Name: Evaluación radioquímica de la actividad de la enzima glucógeno sintasa en tejido animal (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T14:50:00.000+00:00
Duration: 2 min 30 s
Description: Aprenda a evaluar la actividad enzimática de la glucógeno sintasa en tejido animal usando modelos murinos modificados genéticamente. Este método de detección por centelleo nuclear permite medir la incorporación de glucosa radiomarcada en glucógeno con alta sensibilidad.

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<ol><li>Preiss, J., Walsh, D. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPreiss%2C+J+%22Biology+of+Carbohydrates%22">Biology of Carbohydrates</a>. Ginsburg, V., Robbins, P. 1, John Wiley. 199-314 (1981).</li>
<li>Pederson, B. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPederson%2C+BA+%22Enzymology+of+Complex+Alpha-Glucans%22">Enzymology of Complex Alpha-Glucans</a>. , CRC Press. 84-137 (2021).</li>
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<li>Leloir, L. F., Olavarria, J. M., Goldemberg, S. H., Carminatti, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosynthesis+of+glycogen+from+uridine+diphosphate+glucose%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Biochem+Biophys%22%5BJournal%5D)">Biosynthesis of glycogen from uridine diphosphate glucose.</a> Arch Biochem Biophys. 81 (2), 508-520 (1959).</li>
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<li>Gomes, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+storage+and+muscle+glucose+transporters+%28GLUT-4%29+of+mice+selectively+bred+for+high+voluntary+wheel+running%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Glycogen storage and muscle glucose transporters (GLUT-4) of mice selectively bred for high voluntary wheel running.</a> J Exp Biol. 212 (Pt 2), 238-248 (2009).</li>
<li>Greenberg, C. C., Jurczak, M. J., Danos, A. M., Brady, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+branches+out%3A+new+perspectives+on+the+role+of+glycogen+metabolism+in+the+integration+of+metabolic+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Glycogen branches out: new perspectives on the role of glycogen metabolism in the integration of metabolic pathways.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 291 (1), E1-E8 (2006).</li>
<li>Bradford, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+sensitive+method+for+the+quantitation+of+microgram+quantities+of+protein+utilizing+the+principle+of+protein-dye+binding%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.</a> Anal Biochem. 72, 248-254 (1976).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>[14C] Uridina 5-difosfo-glucosa</td><td>Productos químicos radiomarcados estadounidenses</td><td>ARCO 0154</td><td></td></tr><tr><td>31 Artículo de cromatografía ETCHR</td><td>Whatman</td><td>3031 915</td><td></td></tr><tr><td>Hidrato de clorhidrato de benzamidina</td><td>Sigma</td><td>B6506</td><td></td></tr><tr><td>Beta mercaptoetanol</td><td>Sigma</td><td>M3148</td><td></td></tr><tr><td>Baño seco</td><td>Torey Pines Scientific</td><td>SC25</td><td></td></tr><tr><td>Etanol (200 grados)</td><td>PharmcoAaper</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>Ácido tetraacético de etilenglicol (EGTA)</td><td>Sigma</td><td>E4378</td><td></td></tr><tr><td>Ácido etilendediaminático tetraacético (EDTA)</td><td>Sigma</td><td>E5134</td><td></td></tr><tr><td>Glucosa-6-fosfato sal</td><td>Sigma</td><td>G7879</td><td></td></tr><tr><td>Glucógeno del hígado de conejo (Tipo III)</td><td>Sigma</td><td>G8876</td><td></td></tr><tr><td>Microplaca, fondo plano, 96 pozos</td><td>Greiner</td><td>655101</td><td></td></tr><tr><td>Microplaca, PCR, 96 pozos</td><td>DOT Scientific</td><td>951-PCR</td><td></td></tr><tr><td>Contador de centelleo multiusos</td><td>Beckman Coulter</td><td>LS 6500</td><td></td></tr><tr><td>Dihidrato de fluoruro potásico</td><td>Sigma</td><td>221872</td><td></td></tr><tr><td>Cóctel inhibidor de proteasas</td><td>GoldBio</td><td>GB-108-2</td><td></td></tr><tr><td>Cóctel de centelleo</td><td>Productos de Investigación Internacional</td><td>111195</td><td></td></tr><tr><td>Viales de centelleo</td><td>Productos de Investigación Internacional</td><td>125509</td><td></td></tr><tr><td>Fluoruro de sodio</td><td>Sigma</td><td>S7920</td><td></td></tr><tr><td>Desgarro tisular</td><td>Productos Biospec</td><td>Modelo 398</td><td></td></tr><tr><td>Tosilisina Clorometil Cetona (TLCK)</td><td>Sigma</td><td>T7254</td><td></td></tr><tr><td>Base de Trizma (99,9%)</td><td>Sigma</td><td>T1503</td><td></td></tr><tr><td>Clorhidrato de Trizma</td><td>Sigma</td><td>T3253</td><td></td></tr><tr><td>Uridina 5-difospoglucosa</td><td>Sigma</td><td>U-4625</td><td></td></tr></tbody></table>

evaluación radioquímica de la actividad de la enzima glucógeno sintasa en tejido animal

Radiochemical Assessment of Glycogen Synthase Enzyme Activity in Animal Tissue

Evaluación radioquímica de la actividad de la enzima glucógeno sintasa en tejido animal

Glycogen is an important metabolite to many eukaryotic cells, integral to energy storage and quick energy release. The building of the molecule is ...

radiochemical-assessment-glycogen-synthase-enzyme-activity-animal

Research

Investigación

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Este video describe un ensayo espectrofotométrico para la estimación de la actividad de la glucógeno sintasa. El método se basa en la reducción de la absorbancia de NADH con el tiempo e indica la actividad de la glucógeno sintasa.

Ensayo espectrofotométrico para determinar la actividad de la glucógeno sintasa

En este video, describimos un ensayo espectrofotométrico cualitativo para determinar el grado de ramificación en una muestra de glucógeno con una estructura no caracterizada. La comparación de los máximos de absorbancia de la muestra no caracterizada con los de los polisacáridos con estructuras ramificadas conocidas indica la presencia de ramificación en la muestra no caracterizada.

Ensayo de ramificación de glucógeno para medir el grado de ramificación de glucógeno

Se describe aquí un método bioquímico exacta, reproducible y conveniente para la titulación de glucógeno in vitro. Esta técnica utiliza el kit de ensayo de Abcam glucógeno y se basa en la hidrólisis sucesivas de glucógeno en glucosa y la glucosa titulación por fluorescencia.

Titulación bioquímica de glucógeno<em&gt; In vitro</em

La tinción de Schiff con ácido peryódico es una técnica que visualiza el contenido de polisacáridos de los tejidos. Este artículo demuestra el protocolo de tinción de Schiff de ácido peryódico adaptado para su uso en células mononucleares de sangre periférica purificadas a partir de sangre venosa humana. Dichas muestras están enriquecidas con linfocitos y otros glóbulos blancos del sistema inmunitario.

La detección de glucógeno en las células mononucleares de sangre periférica con ácido periódico de Schiff tinción

Aquí, presentamos un ensayo fiable y fácil para medir el contenido de glucógeno en células de cianobacterias. El procedimiento implica precipitación, despolimerización seleccionable y la detección de residuos de glucosa. Este método es adecuado para cepas de tipo salvaje y genéticamente modificadas y puede facilitar la ingeniería metabólica de las cianobacterias.

Determinación del contenido de glucógeno en las cianobacterias

Se presentan técnicas para medir la actividad de enzimas clave del metabolismo del glucógeno, utilizando un espectrofotómetro simple que opera en el rango visible.

Métodos espectrofotométricos para el estudio del metabolismo del glucógeno eucariota

Se determinó una concentración óptima de sacarosa para la extracción de glucógeno hepático mediante centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa. La adición de un paso de ebullición de 10 minutos para inhibir las enzimas que degradan el glucógeno resultó beneficiosa.

La extracción de moléculas de glucógeno hepático para la determinación de la estructura del glucógeno

Como las mitocondrias son sólo un pequeño porcentaje de la célula de la planta, tienen que ser purificado para una gama de estudios. Las mitocondrias pueden ser aisladas de una variedad de órganos de la planta de homogeneización, seguido de centrifugación gradiente diferencial y densidad para obtener una fracción altamente purificada mitocondrial.

Aislamiento y medidas respiratoria de las mitocondrias de Arabidopsis thaliana

Se describe un protocolo para el mapeo de la distribución espacial de la actividad enzimática de las enzimas que generan nicotinatmide adenina-dinucleótido-fosfato (NAD(P)H) + H + directamente en muestras de tejido.

Asignación de metabolismo: Supervisar la actividad de la deshidrogenasa del lactato directamente en el tejido

Este protocolo describe una metodología eficiente para la extracción y cuantificación de cafeína en suspensiones celulares de C. arabica L. y un proceso experimental para la evaluación de la actividad enzimática de la cafeína sintasa con el nivel de expresión de el gen que codifica esta enzima.

Extracción de cafeína, la actividad enzimática y la expresión del gen de la sintasa de cafeína de suspensiones celulares de plantas

Aprenda a evaluar la actividad enzimática de la glucógeno sintasa en tejido animal usando modelos murinos modificados genéticamente. Este método de detección por centelleo nuclear permite medir la incorporación de glucosa radiomarcada en glucógeno con alta sensibilidad.

Evaluación radioquímica de la actividad de la enzima glucógeno sintasa en tejido animal

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