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Estimulación de las células endoteliales vasculares mediante trampas extracelulares de neutrófilo...
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JoVE Journal Biochemistry
Stimulation of Vascular Endothelial Cells Using Neutrophil Extracellular Traps in the Presence of Low-Density Lipoprotein

Estimulación de las células endoteliales vasculares mediante trampas extracelulares de neutrófilos en presencia de lipoproteínas de baja densidad

Full Text
736 Views
07:26 min
August 12, 2025

DOI: 10.3791/68830-v

Takashi Obama1, Haruki Iwakura1, Hitomi Ohinata1, Tomohiko Makiyama1, Hiroyuki Itabe1

1Department of Biological Chemistry,Showa Medical University Graduate School of Pharmacy

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Se describe una serie de métodos, que incluyen el aislamiento de lipoproteínas de baja densidad (LDL) del plasma humano, la diferenciación de células HL-60 en células similares a neutrófilos, la preparación de trampas extracelulares de neutrófilos (NET) en presencia de LDL y la estimulación de células endoteliales aórticas humanas con una mezcla de NET y LDL.

Las trampas extracelulares de neutrófilos están involucradas en una variedad de enfermedades, incluidas las enfermedades cardiovasculares. Sin embargo, los efectos sinérgicos de la formación de NET y las lipoproteínas en las células vasculares siguen sin estar claros. Utilizando este protocolo, hasta la fecha se están realizando análisis mecanicistas de cómo se inducen las respuestas inflamatorias en las células endoteliales aórticas humanas tratadas con trampas extracelulares de neutrófilos y lipoproteínas de baja densidad.

Hemos demostrado que la lipoproteína de alta densidad actúa como supresor de la formación de NET. Eso es promovido por lipoproteínas oxidadas de baja densidad, fosfolípidos oxidados y lisofosfolípidos. Para comenzar, centrifugar de 45 a 50 mililitros de sangre entera humana obtenida en un tubo de heparina a 700 G durante 15 minutos a cuatro grados centígrados.

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