Name: Imagen por resonancia magnética multianimal para mediciones tumorales en modelos de ratón con cáncer de páncreas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-03T14:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 18 s
Description: Aprenda a realizar resonancia magnética multianimal para detectar tumores pancreáticos en modelos de ratón KRAS. Este protocolo eficiente permite el monitoreo longitudinal y la evaluación terapéutica preclínica con alta sensibilidad.

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<ol><li>Siegel, R. L., Giaquinto, A. N., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%2C+2024%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics, 2024.</a> CA Cancer J Clin. 74 (1), 12-49 (2024).</li>
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<li>Kempinska, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+ablation+of+microRNA-10b+improves+treatment+outcomes+in+mouse+models+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Genetic ablation of microRNA-10b improves treatment outcomes in mouse models of pancreatic cancer.</a> Cancer Res. 84 (6 Suppl), Abstract 467 (2024).</li>
<li>Fan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Species-specific+hepatic+uptake+of+%5B64Cu%5DCu-EOB-NOTA%2C+a+newly+designed+hepatospecific+PET+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Imaging+Biol%22%5BJournal%5D)">Species-specific hepatic uptake of [64Cu]Cu-EOB-NOTA, a newly designed hepatospecific PET agent.</a> Mol Imaging Biol. 27 (3), 305-312 (2025).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Impresora 3D&nbsp;</td><td>Stratasys</td><td>J750&nbsp;</td><td>Para insertos de cama de resonancia magnética multi-animal</td></tr><tr><td>Gemcitabina HCl</td><td>ApexBio</td><td>A1402-500</td><td>Para inyecciones de IP y nbsp;</td></tr><tr><td>HOROS</td><td>HOROS</td><td>https://horosproject.org/</td><td>Para el análisis de resonancia magnética</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Covetrus</td><td>11695067772</td><td>Para anestesia de ratón</td></tr><tr><td>Vaporizador de isoflurano</td><td>SOMNI Scientific</td><td>VS6002</td><td>Para anestesia de ratón</td></tr><tr><td>Jeringuillas de insulina U-100 de dosis baja</td><td>BD</td><td>14-826-79</td><td>Para inyecciones de IP y nbsp;</td></tr><tr><td>Acoplamientos de tubo Luer Lock, bujones rectos de nailon, con púas para diámetro de tubo de 1/16" x7</td><td>McMaster</td><td>51525K521</td><td>Para montaje de camas de resonancia magnética multi-animales</td></tr><tr><td>acoplamientos de tubo Luer Lock, tapón, para tubo de bardo de 1/16" de diámetro x2</td><td>McMaster</td><td>7466N11</td><td>Para montaje de camas de resonancia magnética multi-animales</td></tr><tr><td>Conector Luer macho a macho X2</td><td>SAI</td><td>MML</td><td>Para montaje de camas de resonancia magnética multi-animales</td></tr><tr><td>Sistema de monitorización y repuerta de pequeños animales compatible con RM</td><td>SAII</td><td>Modelo 1030</td><td>monitorizar animales durante la resonancia magnética</td></tr><tr><td>Adaptador de cama para resonancia magnética</td><td>Bruker</td><td>T150743</td><td>Componente de cama de resonancia magnética proporcionada por el proveedor</td></tr><tr><td>Bobina de resonancia magnética, 72 mm de diámetro interno</td><td>Bruker</td><td>T20209V3</td><td>Bobina de resonancia magnética proporcionada por el proveedor</td></tr><tr><td>Rata media multimodal de cuna</td><td>Bruker</td><td>T151629</td><td>Camilla de resonancia magnética proporcionada por el proveedor</td></tr><tr><td>lubricante oftálmico &nbsp;</td><td>Covetrus</td><td>75848</td><td>Para su uso durante la anestesia</td></tr><tr><td>Software ParaVision 360</td><td>Bruker</td><td>https://www.bruker.com/en/products-and-solutions/preclinical-imaging/paravision-360.html</td><td>Para el análisis de resonancia magnética</td></tr><tr><td>PMOD 4.2</td><td>Bruker</td><td>https://www.bruker.com/en/products-and-solutions/preclinical-imaging/pmod.html</td><td>Para el análisis de resonancia magnética</td></tr><tr><td>sistema de resonancia preclínica y nbsp;</td><td>Bruker</td><td>BioSpec 70/30</td><td>Para la resonancia magnética</td></tr><tr><td>Resina Stratasys Vero Clear</td><td>Stratasys</td><td>RGD810</td><td>Para fabricación de camas de resonancia magnética multi-animales</td></tr><tr><td>Conectores de toma a cavidad en T, tubo Luer Lock x2</td><td>McMaster</td><td>51525K443</td><td>Para cama de resonancia magnética de varios animales y nbsp;</td></tr><tr><td>tubería (diámetro interior 1/16", diámetro exterior 1/8")</td><td>Bruker</td><td>T12330</td><td>Para montaje de camas de resonancia magnética multi-animales</td></tr></tbody></table>

imagen por resonancia magnética multianimal para mediciones tumorales en modelos de ratón con cáncer de páncreas

Multianimal Magnetic Resonance Imaging for Tumor Measurements in Pancreatic Cancer Mouse Models

Los animales KPC desarrollan tumores pancreáticos a las 12 semanas de edadde 9 años. Utilizando una cama de resonancia magnética multicámara, se inició el cribado tumoral en ratones KPC a las 10 semanas de edad. Esto permitió reclutar animales con tumores de aproximadamente 200 mm3 para el estudio preclínico con el tratamiento con gemcitabina. Se observaron diferencias en la cinética tumoral y variaciones en la presentación tumoral. La mayoría de los tumores KPC mostraron un patrón de crecimiento sólido con un enfoque único o predominante (Figura 4A), lo que facilitó el reclutamiento animal para tratamientos y evaluación del volumen tumoral. Sin embargo, también se observaron animales con múltiples tumores sólidos pequeños distribuidos por todo el páncreas (Figura 4A). Algunos casos de PDAC también pueden presentar lesiones quísticas intratumorales llenas de líquido, acompañadas de lesiones quísticas peritumorales no neoplásicas y retención de líquidos resultante de una obstrucción ductal de la vesícula biliar y/o del páncreas. (Figura 4A).
Tras el reclutamiento, los animales fueron asignados aleatoriamente a dos grupos experimentales: un grupo de control que no recibió tratamiento y un grupo tratado que recibió administración intraperitoneal (p) de gemcitabina a una dosis de 100 mg/kg dos veces por semana. De los 23 animales elegibles en total, se asignaron 4 hembras y 7 machos al grupo de control, y 6 hembras y 6 machos al grupo tratado. Se realizaron resonancias magnéticas semanales utilizando el sistema de cama multianimal (Figura 5A), lo que nos permitió monitorizar continuamente los cambios en la cinética de crecimiento tumoral tanto en el grupo control como en el tratado (Figura 5B).
Los datos de imagen procesados demuestran que los tumores en el modelo KPC tratado con gemcitabina presentaron un patrón de crecimiento más lento en comparación con el grupo de control no tratado (Figura 5C), lo que se asoció con un aumento estadísticamente significativo (Log rank test, p = 0,04) en la supervivencia global de la cohorte tratada (Figura 5D). La supervivencia mediana para la KPC no tratada fue de 20 semanas, mientras que el grupo tratado mostró una prolongación de la supervivencia mediana de más de 23 semanas (Figura 5D).
<img alt="Figura 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69927/69927fig1.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 1"> 
Figura 1: Flujo de trabajo del procedimiento de imagen por resonancia magnética multianimal, procesamiento y análisis de imágenes. Se destacan los pasos clave del protocolo de resonancia magnética multianimal desde la preparación previa hasta los estudios preclínicos guiados por imagen. Hasta 4 animales son anestesiados en una cámara de inducción (preparación preescaneada) y preparados para su colocación en una cama multianimal (sistema de cama de resonancia magnética multianimal). Una imagen preescaneada de los animales en configuración 2 x 2 (2 en el compartimento superior, 2 en el inferior) seguida de un escaneo por resonancia magnética (imagen por RM). Los datos de imagen de cada animal se guardan como archivos individuales y se analizan de forma independiente (Análisis de Imágenes). La búsqueda de imágenes y el tamaño tumoral se utilizan para seleccionar animales para estudios preclínicos y monitorizar la respuesta al tratamiento (ensayos preclínicos). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69927/69927fig1large.jpg" target="_blank">Por favor, haz clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.</a>
<img alt="Figura 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69927/69927fig2.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 2"> 
Figura 2: Pasos clave para una resonancia magnética multianimal desde la configuración hasta el escaneo. (A) Panel superior, montaje del sistema personalizado de cama de resonancia multianimal. Insertos de cama impresos en 3D diseñados a medida con puertos anestésicos integrados encajan en un soporte estándar para PET/MRI para una sola rata. En el panel inferior, estos insertos impresos en 3D dividen la cama en dos cámaras, permitiendo la imagen simultánea de hasta cuatro animales: los animales 1 y 2 en la parte superior del inserto superior, y los animales 3 y 4 en la parte superior del inserto inferior. Se muestran los planos transversales y los planos modificados frontales de los insertos de la impresora 3D desde el visor STL. (B) Colocación secuencial de ratones en una cama de resonancia magnética multicámara (de arriba a abajo). Imagen superior, dos animales colocados en posición ventral en la parte inferior (izquierda y derecha) del inserto impreso en 3D, que está dentro de la cama PET/MRI proporcionada por el fabricante. Imagen central, los otros dos ratones están colocados en posición ventral en la parte superior (izquierda y derecha) del inserto impreso en 3D; El ratón situado en el lado izquierdo del inserto superior lleva un monitor respiratorio acoplado. Imagen inferior: montaje terminado de cuatro animales con la cubierta superior. Todos los animales tienen cabezas sujetas en un cono nasale para mantener la anestesia (1,5-2% de isoflurano, 0,8-2 L/min de oxígeno). Disposición final de los cuatro animales en el soporte de cama para resonancia magnética con administración de anestesia, calentador de agua y sistema de monitorización de signos vitales para permitir escaneos por resonancia magnética y adquisición de datos de todos los animales en una sola sesión. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69927/69927fig2large.jpg" target="_blank">Por favor, haz clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.</a>
<img alt="Figura 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69927/69927fig3.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 3"> 
Figura 3: Recogida y procesamiento de datos a partir de resonancias magnéticas multianimal. (A) Vista representativa (plano medial) de la resonancia magnética inicial de los cuatro animales. (B) Escaneo de resonancia magnética (plano dorsal) de los cuatro ratones en una cama de varias cámaras: dos ratones situados en la parte inferior (3, 4) y dos ratones en la parte superior (1, 2) de los insertos impresos en 3D. (C) Archivo final de resonancia magnética de alta resolución de cada escaneo individual del ratón. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69927/69927fig3large.jpg" target="_blank">Haz clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.</a>
<img alt="Figura 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69927/69927fig4.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 4"> 
Figura 4: Presentaciones diversas de tumores PDAC: análisis integrado de resonancia magnética e histológica. (A) Imagen representativa de resonancia magnética (plano dorsal) que ilustra la variabilidad anatómica de los tumores PDAC (de izquierda a derecha): páncreas normal, tumores multifocales con lesiones quísticas llenas de líquido y masa tumoral sólida. Los órganos anatómicos se codifican por colores de la siguiente manera: estómago (amarillo), bazo (verde), tumor (morado), acumulación de líquido debido a obstrucción de conductos (azul). Barra de escala blanca = 1 cm. (B) Secciones histológicas de tumores teñidos con H&amp;E junto a clases celulares basadas en superposiciones de clasificadores entrenados asistidos por ordenador, destacando las características histopatológicas de los tumores alineadas con los hallazgos de la resonancia magnética. Área tumoral (T) delimitada en negro para todas las muestras cuando el tumor está presente. Las clases celulares se muestran en color: tejido pancreático normal (gris), tumor (rojo) y células inmunitarias (amarillo). Barra de escamas negras = 0,5 cm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69927/69927fig4large.jpg" target="_blank">Por favor, haga clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.</a>
<img alt="Figura 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69927/69927fig5.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 5"> 
Figura 5: Aplicación de resonancia magnética multianimal para el reclutamiento de animales y el seguimiento del crecimiento tumoral durante el tratamiento con gemcitabina. (A) Cronología del diseño experimental: Se reclutaron animales (14+ semanas de edad) tras una resonancia magnética que detectó un tumor ≥ 200 mm3. Los ratones del grupo tratado recibieron gemcitabina (100 mg/kg, i.p., b.i.w.) hasta alcanzar los criterios de eutanasia. Durante todo el experimento se realizaron resonancias magnéticas multianimales para todos los animales para monitorizar la cinética del crecimiento tumoral. (B) Imágenes representativas de resonancia magnética (plano dorsal) que muestran la progresión tumoral de un animal del grupo no tratado y uno del grupo tratado, desde el día 0 hasta el último día del experimento (punto final de supervivencia). Barra de escala blanca = 1 cm. (C,D) Gráficos que ilustran la cinética de crecimiento tumoral (C, n = 4 [2 F, 2 M] vs. 4 [2 F, 2 M]) y la supervivencia global (D, n = 11 [4 F, 7 M] vs. 12 [6 F, 6 M]) en el grupo no tratado y tratado. La significación estadística para las curvas de supervivencia de Kaplan-Meier se determinó mediante la prueba de rango logarítmico (Mantel-Cox) (* p &lt; 0,05). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69927/69927fig5large.jpg" target="_blank">Por favor, haz clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.</a>
Archivo suplementario 1: Archivo STL para impresión 3D del inserto inferior con puertos anestésicos integrados que cabe en un soporte estándar para camas PET/MRI de una sola rata. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69927/MSU%204%20mouse%20bed%20bottom.stl" target="_blank">Por favor, haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo suplementario 2: Archivo STL para impresión 3D del inserto superior con puertos anestésicos integrados que cabe en un soporte estándar para PET/MRI de una sola rata. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69927/MSU%204%20mouse%20bed%20top.stl" target="_blank">Por favor, haga clic aquí para descargar este archivo.</a>

Imagen por resonancia magnética multianimal para mediciones tumorales en modelos de ratón con cáncer de páncreas

Advanced in vivo imaging modalities, such as magnetic resonance imaging (MRI), are essential research tools to effectively detect tumors in preclinical ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

Este video describe la técnica de DCE-MRI para xenoinjertos de tumores pancreáticos ortotrópicos en ratones. La DCE-MRI es un método no invasivo para analizar la microvasculatura en un tejido diana, y útil para evaluar la respuesta vascular en un tumor después de una terapia novedosa. Este método ayudará a los investigadores a aplicar DCE-MRI para modelos de ratón de cáncer gastrointestinal ortotópico.

DCE-MRI de xenoinjertos ortotópicos de tumores pancreáticos: un método para evaluar la microvasculatura en un tejido tumoral objetivo

Este video muestra un modelo ortotópico de cáncer de páncreas que utiliza Matrigel para la administración celular localizada e imágenes de bioluminiscencia in vivo para el monitoreo no invasivo de la progresión tumoral. El modelo ortotópico es adecuado tanto para modelos singénicos como de xenoinjertos y podría utilizarse en ensayos preclínicos para investigar el impacto de nuevas terapias contra el cáncer en el crecimiento del tumor pancreático primario y la metástasis.

Modelo de ratón ortotópico bioluminiscente para cáncer de páncreas: una técnica no invasiva para monitorear la progresión del cáncer en ratones

El objetivo de este protocolo es aplicar imágenes de resonancia magnética mejorada con contraste dinámico (DCE-MRI) para xenoinjertos ortotópicos de tumores pancreáticos en ratones. La DCE-MRI es un método no invasivo para analizar la microvasculatura en un tejido diana, y útil para evaluar la respuesta vascular en un tumor después de una terapia novedosa.

Dynamic Contrast mejorada de imagen de resonancia magnética de un modelo ortotópico de cáncer pancreático del ratón

Aquí se presenta un procedimiento para implantar células de cáncer de páncreas que expresan proteínas fluorescentes verdes (PANC-1 GFP) ortotópicamente en el páncreas de ratones Balb-c Ola Hsd-Fox1nu para evaluar la progresión tumoral y la metástasis.

Fluorescente modelo de ratón ortotópico de cáncer de páncreas

Este artículo describe la utilización de la ecografía de alta resolución en ratones modificados genéticamente el cáncer de páncreas. El objetivo principal es proporcionar una instrucción detallada para la detección y evaluación de los tumores pancreáticos endógenos.

Utilizando ultrasonido de alta resolución Monitor Tumor Inicio y crecimiento en modelos de cáncer pancreático genéticamente

Los tumores de vejiga murino son inducidos con el carcinógeno nitrosaminas de N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) (BBN). Generación de tumor de vejiga es heterogénea; por lo tanto, es necesaria una evaluación precisa de la carga tumoral antes de la aleatorización al tratamiento experimental. Aquí presentamos un protocolo MRI rápido y confiable para evaluar el escenario y tamaño del tumor.

Evaluación de la proyección de imagen de resonancia magnética de los tumores vesicales murina inducida por carcinógenos

Describimos un protocolo para la implantación guiada por ultrasonido de líneas celulares de adenocarcinoma ductal pancreático derivados de la murino directamente en el sitio del tumor nativo. Este enfoque resultó en tumores pancreáticos detectables por la ecografía dentro de 2-4 semanas de la inyección, y redujo significativamente la proporción de la sesión de células tumorales en la pared peritoneal en comparación con la implantación ortotópica quirúrgica.

Ultrasonido-Guiado Implantación Ortotópica de Adenocarcinoma Ductal Pancreático Murino

El modelado intracraneal de metástasis cerebral se complica por la incapacidad para controlar el tamaño del tumor y la respuesta al tratamiento con métodos precisos y oportunos. La metodología presentada combina la inyección de tumores intracraneales con el análisis de imágenes por resonancia magnética, que cuando se combina, cultiva inyecciones precisas y consistentes, monitorización animal mejorada y mediciones precisas del volumen tumoral.

Modelado de metástasis cerebrales a través de inyección intracraneal e imágenes de resonancia magnética

En el contexto clínico, los pacientes con cáncer de páncreas localizado se someterán a pancreatectomía seguida de tratamiento adyuvante. Este protocolo divulgado aquí apunta establecer un método seguro y de manera efectiva de modelar este escenario clínico en ratones desnudos, con la implantación orthotopic del cáncer pancreático seguido por pancreatectomy y splenectomy distales.

Un modelo ortotópico de ratón reseccional de cáncer de páncreas

Presentamos un protocolo para generar un modelo de cáncer de páncreas ortotópico mínimamente invasivo mediante inyección guiada por ultrasonido de células de cáncer de páncreas humano y el posterior monitoreo del crecimiento tumoral in vivo por imagen ecográfica.

Generación de un xenoinjerto ortotópico de células de cáncer de páncreas mediante inyección guiada por ultrasonido

Aquí, presentamos un protocolo para crear xenoinjertos de carcinoma hepatocelular ortotópico con y sin ligadura de la arteria hepática y realizar imágenes no invasivas de tomografía por emisión de positrones (PET) de hipoxia tumoral utilizando [18 F] fluoromisonidazol ([18 F] FMISO) y [18 F] fluorodesoxiglucosa ([18F] FDG).

Imágenes PET/MR no invasivas en un modelo ortotópico de ratón de carcinoma hepatocelular

Aprenda a realizar resonancia magnética multianimal para detectar tumores pancreáticos en modelos de ratón KRAS. Este protocolo eficiente permite el monitoreo longitudinal y la evaluación terapéutica preclínica con alta sensibilidad.

Imagen por resonancia magnética multianimal para mediciones tumorales en modelos de ratón con cáncer de páncreas

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