Name: Trasplante intramuscular de células endocrinas pancreáticas derivadas de células madre pluripotentes humanas en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-10T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: Aprende el trasplante intramuscular de islotes pancreáticos derivados de células madre pluripotentes humanas en ratones inmunodeficientes. Este protocolo permite evaluar la función mediante GSIS in vivo y análisis histológico.

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<ol><li>Ong, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((regional%2C+and+national+burden+of+diabetes+from+1990+to+2021%2C+with+projections+of+prevalence+to+2050%3A+A+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2021%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">regional, and national burden of diabetes from 1990 to 2021, with projections of prevalence to 2050: A systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2021.</a> The Lancet. 402 (10397), 203-234 (2021).</li>
<li>Ismail, L., Materwala, H., Al Kaabi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+risk+factors+with+type+2+diabetes%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Struct+Biotechnol+J%22%5BJournal%5D)">Association of risk factors with type 2 diabetes: A systematic review.</a> Comput Struct Biotechnol J. 19, 1759-1785 (2021).</li>
<li>Prasad, M. K., Mohandas, S., Ramkumar, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysfunctions%2C+molecular+mechanisms%2C+and+therapeutic+strategies+of+pancreatic+%CE%B2-cells+in+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Apoptosis%22%5BJournal%5D)">Dysfunctions, molecular mechanisms, and therapeutic strategies of pancreatic β-cells in diabetes.</a> Apoptosis. 28 (7-8), 958-976 (2023).</li>
<li>Xue, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+interrogation+of+twenty+type+2+diabetes-associated+genes+using+isogenic+human+embryonic+stem+cell-derived+%CE%B2-like+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Functional interrogation of twenty type 2 diabetes-associated genes using isogenic human embryonic stem cell-derived β-like cells.</a> Cell Metab. 35 (11), 1897-1914.e11 (2023).</li>
<li>Bartolomé, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell-derived+%CE%B2+cells%3A+A+versatile+research+platform+to+interrogate+the+genetic+basis+of+%CE%B2+cell+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Stem cell-derived β cells: A versatile research platform to interrogate the genetic basis of β cell dysfunction.</a> Int J Mol Sci. 23 (1), 501(2022).</li>
<li>Balboa, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional%2C+metabolic+and+transcriptional+maturation+of+human+pancreatic+islets+derived+from+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Functional, metabolic and transcriptional maturation of human pancreatic islets derived from stem cells.</a> Nat Biotechnol. 40 (7), 1042-1055 (2022).</li>
<li>Barsby, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiating+functional+human+islet-like+aggregates+from+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Differentiating functional human islet-like aggregates from pluripotent stem cells.</a> STAR Protoc. 3 (4), 101711(2022).</li>
<li>Shi, Z. -D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+editing+in+hPSCs+reveals+GATA6+haploinsufficiency+and+a+genetic+interaction+with+GATA4+in+human+pancreatic+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Genome editing in hPSCs reveals GATA6 haploinsufficiency and a genetic interaction with GATA4 in human pancreatic development.</a> Cell Stem Cell. 20 (5), 675-688.e6 (2017).</li>
<li>Fantuzzi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+depth+functional+characterization+of+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+beta+cells+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">In depth functional characterization of human induced pluripotent stem cell-derived beta cells in vitro and in vivo.</a> Front Cell Dev Biol. 10, e967765(2022).</li>
<li>Augsornworawat, P., Maxwell, K. G., Velazco-Cruz, L., Millman, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+profiling+reveals+%CE%B2+cell+maturation+in+stem+cell-derived+islets+after+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome profiling reveals β cell maturation in stem cell-derived islets after transplantation.</a> Cell Rep. 32 (8), 108850(2020).</li>
<li>Lin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+metabolism+and+regulation+in+establishing+human+stem+cell-derived+%CE%B2+cell+maturation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Glucose metabolism and regulation in establishing human stem cell-derived β cell maturation.</a> Cell Rep. 44 (7), 115892(2025).</li>
<li>Maxwell, K. G., Kim, M. H., Gale, S. E., Millman, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+function+and+maturation+of+human+stem+cell-derived+islets+after+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Differential function and maturation of human stem cell-derived islets after transplantation.</a> Stem Cells Transl Med. 11 (3), 322-331 (2022).</li>
<li>Thévenet, J., Gmyr, V., Delalleau, N., Pattou, F., Kerr-Conte, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+islet+transplantation+under+the+kidney+capsule+of+mice%3A+Model+of+refinement+for+molecular+and+ex-vivo+graft+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Pancreatic islet transplantation under the kidney capsule of mice: Model of refinement for molecular and ex-vivo graft analysis.</a> Lab Anim. 55 (5), 408-416 (2021).</li>
<li>Scholl, V. G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+implantation+sites+for+pancreatic+islet+cell+transplantation%3A+Implications+for+type+1+diabetes+mellitus+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Assessing implantation sites for pancreatic islet cell transplantation: Implications for type 1 diabetes mellitus treatment.</a> Bioengineering. 12 (5), 499(2025).</li>
<li>Sui, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+replication+fork+speed+promotes+pancreatic+endocrine+differentiation+and+controls+graft+size%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Reduced replication fork speed promotes pancreatic endocrine differentiation and controls graft size.</a> JCI Insight. 6 (5), e141553(2021).</li>
<li>Lithovius, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+quantification+of+stem+cell-derived+islet+graft+size+and+composition%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Non-invasive quantification of stem cell-derived islet graft size and composition.</a> Diabetologia. 67 (9), 1912-1929 (2024).</li>
<li>Lyra-Leite, D. M., Fonoudi, H., Gharib, M., Burridge, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+updated+protocol+for+the+cost-effective+and+weekend-free+culture+of+human+induced+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">An updated protocol for the cost-effective and weekend-free culture of human induced pluripotent stem cells.</a> STAR Protoc. 2 (1), 100213(2021).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+versatile+polypharmacology+platform+promotes+cytoprotection+and+viability+of+human+pluripotent+and+differentiated+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A versatile polypharmacology platform promotes cytoprotection and viability of human pluripotent and differentiated cells.</a> Nat Methods. 18 (5), 528-541 (2021).</li>
<li>Wells, S. A., Ellis, G. J., Gunnells, J. C., Schneider, A. B., Sherwood, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parathyroid+autotransplantation+in+primary+parathyroid+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Parathyroid autotransplantation in primary parathyroid hyperplasia.</a> N Engl J Med. 295 (2), 57-62 (1976).</li>
<li>Kim, H. -I., Yu, J. E., Park, C. -G., Kim, S. -J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+four+pancreatic+islet+implantation+sites%5BTitle%5D)+AND+%22J+Korean+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Comparison of four pancreatic islet implantation sites.</a> J Korean Med Sci. 25 (2), 203(2010).</li>
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<li>Prokhorova, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Teratoma+formation+by+human+embryonic+stem+cells+is+site+dependent+and+enhanced+by+the+presence+of+Matrigel%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Dev%22%5BJournal%5D)">Teratoma formation by human embryonic stem cells is site dependent and enhanced by the presence of Matrigel.</a> Stem Cells Dev. 18 (1), 47-54 (2009).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2-Phosfo-L-ácido ascórbico trisodio sal</td><td>Sigma Aldrich</td><td>49752</td><td></td></tr><tr><td>Activina A</td><td>Qkine</td><td>Qk001</td><td></td></tr><tr><td>AggreWell 400 24-well (placa de micropocillo)</td><td>Stemcell</td><td>34415</td><td></td></tr><tr><td>Betacelulina</td><td>GenScript</td><td>Z03102</td><td></td></tr><tr><td>Albúmina de suero bovino, Fracción V, Libre de Ácidos Grasos</td><td>Goldbio</td><td>A-421</td><td></td></tr><tr><td>CHIR 99021</td><td>LC labs</td><td>C-6556&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Chroman-1</td><td>Medchem Express</td><td>HY-15392</td><td>Cocktail CEPT</td></tr><tr><td>CMRL-1066</td><td>Pan Biotech</td><td>P04-84600</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Glucosa</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G7021</td><td></td></tr><tr><td>Dibenzazepina (DBZ)</td><td>Syncom</td><td>Producto personalizado</td><td>Inhibidor de gamma-secretasa</td></tr><tr><td>Medio de Eagle modificado de Dulbecco y medio de Ham&rsquo;s F12 (DMEM/F12)</td><td>Corning</td><td>15383541</td><td></td></tr><tr><td>EGF</td><td>Qkine</td><td>Qk011</td><td></td></tr><tr><td>Emricasan</td><td>Medchem Express</td><td>HY-10396</td><td>Cocktail CEPT</td></tr><tr><td>Etanolamina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E9508</td><td></td></tr><tr><td>FGF2-G3</td><td>GenScript</td><td>Producto personalizado</td><td></td></tr><tr><td>FGF7</td><td>GenScript</td><td>Z03047</td><td></td></tr><tr><td>Heparina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H3149</td><td></td></tr><tr><td>Insulina</td><td>Gibco</td><td>30284510</td><td></td></tr><tr><td>L-Alanil-L-Glutamina</td><td>Linus</td><td>X0551-100</td><td></td></tr><tr><td>Ácido L-Ascórbico</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-202686</td><td></td></tr><tr><td>LDN-193189&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SML0559</td><td></td></tr><tr><td>Concentrado de Lípidos</td><td>Gibco</td><td>11548846</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel (matriz extracelular derivada de membrana basal)</td><td>Falcon</td><td>354230</td><td></td></tr><tr><td>MCDB 131</td><td>Corning</td><td>15-100-CV</td><td></td></tr><tr><td>N-acetilcisteína</td><td>Thermo Scientific</td><td>10521221</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Fisher Scientific</td><td>10553325</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamida</td><td>Sigma Aldrich</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>NRG-1</td><td>Qkine</td><td>Qk045</td><td></td></tr><tr><td>Pluronic F-127 (solución anti-adherencia)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>82184</td><td>Usado al 5% (p/v)</td></tr><tr><td>Suplemento de Poliamina (1000&times;)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8483</td><td>Cocktail CEPT</td></tr><tr><td>RepSox</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-13012</td><td>Inhibidor de Alk5</td></tr><tr><td>Ácido Retinoico</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>SANT-1</td><td>Selleckchem</td><td>S7092</td><td></td></tr><tr><td>Sobetirome (GC1)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SML1900-5MG</td><td>Análogo T3 permeabilizante para células</td></tr><tr><td>Pirvetato de Sodio</td><td>Corning</td><td>25-000-CI</td><td></td></tr><tr><td>Selenito de Sodio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S5261</td><td></td></tr><tr><td>T3 (3,3&prime;,5-Triyodo-L-tironina sal sódica)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T6397</td><td></td></tr><tr><td>TGF-&beta;1&nbsp;</td><td>Qkine</td><td>Qk010</td><td></td></tr><tr><td>TPB</td><td>Tocris</td><td>5343</td><td></td></tr><tr><td>Elementos Traza A</td><td>Corning</td><td>15333641</td><td></td></tr><tr><td>Elementos Traza B</td><td>Corning</td><td>15343641</td><td></td></tr><tr><td>Trans-ISRIB</td><td>Medchem Express</td><td>HY-12495</td><td>Cocktail CEPT</td></tr><tr><td>Transferrina</td><td>InVitria</td><td>777TRF029</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100 (tensioactivo no iónico)</td><td>Thermo Scientific</td><td>11488696</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE</td><td>Gibco</td><td>11538856</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>LC Laboratories</td><td>Y-5301</td><td>Inhibidor de ROCK</td></tr><tr><td>ZM-447439&nbsp;</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-10128</td><td></td></tr><tr><td>ZnSO4</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Z0251</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpos</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anti-Humano Ratón C-péptido (insulina)</td><td>DSHB</td><td>GN-ID4-s</td><td>Usado a 150 ng/mL</td></tr><tr><td>Anti-glucagón ratón</td><td>Proteintech</td><td>67286-1-Ig</td><td>1:2000</td></tr><tr><td>Anti-somatostatina conejo</td><td>Millipore</td><td>AB5494</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-rata AF488 conejo</td><td>Invitrogen</td><td>A-11006</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-ratón AF488 burro</td><td>Invitrogen</td><td>A-21202</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-conejo AF488 burro</td><td>Invitrogen</td><td>A-21206</td><td>1:500</td></tr></tbody></table>

trasplante intramuscular de células endocrinas pancreáticas derivadas de células madre pluripotentes humanas en ratones

Intramuscular Transplantation of Human Pluripotent Stem Cell-derived Pancreatic Endocrine Cells in Mice

Trasplante intramuscular de células endocrinas pancreáticas derivadas de células madre pluripotentes humanas en ratones

Human pluripotent stem cell (hPSC)-derived pancreatic endocrine cells constitute a promising source for diabetes cell therapy and disease modeling. ...

intramuscular-transplantation-human-pluripotent-stem-cell-derived

Research

Investigación

JoVE Journal

Developmental Biology

Biología del Desarrollo

El protocolo fue desarrollado para ofrecer de forma limpia y fácil de islotes o células bajo la cápsula renal de ratones. Las células se concentran en pastillas en el tubo final utilizado para trasplantar las células en la cápsula renal. La facilidad de esta técnica reduce el estrés de las células y el ratón.

El trasplante de islotes pancreáticos en la cápsula renal de ratones diabéticos

Este video describe el protocolo para injertar islotes pancreáticos humanos en la cámara anterior del ojo del ratón para monitorear la revascularización de injertos de islotes humanos in vivo. También ayuda a comprender la contribución de las células receptoras frente a las del donante en la promoción de la encapsulación y vascularización del injerto.

Injerto de islotes pancreáticos: un método para implantar islotes pancreáticos en la cámara anterior del ojo de ratón para obtener imágenes in vivo

Este protocolo demuestra el aislamiento de los islotes murinos y la siembra en un andamio decelularizado. Los islotes soportados por el andamio fueron trasplantados en la almohadilla de grasa epididimal de ratones diabéticos inducidos por estreptozotocina (STZ). Los islotes sobrevivieron en el sitio del trasplante e invirtieron la condición hiperglucémica.

Transplante de islotes en el cojín de grasa epididimal de ratones diabéticos

Se introduce un método para el trasplante omental de islotes en un ratón. Los islotes aislados se mezclan con hidrogel y la mezcla se coloca en la bolsa omental de un ratón diabético. Luego, se controla la glucosa en la sangre, y se realiza el análisis inmuno-histoquímico.

Un método para el trasplante de islotes pancreáticos para el epiplón en ratón

Trasplante de islotes pancreáticos es una manera de lograr normoglycemia en diabetes tipo 1. Este artículo se centra en la técnica de trasplante vía intraportal para mantener niveles normales de glucosa en ratones diabéticos.

Intraportal trasplante de islotes pancreáticos en modelo murino

Describimos un protocolo para la implantación guiada por ultrasonido de líneas celulares de adenocarcinoma ductal pancreático derivados de la murino directamente en el sitio del tumor nativo. Este enfoque resultó en tumores pancreáticos detectables por la ecografía dentro de 2-4 semanas de la inyección, y redujo significativamente la proporción de la sesión de células tumorales en la pared peritoneal en comparación con la implantación ortotópica quirúrgica.

Ultrasonido-Guiado Implantación Ortotópica de Adenocarcinoma Ductal Pancreático Murino

Presentamos un protocolo para generar un modelo de cáncer de páncreas ortotópico mínimamente invasivo mediante inyección guiada por ultrasonido de células de cáncer de páncreas humano y el posterior monitoreo del crecimiento tumoral in vivo por imagen ecográfica.

Generación de un xenoinjerto ortotópico de células de cáncer de páncreas mediante inyección guiada por ultrasonido

El presente protocolo describe un método mejorado para aumentar la coexpresión de los factores de transcripción PDX1 y NKX6.1 en progenitores pancreáticos derivados de células madre pluripotentes humanas (hPSC) en monocapas planas. Esto se logra reponiendo la matriz fresca, manipulando la densidad celular y disociando las células endodérmicas.

Diferenciación de células madre pluripotentes humanas en precursores de células beta pancreáticas en un sistema de cultivo 2D

Los aloinjertos ortotópicos singénicos de ratón del adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) recapitulan la biología, los fenotipos y las respuestas terapéuticas de los subtipos de enfermedades. Debido a su progresión tumoral rápida y reproducible, son ampliamente utilizados en estudios preclínicos. Aquí, mostramos prácticas comunes para generar estos modelos, inyectando cultivos singénicos murinos de PDAC en el páncreas.

Aloinjertos ortotópicos singénicos de ratón para modelar el cáncer de páncreas

La diferenciación de las células madre en células de los islotes proporciona una solución alternativa al tratamiento convencional de la diabetes y al modelado de la enfermedad. Describimos un protocolo detallado de cultivo de células madre que combina un kit de diferenciación comercial con un método previamente validado para ayudar a producir islotes derivados de células madre secretores de insulina en una placa.

Diferenciación de células madre pluripotentes humanas en grupos de islotes productores de insulina

Este artículo presenta un protocolo para la diferenciación dirigida y el análisis funcional de células similares a β células. Describimos las condiciones óptimas de cultivo y los pasajes para las células madre pluripotentes humanas antes de generar células pancreáticas productoras de insulina. La diferenciación de seis etapas progresa desde la formación definitiva del endodermo hasta las células funcionales similares a las células β que secretan insulina en respuesta a la glucosa.

Protocolo optimizado para generar células pancreáticas funcionales secretoras de insulina a partir de células madre pluripotentes humanas

Aprende el trasplante intramuscular de islotes pancreáticos derivados de células madre pluripotentes humanas en ratones inmunodeficientes. Este protocolo permite evaluar la función mediante GSIS in vivo y análisis histológico.

Trasplante intramuscular de células endocrinas pancreáticas derivadas de células madre pluripotentes humanas en ratones

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