Name: Modelo murino de leucemia Recaída a quimioterapia de inducción para la leucemia linfoblástica aguda (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 31 s
Description: Aprende a establecer un modelo PDX de recaída de leucemia linfoblástica aguda en ratones para investigar la resistencia a fármacos. Este método permite estudiar la evolución dinámica de células resistentes a la quimioterapia in vivo.

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<ol><li>Hunger, S. P., Mullighan, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Lymphoblastic+Leukemia+in+Children%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Acute Lymphoblastic Leukemia in Children.</a> N Engl J Med. 373 (16), 1541-1552 (2015).</li>
<li>Mengxuan, S., Fen, Z., Runming, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+treatments+for+pediatric+relapsed+or+refractory+acute+B-cell+lineage+lymphoblastic+leukemia%3A+Precision+medicine+era%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Novel treatments for pediatric relapsed or refractory acute B-cell lineage lymphoblastic leukemia: Precision medicine era.</a> Front Pediatr. 10, 923419(2022).</li>
<li>Bailey, L. C., Lange, B. J., Rheingold, S. R., Bunin, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone-marrow+relapse+in+paediatric+acute+lymphoblastic+leukaemia%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncol%22%5BJournal%5D)">Bone-marrow relapse in paediatric acute lymphoblastic leukaemia.</a> Lancet Oncol. 9 (9), 873-883 (2008).</li>
<li>Inaba, H., Mullighan, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pediatric+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Pediatric acute lymphoblastic leukemia.</a> Haematologica. 105 (11), 2524-2539 (2020).</li>
<li>Mullighan, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+analysis+of+the+clonal+origins+of+relapsed+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genomic analysis of the clonal origins of relapsed acute lymphoblastic leukemia.</a> Science. 322 (5906), 1377-1380 (2008).</li>
<li>Turati, V. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotherapy+induces+canalization+of+cell+state+in+childhood+B-cell+precursor+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cancer%22%5BJournal%5D)">Chemotherapy induces canalization of cell state in childhood B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia.</a> Nat Cancer. 2 (8), 835-852 (2021).</li>
<li>Uckun, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+significance+of+B-lineage+leukemic+cell+growth+in+SCID+mice%3A+a+Children%27s+Cancer+Group+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Leuk+Lymphoma%22%5BJournal%5D)">Prognostic significance of B-lineage leukemic cell growth in SCID mice: a Children's Cancer Group Study.</a> Leuk Lymphoma. 30 (5-6), 503-514 (1998).</li>
<li>Borgmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Childhood+all+blasts+retain+phenotypic+and+genotypic+characteristics+upon+long-term+serial+passage+in+NOD%2FSCID+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Childhood all blasts retain phenotypic and genotypic characteristics upon long-term serial passage in NOD/SCID mice.</a> Pediatr Hematol Oncol. 17 (8), 635-650 (2000).</li>
<li>Lock, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nonobese+diabetic%2Fsevere+combined+immunodeficient+%28NOD%2FSCID%29+mice+model+of+childhood+acute+lymphoblastic+leukemia+reveals+intrinsic+differences+in+biologic+characteristics+at+diagnosis+andrelapse%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">The nonobese diabetic/severe combined immunodeficient (NOD/SCID) mice model of childhood acute lymphoblastic leukemia reveals intrinsic differences in biologic characteristics at diagnosis andrelapse.</a> Blood. 99 (11), 4100-4108 (2002).</li>
<li>Samuels, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pre-clinical+model+of+resistance+to+induction+therapy+in+pediatric+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Cancer+J%22%5BJournal%5D)">A pre-clinical model of resistance to induction therapy in pediatric acute lymphoblastic leukemia.</a> Blood Cancer J. 4 (8), e232(2014).</li>
<li>Alruwetei, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Examining+treatment+responses+of+diagnostic+marrow+in+murine+xenografts+to+predict+relapse+in+children+with+acute+lymphoblastic+leukaemia%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Examining treatment responses of diagnostic marrow in murine xenografts to predict relapse in children with acute lymphoblastic leukaemia.</a> Br J Cancer. 123 (5), 742-751 (2020).</li>
<li>Wunderlich, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+chemotherapy+modeling+with+RAG-based+immune+deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Improved chemotherapy modeling with RAG-based immune deficient mice.</a> PLoS One. 14 (11), e0225532(2019).</li>
<li>Cadena-Herrera, D., et al. Validation of three viable-cell counting methods: Manual, semi-automated, and automated. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCadena-Herrera%2C+D+%22Biotechnol+Rep%22">Biotechnol Rep</a>. 7, 9-16 (2015).</li>
<li>Liem, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+childhood+acute+lymphoblastic+leukemia+xenograft+models+for+the+preclinical+evaluation+of+new+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Characterization of childhood acute lymphoblastic leukemia xenograft models for the preclinical evaluation of new therapies.</a> Blood. 103 (10), 3905-3914 (2004).</li>
<li>Treatment protocol for children and adolescents with acute lymphoblastic leukemia - AIEOP-BFM ALL 2017. , AIEOP-BFM Study Group. 
 <a target="_blank" href="https://clinicaltrials.gov/study/NCT03643276#study-overview">https://clinicaltrials.gov/study/NCT03643276#study-overview</a> (2017).</li>
<li>Randall, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+activity+of+the+second-generation+proteasome+inhibitor+ixazomib+against+pediatric+T-cell+acute+lymphoblastic+leukemia+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Hematol%22%5BJournal%5D)">In vivo activity of the second-generation proteasome inhibitor ixazomib against pediatric T-cell acute lymphoblastic leukemia xenografts.</a> Exp Hematol. 132, 104176(2024).</li>
<li>Carbone, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+cervical+dislocation+as+a+humane+euthanasia+method+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Assessing cervical dislocation as a humane euthanasia method in mice.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (3), 352-356 (2012).</li>
<li>Guidelines to promote the wellbeing of animals used for scientific purpose. , National Health and Medical Research Council (NHMRC). 
 <a target="_blank" href="https://www.nhmrc.gov.au/about-us/publications/guidelines-promote-wellbeing-animals-used-scientific-purposes">https://www.nhmrc.gov.au/about-us/publications/guidelines-promote-wellbeing-animals-used-scientific-purposes</a> (2008).</li>
<li>AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2020 edition. , American Veterinary Medical Association (AVMA). 
 <a target="_blank" href="https://www.avma.org/resources-tools/avma-policies/avma-guidelines-euthanasia-animals">https://www.avma.org/resources-tools/avma-policies/avma-guidelines-euthanasia-animals</a> (2020).</li>
<li>Ramos, T. V., Mathew, A. J., Thompson, M. L., Ehrhardt, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+cryopreservation+of+human+primary+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Standardized cryopreservation of human primary cells.</a> Curr Protoc Cell Biol. 64, A.3I.1-A.3I.8 (2014).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models+in+cancer+therapy%3A+Technologies+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Sig+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models in cancer therapy: Technologies and applications.</a> Sig Transduct Target Ther. 8, 160(2023).</li>
<li>Jin, J., Yoshimura, K., Sewastjanow-Silva, M., Song, S., Ajani, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+prospects+of+patient-derived+xenografts+for+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Challenges and prospects of patient-derived xenografts for cancer research.</a> Cancers. 15 (17), 4352(2023).</li>
<li>Duy, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotherapy+induces+senescence-like+resilient+cells+capable+of+initiating+AML+recurrence%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Chemotherapy induces senescence-like resilient cells capable of initiating AML recurrence.</a> Cancer Discov. 11 (6), 1542-1561 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL&nbsp; jeringa</td><td>BD&nbsp;</td><td>#309628</td><td>Extracción de órganos</td></tr><tr><td>10 mL de agua estéril para inyección</td><td>Halex Istar Ind&uacute; stria Farmaceutica LTDA</td><td>https://www.medstoremaringa.com.br/produtos/agua-destilada-10ml-pack-c-5un-isofarma/</td><td>Reconstitución de drogas</td></tr><tr><td>Solución de lisis 10X para glóbulos rojos</td><td>BioLegend</td><td>#420302</td><td>Procesamiento de muestras de sangre de ratones</td></tr><tr><td>Analizador de celdas de 5 canales</td><td>BD Biociencias</td><td>658226R1</td><td>Citómetro de flujo &nbsp;</td></tr><tr><td>Colador de celdas de 70 uM</td><td>Falcom</td><td>#352350</td><td>Extracción de órganos</td></tr><tr><td>Maleado acepromazina Inj&nbsp;</td><td>Vetnil LTDA</td><td>https://vetnil.com.br/produto/acepran-r-1</td><td>Anestesia de ratones</td></tr><tr><td>APC antihumano CD45 - isotipo de ratón IgG1 - clon HI30</td><td>BioLegend</td><td>#304037</td><td>Tinción linfocitiva</td></tr><tr><td>Asparaginasa 10000 U</td><td>Aginasa/medac</td><td>#88660100</td><td>Tratamiento con ratones</td></tr><tr><td>Brilliant-Violet 605 anti-ratón CD45 - isotipo IgG2 - clon 30-F11</td><td>BioLegend</td><td>#103139</td><td>Tinción linfocitiva</td></tr><tr><td>Daunorubicina</td><td>Farmarin</td><td>#116880025</td><td>Tratamiento con ratones</td></tr><tr><td>Dexametasona</td><td>Aqu&eacute;</td><td>#00000066</td><td>Tratamiento con ratones</td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>#589569</td><td>Criopreservación de linfocitos</td></tr><tr><td>Aguja desechable - 0,60 x 25 mm (23G x 1' &rsquo;)</td><td>BD</td><td>#300388</td><td>Extracción de órganos</td></tr><tr><td>Lanceto estéril desechable &nbsp;</td><td>Yancheng Huida Instrumentos Médicos &nbsp;</td><td>https://www.cralplast.com.br/produto/lanceta-manual/</td><td>Recogida de sangre de ratones</td></tr><tr><td>Ácido etilendediaminetetracético</td><td>Tecnologías vitales</td><td>#15576-O28</td><td>Solución EDTA</td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Cultilab</td><td>#F083</td><td>Criopreservación de linfocitos</td></tr><tr><td>Análisis de software de citometría de flujo - Versión 10.10.0</td><td>BD Biociencias</td><td>https://www.flowjo.com/</td><td>Análisis de citometría de flujo</td></tr><tr><td>Análisis de software de gráficos y gráficos - Versión 9.5.1</td><td>Dotmatics</td><td>https://www.graphpad.com/features</td><td>Graficado y análisis de gráficos</td></tr><tr><td>Jeringuilla de insulina con aguja acoplada 1 mL FX 12,7 mm X 0,33 mm</td><td>Descarpack</td><td>e0342101</td><td>Trasplante de ratones y administración de fármacos</td></tr><tr><td>Ketamine Inj</td><td>Sespo Ind&uacute; stria e Com&eacute; rcio LTDA</td><td>https://www.bassopancotte.com.br/produto/dopalen-pecuaria/</td><td>Anestesia de ratones</td></tr><tr><td>Plataforma Quirúrgica Multifuncional para roedores</td><td>Corporación Científica de Kent</td><td>https://www.kentscientific.com/products/surgisuite/</td><td>Procedimientos quirúrgicos en ratones</td></tr><tr><td>PE antihumano CD19 - isotipo de ratón IgG1 - clon de HIB19</td><td>BioLegend</td><td>#302208</td><td>Tinción linfocitiva</td></tr><tr><td>Cloruro de potasio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3911-1KG</td><td>Solución PBS</td></tr><tr><td>Dibásico fosfato de potasio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P0662-1KG</td><td>Solución PBS</td></tr><tr><td>Reactivo para el aislamiento de linfocitos</td><td>Cytiva</td><td>#17-1440-02, paquete de 6 y más veces; 100&nbsp; Ml</td><td>Aislamiento de linfocitos de órganos extraídos</td></tr><tr><td>Cloruro de sodio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888-1kg</td><td>Solución PBS</td></tr><tr><td>Fosfato de sodio dibásico &nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9763-1KG</td><td>Solución PBS</td></tr><tr><td>Pinzas de disección anatómica estériles - 12 cm ABC 0170</td><td>Laboratorio L&iacute; Der</td><td>120</td><td>Procedimientos quirúrgicos en ratones</td></tr><tr><td>Tijeras estériles 12 cm - ABC 0321</td><td>Laboratorio L&iacute; Der</td><td>136</td><td>Procedimientos quirúrgicos en ratones</td></tr><tr><td>Vincristine</td><td>Libbs</td><td>#7896094208483</td><td>Tratamiento con ratones</td></tr><tr><td>Xylazine Inj</td><td>Sespo Ind&uacute; stria e Com&eacute; rcio LTDA</td><td>https://www.bassopancotte.com.br/produto/anasedan-10-ml-bovinos-e-equinos/</td><td>Anestesia de ratones</td></tr></tbody></table>

modelo murino de leucemia recaída a quimioterapia de inducción para la leucemia linfoblástica aguda

Murine Model of Leukemia Relapse to Induction Chemotherapy for Acute Lymphoblastic Leukemia

Modelo murino de leucemia Recaída a quimioterapia de inducción para la leucemia linfoblástica aguda

Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is a neoplasm of immature lymphoid precursor cells and one of the most common childhood malignancies. Although cure ...

murine-model-leukemia-relapse-to-induction-chemotherapy-for-acute

Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

Después de la exposición al antígeno, las subpoblaciones de linfocitos B activados sufren un proceso conocido como recombinación de cambio de clase (CSR) para producir isotipos de anticuerpos con diferentes funciones efectoras. El protocolo se describe en este informe se explica cómo la RSE puede ser inducida y...

Inducción y evaluación de la recombinación de cambio de clase en las células murinas purificada B

Los receptores tirosina quinasas se expresan ectópica en muchos tipos de cáncer y han sido identificados como dianas terapéuticas en leucemia aguda. Este manuscrito describe una estrategia eficiente para la evaluación pre-clínica de inhibidores de tirosina quinasa para el tratamiento de la leucemia aguda.

Evaluación previa a la clínica de inhibidores de tirosina cinasa para el tratamiento de la leucemia aguda

El presente informe resume un protocolo que se puede utilizar para modelar la influencia del nicho del microambiente de la médula ósea en las células leucémicas, con énfasis en el enriquecimiento de la subpoblación más quimiorresistente.

Modelado Quimioterapia Leucemia resistente<em&gt; In Vitro</em

Este manuscrito proporciona un procedimiento técnico que puede ser utilizado para caracterizar los cultivos de células C1498 in vitro y la leucemia aguda inducida en ratones después de su inyección. Los análisis fenotípicos y funcionales se realizan mediante citometría de flujo, microscopía de inmunofluorescencia, y la tinción citoquímica de May-Grünwald Giemsa.

Un protocolo detallado para la caracterización de la línea celular murina C1498 y su modelo asociado de leucemia de ratón

Aquí, presentamos un protocolo para la producción y los ensayos preclínicos murinas CD19 coche de células de T por transducción retroviral y utilización como terapia contra establecido syngeneic A20 linfoma en ratones BALB/c con o sin lymphodepleting acondicionamiento previo.

Un modelo con ratones Syngeneic células B linfoma de evaluación preclínica de las células de T automóvil CD19

Aquí, describimos un protocolo en el que se utiliza un modelo de xenoinjerto derivado de pacientes con leucemia linfoblástica aguda como estrategia para evaluar y monitorear las toxicidades asociadas a las células T del receptor de antígeno quimérico dirigido a CD19.

Evaluación de los efectos tóxicos asociados a las células T del receptor de antígeno quimérico mediante un modelo de ratón de xenoinjerto derivado de pacientes con leucemia linfoblástica aguda

Aquí, la inyección intraperitoneal de células leucémicas se utiliza para establecer y propagar la leucemia mieloide aguda (LMA) en ratones. Este nuevo método es eficaz en el trasplante seriado de células de LMA y puede servir como una alternativa para aquellos que pueden experimentar dificultades e inconsistencias con la inyección intravenosa en ratones.

Trasplante intraperitoneal para la generación de leucemia mieloide aguda en ratones

Este protocolo describe la inyección intrafemoral de unas pocas células madre hematopoyéticas o leucémicas, incluidas las células editadas genéticamente, en modelos de xenoinjertos murinos, lo que no solo permitirá el trasplante rápido y seguro de células, sino también análisis seriados de la médula ósea.

Las inyecciones intrafemorales simplificadas con ratones vivos permiten un análisis continuo de la médula ósea

Aquí se presenta un protocolo detallado para aislar y caracterizar poblaciones microambientales de médula ósea a partir de modelos murinos de síndromes mielodisplásicos y leucemia mieloide aguda. Esta técnica identifica cambios en el nicho de la médula ósea no hematopoyética, incluidas las células endoteliales y mesenquimales del estroma, con progresión de la enfermedad.

Identificación de poblaciones microambientales de médula ósea en el síndrome mielodisplásico y la leucemia mieloide aguda

Este protocolo demuestra la inyección temporal en venas para la administración intravenosa de células cancerosas pediátricas a ratones neonatales, permitiendo un modelado preciso y reproducible de las respuestas inmunitarias en la vida temprana contra el cáncer. El método permite evaluar el impacto de intervenciones, como la inmunomodulación o la terapia, cuando se aplican durante el periodo neonatal.

Un modelo de trasplante intravenoso neonatal para la evaluación de las actividades inmunitarias en la vida temprana contra células cancerosas

Aprende a establecer un modelo PDX de recaída de leucemia linfoblástica aguda en ratones para investigar la resistencia a fármacos. Este método permite estudiar la evolución dinámica de células resistentes a la quimioterapia in vivo.

Modelo murino de leucemia Recaída a quimioterapia de inducción para la leucemia linfoblástica aguda

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