Name: Disección a pequeña escala y tinción por anticuerpos de discos imaginales de antenas oculares y de alas de Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-15T12:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 38 s
Description: Aprende a diseccionar y teñir discos imaginales de Drosophila melanogaster con anticuerpos en placas de micropocillos. Este protocolo eficiente reduce el uso de reactivos y permite procesar muestras individuales con precisión.

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<ol><li>Bate, M., Martinez Arias, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCohen%2C+SM+%22The+development+of+Drosophila+melanogaster%22">The development of Drosophila melanogaster</a>. , CSHL Press. 747-841 (1993).</li>
<li>Tripathi, B. K., Irvine, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+wing+imaginal+disc%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">The wing imaginal disc.</a> Genetics. 220 (4), iyac020(2022).</li>
<li>Baker, N. E., Li, K., Quiquand, M., Ruggiero, R., Wang, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eye+development%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Eye development.</a> Methods. 68 (1), 252-259 (2014).</li>
<li>Treisman, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+differentiation+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Wiley+Interdiscip+Rev+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Retinal differentiation in Drosophila.</a> Wiley Interdiscip Rev Dev Biol. 2 (4), 545-557 (2013).</li>
<li>Beira, J. V., Paro, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+legacy+of+Drosophila+imaginal+discs%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">The legacy of Drosophila imaginal discs.</a> Chromosoma. 125 (4), 573-592 (2016).</li>
<li>Held, L. I. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHeld%2C+LIJ+%22Imaginal+discs%3A+The+genetic+and+cellular+logic+of+pattern+formation%22">Imaginal discs: The genetic and cellular logic of pattern formation</a>. , Cambridge University Press. (2002).</li>
<li>Tomlinson, A., Ready, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+differentiation+in+the+Drosophila+ommatidium%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Neuronal differentiation in the Drosophila ommatidium.</a> Developmental Biology. 120, 366-376 (1987).</li>
<li>Rubin lab methods book. , Wellcome Collection. 
 <a target="_blank" href="https://wellcomecollection.org/works/u7msrkak">https://wellcomecollection.org/works/u7msrkak</a> (1990).</li>
<li>Rubin lab manual. , The Rubin Lab. 
 <a target="_blank" href="https://www.yumpu.com/en/document/view/12357776/rubin-lab-manual-jfly-home-page">https://www.yumpu.com/en/document/view/12357776/rubin-lab-manual-jfly-home-page</a> (1990).</li>
<li>Mitchison, T. J., Sedat, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+antigenic+determinants+in+whole+Drosophila+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Localization of antigenic determinants in whole Drosophila embryos.</a> Dev Biol. 99 (1), 261-264 (1983).</li>
<li>Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, R. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSullivan%2C+W+%22Drosophila+protocols%22">Drosophila protocols</a>. , Spring Harbor Laboratory Press. (2000).</li>
<li>Mclean, I. W., Nakane, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Periodate-lysine-paraform-aldehyde+fixative+a+new+fixative+for+immunoelectron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Histochem.+Cytochem%22%5BJournal%5D)">Periodate-lysine-paraform-aldehyde fixative a new fixative for immunoelectron microscopy.</a> J. Histochem. Cytochem. 22, 1108-1077 (1974).</li>
<li>Jarman, A. P., Grell, E. H., Ackerman, L., Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atonal+is+the+proneural+gene+for+Drosophila+photoreceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Atonal is the proneural gene for Drosophila photoreceptors.</a> Nature. 369, 398-400 (1994).</li>
<li>Worley, M. I., Setiawan, L., Hariharan, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tie-dye%3A+A+combinatorial+marking+system+to+visualize+and+genetically+manipulate+clones+during+development+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Tie-dye: A combinatorial marking system to visualize and genetically manipulate clones during development in Drosophila melanogaster.</a> Development. 140 (15), 3275-3284 (2013).</li>
<li>Blanco, J., Cooper, J. C., Baker, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+c%2Febp+class+bzip+proteins+in+the+growth+and+cell+competition+of+rp+%28%27minute%27%29+mutants+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Roles of c/ebp class bzip proteins in the growth and cell competition of rp ('minute') mutants in Drosophila.</a> Elife. 9, e50535(2020).</li>
<li>Jennings, B., Preiss, A., Delidakis, C., Bray, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+notch+signalling+pathway+is+required+for+enhancer+of+split+bhlh+protein+expression+during+neurogenesis+in+the+Drosophila+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The notch signalling pathway is required for enhancer of split bhlh protein expression during neurogenesis in the Drosophila embryo.</a> Development. 120 (12), 3537-3548 (1994).</li>
<li>Kiparaki, M., Baker, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+assessing+translation+in+living+Drosophila+imaginal+discs+by+o-propargyl-puromycin+incorporation%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for assessing translation in living Drosophila imaginal discs by o-propargyl-puromycin incorporation.</a> STAR Protoc. 4 (4), 102653(2023).</li>
<li>Spratford, C. M., Kumar, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissection+and+immunostaining+of+imaginal+discs+from+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Dissection and immunostaining of imaginal discs from Drosophila melanogaster.</a> J Vis Exp. (91), e51792(2014).</li>
<li>Yan, S. J., Li, W. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+Drosophila+larval+imaginal+discs+to+study+low-dose+radiation-induced+cell+cycle+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Using Drosophila larval imaginal discs to study low-dose radiation-induced cell cycle arrest.</a> Methods Mol Biol. 782, 93-103 (2011).</li>
<li>Klein, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunolabeling+of+imaginal+discs%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Immunolabeling of imaginal discs.</a> Methods Mol Biol. 420, 253-263 (2008).</li>
<li>Phalle Bde, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunostaining+of+whole-mount+imaginal+discs%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Immunostaining of whole-mount imaginal discs.</a> Methods Mol Biol. 247, 373-387 (2004).</li>
<li>Morimoto, K., Tamori, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+diagnosis+of+tumors+in+Drosophila+imaginal+disc+epithelia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Induction and diagnosis of tumors in Drosophila imaginal disc epithelia.</a> J Vis Exp. (125), e55901(2017).</li>
<li>Brown, N. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBrown%2C+NL+%22Confocal+microscopy+methods+and+protocols.+Methods+in+molecular+biology%22">Confocal microscopy methods and protocols. Methods in molecular biology</a>. Paddow, S. W. , Humana Press. 75-91 (1999).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Fosfato disódico</td><td>Fisher</td><td>7558-79-4</td><td>Na2HPO4 - fosfato de fosfato de sodio anhidro. Se pueden usar otros estados de hidratación, pero cambian el peso molecular</td></tr><tr><td>Fórceps: Dumont #5 Pinza Biologie</td><td>Herramientas científicas finas</td><td>11252-20</td><td>Estilo: #5</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Forma de la punta: recta</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>Longitud: 11 cm</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Autoclave Safe: Sí</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Consejos: Biología</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Dimensiones de la punta:</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>0,05 x 0,02 mm</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Aleación / Material: Inox</td></tr><tr><td>Formaldehído</td><td>Fisher</td><td>BP531-500</td><td>Grado de biología molecular, 37% de formaldehído. 500ml</td></tr><tr><td>Fijador de formaldehído</td><td>Fisher</td><td>BP531-500</td><td>3,7% formaldehído en 0,1M de tampón fosfato de sodio pH7,2 producido por dilución a partir del 37% de stock.</td></tr><tr><td>Glicerol</td><td>Biorreactivos de Fisher</td><td>BP229-1</td><td></td></tr><tr><td>Hielo</td><td>Preferencia del usuario</td><td></td><td></td></tr><tr><td>L-Lisina, 98%</td><td>Termociencia</td><td>J62225.22</td><td></td></tr><tr><td>mAb40-1</td><td>DHSB</td><td>40-1a-s</td><td>Anti-beta galactosidasa</td></tr><tr><td>Tubos microcentrífugas</td><td>Científico en EE. UU.</td><td>1615-5520</td><td>Tubos de 1,5 mL para almacenar muestras.</td></tr><tr><td>Tijeras de microdisección</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>15003-08</td><td>Filo de corte de 5mm, punta recta, 8,5cm</td></tr><tr><td>Fosfato monosódico</td><td>Fisher</td><td>7558-80-7</td><td>NaH2PO4 - Fosfato de sodio monobásico anhidro. Si se usa una forma hidratada, el peso necesario para hacer una solución de 0,1M cambiaría.</td></tr><tr><td>Medio de montaje</td><td></td><td></td><td>Solución de glicerol al 75% en un tampón fosfato de sodio 0,1M pH7,2 con 2,5% de n-propilo galato. Mezcla por inversión para minimizar burbujas.</td></tr><tr><td>NSG</td><td></td><td></td><td>0,1M de fosfato de sodio tampón pH7,2, 0,1% saponina, 5% NGS</td></tr><tr><td>N-propilo galato</td><td>MP Biomedicina</td><td>210274780</td><td></td></tr><tr><td>Esmalte de uñas</td><td>Ted Pella, comprado a Fisher</td><td>NC0381432</td><td>Para correderos de sellado</td></tr><tr><td>Portaagujas</td><td>Fisher</td><td>NC0099380</td><td>Para microdisecar agujas. Acero inoxidable hueco; Longitud del mango: 4 3/4" de largo</td></tr><tr><td>Mini Bandejas Microwell Nunc</td><td>Termo Científica</td><td>12565155</td><td>MicroWell MiniTray para aplicaciones serológicas. Recuento de pozos: 60</td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>StatLab</td><td>PM996</td><td>StatLab ParaFilm M Película Flexible Autosellante</td></tr><tr><td>Paraformaldehído</td><td>Polysciences, Inc.</td><td>00380-250</td><td></td></tr><tr><td>10 veces PBS</td><td>Preferencia del usuario</td><td></td><td>Prepara 800 mL de agua destilada en un recipiente adecuado.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>Añade 1,37 m de cloruro de sodio a la solución.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Añade 26,8 mM de cloruro de potasio a la solución.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Añade 101 mM de dibásico fosfato de sodio a la solución.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Añade 18,0 mM de Monobásico de Fosfato de Potasio a la solución.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Ajustar la solución al pH deseado (normalmente pH y asínpice; 7,4).</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Añade agua destilada hasta que el volumen sea de 1 L.</td></tr><tr><td>PBT</td><td>Preferencia del usuario</td><td></td><td>0,1M tampón fosfato de sodio pH7,2, 0,1% albúmina sérica bovina y 0,2% Triton X-100.</td></tr><tr><td>PDT</td><td>Preferencia del usuario</td><td></td><td>0,1M tampón fosfato de sodio (pH = 7,2), 0,3% desoxicolato y 0,3% Triton x-100</td></tr><tr><td>Placa de Petri</td><td>Halcón</td><td>Corning 351007</td><td>Placa de Petri; 60mm; no tratado</td></tr><tr><td>Placa de Petri</td><td>Halcón</td><td>Corning 351008</td><td>Placa de Petri; 35mm; no tratado</td></tr><tr><td>Alicates</td><td>Preferencia del usuario</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PLP</td><td>N/D</td><td></td><td>2% de paraformaldehído 1,35% lisina en un tampón fosfato de sodio 0,05M pH7,2</td></tr><tr><td>Anticuerpos secundarios</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>715-545-151</td><td>0,5 mg de Alexa Fluor 488 Donkey Anti-Mouse IgG.</td></tr><tr><td>Cubiertas para diapositivas</td><td>VWR</td><td>48393-172</td><td>VWR Coverglass #1.5 22x40 (CAJA)</td></tr><tr><td>Diapositivas</td><td>Fisher</td><td>125442</td><td>Fisher Glass Slides 10bx/CS</td></tr><tr><td>Desoxicolato de sodio</td><td>Ciencias Termodinámicas de Fisher</td><td>89904</td><td>detergente desoxicolato de sodio; 5 mg</td></tr><tr><td>Periodato de sodio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>71859-25G</td><td>Periodato de sodio y ndash; 25 gramos</td></tr><tr><td>Buffer de fosfato de sodio</td><td></td><td></td><td>0,1M del tampón NaPO4 pH 7,2. Mezcla 28 ml de 0,1 millones de fosfato monosódico anyhdrous (11,998 g de NaH2PO4 a 1L de agua destilada) con 72 ml de fosfato disódico anyhidro 0,1M (14,196 g de Na2HPO4 a 1L de agua destilada) para generar 100 ml de tampón de 0,1M NaPO4. Alternativamente, se puede utilizar PBS.</td></tr><tr><td>Alambre de tungsteno</td><td>Ted Pella</td><td>27-11</td><td>.005" Dia.</td></tr><tr><td>Triton x-100</td><td>Ciencias Termodinámicas de Fisher</td><td>A16046AE</td><td></td></tr><tr><td>Vórtice</td><td>Preferencia del usuario</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

disección a pequeña escala y tinción por anticuerpos de discos imaginales de antenas oculares y de alas de drosophila melanogaster

Small Scale Dissection and Antibody Staining of Eye-Antennal and Wing Imaginal Discs from Drosophila melanogaster

Disección a pequeña escala y tinción por anticuerpos de discos imaginales de antenas oculares y de alas de Drosophila melanogaster

Drosophila imaginal discs have long been studied as models of epithelial development, patterning, and regeneration. Antibody labeling and imaging of ...

small-scale-dissection-antibody-staining-eye-antennal-wing-imaginal

Research

Investigación

JoVE Journal

Developmental Biology

Biología del Desarrollo

A continuación se describe un protocolo para examinar la migración de las células gliales en el desarrollo del ojo de Drosophila mediante el análisis microscópico directo emparejado con GFP etiquetados células gliales.

Imágenes en directo de la migración de células gliales en el ojo del disco imaginal de Drosophila

Se describe una nueva proteína fluorescente roja (RFP) periodista que se expresa específicamente en...

Una novela RFP reportero para ayudar en la visualización del disco imaginal del ojo en Drosophila</em

La disección e inmunohistoquímica de larva, pupa y adulto<em&gt; Drosophila</em&gt; Retinas

Al teñir discos imaginales de Drosophila, a menudo se realiza una disección aproximada en la que los discos quedan expuestos pero permanecen unidos al cuerpo. Una vez teñidos, los discos de interés se aíslan y se montan. El protocolo de ejemplo muestra un procedimiento para la disección y el montaje del disco imaginal del ala.

Drosophila Disección del disco imaginal de las larvas: un método para observar el desarrollo de los epitelios

Las estructuras adultas de Drosophila se derivan de estructuras en forma de saco llamadas discos imaginales. El análisis de estos discos proporciona información sobre muchos procesos de desarrollo, incluida la determinación de tejidos, el establecimiento de límites de compartimentos, la proliferación celular, la especificación del destino celular y la polaridad celular plana. Este protocolo se utiliza para preparar discos imaginales para microscopía óptica/fluorescente.

La disección y la inmunotinción de imaginal discos de Drosophila melanogaster

El objetivo de esta técnica es permitir a los investigadores realizar la disección, inmunotinción y montaje de discos oculares de pupa de Drosophila melanogaster de cualquier edad.

Disección y montaje de<em&gt; Drosophila</em&gt; Pupal discos Eye

Este protocolo se muestra cómo generar tumores clonales fluorescente marcada, genéticamente definidos en el ojo de Drosophila / discos imaginales de las antenas (EAD). En él se describe cómo diseccionar el EAD y el cerebro de la tercera fase larvaria y la forma de procesarlos para visualizar y cuantificar cambios de expresión génica y la invasividad tumoral.

los<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal modelo de tumor de disco: visualización y cuantificación de la expresión génica y la invasividad tumoral Uso Genético Mosaicos

Este protocolo describe la disección y el immunostaining del adulto de Drosophila melanogaster los tejidos del cerebro. Específicamente, este protocolo destaca el uso de setas neuronas cuerpo y fotorreceptor Drosophila como subconjuntos neuronal de ejemplo que pueden utilizarse con precisión para descubrir principios generales subyacentes a muchos aspectos del desarrollo neuronal.

Disección y tinción inmunofluorescente de seta del cuerpo y las neuronas fotorreceptoras en cerebros de adultos de Drosophila melanogaster

Aquí, presentamos un protocolo para la etapa y diseccionar desarrollar tejido olfativo de especies de Drosophila . El tejido disecado más adelante puede ser utilizado para análisis moleculares como RT-PCR (reacción en cadena de polimerasa de transcripción inversa) o RNA, secuenciación (RNAseq), así como análisis en vivo como inmunohistoquímica o en situ hibridación.

Preparación de desarrollar tejido olfatorio periférico para Molecular y el análisis de Immunohistochemical en Drosophila

Este artículo presenta un método quirúrgico para disección Drosophila pupas retinas junto con protocolos para el procesamiento del tejido para la extracción de RNA, inmunohistoquímica y análisis occidental.

Disección de la Retina Pupal de Drosophila para inmunohistoquímica, Western análisis y aislamiento de ARN

Drosophila es un modelo poderoso para comprender los mecanismos fundamentales de la miogénesis. Este protocolo para la disección y preparación de hemisecciones de tórax permite el análisis microscópico del músculo de vuelo indirecto tanto de la etapa de pupa como de la adulta. Este protocolo permite obtener imágenes confocales de la morfología celular, la localización de proteínas, la estructura muscular y muchos otros aspectos de la miogénesis.

Disección de los músculos de vuelo indirecto de Drosophila melanogaster para enfoques de microscopía

Aprende a diseccionar y teñir discos imaginales de Drosophila melanogaster con anticuerpos en placas de micropocillos. Este protocolo eficiente reduce el uso de reactivos y permite procesar muestras individuales con precisión.

Disección a pequeña escala y tinción por anticuerpos de discos imaginales de antenas oculares y de alas de Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal

Disección a pequeña escala y tinción por anticuerpos de discos imaginales de antenas oculares y de alas de Drosophila melanogaster

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