Name: Establecimiento y mantenimiento de organoides de cáncer de próstata derivados del paciente: un protocolo experimental detallado (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: Aprenda a establecer organoides de cáncer de próstata derivados del paciente para estudios de tratamiento personalizado. Este protocolo optimizado preserva las características tumorales y mejora el cribado de fármacos en medicina de precisión.

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<ol><li>James, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lancet+commission+on+prostate+cancer%3A+planning+for+the+surge+in+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">The lancet commission on prostate cancer: planning for the surge in cases.</a> Lancet. 403 (10437), 1683-1722 (2024).</li>
<li>Knutson, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AR+alterations+inform+circulating+tumor+DNA+detection+in+metastatic+castration+resistant+prostate+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">AR alterations inform circulating tumor DNA detection in metastatic castration resistant prostate cancer patients.</a> Nat Commun. 15 (1), 10648(2024).</li>
<li>Haffner, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Framework+for+the+pathology+workup+of+metastatic+castration-resistant+prostate+cancer+biopsies%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Framework for the pathology workup of metastatic castration-resistant prostate cancer biopsies.</a> Clin Cancer Res. 31 (3), 466-478 (2025).</li>
<li>Fang, Z., Li, P., Du, F., Shang, L., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+organoids+in+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">The role of organoids in cancer research.</a> Exp Hematol Oncol. 12 (1), 69(2023).</li>
<li>Sachs, N., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+cultures+for+the+analysis+of+cancer+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">Organoid cultures for the analysis of cancer phenotypes.</a> Curr Opin Genet Dev. 24, 68-73 (2014).</li>
<li>Zhou, L., Zhang, C., Zhang, Y., Shi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+organoid+models+in+prostate+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Application of organoid models in prostate cancer research.</a> Front Oncol. 11, 736431(2021).</li>
<li>Gao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+cultures+derived+from+patients+with+advanced+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid cultures derived from patients with advanced prostate cancer.</a> Cell. 159 (1), 176-187 (2014).</li>
<li>Drost, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+culture+systems+for+prostate+epithelial+and+cancer+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Organoid culture systems for prostate epithelial and cancer tissue.</a> Nat Protoc. 11 (2), 347-358 (2016).</li>
<li>Puca, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+to+model+rare+prostate+cancer+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids to model rare prostate cancer phenotypes.</a> Nat Commun. 9 (1), 2404(2018).</li>
<li>Pamarthy, S., Sabaawy, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+in+prostate+cancer%3A+improving+therapeutic+efficacy+in+precision+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids in prostate cancer: improving therapeutic efficacy in precision medicine.</a> Mol Cancer. 20 (1), 125(2021).</li>
<li>Karkampouna, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenografts+and+organoids+model+therapy+response+in+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenografts and organoids model therapy response in prostate cancer.</a> Nat Commun. 12 (1), 1117(2021).</li>
<li>Driehuis, E., Kretzschmar, K., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+patient-derived+cancer+organoids+for+drug-screening+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Establishment of patient-derived cancer organoids for drug-screening applications.</a> Nat Protoc. 15 (10), 3380-3409 (2020).</li>
<li>Neal, J. T., Kuo, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids+as+models+for+neoplastic+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">Organoids as models for neoplastic transformation.</a> Annu Rev Pathol. 11, 199-220 (2016).</li>
<li>Waseem, M., Wang, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%3A+an+emerging+precision+medicine+model+for+prostate+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Organoids: an emerging precision medicine model for prostate cancer research.</a> Int J Mol Sci. 25 (2), (2024).</li>
<li>Moschovas, M. C., Patel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurovascular+bundle+preservation+in+robotic-assisted+radical+prostatectomy%3A+how+I+do+it+after+15%2C000+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Braz+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Neurovascular bundle preservation in robotic-assisted radical prostatectomy: how I do it after 15,000 cases.</a> Int Braz J Urol. 48 (2), 212-219 (2022).</li>
<li>Li, Y., Qin, M., Liu, N., Zhang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+development+and+applications+in+gynecological+cancers%3A+the+new+stage+of+tumor+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Organoid development and applications in gynecological cancers: the new stage of tumor treatment.</a> J Nanobiotechnology. 23 (1), 20(2025).</li>
<li>Xiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Building+consensus+on+the+application+of+organoid-based+drug+sensitivity+testing+in+cancer+precision+medicine+and+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Building consensus on the application of organoid-based drug sensitivity testing in cancer precision medicine and drug development.</a> Theranostics. 14 (8), 3300-3316 (2024).</li>
<li>Van Hemelryk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenografts+and+organoids+recapitulate+castration-resistant+prostate+cancer+with+sustained+androgen+receptor+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenografts and organoids recapitulate castration-resistant prostate cancer with sustained androgen receptor signaling.</a> Cells. 11 (22), 3632(2022).</li>
<li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+bladder+cancer+organoids+as+a+valuable+tool+for+understanding+tumor+biology+and+developing+personalized+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Patient-derived bladder cancer organoids as a valuable tool for understanding tumor biology and developing personalized treatment.</a> Adv Sci (Weinh). 12 (13), e2414558(2025).</li>
<li>Polak, R., Zhang, E. T., Kuo, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+organoids+2.0%3A+modelling+the+complexity+of+the+tumour+immune+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Cancer organoids 2.0: modelling the complexity of the tumour immune microenvironment.</a> Nat Rev Cancer. 24 (8), 523-539 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>A 83-01</td><td>TOCRIS</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>adMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>12634010</td><td></td></tr><tr><td>Gabinete de bioseguridad</td><td>Jinan Xinbeixi Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solución de Recuperación Celular</td><td>Corning</td><td>354253</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co., Ltd</td><td>M1416R</td><td></td></tr><tr><td>Tubos centrífugas</td><td>Nankín iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cultrex PathClear BM</td><td>R& D</td><td>3533-010-02</td><td></td></tr><tr><td>Cultrex Factor de Crecimiento Reducido BME, Tipo 2</td><td>R& D</td><td>3533-005-02</td><td></td></tr><tr><td>Recipientes de cultivo (placas de baja adhesión de 24 pozos)</td><td>Termodinámica</td><td>Nunc-174930-ZX</td><td></td></tr><tr><td>DHT</td><td>ISOREAG</td><td>521-18-6</td><td></td></tr><tr><td>Balance electrónico</td><td>Nankín iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Gibco</td><td>10099141</td><td></td></tr><tr><td>GlutaminePlus-200mM</td><td>R& D</td><td>B90210</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>R& D</td><td>1254/10</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora de cultivo celular humidificado (37&ºC; C, 5% CO2)</td><td>Shanghai Hetian Scientific Instrument Co., Ltd</td><td>HY-160SY</td><td></td></tr><tr><td>Caja de hielo</td><td>Nankín iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>platos de cultura de tamaño medio</td><td>Absenta</td><td>abs7005</td><td></td></tr><tr><td>Suplemento de medios N21-MAX (50X)</td><td>R& D</td><td>AR008</td><td></td></tr><tr><td>N-acetilcisteína</td><td>Sigma</td><td>A9165-5G</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamida</td><td>R& D</td><td>3533-010-02</td><td></td></tr><tr><td>Normocin</td><td>Invivogen</td><td>ANT-NR-2</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo de pipeteo con pipeteo tipo pipeteo</td><td>Nankín Hotspot Scientific Instrument Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipetas</td><td>Nankín Hotspot Scientific Instrument Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Primocin</td><td>Invivogen</td><td>ANT-PM-2</td><td></td></tr><tr><td>rhEGF</td><td>R& D</td><td>236-EG-01M</td><td></td></tr><tr><td>rhFGF</td><td>R& D</td><td>233-FB-025</td><td></td></tr><tr><td>rhFGF-10</td><td>R& D</td><td>345-FG-025</td><td></td></tr><tr><td>rhNoggin</td><td>R& D</td><td>6057-NG-100</td><td></td></tr><tr><td>rhR-Spondin 1</td><td>R& D</td><td>4656-RS-100</td><td></td></tr><tr><td>SB 202190</td><td>TOCRIS</td><td>1264</td><td></td></tr><tr><td>Aparato de preparación de suspensión de célula única</td><td>RWD</td><td>DSC-400</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de tejido/bisturí</td><td>Nankín iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TryplE Express</td><td>Gibco</td><td>126A04013</td><td></td></tr><tr><td>Kit de Disociación Tumoral, Humano</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-095-929</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas</td><td>Nankín iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Baños de agua</td><td>Changzhou Zhongjie Experimental Instrument Manufacturing Co., Ltd</td><td>HH-600</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632 dihidrocloruro</td><td>R& D</td><td>1254/10</td><td></td></tr></tbody></table>

establecimiento y mantenimiento de organoides de cáncer de próstata derivados del paciente: un protocolo experimental detallado

Establishment and Maintenance of Patient-derived Prostate Cancer Organoids: A Detailed Experimental Protocol

Establecimiento y mantenimiento de organoides de cáncer de próstata derivados del paciente: un protocolo experimental detallado

Prostate cancer (PCa) is a highly heterogeneous malignancy and a leading cause of cancer-related mortality in men, with significant clinical challenges in ...

establishment-maintenance-patient-derived-prostate-cancer-organoids

Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

Los organoides derivados de tumores son un tipo de modelo de cultivo celular en 3D que puede mantener las características patológicas y el linaje celular específico de los órganos de los tumores. En el protocolo de ejemplo, veremos a los científicos generar organoides a partir de un tumor de próstata a partir de un modelo de ratón modificado genéticamente.

Preparación de organoides a partir de tumores: un modelo tumoral in vitro en 3D

Aquí, presentamos un protocolo guía de manejo de organoide de próstata primario humano y sugerir criterios de valoración para evaluar el fenotipo. Siembra, mantenimiento de la cultura, recuperación de gel de la matriz, cuantificación morfológica, incrustar y seccionamiento, FFPE seccionamiento, todo Monte tinción y aplicación de ensayos comerciales se describen.

Manejo y evaluación de la cultura humana organoide de próstata primario

Mostramos un método para la necropsia y la disección de modelos de cáncer de próstata de ratón, centrándose en la disección tumoral de próstata. También se presenta un protocolo paso a paso para la generación de organoides tumorales de próstata de ratón.

Generación de organoides tumorales a partir de modelos de ratón de ingeniería genética del cáncer de próstata

Aquí se presenta un protocolo para estudiar las respuestas farmacológicas en organoides epiteliales de próstata. Los organoides se asemejan mucho a la biología in vivo y recapitulan la genética de los pacientes, convirtiéndolos en atractivos sistemas de modelos. Los organoides de próstata se pueden establecer a partir de próstatas de tipo salvaje, modelos de ratón genéticamente diseñados, tejido humano benigno y cáncer de próstata avanzado.

Cultivos organoides de próstata como herramientas para traducir genotipos y perfiles mutacionales a respuestas farmacológicas

Los cultivos tridimensionales de muestras BMPC pacientes y xenoinjertos de cáncer de próstata metastásico óseo mantienen la heterogeneidad funcional de sus tumores originales, lo que resulta en quistes, esferoides y organoides complejos similares a tumores. Este manuscrito proporciona una estrategia de optimización y protocolo para el cultivo 3D de muestras derivadas de pacientes heterogéneos y su análisis utilizando IFC.

Establecimiento y Análisis de Organoides Tridimensionales (3D) Derivados de los Especímenes de Metastasis ósea del Cáncer de Próstata del Paciente y sus Xenoinjertos

Aquí se proporciona un protocolo detallado para establecer organoides mamarios humanos a partir de resecciones de tumores de mama derivados de pacientes o tejido mamario normal. El protocolo proporciona instrucciones completas paso a paso para el cultivo, la congelación y la descongelación de organoides mamarios derivados de pacientes humanos.

Establecimiento y cultivo de organoides mamarios derivados de pacientes

Los organoides tumorales han revolucionado la investigación del cáncer y el enfoque de la medicina personalizada. Representan un modelo tumoral clínicamente relevante que permite a los investigadores estar un paso por delante del tumor en la clínica. Este protocolo establece organoides tumorales a partir de muestras frescas de tejido tumoral pancreático y xenoinjertos derivados de pacientes de origen adenocarcinoma de páncreas.

Establecimiento de organoides tumorales derivados del cáncer de páncreas y fibroblastos a partir de tejido fresco

Este protocolo describe la generación de un modelo murino basado en organoides prostáticos cultivado en 2D. Incluye disociación de organoides, siembra celular, diferenciación, evaluación de la integridad epitelial e infección in vitro con Escherichia coli uropatógena. El modelo proporciona accesibilidad apical y es adecuado para estudiar las interacciones huésped-patógeno, superando las limitaciones de los sistemas organoides 3D tradicionales.

Generación de un modelo basado en organoides prostáticos de ratón para estudiar las interacciones huésped-patógeno

La utilización de los tumores derivados del paciente en un modelo preclínico subcutánea es una manera excelente para estudiar la eficacia de nuevas terapias, el descubrimiento de biomarcadores predictivos y vías resistentes a los fármacos. Este modelo, en el proceso de desarrollo de fármacos, es fundamental para determinar el destino de muchas nuevas terapias contra el cáncer antes de la investigación clínica.

Desarrollo y mantenimiento de un tumor del paciente preclínicos Derivado modelo de xenoinjerto para la Investigación de Novela Anti-Cancer Therapies

El siguiente protocolo se centra en el establecimiento de un cultivo primario de sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente (STS). Este modelo podría ayudarnos a entender mejor el fondo molecular y perfil farmacológico de estos raros tumores malignos y podría representar un punto de partida para futuras investigaciones destinadas a mejorar la gestión de STS.

Establecimiento de un cultivo primario de Sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente

Aprenda a establecer organoides de cáncer de próstata derivados del paciente para estudios de tratamiento personalizado. Este protocolo optimizado preserva las características tumorales y mejora el cribado de fármacos en medicina de precisión.

Establecimiento y mantenimiento de organoides de cáncer de próstata derivados del paciente: un protocolo experimental detallado

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