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Artículo de método

Modelo novedoso de rata de trombosis sinusal venosa cerebral grave establecido mediante combinación de semiligadura, cloruro férrico y trombina

365 visualizaciones

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DOI:

10.3791/69961

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13 de febrero de 2026

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En este artículo

Resumen

El novedoso modelo en rata de trombosis venosa cerebral severa (CVST), que se construye mediante semiligadura combinada con cloruro férrico y trombina, puede imitar de forma más eficaz el mecanismo fisiopatológico de la CVST grave en humanos.

Resumen

La trombosis del seno venoso cerebral (CVST) es un tipo distinto de ictus que afecta principalmente a personas jóvenes, especialmente a mujeres embarazadas. Aproximadamente el 60% de los pacientes con CVST desarrollan infarto cerebral venoso o hemorragia, que se define como CVST grave. Actualmente, se emplean diversos métodos tanto a nivel nacional como internacional para inducir la CVST en modelos animales. Sin embargo, estos modelos no logran replicar completamente los mecanismos fisiopatológicos que subyacen a la CVST grave, limitando así la investigación básica sobre esta condición. Se puede establecer un modelo novedoso en ratas de CVST grave mediante semiligadura en combinación con cloruro férrico y trombina. La semiligadura se logró midiendo el flujo sanguíneo cerebral (CBF) en la región de interés (ROI) antes y después de la ligadura del seno sagital superior (SSS) utilizando un Imagen de Perfusión Speckle (PSI). La semi-ligadura del SSS induce estasis sanguíneo dentro del seno venoso. La aplicación tópica de cloruro férrico en la superficie del SSS provoca una lesión endotelial, mientras que la inyección directa de trombina en el seno crea un estado hipercoagulable localizado. Este enfoque imita eficazmente los tres componentes clave de la formación de la trombosis: estasis, daño endotelial e hipercoagulabilidad. El modelo resultante presenta una carga trombótica considerable que implica múltiples senos venosos simultáneamente. El trombo inducido permanece estable al menos durante una semana. La tinción con cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio (TTC) demuestra que este modelo puede producir de forma constante un infarto cerebral venoso de gran área, que persiste hasta 7 días. Este modelo incluso puede inducir convulsiones epilépticas en ratas, una capacidad que los modelos anteriores no lograron. La ruptura de la barrera hematoencefálica se observó mediante tinción de azul de Evans (EB). Por lo tanto, el modelo de CVST severo establecido mediante semiligadura combinada con administración de cloruro férrico y trombina replica con mayor precisión la progresión fisiopatológica de la CVST grave en humanos, demostrando estabilidad y fiabilidad.

Introducción

La trombosis del seno venoso cerebral (CVST) es una forma distinta de trastorno cerebrovascular que difiere del ictus arterial. Ocurre con más frecuencia en personas jóvenes 1,2, especialmente en mujeresembarazadas 3, y su incidencia ha ido aumentando de forma constante en los últimos años. Un estudio epidemiológico realizado en Australia indica que la incidencia anual de CVST oscila entre 13,0 y 15,7 casos por millón depersonas 4. En Estados Unidos, la incidencia de CVST muestra una tendencia al alza con la edad. Sin embargo, la....

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Protocolo

El protocolo experimental fue aprobado por el Comité de Experimentos Animales y Bienestar Experimental de la Capital Medical University (AEEI-2020-119) en Pekín, China, y se llevó a cabo en cumplimiento con las normativas del Comité de Cuidado y Uso Animal de la institución.

1. Preparación animal

  1. Asignar aleatoriamente ratas machos Sprague-Dawley (SD) adultas sanas, con un peso corporal medio de 300 ± 10 g, al grupo experimental o al grupo de operación simulada. Todos los animales se mantuvieron en un ciclo alterno de 12 horas luz/oscuridad, con acceso a comida y agua ad lib....

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Resultados

Proceso de modelado
La Figura 1A muestra el SSS de la rata, denotado por la flecha. El rostral y caudal del SSS fueron semi-ligados (Figura 1B), seguidos de la aplicación de hilo empapado en cloruro férrico sobre la superficie de las regiones ligadas (Figura 1C). Posteriormente se inyectó trombina en los segmentos ligados para inducir la trombosis. El área indicada por la flecha.......

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Discusión

Un modelo novedoso de rata de CVST severo construido por semiligadura combinada con cloruro férrico y trombina no solo simula la estasis sanguínea y la lesión endotelial, sino también el estado hipercoagulable de la sangre, es decir, simula los tres elementos de la formación dela trombosis 25. Lo que resulta aún más emocionante es que el modelo de rata desarrollado con este método es capaz de presentar convulsiones epilépticas. Las crisis epilépticas representan u.......

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Divulgaciones

Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia.

Agradecimientos

Agradecemos al Instituto de Enfermedades Cerebrales Críticas de la Universidad Médica Capital por su apoyo técnico. Este estudio fue apoyado por la Fundación de Ciencias Naturales de Pekín (Nº 7182064).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Cloruro 2,3,5-trifeniltetrazolioSigma-Aldrich
40% cloruro férrico  Tianjin Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., China
Evans blue Sigma-Aldrich
Almohadilla térmica yAparato de Harvard Holliston, MA, EE. UU.50-7061-f,  
Taladro dental de alta velocidad y bbsp;Saeshin, Busan, Corea del SurStrong-207B
Medidor de speckles láser  Sistema PSI PeriCam, Suecia
MicroscopioCarl Zeiss, Inc., Berlín, Alemania
Sutura de poliamida  Fábrica de Microaparatos Ningbo Chenghe, China
Marco estereotáxicoDavid Kopf Instruments, Tujunga, California, EE. UU.
TrombinaChang Chun Lei Yunshang Pharmaceutical Co., Ltd., China

Referencias

  1. Silvis, S. M., de Sousa, D. A., Ferro, J. M., Coutinho, J. M. Cerebral venous thrombosis. Nat Rev Neurol. 13 (9), 555-565 (2017).
  2. Ferro, J. M., Aguiar de Sousa, D. Cerebral venous thrombosis: an update. Curr Neurol Neurosci Rep. 19 (10), 74(2019).
  3. Kashkoush, A. I., et al.

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