Name: Método MALDI-ToF MS para la caracterización de polímeros sintéticos con dispersión variable y grupos terminales (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 16 s
Description: Aprende a caracterizar polímeros sintéticos con MALDI-ToF MS, analizando dispersión variable y grupos terminales. Este protocolo detalla preparación de muestras, adquisición de datos y calibración para obtener espectros de masa precisos.

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PRECAUCIÓN: Revise las hojas de datos de seguridad (SDS) de todos los productos químicos antes de su uso. Realice todas las preparaciones de muestras y preparaciones de placas MALDI-ToF MS en una campana extractora y use el equipo de protección personal (EPP) adecuado, incluidas gafas de seguridad, una bata de laboratorio y guantes.
1. Preparación de la muestra
<ol>
	<li>Preparación de la solución madre de matriz, catión, calibrante y analito<ol>
		<li>Prepare la solución madre de cationes alcalinos disolviendo 2 mg del catión deseado en 1 ml de un disolvente seleccionado por su compatibilidad con el analito y el catión. Para la muestra 1, se disolvieron 2 mg de trifluoroacetato de sodio en 1 ml de THF.</li>
		<li>Prepare la solución madre de matriz disolviendo 20 mg de la matriz deseada en 1 ml de un disolvente compatible basado en la solubilidad del analito. Ejemplo: Para los datos representativos (Muestra 1), disuelva 20 mg de DCTB en 1 ml de tetrahidrofurano (THF).</li>
		<li>Prepare la solución madre del calibrante siguiendo las instrucciones del proveedor.</li>
		<li>Preparar la solución de analito disolviendo 10 mg del analito en 1 ml de un disolvente adecuado. Para la muestra 1, se disuelven 10 mg del analito en 1 ml de THF.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Preparación de la placa diana MALDI-ToF MS<ol>
		<li>Limpie la placa de destino MALDI-ToF MS.</li>
		<li>Prepare la muestra de adquisición de analito y la solución de muestra de calibración. Agregue las soluciones madre de catión, analito y matriz en una proporción de 1:5:20 μL en el tubo A y el vórtice. Para calibración externa: Agregue las soluciones catiónicas, calibrantes y matriciales en una proporción de 1:5:20 μL en el tubo B y el vórtice.</li>
		<li>Agregue la mezcla de solución de muestra de analito y calibrante a la placa objetivo MALDI-ToF MS. Pipetear 0,5 μl de la mezcla de solución de muestra de catión:analito:matriz (tubo A) en la placa diana MALDI-ToF MS utilizando el método de gota seca. Pipetear 0,5 μl de la mezcla catión:calibrante:matriz (tubo B) en un punto adyacente al analito en la placa diana MALDI-ToF MS utilizando el método de gota seca. Registre la ubicación exacta de cada punto (letra de fila y número de columna) para localizar fácilmente la muestra y el calibrador durante la adquisición de datos.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Adquisición de datos
<ol>
	<li>Inserte la placa de destino MALDI-ToF MS y seleccione un método de adquisición<ol>
		<li>Inserte la placa de destino MALDI-ToF MS en el instrumento. Coloque la placa de destino en el soporte con la orientación correcta y no empuje demasiado la placa de destino MALDI-ToF MS.</li>
		<li>Acople la placa de destino MALDI-ToF MS en el instrumento utilizando el software de control del instrumento.</li>
		<li>Seleccione y abra un archivo de método en el software de control del instrumento. Elija un método reflector positivo (RP) o lineal positivo (LP) dentro del rango de masa del analito.</li>
		<li>Supervise el software de control del instrumento para confirmar que se ha insertado la placa objetivo y que la configuración del método está completa. NOTA: Estos polímeros representativos tienen oxígenos; por lo tanto, se selecciona el modo positivo (la mayoría de los compuestos tienen la adquisición completada en modo positivo). Para los datos representativos, se seleccionó un método RP para el modo reflector en todas las muestras.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Adquisición inicial de datos<ol>
		<li>En el software de control del instrumento, ubique la cámara que muestra la placa objetivo MALDI-ToF MS y un diagrama de los pocillos con las letras de columna y los números de fila que se muestran. Haga clic en el pocillo MALDI-ToF MS que contiene la mezcla catión:analito:matriz para seleccionar la adquisición de datos.</li>
		<li>Ajuste el rango de detección de masa en el software de control del instrumento a un amplio rango de 500-20000 Da para garantizar que la masa esperada del analito se capture por completo. Utilice el cursor para ajustar el rango aproximadamente 2x por debajo y por encima de la masa esperada del analito después de una adquisición inicial.</li>
		<li>Adquisición de datos<ol>
			<li>Presione el botón Start en el software de control del instrumento para comenzar la adquisición de datos MALDI-ToF MS.</li>
			<li>Presione Detener o permita que la adquisición de MALDI-ToF MS se complete automáticamente.</li>
			<li>Haga clic en Agregar para agregar el espectro único de la MS MALDI-ToF al búfer de espectro de suma. NOTA: La memoria tampón de espectro único de la EM MALDI-ToF almacena un espectro de masas MALDI-ToF individual, y la memoria tampón de espectro de suma acumula datos de múltiples adquisiciones, lo que aumenta la intensidad de la señal.</li>
			<li>Vuelva a colocar el láser MALDI-ToF MS viendo la alimentación de la cámara y haga clic en Cualquier lugar dentro del mismo pocillo seleccionado para mover el láser a una nueva posición.</li>
			<li>Repita las adquisiciones de MS MALDI-ToF para agregar espectros únicos de MS MALDI-ToF al búfer de suma. Repita los pasos 2.2.3.1 a 2.2.3.4 hasta que los resultados de la EM MALDI-ToF sean satisfactorios.</li>
			<li>Evalúe el espectro de masas MALDI-ToF para la resolución y el ruido de referencia. Si el espectro de la MS MALDI-ToF presenta una alta resolución y un ruido de referencia mínimo, continúe con el paso de calibración. Si no es así, considere optimizar el método de adquisición de datos (por ejemplo, ajustar la potencia del láser, la ganancia del detector o la configuración de extracción de iones pulsados).</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Optimización de la adquisición de datos (véase Figura 1)<ol>
		<li>Ajuste la potencia del láser MALDI-ToF MS, la ganancia del detector y la extracción de iones pulsados uno a la vez para mejorar la resolución y/o disminuir el ruido de fondo</li>
		<li>Para duplicar el método MALDI-ToF MS, copie y pegue el método MALDI-ToF MS LP o RP con un nuevo nombre. Abra el archivo de método MS MALDI-ToF pegado que se creó y cambie el nombre del archivo.</li>
		<li>Adquiera un espectro de masas MALDI-ToF inicial siguiendo todos los pasos de la sección 2.2 para la adquisición inicial de datos, en la sección de adquisición de datos. Amplíe un conjunto de picos del MALDI-ToF MS con la intensidad más alta para evaluar la resolución y el ruido de referencia en el software de control del instrumento.</li>
		<li>Optimización de adquisiciones<ol>
			<li>Ajuste de la potencia del láser MALDI-ToF MS<ol>
				<li>Comience con una potencia de láser MS MALDI-ToF baja de ~ 4% y siga los pasos 2.2.3.1 y 2.2.3.2 para que la adquisición de datos inicial inicie y detenga la adquisición de datos.</li>
				<li>Observe y compare la resolución y el ruido de referencia de la memoria tampón única de la EM MALDI-ToF y el espectro inicial en la memoria tampón de suma.</li>
				<li>Aumente la potencia del láser MALDI-ToF MS en incrementos del 2% al 10% para mejorar la ionización. Siga los pasos 2.2.3.1 y 2.2.3.2 para que la adquisición de datos inicial inicie y detenga la adquisición de datos después de cada incremento.</li>
				<li>Seleccione la potencia láser más baja que proporcione picos de alta intensidad con un ruido mínimo. NOTA: Cuando la potencia del láser MALDI-ToF MS es del 50% o superior, existe una mayor posibilidad de fragmentación de la muestra.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Optimice el diámetro del láser MALDI-ToF MS<ol>
				<li>En la pestaña del detector, ajuste el diámetro del láser MALDI-ToF MS para probar configuraciones medias, grandes y ultra. Siga los pasos 2.2.3.1 y 2.2.3.2 para que la adquisición de datos inicial inicie y detenga la adquisición de datos.</li>
				<li>Observe y compare la resolución y el ruido de referencia de la memoria tampón única de la EM MALDI-ToF y el espectro inicial en la memoria tampón de suma.</li>
				<li>Seleccione el diámetro del láser MALDI-ToF MS que proporcione una resolución óptima con un ruido de referencia mínimo. NOTA: El diámetro del láser MALDI-ToF MS controla el diámetro del rayo láser.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Ajuste de la ganancia del detector MALDI-ToF MS<ol>
				<li>En pequeños incrementos, aumente o disminuya la ganancia del detector MALDI-ToF MS. Siga los pasos 2.2.3.1 y 2.2.3.2 para que la adquisición de datos inicial inicie y detenga la adquisición de datos para cada aumento o disminución de la ganancia del detector de la EM MALDI-ToF.</li>
				<li>Observe la intensidad y la resolución de la señal de los espectros de masas MALDI-ToF en el software de control del instrumento con cada ajuste de la memoria tampón única de la EM MALDI-ToF y el espectro inicial en la memoria tampón de suma.</li>
				<li>Mantenga la ganancia del detector MALDI-ToF MS que proporciona la mejor intensidad y una buena resolución de señal.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Modificación de la extracción de iones pulsados de la MS MALDI-ToF<ol>
				<li>Ajuste la extracción de iones pulsados MALDI-ToF MS en incrementos de 10 ns. Siga los pasos 2.2.3.1 y 2.2.3.2 para que la adquisición de datos inicial inicie y detenga la adquisición de datos, para cada aumento o disminución en la ganancia del detector.</li>
				<li>Evalúe cómo los cambios en la extracción de iones pulsados mejoran la resolución de la señal MALDI-ToF MS. NOTA: La extracción de iones pulsados de MALDI-ToF MS se define como un retardo de tiempo entre la ionización del láser. Al aumentar o disminuir la extracción de iones de pulso, los iones de diferentes energías permanecerán en el campo eléctrico durante tiempos más cortos o más largos. El tiempo más largo puede permitir que los analitos de la misma masa y los iones cargados positivamente que se ablacionan en momentos ligeramente diferentes se aceleren completamente a la misma velocidad que los iones de analito de la misma masa cuando se aplica el voltaje. Esto se puede utilizar para aumentar la resolución y disminuir el ruido de fondo de la señal25.</li>
			</ol>
			</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Una vez que se logre la resolución óptima y la relación señal-ruido más alta, guarde el archivo de método MS MALDI-ToF optimizado para su uso actual y futuro.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Calibración de MS MALDI-ToF<ol>
		<li>Adquiera el espectro de masas MALDI-ToF de calibración seleccionando la muestra de calibración en la placa objetivo y siguiendo todos los pasos de la sección 2.2 para la adquisición inicial de datos<ol>
			<li>Acceda a los puntos de referencia de calibración. Navegue a la pestaña de calibración en el software de control del instrumento. Abra la lista de control de masas correspondiente al calibrador utilizado.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Haga coincidir los picos de calibración del espectro de masas MALDI-ToF con las masas de referencia en la lista de control de masas.<ol>
			<li>En la lista de control de masas, seleccione la masa correspondiente al primer pico de calibración en el espectro de masas MALDI-ToF. El espectro de masas MALDI-ToF se acercará automáticamente al pico de calibración seleccionado.</li>
			<li>Establezca el pico de referencia haciendo clic a la izquierda de la señal del calibrador. Se seleccionará el pico.</li>
			<li>Seleccione Aplicar para establecer la señal de calibrador como masa de referencia en la lista de control de masas.</li>
			<li>Repita este proceso para todos los picos de calibración adicionales. Seleccione la siguiente masa de interés de la lista de control de masas, alinee el pico de calibrador correspondiente y aplique la configuración de referencia.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Adquisición de muestras de analito polimérico calibrado<ol>
		<li>Localice y seleccione el pocillo que contiene el pozo de mezcla catión:analito:matriz en el software de control del instrumento.</li>
		<li>Realice la adquisición de datos siguiendo todos los pasos de la sección 2.2 con el método optimizado y calibrado abierto.</li>
		<li>Agregue un nombre de archivo apropiado y guarde el espectro de masas del analito calibrado MALDI-ToF para su posterior análisis.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Retire la placa de destino MALDI-ToF MS con el software de control del instrumento. Limpiar la placa de destino MALDI-ToF MS</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68455/68455fig1.jpg"> 
Figura 1: Árbol de decisión para la optimización del método del instrumento. Esta guía está diseñada para ayudar a los usuarios principiantes a optimizar sistemáticamente los parámetros del método del instrumento. Comience con la configuración predeterminada o inicial y ajuste un parámetro a la vez aumentando o disminuyendo según las mejoras observadas. A continuación, continúe en la dirección que mejore (1) la intensidad máxima, (2) la calidad de referencia (bajo ruido) y (3) proporcione una resolución isotópica y máxima estrecha. Este enfoque ayuda a identificar las condiciones óptimas para espectros confiables y de alta calidad. Si la muestra de polímero no ioniza ni produce un espectro utilizable en modo reflector, cambie al modo lineal y utilice este mismo árbol de decisión para optimizar los parámetros. Tenga en cuenta que el modo lineal a menudo da como resultado picos más amplios y una resolución isotópica limitada o nula, pero puede ser efectivo para polímeros de mayor masa o polímeros que pueden perder ionización en modo reflector. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68455/68455fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
3. Análisis e interpretación de datos
<ol>
	<li>Abra el software de análisis de datos MALDI-ToF MS y cargue el espectro de muestras de analito MALDI-ToF MS.</li>
	<li>Seleccione el método de procesamiento MALDI-ToF MS correcto para las muestras de analito. Aquí, todas las muestras tenían resolución isotópica y se seleccionó el primer pico para todos los picos con el método de procesamiento MALDI-ToF MS seleccionado. NOTA: Los parámetros de procesamiento de MALDI-ToF MS se pueden adaptar para muestras de polímeros sintéticos. Por ejemplo, un técnico de instrumentos de MALDI-ToF MS desarrolló un método de procesamiento MALDI-ToF MS para polímeros durante una sesión de capacitación técnica. Payne et al. crearon un método de procesamiento masivo promedio de MS MALDI-ToF para aplicaciones específicas16. Póngase en contacto con el equipo técnico de polímeros del fabricante de MALDI-ToF MS para obtener información y asesoramiento sobre la edición del método de procesamiento de MALDI-ToF MS.</li>
	<li>Encuentre picos utilizando el software de análisis MALDI-ToF MS.</li>
	<li>Comparar la masa de polímero teórica y experimental<ol>
		<li>Registre la masa teórica del polímero. Dibuje la estructura esperada de la macromolécula, incluido el catión, en un software de dibujo químico. Abra la ventana de análisis en el software de dibujo químico y registre la masa teórica.<ol>
			<li>Macromoléculas monodispersas: Registre la masa exacta y el peso molecular de la macromolécula seleccionando la estructura y el catión juntos.</li>
			<li>Polímeros bajos, moderados y muy dispersos: Para la masa de la unidad de repetición, seleccione la columna vertebral del polímero solo para registrar la masa de la unidad de repetición. Para la masa total de un n-mer especificado, establezca el número de unidad de repetición en una masa dentro del rango de espectro de la EM MALDI-ToF que se muestra en el software de análisis de la EM MALDI-ToF. Seleccione toda la estructura del polímero, incluidos los grupos catiónicos y finales, para registrar la masa de un n-mer especificado.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Comparar la masa teórica registrada con la masa observada del espectro de la EM MALDI-ToF<ol>
			<li>Para el cálculo de la masa total de macromoléculas monodispersas, siga los pasos que se describen a continuación.<ol>
				<li>Acérquese al pico con la intensidad más alta en el espectro MALDI-ToF MS, asegurándose de que la vista incluya un rango de masa de al menos 2x por debajo y por encima de la masa teórica.</li>
				<li>Compare la masa teórica con la masa observada en el espectro de masas MALDI-ToF. Si la diferencia es inferior a 0,100 Da, es probable que la masa de la macromolécula monodispersa esperada sea precisa.</li>
				<li>Examine el espectro de la EM MALDI-ToF en busca de picos adicionales que puedan indicar la presencia de estructuras inesperadas.</li>
				<li>Si se detectan discrepancias, evalúe las posibles variaciones estructurales. Revise el esquema de reacción y calcule las masas de las estructuras alternativas para comparar.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Para repetir el cálculo de masa unitaria de polímeros bajos, moderados y altamente dispersos, siga los pasos que se describen a continuación.<ol>
				<li>Seleccione y amplíe dos picos separados por la masa unitaria de repetición en el espectro de MS MALDI-ToF que exhiben la intensidad más alta.</li>
				<li>Para cada par de picos adyacentes, reste la masa observada del pico de masa más alto del pico de masa más bajo para calcular la masa de la unidad de repetición. Repita este proceso para el siguiente conjunto de picos para confirmar la consistencia de la masa unitaria de repetición.</li>
				<li>Compare la masa de la unidad de repetición calculada con la masa de la unidad de repetición teórica. Si los valores observados y teóricos coinciden y exhiben diferencias de masa consistentes, es probable que la masa de la unidad de repetición del polímero sea correcta.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Para la masa total de un n-mer especificado de polímeros bajos, moderados y altamente dispersos, siga los pasos que se describen a continuación.<ol>
				<li>Amplíe el pico en el espectro de masas MALDI-ToF correspondiente a la masa total teórica, así como los picos una unidad repetida por encima y por debajo.</li>
				<li>Compare la masa teórica con la masa observada en el espectro de masas MALDI-ToF. Si la diferencia es inferior a 0,100 Da, es probable que los grupos finales esperados sean precisos.</li>
				<li>Inspeccione el espectro de masas MALDI-ToF en busca de picos adicionales que puedan sugerir estructuras inesperadas.</li>
				<li>Si se identifican discrepancias, evalúe grupos finales alternativos o variaciones estructurales. Revise el esquema de reacción y calcule las masas para posibles grupos finales alternativos o estructuras cíclicas.</li>
			</ol>
			</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida</td><td>Productos químicos TCI</td><td>D1601</td><td>https://www.tcichemicals.com/US/en/p/D1601</td></tr><tr><td>1,1,1-Tris(hidroximetil)propano</td><td>Millipore Sigma</td><td>148083</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/148083?srsltid=AfmBOoqaMzcy1xravp1h2QE 0myfY5gjuEBfOIv2o882Wb _xcB4Ol4CMW</td></tr><tr><td>1,5,7-Triazabiciclo[4.4.0]dec-5-eno</td><td>Millipore Sigma</td><td>345571</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/345571?srsltid=AfmBOooLQXIhWaMnO63nE xu-Y5MJoJID6RJiby0NXyu DHOxXYjle_kMT</td></tr><tr><td>1,6-hexaneditiol 98% (HDT)&nbsp;</td><td>TCI</td><td>H0334</td><td>https://www.tcichemicals.com/US/en/p/H0334</td></tr><tr><td>ácido 2-(4-hidroxifenilazo)benzoico) (HABA)</td><td>Millipore Sigma</td><td>H5126</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/h5126</td></tr><tr><td>Ácido 2,2-Bis(hidroximetil)propiónico</td><td>Millipore Sigma</td><td>106615</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/106615?srsltid=AfmBOopCRoa1N_UiDK 56NKhDKdlAN8feUrMxVYhul Muz2en6NYEGIh4b</td></tr><tr><td>2,2-dimetoxi-2-fenilacetofenona 99% (DMPA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>196118</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/196118?srsltid=AfmBOoqVTif6KNwIr6A -bIgnXbkrvWKIUNH6qOsc RseQLNVKi0DMWPb-</td></tr><tr><td>Ácido 2,5-dihidroxibenzoico (DHB)</td><td>Millipore Sigma</td><td>149357</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/149357</td></tr><tr><td>4-(Dimetilamino)piridina</td><td>Millipore Sigma</td><td>522821</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/search/522821?focus=products&page=1&perpage= 30& ordenar=relevancia& term=522821 & type=producto&nbsp;</td></tr><tr><td>Ácido 6-bromohexanoico</td><td>Millipore Sigma</td><td>150452</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/search/6-bromohexanoic-acid?focus=products&page=1 y por página = 30 & ordenar=relevancia& term= ácido 6-bromohexanoico%20& type=producto&nbsp;</td></tr><tr><td>Benzaldehído dimetil acetal</td><td>Millipore Sigma</td><td>226076</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/226076?srsltid= AfmBOorbjP7zD9MO3g5Xk LL3rNZ02PhfkXoRfe3EjRK7 TrqJ-kEOrTCN</td></tr><tr><td>Ácido benzoico</td><td>Millipore Sigma</td><td>242381</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/sial/242381?srsltid=AfmBOook_iIcMnwuB3e _j-KetQyyHJ6Qq86jSK8 ZVxC3BorQgkO8Xg5I&nbsp;</td></tr><tr><td>Bruker UltraFlextreme&nbsp;</td><td>Bruker Daltonics</td><td></td><td>https://www.bruker.com/en/products-and-solutions/mass-spectrometry/maldi-tof/ultraflextreme.html</td></tr><tr><td>Cloroformo</td><td>Fisher Scientific</td><td>AA32614K7</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/chloroform-acs-99-8-thermo-scientific/AA32614K7 ?searchHijack=true& searchTerm= chloroform-acs-99-8-thermo-scientific & searchType=Rápido& GatoEmparejadoNo =AA32614M6</td></tr><tr><td>Ditranol, PA, 98,5-101% (DT)</td><td>Fisher Scientific</td><td>18-602-270</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/dithranol-bp-98-5-101-spectrum-chemical/18602270</td></tr><tr><td>Latón de etileno</td><td>Millipore Sigma</td><td>W354309</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/w354309?utm_source=google&utm_medium= CPC& utm_campaign=8692675663& utm _content=86098110623& gad_source= 1& gclid=CjwKCAiApY-7BhBjEiwAQMr rEdJTcKN5TEFkP1uHvRlVign3lwg2cj5 _spBUCrfi6exZ3Ur5sJkARxoCfWsQ AvD_BwE&nbsp;</td></tr><tr><td>Galvinoxilo, radical libre</td><td>Millipore Sigma</td><td>G307</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/g307?srsltid= AfmBOopoWGDMXtLk5Erf0rVyl 7j442uyg8rIWkfBjhHZ2z0dDktH3y8-</td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>A456</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-optima-lc-ms-grade-thermo-scientific/A4564</td></tr><tr><td>Paladio, 10% sobre carbono, Tipo 487, seco</td><td>Fisher Scientific</td><td>AAA1201206</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/palladium-10-carbon-type-487-dry-thermo-scientific-1/AAA1201206#?keyword=palladium%20on%20carbon</td></tr><tr><td>Polietileno glicol) éter monometílico 350&nbsp; Mn&nbsp; (MeO-PEG-OH 360)&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>AA4156022</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/polyethylene-glycol-monomethylether-350-thermo-scientific/AA4156022</td></tr><tr><td>Trifluoroacetato de potasio (KTFA)</td><td>Millipore Sigma</td><td>281883</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/281883</td></tr><tr><td>Alcohol propargílico</td><td>Fisher Scientific</td><td>A10295.0F</td><td>https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A10295.0F?SID=srch-hj-A10295.0F</td></tr><tr><td>Bromuro de propargil 97% (80% p/p en tolueno estabilizado con MgO)</td><td>Fisher Scientific</td><td>AAL1059514</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/propargyl-bromide-97-80-w-w-toluene-stab-magnesium-oxide-thermo-scientific/AAL1059514#?keyword=Propargyl%20bromide%2097%%20(80%20w/w%20in%20tolueno%20estabilizado%20con%20MgO)</td></tr><tr><td>Azida sódica</td><td>Millipore Sigma</td><td>S2002</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/sial/s2002&nbsp;</td></tr><tr><td>Hidruro de sodio 60% de dispersión en aceite mineral&nbsp;</td><td>Millipore Sigma</td><td>452912</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/452912?srsltid= AfmBOooZhbCm_qtgKU99922Y91zI qEOWONlEGxjZn0mdSJF2L5hW1uVn</td></tr><tr><td>Trifluoroacetato de sodio (NaTFA)</td><td>Oakwood</td><td>MFCD00013217</td><td>https://www.oakwoodchemical.com/ProductsList.aspx?CategoryID=-2&txt Buscar = 1549& ExtHyperLink=1</td></tr><tr><td>Kit de rango bajo SpheriCal Neat (250 - 7,500 Da)</td><td>Fábrica de polímeros</td><td>PFS-104</td><td>https://www.polymerfactory.com/product-page/spherical-low-range-kit-500-7-500-da</td></tr><tr><td>Tetrahidrofurano (THF)</td><td>Fisher Scientific</td><td>T427</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/tetrahydrofuran-optima-fisher-chemical-3/T4274#?keyword=tetrahydrofuran%20optima</td></tr><tr><td>trans-2-[3-(4-terc-Butilfenil)-2-metil-2-propenilideno]malononitrilo (DCTB)</td><td>TCI</td><td>B3635</td><td>https://www.tcichemicals.com/US/en/p/B3635</td></tr><tr><td>Ácido &alfa;-ciano-4-hidroxicinámico (CHCA)</td><td>TCI</td><td>C1768</td><td>https://www.tcichemicals.com/US/en/p/C1768</td></tr></tbody></table>

método maldi-tof ms para la caracterización de polímeros sintéticos con dispersión variable y grupos terminales

MALDI-ToF MS Method for the Characterization of Synthetic Polymers with Varying Dispersity and End Groups

Método MALDI-ToF MS para la caracterización de polímeros sintéticos con dispersión variable y grupos terminales

Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-ToF MS) is an effective analytical tool for characterizing synthetic ...

maldi-tof-ms-method-for-characterization-synthetic-polymers-with

Research

Investigación

JoVE Journal

Chemistry

Química

Una manera rápida se describe para obtener información sobre la estructura de los polisacáridos en una matriz extracelular. El método tiene la ventaja de la especificidad de glycosylhydrolases y la sensibilidad de la espectrometría de masas permite pequeñas cantidades de materiales para ser analizados. Esta técnica se puede adaptar para utilizarse directamente sobre el tejido en sí.

Oligo perfiles Misa (OLIMP) de polisacáridos extracelulares

El ditranol (DT; 1,8-dihidroxi-9 ,10-dihydroanthracen-9-ona) ha sido reportado anteriormente como una matriz de MALDI para obtener imágenes de tejido de pequeñas moléculas; protocolos para el uso de DT para la formación de imágenes de MALDI de los lípidos endógenos en la superficie de secciones de tejido por-ion positivo MALDI-MS en un instrumento cuadrupolar-FTICR ultra alta resolución se proporcionan aquí.

El ditranol como una matriz para láser asistida por matriz de desorción / ionización de imágenes en una transformada de Fourier de iones de resonancia de ciclotrón Espectrómetro de Masas

Se presenta un protocolo para la síntesis y caracterización de movimiento difusivo de los polímeros cíclicos en el nivel de una sola molécula.

Síntesis de polímeros cíclicos y caracterización de su movimiento difusivo en el estado fundido en la molécula de un solo nivel

Se presenta un posible método general para la síntesis de matrices peptídicas multimetálicas solubles en agua que contienen una secuencia predeterminada de centros metálicos.

Síntesis de un conjunto complejo de metal-orgánico soluble en agua

A continuación, se presenta un protocolo para preparar y visualizar estructuras secundarias (por ejemplo, fibras, arquitecturas toroidal, y nano-esferas) derivados de policarbodiimidas helicoidales. La morfología caracterizada tanto por microscopía de fuerza atómica (AFM) y microscopía electrónica de barrido (SEM) se demostró que dependerá de la estructura molecular, la concentración, y el disolvente de elección.

Morfologías auto-montaje Obtenido a partir helicoidales policarbodiimida copolímeros y sus derivados de triazol

Un protocolo para el tiempo de ionización desorción láser asistida por matriz de caracterización de la espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) de los polímeros sintéticos se describe como la optimización de la preparación de muestras, adquisición espectral y análisis de datos de vuelo.

Caracterización de polímeros sintéticos vía matriz asistida por láser desorción de ionización tiempo de vuelo (MALDI-TOF) espectrometría de masas

El objetivo de este protocolo es iniciar la polimerización utilizando enlaces dinámicos de azufre en poli (S-divinylbenzene) a temperaturas suaves (90 ° c) sin utilizar disolventes. Terpolímeros se caracterizan por GPC, DSC y 1H NMR, y probados para cambios en la solubilidad.

Síntesis de terpolímeros a temperaturas suaves utilizando enlaces de azufre dinámicos en poli (S-Divinylbenzene)

Se proporciona un protocolo para la síntesis y caracterización de monocapas de estructura metal-orgánica autoensambladas utilizando cristales de estructura metal-orgánica (MOF) injertados en polímeros. El procedimiento muestra que las partículas de MOF injertadas en polímeros pueden autoensamblarse en una interfaz aire-agua, lo que da como resultado estructuras monocapa independientes y bien formadas, como lo demuestran las imágenes de microscopía electrónica de barrido.

Síntesis y caracterización de monocapas metal-orgánicas autoensambladas utilizando partículas recubiertas de polímeros

En este trabajo se presenta un protocolo detallado para la liberación de O-glicanos de las mucinas, y la posterior desalado, permetilación y análisis mediante espectrometría de masas MALDI-TOF.

Perfilado de O-glicanos de mucina permetilada mediante espectrometría de masas de tiempo de vuelo de desorción/ionización láser asistida por matriz

Medición de la masa exacta representa un paso importante en la investigación de las proteínas. Matrix asistida por láser de desorción / ionización (MALDI) espectrometría de masas (MS) se puede utilizar para tal determinación y su ventaja fundamental es la tolerancia a las sales, detergentes y los contaminantes. Aquí se ilustra un enfoque accesible para el análisis de proteínas más grandes de 100 kDa por MALDI-MS.

Matrix asistida por láser de desorción / ionización tiempo de vuelo (MALDI-TOF) espectrometría de masas Análisis de las proteínas intactas de más de 100 kDa

Aprende a caracterizar polímeros sintéticos con MALDI-ToF MS, analizando dispersión variable y grupos terminales. Este protocolo detalla preparación de muestras, adquisición de datos y calibración para obtener espectros de masa precisos.

Método MALDI-ToF MS para la caracterización de polímeros sintéticos con dispersión variable y grupos terminales

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