Name: Plataforma de imágenes sin lentes desplegable en campo para un análisis rápido sin etiquetas de la activación de células asesinas naturales (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-08T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Aprende a analizar células asesinas naturales sin etiquetas mediante imágenes sin lentes en tiempo real. Esta plataforma computacional evalúa la activación celular en 30 segundos, eliminando costosos marcadores y citometría de flujo.

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<table><tbody><tr><td>Tubos de microcentrífuga de 1,7 ml</td><td>AXYGEN</td><td>MCT-175-C</td><td>Estéril, libre de ADNasa/ARNasa</td></tr><tr><td>Portaobjetos de ensayo</td><td>Metainmune</td><td>AS050-G</td><td>Portaobjetos dedicado para el sistema Cellytics 50 portaobjetos en una caja</td></tr><tr><td>Sistema Cellytics con software</td><td>Metainmune</td><td>CS001</td><td>Plataforma de imágenes de sombras sin lentes</td></tr><tr><td>Centrífuga (rotor de cubeta oscilante)</td><td>LABÓGENO</td><td>1580R</td><td>300&ndash; 500 &veces; Gama G</td></tr><tr><td>Sensor de imagen CMOS</td><td>Incluido con el dispositivo Cellytics</td><td>Integrado</td><td>Se utiliza para imágenes de difracción</td></tr><tr><td>Centrífuga Cytospin</td><td>Nasco corea</td><td>Citocentrífuga TXT3</td><td>Para tinción de citocentrifugación</td></tr><tr><td>Bloque calefactor digital (37 &deg; C)</td><td>Daihan Científico</td><td>DH. WHB00349</td><td>Para incubación celular</td></tr><tr><td>Kit ELISA (IFN-&gamma;)</td><td>R& Sistema D</td><td>DIF50C</td><td>IFN-&gamma humano; Kit ELISA</td></tr><tr><td>Citómetro de flujo Guava easyCyte</td><td>Millipore</td><td>0500-5005</td><td>Para el análisis de expresión de CD107a</td></tr><tr><td>Paquete de estadísticas Hema 3</td><td>ThermoFisher</td><td>122-911</td><td>Para tinción de citocentrifugación</td></tr><tr><td>IL-12 (Humano Recombinante)</td><td>R& Sistema D</td><td></td><td>Componente de ASC</td></tr><tr><td>IL-2 (humano recombinante)</td><td>Peprotech</td><td>200-02</td><td>Componente de ASC</td></tr><tr><td>Bastidor de separación magnética</td><td>Metainmune</td><td>M13R8</td><td>Para la separación de cordones</td></tr><tr><td>Portaobjetos de microscopio</td><td>Marienfeld</td><td>1000612</td><td>Para preparaciones de citocentrifugación</td></tr><tr><td>Kit de activación NK</td><td>Metainmune</td><td>MIT2301V, MIT2301A</td><td>Para la activación de células NK</td></tr><tr><td>NK Sep Kit</td><td>Metainmune</td><td>MIT2301-500</td><td>Para el aislamiento de células NK</td></tr><tr><td>PE Ratón Anti-Humano CD107a, 100test</td><td>BD biociencias</td><td>555801</td><td>Para el análisis de expresión de CD107a</td></tr><tr><td>Abertura estenopeica</td><td>Incluido con el dispositivo Cellytics</td><td>Integrado</td><td>Utilizado en la ruta de iluminación LSIT</td></tr><tr><td>Pipetas (2&ndash; 20 &micro; L, 20&ndash; 200 &micro; L)</td><td>AXYGEN</td><td>T-200-Y</td><td>Volumen ajustable</td></tr><tr><td>Diapositiva de calibración de sombras</td><td>Metainmune</td><td>AS050-G</td><td>Para calibración del dispositivo. 1 Portaobjetos de calibración en 1 Caja de portaobjetos de ensayo</td></tr><tr><td>Mezclador de vórtice</td><td>Merck&nbsp;</td><td>SI-0246A</td><td>Para resuspensión</td></tr></tbody></table>

plataforma de imágenes sin lentes desplegable en campo para un análisis rápido sin etiquetas de la activación de células asesinas naturales

Field-Deployable Lens-Free Imaging Platform for Rapid Label-Free Analysis of Natural Killer Cell Activation

Siguiendo este protocolo, la plataforma LSIT permite una evaluación cuantitativa y sin etiquetas de la activación de las células NK basada en cambios morfológicos en las células. La Figura 2A muestra preparaciones de citospígrafe teñidas con Hema-3 de células NK primarias de donantes sanos después de 2 h de incubación con o sin ASC. La activación por ASC da como resultado cambios marcados, principalmente agrandamiento celular y mayor complejidad interna o granularidad, en comparación con los...

Plataforma de imágenes sin lentes desplegable en campo para un análisis rápido sin etiquetas de la activación de células asesinas naturales

Natural killer (NK) cells are important effectors of innate immunity that eliminate virus-infected and malignant cells. Monitoring NK cell activity is ...

field-deployable-lens-free-imaging-platform-for-rapid-label-free

Research

Investigación

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingeniería

Lensfree en el chip de imagen y caracterización de las células se ilustra. Este enfoque de células en el chip de imagen proporciona una herramienta compacta y rentable para el diagnóstico médico y de alto rendimiento de aplicaciones de la biología celular, por lo que es especialmente adecuado para entornos de escasos recursos.

Sin cristalino en el chip de imagen de las células proporciona una nueva herramienta de alto rendimiento Biología celular y el diagnóstico médico

Aquí se describe una manera no invasiva de dos fotones (2P), microscopía de enfoque para el estudio de leucocitos de recalada en la almohadilla plantar del ratón. Se discuten los aspectos técnicos de la preparación de imágenes de tejidos y caminar al lector a través de un experimento típico de la configuración inicial a la colección de ejecución y los datos.

De imagen no invasivas de Homing leucocitos y Migración In vivo</em

En este video, describimos la técnica de microscopía de lámina de luz reticular para visualizar las interacciones entre las células T vivas y las células presentadoras de antígenos. El método consiste en enfocar una lámina de luz reticular ultradelgada en un par de células que interactúan para obtener una serie de imágenes bidimensionales, que se combinan para obtener imágenes cuatridimensionales de alta resolución que revelan la dinámica espacio-temporal de la interacción célula-célula.

Microscopía de lámina de luz reticular para visualizar las interacciones receptor-ligando en células vivas

Este video muestra una técnica para visualizar la formación de la sinapsis inmunológica en células asesinas naturales (NK) en una bicapa lipídica (SLB) soportada. El SLB se marca primero con un ligando del receptor activador de células NK marcado con fluoróforos, seguido de la incubación con células NK. Posteriormente, las células se tiñen para obtener actina polimerizada y gránulos líticos perforin-positivos. Este enfoque permite la visualización de la formación de sinapsis mediante...

Imágenes de superresolución de la formación de sinapsis inmunológica de células NK en una bicapa lipídica soportada

Aquí se ilustra el protocolo para obtener imágenes de dos colores STED nanoscopía la sinapsis inmune citotóxica de las células NK recapitulado sobre vidrio. Con este método se obtiene la resolución nm sub-100 de las proteínas de la sinapsis y el citoesqueleto.

La visualización de la sinapsis inmunológica mediante gated-Tiempo color dual Emisión Estimulada de Agotamiento (STED) Nanoscopia

Describimos aquí una combinación de la técnica de bicapa lipídica soportada por vidrio para formar sinapsis inmunológicas con la técnica de imagen de superresolución de la microscopía de depleción por emisión estimulada (STED). El objetivo de este protocolo es proporcionar a los usuarios las instrucciones necesarias para llevar a cabo con éxito estas dos técnicas.

Super-resolución de imagen de la célula Natural Killer inmunológica Synapse en un apoyada-Glass planar bicapa lipídica

La comunicación entre celulares es fundamental para el control de diversas actividades fisiológicas dentro y fuera de la célula. En este trabajo se describe un protocolo para la medición de la naturaleza espacio-temporal de las secreciones de células individuales. Para ello, se utiliza un enfoque multidisciplinario que integra nanoplasmonic etiqueta libre de detección con imágenes de células vivas.

Una técnica-Label libre para el Imaging espacio-temporal de las secreciones sola célula

Microscopía lente libre de vídeo nos permite supervisar cultivos celulares directamente dentro de la incubadora. Aquí describimos el protocolo completo utilizado para adquirir y analizar una adquisición largo 2,7 días de cultivos de células HeLa, conduce a un conjunto de datos de 2.2 x 106 mediciones de morfología de la célula individual y ciclo celular 10584 pistas.

Lente libre Video microscopia para la dinámica y el análisis cuantitativo del cultivo de células adherentes

Se describe un protocolo para la identificación de subtipos de linfocitos usando proyección de imagen de fase cuantitativa y un algoritmo de aprendizaje automático libre de etiqueta. Las mediciones de índice de refracción 3D tomogramas de linfocitos presentan 3D información morfológica y bioquímica de células individuales, que luego se analiza con un algoritmo de aprendizaje automático para la identificación de tipos de la célula.

Máquina de aprendizaje y sin etiqueta de identificación de subtipos de linfocitos usando proyección de imagen tridimensional fase cuantitativa

El objetivo de este protocolo es mostrar cómo utilizar la microscopía de hoja de luz de celosía para visualizar la dinámica de receptores de superficie en células vivas. Aquí se muestran los receptores de células T en CD4+ células T primarias.

Visualización de la dinámica del receptor de células T de superficie de cuatro dimensiones mediante la microscopía de hoja de luz de celosía

Aprende a analizar células asesinas naturales sin etiquetas mediante imágenes sin lentes en tiempo real. Esta plataforma computacional evalúa la activación celular en 30 segundos, eliminando costosos marcadores y citometría de flujo.

Plataforma de imágenes sin lentes desplegable en campo para un análisis rápido sin etiquetas de la activación de células asesinas naturales (Video) | JoVE Journal

Plataforma de imágenes sin lentes desplegable en campo para un análisis rápido sin etiquetas de la activación de células asesinas naturales

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