Almacenar a 4 ° C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Diclorhidrato de puromicina de&nbsp; Streptomyces alboniger</td><td>Sigma Aldirch</td><td>P8833</td><td></td></tr><tr><td>Búfer rCutSmart&nbsp;</td><td>Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra</td><td>B6004</td><td>Almacenar a -20 &grados; C</td></tr><tr><td>Afeitadora para roedores</td><td>Aesculap</td><td>GT416</td><td></td></tr><tr><td>Instituto Conmemorativo de Roswell Park (RPMI)</td><td>Gibco</td><td>61870010</td><td>Almacenar a 4 ° C, uso en una campana biológica</td></tr><tr><td>Hisopos sedientos de punta redonda</td><td>Sigma Aldirch</td><td>Z744127</td><td></td></tr><tr><td>Escalpelo</td><td>Gima</td><td>27041</td><td></td></tr><tr><td>Balanza semimicro Secura</td><td>Sartorio</td><td>SECURA125-1S</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta serológica 10 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861254001</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta serológica 2 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861252001</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta serológica 25 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861256001</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta serológica 5 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861253001</td><td></td></tr><tr><td>Puntos 5-0</td><td>Ethicon</td><td>1866G</td><td></td></tr><tr><td>Jeringa 10 mL</td><td>Pentaferte</td><td>00202250E14</td><td></td></tr><tr><td>Jeringa 5 mL</td><td>Pentaferte</td><td>00202250E12</td><td></td></tr><tr><td>Jeringa Omnican Insulina 1 mL</td><td>Braun</td><td>9151125S</td><td></td></tr><tr><td>Tejido adesivo</td><td>Vetbond de 3M</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Insertos Transwell 8 &micro; m poro&nbsp;</td><td>Halcón</td><td>353097</td><td></td></tr><tr><td>Insertos Transwell Matrigel 8 &micro; m poro&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354480</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina-EDTA (0,5%), sin rojo fenólico</td><td>Gibco</td><td>15400054</td><td></td></tr><tr><td>Concentrador centrífugo Vivaspin 20 MWCO 10.000 Días</td><td>Sigma Aldirch</td><td>Z614602</td><td></td></tr></tbody></table>

fibroblastos asociados al cáncer de tumores mamarios de ratón como herramientas para estudios moleculares y computacionales

Cancer-Associated Fibroblasts from Mouse Mammary Tumors as Tools for Molecular and Computational Studies

Evaluación in vitro de las actividades de CAF La contribución de los fibroblastos asociados al cáncer (CAF) derivados de tumores mamarios a las características agresivas del cáncer de mama (BC) se estudió utilizando CAFs inmortalizados (iCAFs) generados de acuerdo con el paso 3. Los iCAFs se superactivaron como se describe en el paso 6, y luego se les privó de sDMEM para recolectar su CM, que se utilizó para tratar las células 4T1 durante 48 h (ver paso 7.1). A este tratamien...

Fibroblastos asociados al cáncer de tumores mamarios de ratón como herramientas para estudios moleculares y computacionales

A compelling body of research has confirmed the critical role of the tumor microenvironment (TME) in the growth and aggressiveness of breast cancer (BC). ...

cancer-associated-fibroblasts-from-mouse-mammary-tumors-as-tools-for

Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

En este informe, demuestran un sistema para aislar y cultivar células de donantes de la glándula mamaria de ratón, y ortotópicamente trasplante de estas células en ratones receptores para analizar estroma: interacciones epiteliales durante el desarrollo de tumores mamarios.

El trasplante de células del estroma mamario y células de carcinoma en los ratones C57BL/6J

Carcinoma asociados fibroblastos (CAF), rica en miofibroblastos presentes en el estroma tumoral, juegan un papel importante en la conducción de la progresión del tumor. Hemos desarrollado un modelo de tumor coimplantation xengraft para generar experimentalmente CAF a partir de fibroblastos humanos mamarios. El protocolo describe cómo establecer miofibroblastos CAF que adquirir la capacidad de promover la génesis tumoral.

Generación experimental de carcinoma asociada a los fibroblastos (CAF) a partir de fibroblastos humanos mamarios

Cáncer de fibroblastos asociados (CAF) facilitar la iniciación del crecimiento del tumor y la progresión a través de señalización que promueve la proliferación, la angiogénesis y la inflamación. Aquí se describe un método para aislar poblaciones puras de los fibroblastos normales y CAFS de ratón fresco y tejidos humanos por clasificación de células, usando PDGFR como un marcador de superficie.

Aislamiento de fibroblastos normales y el cáncer asociado-de los tejidos frescos por Clasificación células activadas por fluorescencia (FACS)

Aquí describimos el modelo y el enfoque para estudiar las funciones de los macrófagos alveolares pulmonares en la metástasis del cáncer. Para demostrar el papel de estas células en la metástasis, se utilizó el modelo singénico (4T1) de cáncer de mama junto con la depleción de macrófagos alveolares con liposomas de clodronato.

El estudio de la función de los macrófagos alveolares en cáncer de mama metástasis

Se proporciona un protocolo para coinyectar células cancerosas y fibroblastos y monitorear el crecimiento tumoral a lo largo del tiempo. Este protocolo se puede utilizar para comprender las bases moleculares del papel de los fibroblastos como reguladores del crecimiento tumoral.

Un modelo de ratón para investigar el papel de los fibroblastos asociados al cáncer en el crecimiento tumoral

Este artículo tiene como objetivo proporcionar un protocolo para el aislamiento y cultivo de fibroblastos asociados al cáncer primario a partir de un modelo murino singénico de cáncer de mama triple negativo y su aplicación para el estudio preclínico de nuevas nanopartículas diseñadas para dirigirse al microambiente tumoral.

Aislamiento de fibroblastos asociados al cáncer primario a partir de un modelo murino singénico de cáncer de mama para el estudio de nanopartículas dirigidas

Se prepararon esferoides tumorales 3D multicelulares con células de adenocarcinoma de pulmón, fibroblastos y monocitos, seguidos del aislamiento de fibroblastos asociados al cáncer (CAF) de estos esferoides. Los CAF aislados se compararon con fibroblastos normales para evaluar la salud mitocondrial mediante el estudio del potencial transmembrana mitocondrial, las especies reactivas de oxígeno y las actividades enzimáticas.

Evaluación de la salud mitocondrial en fibroblastos asociados al cáncer aislados de esferoides tumorales de pulmón multicelulares 3D

Desarrollamos un método para eliminar, procesar, seccionar y teñir exitosamente, para la evaluación histopatológica, el tejido mamario que originalmente había sido fijado en diapositivas como monturas enteras. Este método puede promover la recolección y evaluación de monturas enteras de glándulas mamarias en estudios de referencia de pruebas reproductivas y de desarrollo.

Seccionando los Montes Enteros de las Glándulas Mamarias para la Identificación de Lesiones

Este protocolo describe un método sencillo y útil para almacenar sangre periférica y suero o plasma para análisis de aguas abajo como evaluación de un solo nucleótido polimorfismo (SNP) y el ensayo ELISA.

Secado de la sangre y manchas de suero como una herramienta útil para el almacenamiento de la muestra a evaluar biomarcadores de cáncer

El objetivo de este protocolo es establecer un modelo 3D in vitro para estudiar la diferenciación de los fibroblastos asociados al cáncer (CAC) en un entorno tumoral a granel, que puede abordarse en diferentes sistemas de análisis, como la inmunofluorescencia, la transcripción análisis e imágenes de células salvavidas.

Un modelo de esferoides 3D como un sistema más fisiológico para la diferenciación de fibroblastos asociados al cáncer y estudios de invasión in Vitro

Aprende análisis computacional de fibroblastos asociados al cáncer en tumores mamarios de ratón. Este método integra transcriptómica y organoides tumorales para identificar mecanismos moleculares y dianas terapéuticas en cáncer de mama.

Fibroblastos asociados al cáncer de tumores mamarios de ratón como herramientas para estudios moleculares y computacionales

Explorar más videos