Name: In vitro Infusión de gel intraluminal: un enfoque avanzado para el análisis microscópico de arterias de resistencia humana (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 20 s
Description: Aprende a preservar arterias de resistencia humana mediante infusión de gel intraluminal para análisis microscópico avanzado. Este protocolo mantiene la integridad estructural y molecular esencial para investigaciones cardiovasculares.

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<ol><li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+in+hypertension%3A+Roles+of+apoptosis%2C+inflammation%2C+and+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling in hypertension: Roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis.</a> Hypertension. 38 (3 Pt 2), 581-587 (2001).</li>
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<li>Zieman, S. J., Melenovsky, V., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms%2C+pathophysiology%2C+and+therapy+of+arterial+stiffness%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms, pathophysiology, and therapy of arterial stiffness.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (5), 932-943 (2005).</li>
<li>Bell, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microstructure+and+mechanics+of+human+resistance+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Microstructure and mechanics of human resistance arteries.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 311 (6), H1560-H1568 (2016).</li>
<li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+mechanical+properties+of+resistance+arteries+in+hypertension%3A+Role+of+adhesion+molecules+and+extracellular+matrix+determinants%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Structure and mechanical properties of resistance arteries in hypertension: Role of adhesion molecules and extracellular matrix determinants.</a> Hypertension. 36 (3), 312-318 (2000).</li>
<li>Rajendran, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vascular+endothelium+and+human+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">The vascular endothelium and human diseases.</a> Int J Biol Sci. 9 (10), 1057-1069 (2013).</li>
<li>Chistiakov, D. A., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+barrier+and+its+abnormalities+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Endothelial barrier and its abnormalities in cardiovascular disease.</a> Front Physiol. 6, 365(2015).</li>
<li>Gurina, T. S., Simms, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGurina%2C+TS+%22Histology%2C+Staining%22">Histology, Staining</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
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<li>Nolte, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+correlation+of+2D+hard-tissue+histology+with+3D+microCT+scans+through+3C+printed+phantoms%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Spatial correlation of 2D hard-tissue histology with 3D microCT scans through 3C printed phantoms.</a> Sci Rep. 13 (1), 18479(2023).</li>
<li>Taqi, S. A., Sami, S. A., Sami, L. B., Zaki, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+artifacts+in+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Maxillofac+Pathol%22%5BJournal%5D)">A review of artifacts in histopathology.</a> J Oral Maxillofac Pathol. 22 (2), 279(2018).</li>
<li>Torii, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathologic+characterization+of+peripheral+arteries+in+subjects+with+abundant+risk+factors%3A+Correlating+imaging+with+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Histopathologic characterization of peripheral arteries in subjects with abundant risk factors: Correlating imaging with pathology.</a> JACC Cardiovasc Imaging. 12 (8 Pt 1), 1501-1513 (2019).</li>
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<li>Chatzizisis, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+endothelial+shear+stress+in+the+natural+history+of+coronary+atherosclerosis+and+vascular+remodeling%3A+Molecular%2C+cellular%2C+and+vascular+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Role of endothelial shear stress in the natural history of coronary atherosclerosis and vascular remodeling: Molecular, cellular, and vascular behavior.</a> J Am Coll Cardiol. 49 (25), 2379-2393 (2007).</li>
<li>Li, S., Liu, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+of+3D+printing+in+vascularized+organ+construction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Bioprint%22%5BJournal%5D)">Advances of 3D printing in vascularized organ construction.</a> Int J Bioprint. 8 (3), 588(2022).</li>
<li>Rengier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+printing+based+on+imaging+data%3A+Review+of+medical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Comput+Assist+Radiol+Surg%22%5BJournal%5D)">3D printing based on imaging data: Review of medical applications.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 5 (4), 335-341 (2010).</li>
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<li>Choi, J., Lee, E. J., Jang, W. B., Kwon, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+biocompatible+3D-printed+artificial+blood+vessels+through+multidimensional+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Funct+Biomater%22%5BJournal%5D)">Development of biocompatible 3D-printed artificial blood vessels through multidimensional approaches.</a> J Funct Biomater. 14 (10), 497(2023).</li>
<li>De Graaf, M. N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+fluidic+circuit+board+for+controlled+perfusion+of+3D+blood+vessels-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Multiplexed fluidic circuit board for controlled perfusion of 3D blood vessels-on-a-chip.</a> Lab Chip. 23 (1), 168-181 (2022).</li>
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<li>Abdul Sisak, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+near-infrared+organic+fluorescent+probe+for+broad+applications+for+blood+vessel+imaging+by+high-throughput+screening+via+3D-blood+vessel+models%5BTitle%5D)+AND+%22Small+Methods%22%5BJournal%5D)">A near-infrared organic fluorescent probe for broad applications for blood vessel imaging by high-throughput screening via 3D-blood vessel models.</a> Small Methods. 5 (8), e2100338(2021).</li>
<li>Yu, T., Yang, Q., Peng, B., Gu, Z., Zhu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+organoid-on-a-chip%3A+Design%2C+imaging%2C+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Vascularized organoid-on-a-chip: Design, imaging, and analysis.</a> Angiogenesis. 27 (2), 147-172 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Alcohol ácido con concentración al 1%</td><td>StatLab</td><td>&nbsp; SL89-1</td><td></td></tr><tr><td>10% NBS</td><td>Leica Biosystems</td><td>3800598</td><td></td></tr><tr><td>Cámara HDMI de microscopía 4K</td><td>Hitech Instruments, Inc.</td><td>HT-XP4K8MA</td><td></td></tr><tr><td>Diluyente de anticuerpos - Reducción de antecedentes</td><td>Dako</td><td>S3022</td><td></td></tr><tr><td>Procesador Automatizado de Tejidos &nbsp;</td><td>Leica Biosystems</td><td>HistoCore PEGASUS/Cat# 14048858005</td><td></td></tr><tr><td>Solución de Dewax de Bond</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9222</td><td></td></tr><tr><td>Solución de recuperación de epítopos de enlace 1</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9961</td><td></td></tr><tr><td>Solución de Recuperación de Epítopos de Enlace 2</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9640</td><td></td></tr><tr><td>Detección de refinación de polímeros de enlace</td><td>Leica Biosystems</td><td>DS9800</td><td></td></tr><tr><td>Detección de Rojo Refinado de Polímeros de Enlace</td><td>Leica Biosystems</td><td>DS9390</td><td></td></tr><tr><td>Solución de lavado de unión (10 veces)</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9590</td><td></td></tr><tr><td>Paquete de cánula (cristal), 80 y guion; 100 & mu; m</td><td>DMT</td><td>Código de producto: 300407</td><td></td></tr><tr><td>CD31</td><td>Abcam</td><td>ab28364</td><td></td></tr><tr><td>Platos de disección, grandes (vidrio pyrex), 93 mm</td><td>Instrumentación de Sistemas Vivos</td><td>SKU: DD-90</td><td></td></tr><tr><td>Platos de disección, pequeños</td><td>Instrumentación de Sistemas Vivos</td><td>SKU: DD-50</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio de disección</td><td>Hitech Instruments, Inc.</td><td>ZEISS SteREO Discovery.V8&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas Dumont #5</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>Artículo nº 11295-10</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5SF Pinzas</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>Artículo nº 11252-00</td><td></td></tr><tr><td>EcoMount</td><td>BioCare Medical</td><td>EM897L</td><td></td></tr><tr><td>Eosina</td><td>IHC Mundo</td><td>IW-3100B</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxilina</td><td>BioCare Medical</td><td>Cathe-MM</td><td></td></tr><tr><td>Cámara de Iamging</td><td>Olyumpus</td><td>DP28</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio de imagen</td><td>Olyumpus</td><td>BX51</td><td></td></tr><tr><td>Tampón Krebs Henseleit (con 2 mM de cloruro de calcio)</td><td>Boston BioProducts, Inc.</td><td>SKU: C-10625N-200mL</td><td></td></tr><tr><td>Amortiguador de Krebs-Henseleit (sin calcio)</td><td>Boston BioProducts, Inc.</td><td>SKU: C-9906W-200mL</td><td></td></tr><tr><td>Medios de montaje</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4111</td><td></td></tr><tr><td>Cámara y unidad de miógrafo</td><td>DMT</td><td>202/204CM</td><td></td></tr><tr><td>PBS (solución salina tamponada con fosfato)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>PPIB</td><td>&nbsp; ACDBio</td><td>313908</td><td></td></tr><tr><td>Kit de reactivos RNAscope 2.5 LS-RED</td><td>ACDBio</td><td>322150</td><td></td></tr><tr><td>Stainer</td><td>Leica</td><td>Sistema automatizado Leica Bond RX</td><td></td></tr><tr><td>Pasadores de disección de acero inoxidable</td><td>Instrumentación de Sistemas Vivos</td><td>SKU: PIN-0,1MM | PIN-0,2MM | PIN-#3 | PIN-VP-1</td><td></td></tr><tr><td>Paraplasto Surgipath</td><td>Leica Biosystems</td><td>39601006</td><td></td></tr><tr><td>Gel de protección tisular</td><td>StatLab</td><td>&nbsp; TissueGuard/SKU: TG12</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de muelle Vannas - Filo de corte de 2 mm</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>Artículo nº 15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de muelle Vannas - Filo de corte de 2,5 mm</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>Artículo nº 15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de muelle Vannas - Filo de corte de 3 mm</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>Artículo nº 15000-00</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-SMA</td><td>Abcam</td><td>AB5694</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro infusión de gel intraluminal: un enfoque avanzado para el análisis microscópico de arterias de resistencia humana

In Vitro Intraluminal Gel Infusion: An Advanced Approach for Microscopic Analysis of Human Resistance Arteries

Se obtuvieron tejidos omentales humanos de pacientes sometidos a cirugías abdominales clínicamente indicadas. Se aislaron meticulosamente pequeñas arterias de resistencia (100-300 μm de diámetro) de los tejidos adiposos y conectivos circundantes bajo un microscopio de disección (Figura 1A-C). Las arterias aisladas se limpiaron, se canularon con éxito y se montaron en las cánulas de vidrio en la cámara del miógrafo de cultivo para su presurización (<strong cl...

In vitro Infusión de gel intraluminal: un enfoque avanzado para el análisis microscópico de arterias de resistencia humana

Resistance arteries, which include small arteries and arterioles, play essential roles in regulating blood pressure and tissue perfusion. Dysfunction in ...

in-vitro-intraluminal-gel-infusion-an-advanced-approach-for

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

La Ex vivo Preparación aislada Microvessel esquelético para la Investigación de la reactividad vascular

Presentamos una preparación para la visualización y manipulación de la señalización del calcio en el endotelio microvascular intacta nativo. Tubos endoteliales recién aisladas de las arterias de resistencia de ratones que suministran el músculo esquelético a retener en la morfología vivo y señalización dinámica dentro y entre las células vecinas. Tubos endoteliales pueden prepararse a partir de los microvasos de otros tejidos y órganos.

Aislamiento de microvascular endotelial Tubos de arterias de resistencia Ratón

La vasoconstricción pulmonar hipóxica (HPV) es un fenómeno fisiológico importante por el cual en la perfusión alveolar del pulmón de la hipoxia es emparejada a la ventilación. El segmento vascular principal que contribuye al HPV es la arteria intra-acinar. Aquí, describimos nuestro protocolo para el análisis del VPH de vasos pulmonares murinos con diámetros de 20-100 μm.

Análisis Videomorfométrico De La Vasoconstricción Pulmonar Hipóxica De Las Arterias Intrapulmonares Usando Cortes Murinos De Precisión Pulmonar Slices

Se presenta un protocolo para estudiar las interacciones del endotelio de pericitos humanos en ratón usando una variación del ensayo de angiogénesis tapón de gel de matriz.

Estudio in vivo de Interacción Humano-endotelial de pericitos Utilización de Plug Ensayo matriz de gel en el ratón

Protocolos para el estudio de la aorta murina embrionaria y perinatal mediante análisis clonal de en vivo y asignación de destino, explantes aórticos y aislada del músculo liso células se detallan aquí. Estos diversos enfoques facilitan la investigación de la morfogénesis de la aorta embrionaria y perinatal en el desarrollo normal y la patogénesis en la enfermedad.

Utilizan en Vivo y tejido y célula explante enfoques para el estudio de la morfogénesis y la patogenesia de la Aorta embrionaria y Perinatal

Este manuscrito describe en vitro protocolos video microscopia para evaluar la función vascular en las arterias de resistencia cerebral de rata. El manuscrito también describe técnicas para evaluar la densidad de microvessel con fluorescencia marcada perfusión lectinas y tejido mediante flujometría Doppler láser.

Evaluación de mecanismos de Control Vascular utilizando microscopia Video de arterias de resistencia aislada de ratas

Los monocitos son importantes mediadores de la Arteriogénesis en el contexto de la enfermedad arterial periférica. Utilizando una matriz similar a la membrana del sótano y microscopia intravital, este protocolo investiga monocito recalada y relacionados con el tumor angiogénesis después de la inyección de monocitos en el modelo murino de la ligadura de la arteria femoral.

Microscopia intravital de monocito autoguiado hacia el blanco y la angiogénesis tumorales en un modelo murino de la enfermedad Arterial periférica

Describimos prueba mecánica simultánea y proyección de imagen 3D de la pared arterial de aislados, viven las arterias de resistencia humana y Fiji y Ilastik análisis de imagen para la cuantificación de colágeno y elastina densidades organización y volumen espaciales. Discutimos el uso de estos datos en modelos matemáticos de la mecánica de la pared arterial.

Evaluación de colágeno y elastina Microarchitectures dependiente de la presión en las arterias de resistencia viva, humana por microscopía de fluorescencia etiqueta-libre

Aquí se presenta un protocolo para estudiar la microcirculación coronaria en el tejido cardíaco murino vivo mediante la monitorización ex vivo de la presión arterial perfusión y el flujo que mantiene la presión, así como componentes de árboles vasculares incluyendo los lechos capilares y pericitos, ya que la arteria septal está cánulada y presurizada.

Medición dinámica e imagen de capilares, arterias y pericitos en el corazón del ratón

La preparación intensiva de "tubos" endoteliales cerebrales intactos de ratón de las arteriolas del parénquima cerebral se ilustra para estudiar la regulación del flujo sanguíneo cerebral. Además, demostramos las fortalezas experimentales de este modelo de estudio endotelial para imágenes de fluorescencia y medición electrofisiológica de vías clave de señalización celular, incluidos los cambios en el [Ca2+] intracelular y el potencial de membrana.

Aislamiento y análisis funcional del endotelio arteriolar del parénquima cerebral de ratón

Las imágenes de ultrasonido intravascular in vivo muestran el movimiento de la sección transversal coronaria correspondiente a diferentes condiciones de carga de presión. Sobre la base de un modelo de elementos finitos, se empleó un esquema iterativo para determinar las propiedades mecánicas específicas del paciente de las arterias coronarias in vivo mediante la comparación del movimiento coronario del modelo computacional y las imágenes médicas.

Enfoque de modelado de elementos finitos basado en imágenes de ultrasonido intravascular para cuantificar in vivo las propiedades mecánicas de la arteria coronaria humana 

Aprende a preservar arterias de resistencia humana mediante infusión de gel intraluminal para análisis microscópico avanzado. Este protocolo mantiene la integridad estructural y molecular esencial para investigaciones cardiovasculares.

In vitro Infusión de gel intraluminal: un enfoque avanzado para el análisis microscópico de arterias de resistencia humana

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