Name: Patología estriatal inducida por lentivirales como modelo preclínico de ataxias poliglutaminas, espinocerebelosas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-13T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 12 s
Description: Aprenda a desarrollar un modelo lentiviral estriatal para estudiar ataxias poliglutaminas SCA2 en ratones C57BL6J mediante inyección estereotáxica. Este método permite investigar mecanismos neurodegenerativos y evaluar terapias dirigidas de forma eficiente.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Afonso-Reis, R., Afonso, I. T., Nóbrega, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+Status+of+Gene+Therapy+Research+in+Polyglutamine+Spinocerebellar+Ataxias%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Current Status of Gene Therapy Research in Polyglutamine Spinocerebellar Ataxias.</a> Int J Mol Sci. 22 (8), 4249(2021).</li>
<li>Durr, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autosomal+dominant+cerebellar+ataxias%3A+polyglutamine+expansions+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Autosomal dominant cerebellar ataxias: polyglutamine expansions and beyond.</a> Lancet Neurol. 9 (9), 885-894 (2010).</li>
<li>McIntosh, C. S., Li, D., Wilton, S. D., Aung-Htut, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyglutamine+Ataxias%3A+Our+Current+Molecular+Understanding+and+What+the+Future+Holds+for+Antisense+Therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicines%22%5BJournal%5D)">Polyglutamine Ataxias: Our Current Molecular Understanding and What the Future Holds for Antisense Therapies.</a> Biomedicines. 9 (11), 1499(2021).</li>
<li>Henriques, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral-based+animal+models+in+polyglutamine+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Viral-based animal models in polyglutamine disorders.</a> Brain. 147 (4), 1166-1189 (2024).</li>
<li>Doyle, A., McGarry, M. P., Lee, N. A., Lee, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Construction+of+Transgenic+and+Gene+Knockout%2FKnockin+Mouse+Models+of+Human+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Transg+Res%22%5BJournal%5D)">The Construction of Transgenic and Gene Knockout/Knockin Mouse Models of Human Disease.</a> Transg Res. 21 (2), 327-349 (2012).</li>
<li>Tello, J. A., Williams, H. E., Eppler, R. M., Steinhilb, M. L., Khanna, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Neurodegenerative+Disease%3A+Recent+Advances+in+Fly+Highlight+Innovative+Approaches+to+Drug+Discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Neurodegenerative Disease: Recent Advances in Fly Highlight Innovative Approaches to Drug Discovery.</a> Front Mol Neurosci. 15, 883358(2022).</li>
<li>Moreira-Gomes, T., Nóbrega, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+gene+therapy+with+lentiviral+vectors+for+spinocerebellar+ataxias%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Development of a gene therapy with lentiviral vectors for spinocerebellar ataxias.</a> Methods Mol Biol. 2974, 215-225 (2026).</li>
<li>Parr-Brownlie, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentiviral+vectors+as+tools+to+understand+central+nervous+system+biology+in+mammalian+model+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lentiviral vectors as tools to understand central nervous system biology in mammalian model organisms.</a> Front Mol Neurosci. 8, 14(2015).</li>
<li>Zwi-Dantsis, L., Mohamed, S., Massaro, G., Moeendarbary, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-Associated+Virus+Vectors%3A+Principles%2C+Practices%2C+and+Prospects+in+Gene+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Adeno-Associated Virus Vectors: Principles, Practices, and Prospects in Gene Therapy.</a> Viruses. 17 (2), 239(2025).</li>
<li>Moreira-Gomes, T., Nóbrega, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+the+disruption+of+RNA+metabolism+to+the+targeting+of+RNA-binding+proteins%3A+The+case+of+polyglutamine+spinocerebellar+ataxias%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">From the disruption of RNA metabolism to the targeting of RNA-binding proteins: The case of polyglutamine spinocerebellar ataxias.</a> J Neurochem. 168 (8), 1442-1459 (2024).</li>
<li>Matsuzaki, Y., Oue, M., Hirai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+a+neurodegenerative+disease+mouse+model+using+lentiviral+vectors+carrying+an+enhanced+synapsin+I+promoter%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Meth%22%5BJournal%5D)">Generation of a neurodegenerative disease mouse model using lentiviral vectors carrying an enhanced synapsin I promoter.</a> J Neurosci Meth. 223, 133-143 (2014).</li>
<li>Marcelo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+in+Spinocerebellar+ataxia+type+2%2C+a+dysregulated+pathway%2C+and+a+target+for+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Autophagy in Spinocerebellar ataxia type 2, a dysregulated pathway, and a target for therapy.</a> Cell Death Dis. 12 (12), 1117(2021).</li>
<li>Alves, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Striatal+and+nigral+pathology+in+a+lentiviral+rat+model+of+Machado-Joseph+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Striatal and nigral pathology in a lentiviral rat model of Machado-Joseph disease.</a> Human Mol Genet. 17 (14), 2071-2083 (2008).</li>
<li>Alves, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentiviral+vector-mediated+overexpression+of+mutant+ataxin-7+recapitulates+SCA7+pathology+and+promotes+accumulation+of+the+FUS%2FTLS+and+MBNL1+RNA-binding+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurodegenerat%22%5BJournal%5D)">Lentiviral vector-mediated overexpression of mutant ataxin-7 recapitulates SCA7 pathology and promotes accumulation of the FUS/TLS and MBNL1 RNA-binding proteins.</a> Mol Neurodegenerat. 11 (1), 58(2016).</li>
<li>Geraerts, M., Willems, S., Baekelandt, V., Debyser, Z., Gijsbers, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+lentiviral+vector+titration+methods%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Comparison of lentiviral vector titration methods.</a> BMC Biotechnol. 6 (1), 34(2006).</li>
<li>Arrasate, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+Characterization+of+a+Stable+Producer+Cell+Line+Generation+Platform+for+the+Manufacturing+of+Clinical-Grade+Lentiviral+Vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicines%22%5BJournal%5D)">Establishment and Characterization of a Stable Producer Cell Line Generation Platform for the Manufacturing of Clinical-Grade Lentiviral Vectors.</a> Biomedicines. 12 (10), 2265(2024).</li>
<li>Nóbrega, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overexpression+of+Mutant+Ataxin-3+in+Mouse+Cerebellum+Induces+Ataxia+and+Cerebellar+Neuropathology%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebellum%22%5BJournal%5D)">Overexpression of Mutant Ataxin-3 in Mouse Cerebellum Induces Ataxia and Cerebellar Neuropathology.</a> Cerebellum. 12 (4), 441-455 (2013).</li>
<li>Paxinos, G., Franklin, K. B. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+Mouse+Brain+in+Stereotaxic+Coordinates%22">The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates</a>. , Compact Second Edition, Gulf Professional Publishing. (2004).</li>
<li>Bateup, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+subclasses+of+medium+spiny+neurons+differentially+regulate+striatal+motor+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Distinct subclasses of medium spiny neurons differentially regulate striatal motor behaviors.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (33), 14845-14850 (2010).</li>
<li>Nóbrega, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+hallmarks+of+neurodegeneration+in+polyglutamine+spinocerebellar+ataxias%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Molecular hallmarks of neurodegeneration in polyglutamine spinocerebellar ataxias.</a> Cell Death Dis. 16 (1), 826(2025).</li>
<li>Murakami, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AAV-based+gene+therapy+ameliorated+CNS-specific+GPI+defect+in+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther+Meth+Clin+Dev%22%5BJournal%5D)">AAV-based gene therapy ameliorated CNS-specific GPI defect in mouse models.</a> Mol Ther Meth Clin Dev. 32 (1), 101176(2024).</li>
<li>Wada, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AAV-based+gene+therapy+ameliorates+neurological+deficits+in+a+mouse+model+of+childhood-onset+neurodegeneration+with+cerebellar+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther+J+Am+Soc+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">AAV-based gene therapy ameliorates neurological deficits in a mouse model of childhood-onset neurodegeneration with cerebellar atrophy.</a> Mol Ther J Am Soc Gene Ther. 33 (11), 5829-5839 (2025).</li>
<li>Konno, A., Shinohara, Y., Hirai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+Spinocerebellar+Ataxia+Type+3+Model+Mice+by+Intravenous+Injection+of+AAV-PHP.B+Vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Production of Spinocerebellar Ataxia Type 3 Model Mice by Intravenous Injection of AAV-PHP.B Vectors.</a> Int J Mol Sci. 25 (13), 7205(2024).</li>
<li>Jansen-West, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+PolyQ-ATXN3+Levels+Associate+With+Cerebellar+Degeneration+and+Behavioral+Abnormalities+in+a+New+AAV-Based+SCA3+Mouse+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Plasma PolyQ-ATXN3 Levels Associate With Cerebellar Degeneration and Behavioral Abnormalities in a New AAV-Based SCA3 Mouse Model.</a> Front Cell Dev Biol. 10, 863089(2022).</li>
<li>Nóbrega, C., Mendonça, L., Matos, C. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aN%C3%B3brega%2C+C+%22A+Handbook+of+Gene+and+Cell+Therapy%22">A Handbook of Gene and Cell Therapy</a>. , Springer International Publishing. Cham. (2020).</li>
<li>Thomas, C. E., Ehrhardt, A., Kay, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+and+problems+with+the+use+of+viral+vectors+for+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Progress and problems with the use of viral vectors for gene therapy.</a> Nat Rev Genet. 4 (5), 346-358 (2003).</li>
<li>Schambach, A., Zychlinski, D., Ehrnstroem, B., Baum, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosafety+Features+of+Lentiviral+Vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Biosafety Features of Lentiviral Vectors.</a> Human Gene Ther. 24 (2), 132-142 (2013).</li>
<li>de Almeida, L. P., Ross, C. A., Zala, D., Aebischer, P., Déglon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentiviral-Mediated+Delivery+of+Mutant+Huntingtin+in+the+Striatum+of+Rats+Induces+a+Selective+Neuropathology+Modulated+by+Polyglutamine+Repeat+Size%2C+Huntingtin+Expression+Levels%2C+and+Protein+Length%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lentiviral-Mediated Delivery of Mutant Huntingtin in the Striatum of Rats Induces a Selective Neuropathology Modulated by Polyglutamine Repeat Size, Huntingtin Expression Levels, and Protein Length.</a> J Neurosci. 22 (9), 3473-3483 (2002).</li>
<li>Fisher, E. M. C., Bannerman, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+neurodegeneration%3A+Know+your+question%2C+know+your+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Mouse models of neurodegeneration: Know your question, know your mouse.</a> Sci Transl Med. 11 (493), eaaq1818(2019).</li>
<li>Bii, V. M., Collins, C. P., Hocum, J. D., Trobridge, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Replication-incompetent+gammaretroviral+and+lentiviral+vector-based+insertional+mutagenesis+screens+identify+prostate+cancer+progression+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Replication-incompetent gammaretroviral and lentiviral vector-based insertional mutagenesis screens identify prostate cancer progression genes.</a> Oncotarget. 9 (21), 15451-15463 (2018).</li>
<li>Alves-Cruzeiro, J. M. D. C., Mendonça, L., Pereira de Almeida, L., Nóbrega, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+Dysfunctions+and+Neuropathology+in+Mouse+Models+of+Spinocerebellar+Ataxia+Type+2%3A+A+Comprehensive+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Motor Dysfunctions and Neuropathology in Mouse Models of Spinocerebellar Ataxia Type 2: A Comprehensive Review.</a> Front Neurosci. 10, 572(2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.9% NaCl</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Usado para la preparación de mezclas de anestesia y antagonistas</td></tr><tr><td>Platos de cultivo de tejido de 100 mm</td><td>SPL Life Sciences</td><td>11090</td><td></td></tr><tr><td>Kit ABC (Complejo Avidina-Biotina)</td><td>VECTASTAIN Elite</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Atipazole (5.0 mg/mL)</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Antagonista de la medetomidina</td></tr><tr><td>Centrífuga de sobremesa</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Gabinete de bioseguridad, Clase II (compatible con BSL-2)</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo secundario biotinilado</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Albúmina sérica bovina (BSA)</td><td>NZYTech</td><td>MB47002</td><td></td></tr><tr><td>Secciones cerebrales (por ejemplo, secciones coronales de 30&ndash;40 &micro;m) inmunohistoquímicamente teñidas para DARPP-32</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Plugin Contador de células (FIJI)</td><td>Integrado / ImageJ</td><td>&mdash;</td><td>Herramienta para el conteo manual de agregados</td></tr><tr><td>Incubadora de CO2 (37 &deg;C, 5% CO2, humidificado)</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Estación de trabajo informática</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Usado para el procesamiento de imágenes y la ejecución de software</td></tr><tr><td>Tubos de ultracentrifugación cónicos</td><td>Beckman Coulter</td><td>358126</td><td></td></tr><tr><td>Hisopos de algodón</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Usado para la eliminación del periostio</td></tr><tr><td>Criostato con soporte para discos de muestra</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>DAB (Diaminobenzidina)</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Lector de coordenadas estereotáxicas digital</td><td>Stoelting/WPI</td><td>51725</td><td>Pantalla digital para la medición de coordenadas</td></tr><tr><td>Medio de Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM, glucosa alta)</td><td>Gibco/Thermo Fisher</td><td>11-965-092</td><td></td></tr><tr><td>Etanol 70, 96 y 100%</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Etanol, 70%</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Para la desinfección del cuero cabelludo</td></tr><tr><td>Fentanilo (0.05 mg/mL)</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Componente anestésico</td></tr><tr><td>Suero fetal bovino (FBS), inactivado por calor</td><td>Gibco/Thermo Fisher</td><td>10500064</td><td></td></tr><tr><td>FIJI (distribución de ImageJ)</td><td>NIH / ImageJ</td><td>https://fiji.sc/</td><td>Software de código abierto para la cuantificación manual de agregados</td></tr><tr><td>Pinzas finas (para pellizco de dedos)</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Para el monitoreo de la profundidad de la anestesia</td></tr><tr><td>Flumazenil (0.1 mg/mL)</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Antagonista del midazolam</td></tr><tr><td>Pinzas y bisturí</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Para la eliminación del periostio y la exposición del cráneo</td></tr><tr><td>Jeringas de microlitro/herméticas Hamilton 700/1700 Series</td><td>Hamilton / Fisher Sci.</td><td>7653-01/10550203</td><td>Para la carga de solución viral</td></tr><tr><td>Agujas desmontables con pequeño mango Hamilton (26G)</td><td>Hamilton / Fisher Sci.</td><td>7804-03/ 10698205</td><td>Para la administración viral</td></tr><tr><td>Almohadilla térmica (para roedores)</td><td>Kent Scientific / SOMNI</td><td>por ejemplo 04-777-177</td><td>Para mantener la temperatura corporal</td></tr><tr><td>Células HEK 293T (&le; paso 10, libres de micoplasma)</td><td>ATCC o equivalente</td><td>CRL-3216</td><td></td></tr><tr><td>Peróxido de hidrógeno</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Software IHCAggreCount</td><td>Suministrado bajo demanda</td><td>N/A</td><td>Software propietario interno para la detección y cuantificación semiautomatizada de agregados</td></tr><tr><td>Microscopio invertido (para confluencia celular)</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Mezclador de laboratorio</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Vectores lentivirales (WT y mutante)</td><td>In-house / Core facility</td><td>N/A</td><td>Solución viral para inyección</td></tr><tr><td>L-glutamina (200 mM)</td><td>Gibco/Thermo Fisher</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio óptico con cámara (campo brillante)</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Medetomidina (1.0 mg/mL)</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Componente anestésico</td></tr><tr><td>Microtaladro (compatible con estereotaxic)</td><td>Stoelting / Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Para craneotomía</td></tr><tr><td>Bomba de microinyección (por ejemplo, Stoelting)</td><td>Stoelting/WPI</td><td>53210</td><td>Bomba de infusión automatizada para inyecciones virales</td></tr><tr><td>Micropipeta (P1000, P200, P10) y puntas</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Imágenes de microscopía (secciones de IHC)</td><td>Generadas internamente</td><td>N/A</td><td>Imágenes de inmunohistoquímica a analizar</td></tr><tr><td>Cuchillas de microtomo (de bajo perfil, desechables)</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam (5.0 mg/mL)</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Componente anestésico</td></tr><tr><td>Medio de montaje</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Naloxone (0.4 mg/mL)</td><td>Proveedor local</td><td>&mdash;</td><td>Antagonista del fentanilo</td></tr><tr><td>Portaagujas y agujas de disección fina</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Suero de cabra normal (NGS)</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Compuesto O.C.T.</td><td>Tissue-Tek</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ungüento oftálmico (Ungüento de Ojo y Nariz Bepanthen, 5% Dexpanthenol)</td><td>Bayer</td><td>11568-0053</td><td>Previene el secado de la córnea durante la cirugía</td></tr><tr><td>Mezclador orbital</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Kit ELISA p24</td><td>ZeptoMetrix</td><td>0801111</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehído (PFA)</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>PBS sin Ca2+/Mg2+, pH 7.0</td><td>Gibco/Thermo Fisher</td><td>10-010-031</td><td></td></tr><tr><td>pCMV-dR8.2</td><td>Addgene</td><td>Plasmid #12263</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina-Estreptomicina (100&times;)</td><td>Gibco/Thermo Fisher</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Fenilhidrazina</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>pMD2.G</td><td>Addgene</td><td>Plasmid #

patología estriatal inducida por lentivirales como modelo preclínico de ataxias poliglutaminas, espinocerebelosas

Lentiviral-Induced Striatal Pathology as a Preclinical Model of Polyglutamine Spinocerebellar Ataxias

Patología estriatal inducida por lentivirales como modelo preclínico de ataxias poliglutaminas, espinocerebelosas

Polyglutamine spinocerebellar ataxias are a group of six neurodegenerative diseases caused by a mutation in the trinucleotide CAG tract within the coding ...

lentiviral-induced-striatal-pathology-as-preclinical-model

Research

Investigación

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociencia

Se describe un protocolo para la cuantificación rápida y sensible de la gravedad de la enfermedad en modelos de ratón de la ataxia cerebelosa. Las medidas incluyen las extremidades posteriores juntando, la cornisa de la prueba, la marcha y la cifosis. Este protocolo efectivamente discrimina entre los individuos afectados y no afectados, y detecta la progresión de las personas afectadas con el tiempo.

A simple fenotipo compuesto el sistema de puntaje para la evaluación de modelos de ratón de Ataxia cerebelosa

Fuente: Tagliafierro, L., et al. Plataforma de vectores lentivirales para la entrega eficiente de herramientas de edición del epigenoma en modelos de enfermedades derivadas de células madre pluripotentes inducidas por humanos. J. Vis. Exp. (2019)Este video demuestra la transducción lentiviral de células progenitoras neurales (NPC) para la modificación epigenética dirigida de alfa-sinucleína, una proteína clave en la enfermedad de Parkinson. El protocolo permite la metilación del ADN mediada por...

Transducción lentiviral de células progenitoras neurales para la regulación epigenética de la expresión de alfa-sinucleína

Presentamos un protocolo bioquímico y conductual para evaluar la eficacia de los compuestos solubles en agua dirigidos a las mitocondrias para el tratamiento de la ataxia espinocerebelosa tipo 1 (SCA1) y otras enfermedades neurodegenerativas cerebelosas.

El tratamiento de ratones con SCA1 hidrosolubles compuestos para no específicamente estimular la función mitocondrial

El objetivo de este protocolo es proporcionar un sistema celular que imita la formación de alfa-sinucleína agregados en vivo. Inclusiones intracelulares de alfa-sinucleína se siembran en las neuronas primarias por la internalización y propagación de exógenos administrados agregados de alfa-sinucleína microsomas asociados nativos aislados de ratones transgénicos de alfa-sinucleína enfermo.

Administración exógena de alfa-sinucleína asociada a microsomas agregados a las neuronas primarias como un modelo de celular de gran alcance de la formación de las fibrillas de

El objetivo de esta técnica es preparar una cultura altamente enriquecida de primarias motoneuronas (MNs) de murine de la médula espinal. Para evaluar las consecuencias de las mutaciones que causan enfermedades de MN, Describimos aquí el aislamiento de estos aislados MNs y su transfección por magnetofection.

Modelado enfermedad del Charcot-Marie-diente In Vitro por transferencia primaria Motoneurons de ratón

Este protocolo detalla un procedimiento en el que las culturas neuronales humanas son transducidas con construcciones lentivirales codificando para tau humano mutante. Las culturas transducadas muestran agregados Tau y patologías asociadas.

Un modelo in vitro para estudiar la agregación de Tau utilizando la transducción de neuronas humanas mediada por lentivirales

Se ha implicado que diferentes regiones cerebelosas desempeñan un papel en distintos resultados conductuales, sin embargo, los mecanismos moleculares subyacentes siguen siendo desconocidos. Este trabajo describe un método para diseccionar de manera reproducible y rápida la corteza cerebelosa de los hemisferios, las regiones anterior y posterior del vermis y los núcleos cerebelosos profundos con el fin de sondear las diferencias moleculares mediante el aislamiento del ARN y la prueba de las...

Disección regional cerebelosa para análisis molecular

Se describen dos métodos relacionados para visualizar los eventos subcelulares necesarios para la transmisión sináptica. Estos protocolos permiten el monitoreo en tiempo real de la dinámica de la afluencia de calcio presináptico y la fusión de la membrana de vesícula sináptica utilizando imágenes de células vivas de neuronas cultivadas in vitro .

Medición fluorescente en tiempo real de las funciones sinápticas en modelos de esclerosis lateral amiotrófica

Aquí, presentamos un protocolo para evaluar las actividades neuroprotectoras de los compuestos de prueba en Caenorhabditis elegans, incluida la agregación de poliglutamina, la muerte neuronal y el comportamiento de quimioavoidencia, así como una integración ejemplar de múltiples fenotipos.

Caenorhabditis elegans como sistema modelo para descubrir compuestos bioactivos contra la neurotoxicidad mediada por poliglutamina

Este trabajo analiza la dosis del vector y el tiempo de exposición necesarios para inducir neuroinflamación, neurodegeneración y deterioro motor en este modelo preclínico de la enfermedad de Parkinson. Estos vectores que codifican la α-sinucleína humana se administran en la sustancia negra para recapitular la patología de la sinucleína asociada con la enfermedad de Parkinson.

Análisis del modelo de ratón de la enfermedad de Parkinson inducido por vectores virales adenoasociados que codifican la α-sinucleína humana

Aprenda a desarrollar un modelo lentiviral estriatal para estudiar ataxias poliglutaminas SCA2 en ratones C57BL6J mediante inyección estereotáxica. Este método permite investigar mecanismos neurodegenerativos y evaluar terapias dirigidas de forma eficiente.

Patología estriatal inducida por lentivirales como modelo preclínico de ataxias poliglutaminas, espinocerebelosas

Explorar más videos