Disección de tejidos craneofaciales de pez cebra al teñirlos con azul alcián

Estamos explorando los mecanismos por los cuales el paladar del pez cebra crece con el tiempo utilizando muestras fijas, así como imágenes de lapso de tiempo de embriones con alta resolución espacio-temporal utilizando microscopía de hoja de luz. Nuestro protocolo es simple y fácil de seguir. Establece pasos detallados para diseccionar y separar los cartílagos craneofaciales de una larva de pez cebra de cinco días.

Este protocolo ha permitido una caracterización cuidadosa de la forma del paladar a escala tisular y celular, lo que en última instancia nos permite evaluar el efecto de los antígenos de comentario en la morfogénesis del paladar. Para comenzar, obtenga de 20 a 25 larvas de pez cebra anestesiadas y retire el anestésico una vez que las larvas hayan dejado de moverse. Agregue 1,5 mililitros de aldehído paraformo al 4% al tubo y coloque la muestra en un balancín a 60 revoluciones por minuto a temperatura ambiente durante dos horas.