Name: Un protocolo basado en fluorescencia para el cribado preliminar de inhibidores de síntesis de proteínas de fuentes naturales (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Aprende un protocolo fluorométrico para cribar inhibidores de síntesis de proteínas de fuentes naturales. Este método accesible facilita la enseñanza de técnicas modernas de descubrimiento de fármacos y acelera la investigación en química medicinal.

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<ol><li>Merrick, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+regulation+of+eukaryotic+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanism and regulation of eukaryotic protein synthesis.</a> Microbiol Rev. 56, 291-315 (1992).</li>
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<li>Ma, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dehydroabietylamine+exerts+antitumor+effects+by+affecting+nucleotide+metabolism+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Dehydroabietylamine exerts antitumor effects by affecting nucleotide metabolism in gastric cancer.</a> Carcinogenesis. 45 (10), 759-772 (2024).</li>
<li>Shinde, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+single-cell+adhesion+force+kinetics+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">A review of single-cell adhesion force kinetics and applications.</a> Cells. 10 (3), 577(2021).</li>
<li>Vargas-Accarino, E., Herrera-Montávez, C., Ramón y Cajal, s, Aasen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+cell+detachment+and+reattachment+in+cancer+cell+lines%3A+an+in+vitro+model+of+metastasis+and+malignancy%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Spontaneous cell detachment and reattachment in cancer cell lines: an in vitro model of metastasis and malignancy.</a> Int J Mol Sci. 22 (9), 4929(2021).</li>
<li>Song, L., Hennink, E. J., Young, I. T., Tanke, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photobleaching+kinetics+of+fluorescein+in+quantitative+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Photobleaching kinetics of fluorescein in quantitative fluorescence microscopy.</a> Biophys J. 68 (6), 2588-2600 (1995).</li>
<li>Ling, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dehydroabietylamine+derivatives+target+triple-negative+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Dehydroabietylamine derivatives target triple-negative breast cancer.</a> Eur J Med Chem. 102, 9-13 (2015).</li>
<li>Gautam, L. N., Ling, T., Lang, W., Rivas, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-proliferative+evaluation+of+monoterpene+derivatives+against+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Anti-proliferative evaluation of monoterpene derivatives against leukemia.</a> Eur J Med Chem. 113, 75-80 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Lector de celdas multimodo Agilent Biotek Cytation 1</td><td>Agilent&nbsp;</td><td>BTCYT1V</td><td></td></tr><tr><td>Compuesto 1 (Dehidroabietilamina, CAS 1446-61-3)</td><td>Enamine</td><td>EN300-7409771</td><td></td></tr><tr><td>Compuesto 2 (Bakuchiol, CAS 10309-37-2)</td><td>ChemFaces</td><td>CFN99047</td><td></td></tr><tr><td>Heraeus Megafuge 16R</td><td>Thermo Scientific y nbsp;</td><td>75004271</td><td></td></tr><tr><td>Placa Ibidi Gmbh-slide de 96 pozos</td><td>Ibidi</td><td>80826</td><td></td></tr><tr><td>Líneas celulares MDA-MB-231</td><td>ATCC</td><td>ATCC HTB-26</td><td></td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato pH 7,4</td><td>ATCC</td><td>ATCC 30-2200</td><td></td></tr><tr><td>Kit de análisis de síntesis de proteínas (Verde)</td><td>Abcam</td><td>Ab239725</td><td></td></tr></tbody></table>

un protocolo basado en fluorescencia para el cribado preliminar de inhibidores de síntesis de proteínas de fuentes naturales

A Fluorescence-based Protocol for Preliminary Screening of Protein Synthesis Inhibitors from Natural Sources

Un protocolo basado en fluorescencia para el cribado preliminar de inhibidores de síntesis de proteínas de fuentes naturales

Natural products represent a rich source of therapeutic compounds with applications across multiple diseases, particularly cancer. By leveraging these ...

a-fluorescence-based-protocol-for-preliminary-screening-protein

Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

En este video, demostramos el ensayo homogéneo de proximidad luminiscente amplificado, un ensayo de proximidad basado en perlas. Utiliza perlas aceptoras y donantes de tamaño homogéneo, inmovilizadas con dos proteínas que tienden a interactuar para detectar posibles moléculas pequeñas que inhiben las interacciones proteicas.

Ensayo homogéneo de proximidad luminiscente amplificado: un ensayo de proximidad basado en perlas para cribar moléculas pequeñas que inhiben las interacciones proteína-proteína

Este vídeo muestra el cribado de compuestos inmunomoduladores mediante un ensayo basado en fluorescencia. Los linfocitos T transgénicos derivados de ratones con casetes de expresión de proteínas fluorescentes verdes se tratan con estos compuestos. Las señales de GFP aumentadas y reducidas permiten identificar los efectos estimulantes e inhibidores de los compuestos, respectivamente.

Ensayo basado en fluorescencia que utiliza linfocitos modificados genéticamente para el cribado de compuestos inmunomoduladores

Se presenta un método simplificado para la detección de la expresión de proteínas de membrana recombinantes en Escherichia coli basada en la fusión a la proteína verde fluorescente.

Fluorescente verde a base de proteína Expresión Proyección de proteínas de membrana en<em&gt; Escherichia coli</em

Se presenta un protocolo para el cribado de fármacos moleculares pequeños basado en la síntesis in situ de nanoclusters de oro fluorescentes ultrapequeños (Au NCs) utilizando proteínas cargadas con fármacos como plantilla. Este método es sencillo para determinar la afinidad de unión de los fármacos a una proteína diana mediante una señal fluorescente visible emitida por los Au NC con plantilla de proteínas.

Una rápida y cuantitativa método fluorimétrico para la proteína-Targeting Pequeña Molécula De Drogas

Presentamos en el estudio actual un ensayo basado en fluorescencia novela usando linfocitos derivados de un ratón transgénico. Este ensayo es adecuado para la selección de alto rendimiento (HTS) de moléculas pequeñas dotados de la capacidad de cualquiera de inhibición o promoción de la activación de linfocitos.

Una de linfocitos ensayo basado en la fluorescencia adecuado para el cribado de alto rendimiento de pequeñas moléculas

Este manuscrito describe un método para visualizar y cuantificar eventos traducción localizada en compartimientos subcelulares. El enfoque propuesto en este manuscrito requiere un sistema de proyección de imagen confocal básico y reactivos y es rápida y rentable.

La inmunofluorescencia cuantitativa a medida Global localizada traducción

Un método microdilución en caldo fácil y adaptable para la detección de compuestos antifúngicos y extractos.

Microdilución en Vitro proyección de caldo: un método fácil y rápido para detectar nuevos compuestos antimicóticos

Aquí, presentamos el procedimiento detallado de una plataforma de ensayo de proteasa recientemente desarrollado utilizando N-terminal hexahistidine/maltosa-proteína y sustratos recombinantes fusionado a la proteína fluorescentes Unidos a la superficie de níquel nitrilotriacético perlas de agarosa magnética ácido. Un posterior análisis en gel de las muestras de ensayo separados por electroforesis dodecyl del gel del sulfato-poliacrilamida del sodio también se presenta.

Uso de proteínas de fusión recombinantes en una plataforma de ensayo fluorescente proteasa y su renaturalización en gel

El seguimiento de eventos de traducción individuales permite estudios cinéticos de alta resolución de mecanismos de traducción dependientes de la tapa. Aquí demostramos un ensayo in vitro de una sola molécula basado en interacciones por imágenes entre anticuerpos etiquetados fluorescentemente y péptidos nacientes etiquetados con epitopos. Este método permite la caracterización de moléculas únicas de cinética de iniciación y elongación peptídica durante la traducción activa dependiente de la...

Un ensayo de imágenes de molécula única in vitro para el análisis de cinética de traducción dependiente de la tapa

El monitoreo de los cambios en la temperatura de fusión de una proteína objetivo(es decir,el ensayo de cambio térmico, TSA) es un método eficiente para examinar bibliotecas de fragmentos de unos pocos cientos de compuestos. Presentamos un protocolo TSA que implementa la fluorimetría de escaneo nano-diferencial asistida por robótica (nano-DSF) para monitorear la fluorescencia intrínseca de triptófano y la retrodisparión de luz para la detección de fragmentos.

Fluorimetría de barrido nanodes diferencial para el cribado en el descubrimiento de plomo basado en fragmentos

Este protocolo describe un ensayo bioquímico de cambio de gel para medir la actividad de FEN1 (endonucleasa 1 de colgajo) y el desarrollo de inhibidores.

Detección basada en fluorescencia de la actividad de la nucleasa FEN1 y cribado de inhibidores de moléculas pequeñas

Aprende un protocolo fluorométrico para cribar inhibidores de síntesis de proteínas de fuentes naturales. Este método accesible facilita la enseñanza de técnicas modernas de descubrimiento de fármacos y acelera la investigación en química medicinal.

Un protocolo basado en fluorescencia para el cribado preliminar de inhibidores de síntesis de proteínas de fuentes naturales

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