Name: Un cultivo de organoides bidimensional sobre una invasina o extracto de membrana basal para estudiar las interacciones huésped-bacteria (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-13T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 21 s
Description: Aprende a cultivar organoides intestinales humanos en monocapas 2D sobre invasina para estudiar infecciones bacterianas. Este método permite analizar respuestas epiteliales y translocación de AIEC en modelos in vitro fisiológicos.

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<ol><li>McCoy, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+Models+for+Investigating+Intestinal+Host-Pathogen+Interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci%22%5BJournal%5D)">In vitro Models for Investigating Intestinal Host-Pathogen Interactions.</a> Adv Sci. 11 (8), 2306727(2023).</li>
<li>Sambuy, Y., De Angelis, I., Ranaldi, G., Scarino, M. L., Stammati, A., Zucco, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Caco-2+cell+line+as+a+model+of+the+intestinal+barrier%3A+influence+of+cell+and+culture-related+factors+on+Caco-2+cell+functional+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The Caco-2 cell line as a model of the intestinal barrier: influence of cell and culture-related factors on Caco-2 cell functional characteristics.</a> Cell Biol Toxicol. 21 (1), 1-26 (2005).</li>
<li>Gustafsson, J. K., Ermund, A., Johansson, M. E. V., Schütte, A., Hansson, G. C., Sjövall, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+ex+vivo+method+for+studying+mucus+formation%2C+properties%2C+and+thickness+in+human+colonic+biopsies+and+mouse+small+and+large+intestinal+explants%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">An ex vivo method for studying mucus formation, properties, and thickness in human colonic biopsies and mouse small and large intestinal explants.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 302 (4), G430-G438 (2012).</li>
<li>Puschhof, J., Pleguezuelos-Manzano, C., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids+and+organs-on-chips%3A+Insights+into+human+gut-microbe+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Host+Microbe%22%5BJournal%5D)">Organoids and organs-on-chips: Insights into human gut-microbe interactions.</a> Cell Host Microbe. 29 (6), 867-878 (2021).</li>
<li>Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+Development+and+Disease+with+Organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Modeling Development and Disease with Organoids.</a> Cell. 165 (7), 1586-1597 (2016).</li>
<li>Kim, M., Fèvre, C., Lavina, M., Disson, O., Lecuit, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+live+imaging+of+bacteria-cell+interactions+in+genetically+modified+mouse+small+intestinal+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for live imaging of bacteria-cell interactions in genetically modified mouse small intestinal organoids.</a> STAR Protoc. 5 (1), 102773(2024).</li>
<li>Co, J. Y., Margalef-Català, M., Monack, D. M., Amieva, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+the+polarity+of+human+gastrointestinal+organoids+to+investigate+epithelial+biology+and+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Controlling the polarity of human gastrointestinal organoids to investigate epithelial biology and infectious diseases.</a> Nat Protoc. 16 (11), 5171-5192 (2021).</li>
<li>Moon, C., VanDussen, K. L., Miyoshi, H., Stappenbeck, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+primary+mouse+intestinal+epithelial+cell+monolayer+culture+system+to+evaluate+factors+that+modulate+IgA+transcytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Development of a primary mouse intestinal epithelial cell monolayer culture system to evaluate factors that modulate IgA transcytosis.</a> Mucosal Immunol. 7 (4), 818-828 (2014).</li>
<li>VanDussen, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+enhanced+human+gastrointestinal+epithelial+culture+system+to+facilitate+patient-based+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Development of an enhanced human gastrointestinal epithelial culture system to facilitate patient-based assays.</a> Gut. 64 (6), 911-920 (2015).</li>
<li>Pleguezuelos-Manzano, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+RNA+sequencing+of+a+co-culture+model+of+Pseudomonas+aeruginosa+and+human+2D+upper+airway+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Dual RNA sequencing of a co-culture model of Pseudomonas aeruginosa and human 2D upper airway organoids.</a> Sci Rep. 15 (1), 2222(2025).</li>
<li>Wijnakker, J. J. A. P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin-activating+Yersinia+protein+Invasin+sustains+long-term+expansion+of+primary+epithelial+cells+as+2D+organoid+sheets%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Integrin-activating Yersinia protein Invasin sustains long-term expansion of primary epithelial cells as 2D organoid sheets.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 122 (1), e2420595121(2025).</li>
<li>Darfeuille-Michaud, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Presence+of+adherent+Escherichia+coli+strains+in+ileal+mucosa+of+patients+with+Crohn%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Presence of adherent Escherichia coli strains in ileal mucosa of patients with Crohn's disease.</a> Gastroenterology. 115 (6), 1405-1413 (1998).</li>
<li>Darfeuille-Michaud, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+prevalence+of+adherent-invasive+Escherichia+coli+associated+with+ileal+mucosa+in+Crohn%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">High prevalence of adherent-invasive Escherichia coli associated with ileal mucosa in Crohn's disease.</a> Gastroenterology. 127 (2), 412-421 (2004).</li>
<li>Pleguezuelos-Manzano, C., Puschhof, J., van den Brink, S., Geurts, V., Beumer, J., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+culture+of+human+intestinal+organoids+derived+from+adult+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Immunol%22%5BJournal%5D)">Establishment and culture of human intestinal organoids derived from adult stem cells.</a> Curr Protoc Immunol. 130 (1), e106(2020).</li>
<li>Anilionyte, O., Liang, H., Ma, X., Yang, L., Zhou, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short%2C+auto-inducible+promoters+for+well-controlled+protein+expression+in+Escherichia+coli%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Microbiol+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Short, auto-inducible promoters for well-controlled protein expression in Escherichia coli.</a> Appl Microbiol Biotechnol. 102 (16), 7007-7015 (2018).</li>
<li>Chen, S., Einspanier, R., Schoen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transepithelial+electrical+resistance+%28TEER%29%3A+a+functional+parameter+to+monitor+the+quality+of+oviduct+epithelial+cells+cultured+on+filter+supports%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Transepithelial electrical resistance (TEER): a functional parameter to monitor the quality of oviduct epithelial cells cultured on filter supports.</a> Histochem Cell Biol. 144 (5), 509-515 (2015).</li>
<li>In, J. G., Foulke-Abel, J., Clarke, E., Kovbasnjuk, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+colonoid+monolayers+to+study+interactions+between+pathogens%2C+commensals%2C+and+host+intestinal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Human colonoid monolayers to study interactions between pathogens, commensals, and host intestinal epithelium.</a> J Vis Exp. (146), e59357(2019).</li>
<li>Quereda, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dual+microscopy-based+assay+to+assess+Listeria+monocytogenes+cellular+entry+and+vacuolar+escape%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A dual microscopy-based assay to assess Listeria monocytogenes cellular entry and vacuolar escape.</a> Appl Environ Microbiol. 82 (1), 211-217 (2016).</li>
<li>Schulte, M., Grotheer, L., Hensel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bright+individuals%3A+Applications+of+fluorescent+protein-based+reporter+systems+in+single-cell+cellular+microbiology%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Bright individuals: Applications of fluorescent protein-based reporter systems in single-cell cellular microbiology.</a> Mol Microbiol. 121 (3), 605-617 (2024).</li>
<li>Sharma, A., Puhar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gentamicin+protection+assay+to+determine+the+number+of+intracellular+bacteria+during+infection+of+human+TC7+intestinal+epithelial+cells+by+Shigella+flexneri%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-protocol%22%5BJournal%5D)">Gentamicin protection assay to determine the number of intracellular bacteria during infection of human TC7 intestinal epithelial cells by Shigella flexneri.</a> Bio-protocol. 9 (13), e3292(2019).</li>
<li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+expansion+of+epithelial+organoids+from+human+colon%2C+adenoma%2C+adenocarcinoma%2C+and+Barrett%27s+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Long-term expansion of epithelial organoids from human colon, adenoma, adenocarcinoma, and Barrett's epithelium.</a> Gastroenterology. 141 (5), 1762-1772 (2011).</li>
<li>Fujii, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+intestinal+organoids+maintain+self-renewal+capacity+and+cellular+diversity+in+niche-inspired+culture+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Human intestinal organoids maintain self-renewal capacity and cellular diversity in niche-inspired culture conditions.</a> Cell Stem Cell. 23 (6), 787-793 (2018).</li>
<li>He, G. -W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+human+intestinal+organoid+model+reveals+interleukin-22-dependency+of+paneth+cell+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Optimized human intestinal organoid model reveals interleukin-22-dependency of paneth cell formation.</a> Cell Stem Cell. 29 (9), 1333-1345 (2022).</li>
<li>Ding, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+9+pathway+mediates+Schlafen%E2%81%BA-MDSC+polarization+during+Helicobacter-induced+gastric+metaplasias%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor 9 pathway mediates Schlafen⁺-MDSC polarization during Helicobacter-induced gastric metaplasias.</a> Gastroenterology. 163 (2), 411-425 (2022).</li>
<li>Alonso-Roman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ-on-chip+models+for+infectious+disease+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Organ-on-chip models for infectious disease research.</a> Nature Microbiol. 9 (4), 891-904 (2024).</li>
<li>Jalili-Firoozinezhad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+complex+human+gut+microbiome+cultured+in+an+anaerobic+intestine-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">A complex human gut microbiome cultured in an anaerobic intestine-on-a-chip.</a> Nature Biomed Eng. 3 (7), 520-531 (2019).</li>
<li>Vllahu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+promotes+stomach+epithelial+defense+by+stimulating+the+secretion+of+antimicrobial+peptides+in+the+mucus%5BTitle%5D)+AND+%22Gut+Microbes%22%5BJournal%5D)">Inflammation promotes stomach epithelial defense by stimulating the secretion of antimicrobial peptides in the mucus.</a> Gut Microbes. 16 (1), 2390680(2024).</li>
<li>Aguilar, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((et+al.Helicobacter+pylori+shows+tropism+to+gastric+differentiated+pit+cells+dependent+on+urea+chemotaxis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Commun%22%5BJournal%5D)">et al.Helicobacter pylori shows tropism to gastric differentiated pit cells dependent on urea chemotaxis.</a> Nature Commun. 13 (1), 1-14 (2022).</li>
<li>Llanos-Chea, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacteriophage+therapy+testing+against+Shigella+flexneri+in+a+novel+human+intestinal+organoid-derived+infection+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ped+Gastroenterol+Nutr%22%5BJournal%5D)">Bacteriophage therapy testing against Shigella flexneri in a novel human intestinal organoid-derived infection model.</a> J Ped Gastroenterol Nutr. 68 (4), 509-516 (2019).</li>
<li>Horsley, H., Dharmasena, D., Malone-Lee, J., Rohn, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+urine-dependent+human+urothelial+organoid+offers+a+potential+alternative+to+rodent+models+of+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A urine-dependent human urothelial organoid offers a potential alternative to rodent models of infection.</a> Sci Rep. 8 (1), 1238(2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>A83-01 (inhibidor de TGF y beta)</td><td>Tocris</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>Escherichia coli LF82 invasiva adherente</td><td>generoso regalo de Nicolas Barnich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12 avanzado</td><td>Invitrogen</td><td>12634-010</td><td></td></tr><tr><td>B27 sin vitamina A</td><td>Invitrogen</td><td>12587010</td><td></td></tr><tr><td>Kit de ADNcDNA</td><td>Biosistemas Aplicados</td><td>4387406</td><td>El manual está disponible aquí: https://documents.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/MAN 0017977_highcap_cDNA_RT_UG.pdf</td></tr><tr><td>Contador de celdas</td><td>DeNovix</td><td>H2796</td><td></td></tr><tr><td>Contador de celdas</td><td>Leica</td><td>Stellaris</td><td></td></tr><tr><td>Coberturas 24 mm x 50 mm</td><td>Menzel-Gl&auml; Zer.</td><td>BB024050S1</td><td></td></tr><tr><td>Extracto de membrana basal de Cultrex (BME)</td><td>R& Sistemas D, Bio-Techne</td><td>3533-001-02</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10236276001</td><td></td></tr><tr><td>Bisturí desechable estéril N&deg; 10</td><td>Swann Morton</td><td>3033838</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Fiyi</td><td>Fiyi</td><td></td><td>Fiyi es de acceso abierto y puede descargarse aquí: https://imagej.net/software/fiji/downloads</td></tr><tr><td>Glutamax</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>hEGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Gibco</td><td>15630-080</td><td></td></tr><tr><td>Invasina</td><td>hecha a medida según Wijnakker et al. PNAS 2024</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LB</td><td>Thermofisher</td><td>CM0996</td><td></td></tr><tr><td>LB Agar</td><td>Thermofisher</td><td>CM1116</td><td></td></tr><tr><td>Cámara de Malassez</td><td>KOVA</td><td>87144E</td><td></td></tr><tr><td>Portaobjetos de microscopio</td><td>Skycraft</td><td>18901</td><td></td></tr><tr><td>Voltohmómetro de células de Milli (medición TEER)</td><td>Merck</td><td>MERS00002</td><td></td></tr><tr><td>Medio de montaje</td><td>Laboratorios Vectors</td><td>Vectashield H-1000-10</td><td></td></tr><tr><td>N-Acetil cisteína</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamida</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>Noggin UPE</td><td>Terapias IPA</td><td>N002</td><td></td></tr><tr><td>Solución de paraformaldehído 4%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1.00496</td><td></td></tr><tr><td>Faloidina 647</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>65906-10NMOL</td><td></td></tr><tr><td>plásmido pMB1-spect-PthrC-eGFP</td><td>Addgene</td><td>107408</td><td></td></tr><tr><td>Prostaglandina E2</td><td>Tocris</td><td>2296</td><td></td></tr><tr><td>Máquina qPCR</td><td>Biorad</td><td>C1000-Touch</td><td></td></tr><tr><td>Inhibidor de la rho quinasa</td><td>AbMole</td><td>M1817</td><td></td></tr><tr><td>Kit de extracción de ARN</td><td>Qiagen</td><td>74534</td><td>El manual está disponible aquí: https://www.qiagen.com/us/resources/resourcedetail?id=bf60203 F-291D-48AE-8206-86B0696B28C0& lang=en</td></tr><tr><td>R-spo3 UPE</td><td>Terapias IPA</td><td>R001</td><td></td></tr><tr><td>SB202190 (inhibidor de p38)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S7076</td><td></td></tr><tr><td>Spectinomicina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9007</td><td></td></tr><tr><td>Placa de suspensión para el cultivo de organoides</td><td>Greiner</td><td>665102</td><td></td></tr><tr><td>SYBR verde</td><td>Biorad</td><td>170-8887</td><td>El manual está disponible aquí: https://www.bio-rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/4106212.pdf</td></tr><tr><td>Termociclador</td><td>Biorad</td><td>T100</td><td></td></tr><tr><td>Inserto de cultivo celular</td><td>Transwells 24w 3 y micro; m pores, Greiner</td><td>662631</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8787</td><td></td></tr><tr><td>Triple</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td>12605-010</td><td></td></tr><tr><td>Sustituto Wnt</td><td>U-Protein Express</td><td>Orden personalizado</td><td>&nbsp; https://www.life-sciences-europe.com/organisation/protein-express-immunoprecise-group-utrecht-netherlands-west-europe-2001-30404.html</td></tr></tbody></table>

un cultivo de organoides bidimensional sobre una invasina o extracto de membrana basal para estudiar las interacciones huésped-bacteria

A Two-Dimensional Organoid Culture on Invasin or Basement Membrane Extract to Study Host-Bacteria Interactions

Un cultivo de organoides bidimensional sobre una invasina o extracto de membrana basal para estudiar las interacciones huésped-bacteria

Organoid technology provides an experimental in vitro platform for studying human physiology in health and disease. Compared with other in vitro systems, ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Este protocolo describe un co-cultivo de microfluidos modelo de cultivo simultáneo y localizada de células epiteliales y bacterias. Este modelo se puede utilizar para investigar el papel de las diferentes señales moleculares solubles en la patogénesis, así como la pantalla de la supuesta eficacia de cepas de bacterias probióticas.

Microfluidos Co-cultivo de células epiteliales y bacterias para la Investigación de la señal mediada Soluble Interacciones

Este video proporciona una metodología detallada para cultivar células de cáncer de mama en una matriz de proteínas de membrana basal en 3D, ejemplificando el potencial del cultivo 3D en la evaluación de la invasión celular en el entorno circundante.

Ensayo de membrana basal de cultivo en 3D: cultivo de células cancerosas en matriz de proteínas de membrana basal en 3D para estudiar la invasión celular

Este video muestra un método para establecer un modelo de infección en tejidos placentarios para estudiar la propagación de la infección. Un cultivo de órganos placentarios ex vivo está infectado con Listeria monocytogenes, un parásito intracelular facultativo. Las bacterias invaden los trofoblastos extravellosos (EVT) para entrar en el tejido placentario y luego se propagan a otras células a través de la propagación de célula a célula.

Una técnica para establecer un modelo de infección bacteriana en un cultivo de órganos ex vivo

Los cultivos derivados de células madre albergan un tremendo potencial para modelar enfermedades infecciosas. Aquí se describe el cultivo de organoides gástricos de ratón y humanos derivados de células madre adultas. Los organoides se microinyectan con el patógeno gástrico Helicobacter pylori.

Organoides como Modelo para Enfermedades Infecciosas: Cultura de Derechos Humanos y organoides estomacales murinos y microinyección de Helicobacter Pylori

Aquí, presentamos un protocolo cultura humana enteroide o monocapas de colonoid que tienen la función de la barrera intacta para estudiar las interacciones epiteliales microbiota de host a nivel celular y bioquímico.

Monocapas de Colonoid humano para estudiar las interacciones entre patógenos, comensales y epitelio Intestinal Host

Aquí presentamos dos protocolos que permiten el modelado de interacciones intestinales apical-específicas. las monocapas intestinales Organoide-derivadas y las culturas de la interfaz aire-líquido (ALI) facilitan la generación de epitelios bien diferenciados accesibles de lados luminales y basolaterales, mientras que los organoids intestinales polaridad-invertidos exponen su lado apical y son susceptibles a los análisis de alto rendimiento.

Métodos de cultivo para estudiar las interacciones apicales específicas utilizando modelos organoides intestinales

Este artículo presenta un método único para analizar las interacciones huésped-microbioma utilizando un nuevo sistema de cultivo de órganos intestinales para experimentos ex vivo.

Un sistema de cultivo de órganos intestinales intestinales para analizar las interacciones huésped-microbiota

Los enteroides están emergiendo como un modelo novedoso para estudiar la fisiología y la fisiopatología de los tejidos, el desarrollo de fármacos y la medicina regenerativa. Aquí, describimos un sistema de cultivo derivado de enteroides 2D de células primarias bovinas que permite el cocultivo con tipos de células de tejido relevantes. Este modelo ofrece una ventaja traslacional para el modelado de la investigación gastrointestinal.

Generación de un sistema de cultivo monocapa bidimensional derivado de enteroide primario bovino para aplicaciones en investigación biomédica traslacional

El presente protocolo describe la aplicación de modelos de tejidos organotípicos para investigar las interacciones huésped-patógeno in vitro. En concreto, el sistema modelo descrito utiliza un epitelio oral de múltiples capas expuesto a microorganismos asociados a biopelículas (placa dental) en el contexto de la salud bucal frente a la enfermedad.

Sistemas de modelos de tejidos organotípicos para investigar las interacciones huésped-patógeno in vitro

Este protocolo describe la generación de un modelo murino basado en organoides prostáticos cultivado en 2D. Incluye disociación de organoides, siembra celular, diferenciación, evaluación de la integridad epitelial e infección in vitro con Escherichia coli uropatógena. El modelo proporciona accesibilidad apical y es adecuado para estudiar las interacciones huésped-patógeno, superando las limitaciones de los sistemas organoides 3D tradicionales.

Generación de un modelo basado en organoides prostáticos de ratón para estudiar las interacciones huésped-patógeno

Aprende a cultivar organoides intestinales humanos en monocapas 2D sobre invasina para estudiar infecciones bacterianas. Este método permite analizar respuestas epiteliales y translocación de AIEC en modelos in vitro fisiológicos.

Un cultivo de organoides bidimensional sobre una invasina o extracto de membrana basal para estudiar las interacciones huésped-bacteria (Video) | JoVE Journal

Un cultivo de organoides bidimensional sobre una invasina o extracto de membrana basal para estudiar las interacciones huésped-bacteria

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