FLEX: Protocolo de entrenamiento de ejercicios de vuelo para la mosca de la fruta Drosophila

Nuestra investigación se centra en la susceptibilidad transgeneracional a trastornos neurológicos y metabólicos. Investigamos mecanismos moleculares, específicamente cambios bioenergéticos que podrían transmitir susceptibilidad a través de generaciones. Las técnicas ómicas como la transcriptómica, la proteómica y la metabolómica pueden ayudar a identificar los mecanismos y causas de los trastornos neurodegenerativos.

Para empezar, mantén a las moscas Drosophila en una incubadora o habitación mantenida a 24 grados Celsius con un 60% de humedad y un ciclo de luz y oscuridad de 12 horas. Recoge moscas con edades iguales en un plazo de tres a cuatro días tras la eclosión. Asigna aleatoriamente las moscas a grupos de ejercicio y sedentarios.

Proporciona a ambos grupos siete mililitros de alimento de formulación y utiliza cinta adhesiva para asegurar los frascos dentro de los cuencos. Si la humedad no se puede controlar, proporciona acceso al agua colocando frascos de algodón húmedo dentro de los cuencos y pegándolos con cinta a las paredes del cuenco. Transfer vuela en los cuencos un día antes de que comience el régimen de ejercicio.

Cubre las aberturas de los cuencos con malla y sujeciónala con gomas elásticas. Realiza el entrenamiento en una sala mantenida a 24 grados Celsius con un 60% de humedad. Sujeta los cuencos a la plataforma de ejercicio usando cuerdas elásticas.

Usa dos temporizadores para controlar el motor. Pon el primer temporizador para arrancar la máquina a las 8:00 a.m. y deténla a las 3:00 p.m. todos los días.

Programa el segundo temporizador para que active una serie de tres revoluciones motoras cada cinco minutos. Cada revolución debería elevar y bajar la plataforma, induciendo el vuelo de las moscas. Al final del régimen FLEX, coloca los cuencos en una sala fría durante cinco minutos para inmovilizar las moscas.

Luego, transfiere las moscas a nuevos viales de alimento para análisis fenotípicos o a tubos microcentrífugas para ensayos moleculares o bioquímicos. El régimen de ejercicios de vuelo de cinco días redujo significativamente la mortalidad en moscas con una dieta occidental. El ejercicio de vuelo también mejoró la capacidad de escalada en moscas alimentadas con dieta occidental.

El consumo máximo de ogen durante la respiración apoyada por complejo uno se redujo en un 42% en los músculos de vuelo de moscas alimentadas con dieta occidental en comparación con los controles, pero se restauró en moscas del grupo Western diet plus ejercicio. La descendencia de padres alimentados con dieta occidental mostró significativamente más lamidas de alimentación que otros grupos, mientras que el ejercicio paterno anuló este aumento. Descubrimos que la dieta occidental paterna reprograma el fenotipo de la descendencia, incluyendo cambios en la actividad, el aprendizaje y la memoria, y el comportamiento alimenticio.

Muchos protocolos dependen del comportamiento de escalada forzada. El ejercicio de vuelo es más fisiológico y no provoca lesiones. Este protocolo utilizará más ejercicio fisiológico que genere demandas bioenergéticas significativas y minimizará las lesiones.