30 de diciembre de 2025
Este estudio presenta un protocolo para establecer un modelo de rata reproducible y mínimamente invasivo de trombosis del seno sagital superior inducida por cloruro férrico, utilizando un método de sutura de seda en combinación con imágenes láser de contraste moteado y ultrasonidos de alta resolución para su evaluación.
En nuestro campo, se utilizan varios métodos de modelización para la trombosis del seno sagital superior. Sin embargo, el método de inducción por cloruro férrico se utiliza ampliamente debido a su simplicidad y bajo coste. Nuestro objetivo es perfeccionar el modelo de trombosis sagital superior inducido por cloruro férrico reduciendo la lesión cortical y visualizando el trombo sinusal.
Para empezar, aplica pomada oftálmica en ambos ojos de una rata anestesiada y afeita cuidadosamente el vello del cuero cabelludo. Luego, asegura a la rata en posición prona sobre una plataforma de operación de roedores usando cinta médica. Mantén la temperatura corporal en torno a los 37 grados Celsius con una almohadilla térmica.
Desinfecta bien el cuero cabelludo afeitado usando yodo de povidona al 5%, seguido de alcohol al 75%, y repite tres veces cada uno. Tras confirmar la profundidad anestésica mediante el pellizco del dedo del pie, realiza una incisión perimediana de 15 milímetros en el cuero cabelludo. Mediante disección roma, separa la fascia subyacente y el periostio para exponer completamente el cráneo.
Afina el cráneo usando un taladro craneal hasta que el seno sagital superior quede claramente expuesto, comenzando por el lambda y extendiéndose 10 milímetros hacia adelante a lo largo de la sutura sagital. Emplea una técnica de perforación intermitente para evitar daños en la duramadre subyacente y en el seno sagital superior, e irriga repetidamente la broca con solución salina normal para evitar daños térmicos en la corteza. Tras obtener imágenes de las condiciones de base, aplica un segmento de 10 milímetros de sutura de seda 2-0 empapada en una solución de cloruro férrico al 40% sobre la superficie expuesta del seno sagital superior durante cinco minutos.
Sustituye la sutura por un segmento recién empapado y aplícalo durante otros cinco minutos. Luego, enjuaga el campo quirúrgico con 0,5 mililitros de suero fisiológico normal tres veces para eliminar el cloruro férrico residual. Cierra la piel usando suturas interrumpidas con sutura de seda 4-0 y desinfecta la zona con povidona-yodo.
Observa a la rata hasta que esté completamente despierta y luego devuélvela a su jaula. Activa el sistema láser de imagen de contraste moteado y el software correspondiente, RF LSI versión cinco. Pulsa el botón de modo online para activar la imagen en directo.
Ajusta la altura y posición del instrumento hasta que el láser indicador esté centrado dentro del campo de visión. Coloca la rata sobre una plataforma de espuma y ajusta su posición hasta que el seno sagital superior se alinee con el láser indicador. Ajusta la ampliación y el enfoque hasta que la imagen se muestre claramente.
Establece los límites inferior y superior del umbral de pseudocolor para optimizar la apariencia visual de la imagen del pseudocolor. Establece un ROI circular sobre el seno sagital superior, registra el flujo venoso y guarda las imágenes originales y de pseudocolor. Prepara isoflurano, gel de ultrasonidos, cuchillas desechables, cintas médicas y revisa todos los instrumentos necesarios.
Instala el motor de adquisición tridimensional en el sistema de imagen. Luego, instala el transductor UHF 57X e inicializa el motor. Después de anestesiar a la rata, colócala en posición prona sobre la placa termostática ajustada a 37 grados Celsius y asegura suavemente la cabeza y las extremidades con cintas médicas.
Aplica gel de ultrasonidos de forma uniforme sobre el cuero cabelludo expuesto. Ajusta la posición y orientación de la rata respecto al transductor hasta que el seno sagital superior y el trombo intraluminal estén claramente visualizados. Adquirir imágenes tomográficas secuenciales del seno sagital superior en el plano sagital utilizando imágenes tridimensionales en modo B con un tamaño de paso de 0,04 milímetros, seguidas de imágenes tomográficas en el plano coronal usando los mismos ajustes.
Utiliza el modo Doppler en color para observar el flujo sanguíneo en el seno sagital superior y aplica el modo Doppler de onda pulsada para medir la velocidad del flujo sanguíneo. Suspende la anestesia y observa a la rata hasta que esté completamente despierta. Luego, devuelvo a la rata a su jaula.
Finalmente, exporta las imágenes adquiridas y analízalas usando el software Vevo LAB. Registrar las áreas transversales máximas sagital y coronal y el volumen del trombo en el seno sagital superior, junto con la velocidad máxima del flujo sanguíneo del seno nasal. Tras la aplicación local de cloruro férrico, la imagen láser de contraste de motas detectó una reducción significativa en el flujo sanguíneo local en el seno sagital superior en comparación con la línea inicial.
En el séptimo día postoperatorio, la ecografía de animales pequeños confirmó la formación de trombos en el seno sagital superior con recanalización luminal parcial. La ecografía Doppler de onda pulsada demostró una velocidad medible del flujo sanguíneo dentro del lumen residual del seno sagital superior. La ecografía tridimensional permitió la medición volumétrica del trombo del seno sagital superior utilizando cortes de imagen seriada con un grosor de 0,04 milímetros.
Nuestro modelo refinado es menos invasivo y más compatible con la ecografía, lo que permite un desarrollo y evaluación terapéutica más fiable y directa. Asegúrate de que la imagen interoperatoria con contraste de moteados láser confirme el éxito del modelo y que la ecografía postoperatoria de alta resolución monitorize dinámicamente la formación de trombos, la lisis y la recanalización del lumen.
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Este artículo presenta un modelo refinado en rata para la trombosis del seno sagital superior (SSS) utilizando una técnica de sutura impregnada con FeCl3. El protocolo minimiza la lesión cortical y mejora la compatibilidad con modalidades de imagen, proporcionando una plataforma reproducible y mínimamente invasiva para el estudio de la trombosis venosa cerebral (TVC) y la evaluación de terapias potenciales.
Los modelos preclínicos confiables de trombosis venosa cerebral (TVC) son esenciales para la investigación traslacional y la evaluación terapéutica en el descubrimiento de fármacos neurovasculares. El modelo modificado de trombosis del seno sagital superior inducida por FeCl3 permite estudios reproducibles, mínimamente invasivos y compatibles con imágenes, lo que respalda la confianza predictiva en la validación temprana de objetivos y la reducción de riesgos mecanicistas. Esta plataforma fortalece la toma de decisiones en carteras al proporcionar datos cuantitativos y longitudinales sobre la formación del trombo y la recanalización.
Este modelo se integra en la continuidad desde el descubrimiento hasta la fase preclínica, conectando estudios mecanicistas iniciales con la evaluación de eficacia traslacional para indicaciones neurovasculares.