Name: Montaje reproducible para la imagen in vivo de dos fotones de la contractilidad de los vasos linfáticos cervicales y el flujo linfático en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-10T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 15 s
Description: Aprende a realizar imagen in vivo de dos fotones de la contractilidad de vasos linfáticos cervicales en ratones. Este protocolo permite observaciones de hasta cinco horas con condiciones fisiológicas estables.

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<table><tbody><tr><td>3D printer</td><td>Bambu Lab, China</td><td>P1S</td><td></td></tr><tr><td>5pin connector</td><td>Connfly electronic (Zhenqin), China</td><td>DS1110-01</td><td></td></tr><tr><td>A set of heat shrinkable tubes</td><td>Jupiter, China</td><td>JP7230-01</td><td></td></tr><tr><td>Arduino IDE</td><td>Arduino LLC</td><td>2.3.5-nightly-20241212</td><td></td></tr><tr><td>BALB/c mice</td><td>"Andreevka" Branch FSBIS SCBT FMBA, Russia</td><td>3-15-16</td><td>Male, 6-month-old</td></tr><tr><td>Chlorhixedin&nbsp;</td><td>BIOPHARMACEUTICAL PLANT, Russia</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Dumont forceps&nbsp;</td><td>Stoelting, USA</td><td>52100-07&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Evans Blue dye&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Fine Forceps</td><td>Stoelting, USA</td><td>52102-02P</td><td></td></tr><tr><td>Hamilton</td><td>Hamilton Bonaduz AG, Switzerland</td><td>29 G needle</td><td></td></tr><tr><td>Heating element</td><td>China</td><td>LFH-9415sg</td><td></td></tr><tr><td>Insulin needle</td><td>INSUPEN, Italy</td><td>31G, 0.25mm*6mm</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine&nbsp;</td><td>MOSCOW ENDOCRINE PLANT, FSUE, Russia</td><td></td><td>General anesthesia&nbsp;</td></tr><tr><td>Keypad Shield</td><td>diymore, China</td><td>1602 LCD Keypad Shield</td><td></td></tr><tr><td>Lidocaine&nbsp;</td><td>ORGANICA, Russia</td><td>N/A</td><td>&nbsp;Analgesic drug</td></tr><tr><td>Lockable switch button</td><td>China</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Metal-film resistors</td><td>TZT, China</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Micro Dissecting Vannas Spring Scissors</td><td>Stoelting, USA</td><td>52130-00P</td><td></td></tr><tr><td>MOSFET Module</td><td>China</td><td>MOSFET Module D4184</td><td></td></tr><tr><td>Mounting post</td><td>Standa, Lithuania</td><td>3MP, diameter 12 mm</td><td></td></tr><tr><td>Mounting wire</td><td>AB retail, Russia</td><td>HB-1</td><td></td></tr><tr><td>Non-sharp tweezer</td><td>Stoelting, USA</td><td>52108-83P&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Plastic for 3D printer</td><td>Bambu Lab, China</td><td>A00-D0-1.75-1000-SPL.</td><td></td></tr><tr><td>Post collar&nbsp;</td><td>Standa, Lithuania</td><td>3PC</td><td></td></tr><tr><td>Post holder</td><td>Standa, Lithuania</td><td>3PH-25</td><td></td></tr><tr><td>Power connector</td><td>RUICHI, China</td><td>AC-015</td><td></td></tr><tr><td>Power supply</td><td>SANPU, China</td><td>PS200-H1V24</td><td></td></tr><tr><td>Precision pantograph table for vertical movement</td><td>"Laser components", Russia</td><td>02TV004&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Right-angle fixed post clamp&nbsp;</td><td>Standa, Lithuania</td><td>3RPC-12</td><td></td></tr><tr><td>Screw M3</td><td>Standa, Lithuania</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Screw M4</td><td>Standa, Lithuania</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Screw M6</td><td>Standa, Lithuania</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Shaving machine&nbsp;</td><td>Braun, <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/69482/69482eq1.jpg" style="margin: auto;"/></td><td>Series 3310s</td><td></td></tr><tr><td>Sodium chloride</td><td>Kraspharma, Russia</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Solder&nbsp;</td><td>Production of metal powders, Russia</td><td>tin-lead solder 61</td><td></td></tr><tr><td>Soldering flux</td><td>Solins, Russia</td><td>LTI-120 22 ml with brush</td><td></td></tr><tr><td>Soldering station</td><td>AOYUE, China</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Soldering station&nbsp;</td><td>AOYUE, China</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Steel optical rails (SOR)</td><td>Standa, Lithuania</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Step-down voltage converter</td><td>RUICHI, China</td><td>EM-825</td><td></td></tr><tr><td>Straight dissecting scissors&nbsp;</td><td>Stoelting, USA</td><td>52132-10P&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Temperature sensor</td><td>Liludin, China</td><td>DS1820</td><td></td></tr><tr><td>Tetracycline</td><td>JSC Tatkhimfarmpreparaty, Russia</td><td></td><td>Eye ointment&nbsp;</td></tr><tr><td>The Controller</td><td>Arduino, China</td><td>UNO R3</td><td></td></tr><tr><td>Tweezer</td><td>Stoelting, USA</td><td>52100-03&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Two-photon&nbsp; microscop</td><td>Nikon, Japan</td><td>A1R MP</td><td></td></tr><tr><td>Wire</td><td>Partner-Electro, Russia</td><td>P020G-0305-C050</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine&nbsp;</td><td>"Alfasan International B.V.", Netherlands</td><td></td><td>Muscle relaxant</td></tr><tr><td>Catheter</td><td>Scientific Commodities Inc., USA</td><td>PE-10, 0,28 mm ID &times; 0,61 mm OD</td><td></td></tr></tbody></table>

montaje reproducible para la imagen in vivo de dos fotones de la contractilidad de los vasos linfáticos cervicales y el flujo linfático en ratones

Reproducible Setup for In vivo Two-photon Imaging of the Contractility of Cervical Lymphatic Vessels and Lymph Flow in Mice

Montaje reproducible para la imagen in vivo de dos fotones de la contractilidad de los vasos linfáticos cervicales y el flujo linfático en ratones

The contractility of cLVs is the driving force for lymph flow and a key mechanism underlying brain toxin cleansing. Here, we present an innovative method ...

reproducible-setup-for-vivo-two-photon-imaging-contractility-cervical

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

De dos fotones de imágenes ha descubierto la motilidad de linfocitos y las interacciones celulares en el ganglio linfático en condiciones basales y durante una respuesta inmune 1. En este caso, se demuestra la transferencia adoptiva de células T, el aislamiento de los ganglios linfáticos, y la motilidad de imágenes de células CD4 + T en los ganglios linfáticos explantados.

La disección y 2-Photon imagen de los ganglios linfáticos periféricos en ratones

Aquí se describe una manera no invasiva de dos fotones (2P), microscopía de enfoque para el estudio de leucocitos de recalada en la almohadilla plantar del ratón. Se discuten los aspectos técnicos de la preparación de imágenes de tejidos y caminar al lector a través de un experimento típico de la configuración inicial a la colección de ejecución y los datos.

De imagen no invasivas de Homing leucocitos y Migración In vivo</em

Los recientes avances en microscopía de dos fotones han permitido en tiempo...

Imagen intravital del nodo linfático poplíteo ratón

Recientemente desarrollados utilizando técnicas de imagen de fluorescencia en el infrarrojo cercano (NIRF) puede ayudar a dilucidar el papel del sistema linfático juega en la metástasis del cáncer, la respuesta inmune, la reparación de heridas, y otras enfermedades asociadas linfático.

No invasiva imágenes ópticas de la vasculatura linfática de un ratón

Este video demuestra la visualización de linfocitos intraepiteliales γδ (IELs) en ratones transgénicos utilizando microscopía confocal. El procedimiento quirúrgico consiste en crear una línea de perforación y hacer una incisión longitudinal para exponer la mucosa intestinal y las vellosidades. Los ratones transgénicos expresan proteínas reporteras exclusivamente en γδ IELs, lo que permite su seguimiento. Las imágenes intravitales capturan el movimiento dinámico de las IAL γδ marcadas con...

Visualización intravital de linfocitos intraepiteliales gamma delta

Una nueva preparación ex vivo para obtener imágenes de la médula espinal de ratón. Este protocolo permite la formación de imágenes de dos fotones de las interacciones celulares en vivo a lo largo de la médula espinal.

De dos fotones de imágenes de Dinámica Celular en la médula espinal de ratón

Este protocolo describe una técnica para tomar imágenes de diferentes poblaciones celulares en el drenaje de los ganglios linfáticos sin alteraciones en la estructura del órgano.

Visualización de la estructura de los ganglios linfáticos y la localización celular mediante la microscopía confocal Ex-Vivo

Describimos un método para visualizar los IEL con la etiqueta GFP utilizando imágenes intravitales del intestino delgado murina mediante microscopía confocal de disco giratorio invertido. Esta técnica permite el seguimiento de células vivas dentro de la mucosa hasta 4 h y se puede utilizar para investigar una variedad de interacciones inmunoepiteliales intestinales.

Imágenes intravitales de linfocitos intraepiteliales en el intestino pequeño murino

Este protocolo describe una técnica crónica de implantación de ventanas craneales que se puede utilizar para imágenes longitudinales de estructuras neuro-glio-vasculares, interacciones y función en condiciones saludables y enfermas. Sirve como una alternativa complementaria al enfoque de imagen transcraneal que, aunque a menudo se prefiere, posee algunas limitaciones críticas.

Mapeo cerebral preciso para realizar imágenes in vivo repetitivas de dinámica neuroinmunitaria en ratones

La imagen in vivo es una herramienta poderosa para el estudio de la biología en la salud y la enfermedad. Este protocolo describe imágenes transpupilares de la retina del ratón con un microscopio estándar de dos fotones. También demuestra diferentes métodos de imagen in vivo para etiquetar fluorescentemente múltiples cohortes celulares de la retina.

Imágenes transpupilares de dos fotones in vivo de la retina del ratón

En el presente protocolo, la función de barrera endotelial de la glándula submandibular (SMG) se evaluó inyectando diferentes trazadores fluorescentes ponderados molecularmente en las venas angulares de modelos animales de prueba in vivo bajo un microscopio de escaneo láser de dos fotones.

In vivo Detección de permeabilidad vascular en glándula submandibular de ratón

Aprende a realizar imagen in vivo de dos fotones de la contractilidad de vasos linfáticos cervicales en ratones. Este protocolo permite observaciones de hasta cinco horas con condiciones fisiológicas estables.

Montaje reproducible para la imagen in vivo de dos fotones de la contractilidad de los vasos linfáticos cervicales y el flujo linfático en ratones (Video) | JoVE Journal

Montaje reproducible para la imagen in vivo de dos fotones de la contractilidad de los vasos linfáticos cervicales y el flujo linfático en ratones

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