Name: Protocolo de apilamiento de enfoque para fotografía de insectos de alta resolución (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-02T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 43 s
Description: Aprende a realizar apilamiento de enfoque para fotografía de insectos de alta resolución usando una cámara mirrorless de 61 MP con objetivos de microscopio. Este protocolo de bajo costo permite obtener imágenes sin artefactos con incrementos de enfoque submicrométricos para taxonomía y digitalización de biodiversidad.

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	<li>Aldhawi, H. A., Abulsba, K. S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+significance+of+insect+biodiversity+on+ecosystem+functioning+and+stability:+a+review.">The significance of insect biodiversity on ecosystem functioning and stability: a review.</a> Ebers J Med Publ. 5, 140-150 (2024).</li><li>S&#225;nchez-Bayo, F., Wyckhuys, K. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+decline+of+the+entomofauna:+a+review+of+its+drivers.">Worldwide decline of the entomofauna: a review of its drivers.</a> Biol Conserv. 232, 8-27 (2019).</li><li>Wagner, D. L. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+declines+in+the+Anthropocene.">Insect declines in the Anthropocene.</a> Annu Rev Entomol. 65 (1), 457-480 (2020).</li><li>Slade, E. M., Ong, X. R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+future+of+tropical+insect+diversity:+strategies+to+fill+data+and+knowledge+gaps.">The future of tropical insect diversity: strategies to fill data and knowledge gaps.</a> Curr Opin Insect Sci. 58, 101063 (2023).</li><li>Fujisawa, T., Noguerales, V., Vogler, A. P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-based+taxonomic+classification+of+bulk+insect+biodiversity+samples+using+deep+learning+and+domain+adaptation.">Image-based taxonomic classification of bulk insect biodiversity samples using deep learning and domain adaptation.</a> Syst Entomol. 48 (3), 387-401 (2023).</li><li>O'Kane, W. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+in+insect+photography.">Methods in insect photography.</a> J Econ Entomol. 5 (1), 54-61 (1912).</li><li>Borror, D. J., White, R. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A field guide to insects: America north of Mexico. 19, (1970).</li><li>Cheng, D., Wang, D., Yao, C., Liu, Y., Dai, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thin+and+large+depth-of-field+compound-eye+imaging+for+close-up+photography.">Thin and large depth-of-field compound-eye imaging for close-up photography.</a> Photonics. 11 (2), 107 (2024).</li><li>Brecko, J., Mathys, A., Dekoninck, W., Leponce, M., VandenSpiegel, D., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focus+stacking:+comparing+commercial+top-end+set-ups+with+a+semi-automatic+low+budget+approach.+A+possible+solution+for+mass+digitization+of+type+specimens.">Focus stacking: comparing commercial top-end set-ups with a semi-automatic low budget approach. A possible solution for mass digitization of type specimens.</a> ZooKeys. (464), 1-23 (2014).</li><li>Mertens, J. E. J., Van Roie, M., Merckx, J., Dekoninck, W. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+low+cost+compact+cameras+with+focus+stacking+functionality+in+entomological+digitization+projects.">The use of low cost compact cameras with focus stacking functionality in entomological digitization projects.</a> ZooKeys. 712, 141-154 (2017).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>Tabla de apoyo</td><td>Preferentemente 3 pods</td><td>Base estable para todo el montaje</td><td>150</td></tr><tr><td>Tabla antivibración</td><td>Costumbres</td><td>Minimiza las vibraciones durante la captura de imágenes</td><td>3,200</td></tr><tr><td>Túnel negro cilíndrico</td><td>Costumbres</td><td>Controla la dirección de la luz</td><td>350</td></tr><tr><td>Reduce los reflejos para sujetos pequeños</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rack de enfoque Novoflex CASTEL-MICRO (riel macro)</td><td>Motor de paso a paso y guion; controlado, unidad de control, cable de red, adaptador de corriente europea</td><td>Enfoque de precisión submicrométrico (0,2 y micro; pasos m);</td><td>3,000</td></tr><tr><td>automatiza el movimiento de la cámara</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rotatorio XYZ</td><td>Montura ajustable</td><td>Alineación y posicionamiento meticulosos de los sujetos</td><td>500</td></tr><tr><td>Cámara</td><td>Sony Alpha 7R IV (61 MP de formato completo)</td><td>Captura de imagen de alta resolución</td><td>3,000</td></tr><tr><td>Iluminación</td><td>2 y veces; Godox SK300II</td><td>Iluminación uniforme y sin sombras;</td><td>400</td></tr><tr><td>Iluminación</td><td>2 y veces; Godox QT600II</td><td>Alta velocidad con duración corta del destello</td><td>1400</td></tr><tr><td>Soportes de destellos</td><td>3 soportes ajustables</td><td>Posicionamiento flexible de las luces</td><td>100</td></tr><tr><td>Modificador de luz</td><td>Difusor</td><td>Suaviza la luz y reduce las sombras duras</td><td>50</td></tr><tr><td>Antecedentes</td><td>&ldquo; Agujero negro" terciopelo</td><td>Elimina reflejos, proporciona un fondo uniforme</td><td>200</td></tr><tr><td>Objetivos en el microscopio</td><td>Plan Mitutoyo Apo Infinity Corregido: 5 y veces;</td><td>Aumento de alta calidad para microestructuras</td><td>1,000</td></tr><tr><td>Mitutoyo Plan Apo Infinity Corregido: 7,5 y veces;</td><td>2,000</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mitutoyo Plan Apo Infinity Corregido: 10 y veces;</td><td>1,400</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mitutoyo Plan Apo Infinity Corregido: 20 y más veces;</td><td>5,000</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de tubos de lente</td><td>Uso directo de cámaras de objetivos Mitutoyo M-Plan (2x, 5x, 7,5x, 10x, 20x)</td><td>Acoplamiento de objetivos de microscopio a cámara</td><td>400</td></tr><tr><td>Adaptador</td><td>Montaje Sony E a bayoneta universal NOVOFLEX A</td><td>Conexión mecánica de cámara y sistema óptico</td><td>300</td></tr><tr><td>Lente macro</td><td>Venus Optics Laowa 100 mm f/2.8 2 veces; Ultra Macro APO (montura Sony E-mount)</td><td>Imagen de especímenes de mayor tamaño a alta magnificación</td><td>550</td></tr><tr><td>Disparador</td><td>Disparador de destello</td><td>Sincroniza el flash con el obturador de la cámara</td><td>50</td></tr><tr><td>Ordenador</td><td>Portátil ASUS o Alienware, &ge; 128 GB de RAM, procesador de alto rendimiento</td><td>Procesamiento y almacenamiento de imágenes</td><td>3,000</td></tr><tr><td>Medios de almacenamiento</td><td>2 y veces; SD 256 GB, lector rápido de tarjetas SD</td><td>Almacenamiento y transferencia de imágenes de alto volumen seguro</td><td>200</td></tr><tr><td>Accesorios</td><td>Ratón para juegos</td><td>Precisión durante la edición y la navegación</td><td>50</td></tr><tr><td>Accesorios</td><td>Wacom One (tableta gráfica)</td><td>Control fino durante la limpieza y edición de imágenes</td><td>500</td></tr><tr><td><fuerte>Coste total</fuerte></td><td></td><td></td><td><fuerte>26.800</fuerte></td></tr></tbody></table>

protocolo de apilamiento de enfoque para fotografía de insectos de alta resolución

Focus Stacking Protocol for High-Resolution Insect Photography

Protocolo de apilamiento de enfoque para fotografía de insectos de alta resolución

Here, we present a protocol to acquire high resolution, extended depth of field images of insect specimens by photographic focus stacking using a modular ...

focus-stacking-protocol-for-high-resolution-insect-photography

Research

Investigación

JoVE Journal

Environment

Entorno

En este trabajo se demuestra el uso de un microscopio confocal de barrido rápido de comportamiento de las células de imagen directamente a través de la pupa. Al dejar el caso de pupa intacta, este método permite la observación y medición de los procesos dinámicos de célula en una etapa de desarrollo de Drosophila que es difícil de estudiar directamente.

Imaging A través de la envoltura pupal de<em&gt; Drosophila melanogaster</em

La microscopía de fluorescencia basada en láminas de luz es la herramienta más valiosa en biología del desarrollo. Un problema importante en los estudios comparativos es la varianza ambiental. Nuestro protocolo describe un marco experimental para la proyección de imagen viva simultánea de especímenes múltiples y, por lo tanto, trata este problema favorablemente activamente.

Imágenes simultáneas en vivo de múltiples embriones de insectos en microscopios de fluorescencia de hoja de luz basados en cámaras de muestra

Este protocolo describe las aplicaciones de la inmovilización de muestras utilizando coágulos de Fibrin, limitando la deriva y permitiendo la adición y lavado de reactivos durante las imágenes en vivo. Las muestras se transfieren a una gota de Fibrinógeno que contiene medio de cultivo en la superficie de un deslizamiento de cubierta, después de lo cual la polimerización se induce añadiendo trombina.

Aplicaciones de inmovilización de tejidos de Drosophila con coágulos de fibrina para imágenes vivas

El protocolo aquí describe la medición de la organización espacial de los ejes visuales de los ojos de las moscas domésticas, mapeados por un dispositivo automático, utilizando el fenómeno pseudopupil y el mecanismo de la pupila de las células fotorreceptoras.

Cartografía automatizada del espacio visual de los ojos compuestos de la mosca doméstica

La membrana basal es esencial para la morfogénesis de tejidos y órganos durante el desarrollo. Para comprender mejor los mecanismos que conducen a la colocación adecuada de esta estructura, el protocolo presentado describe métodos para visualizar y caracterizar el tráfico intracelular y la secreción de proteínas de la membrana basal en células epiteliales utilizando microscopía confocal y de superresolución.

Imágenes confocales y de superresolución del tráfico intracelular polarizado y la secreción de proteínas de la membrana basal durante la oogénesis de Drosophila

Aquí, presentamos un flujo de trabajo rápido y de bajo costo para obtener imágenes de alta resolución de ojos de Drosophila adultas para cuantificar los patrones y los defectos de crecimiento. Describimos nuestro protocolo para la preparación de muestras mediante montaje en punto, adquisición de imágenes de alta resolución y análisis de imágenes.

Un flujo de trabajo rápido y sencillo para la cuantificación de estructuras externas de Drosophila adulta

Este protocolo describe la obtención de imágenes de lapso de tiempo de C. elegans basadas en microfluidos a lo largo de todo el desarrollo postembrionario.

Imágenes de alta resolución de C. elegans en todas las etapas larvales

El blanqueo iterativo espectral extiende la multiplexidad (IBEX) se basa en la técnica IBEX base al agregar bloqueo de heparina para minimizar la unión inespecífica y aprovechar la detección espectral con desmezcla computacional para suprimir la autofluorescencia. Este enfoque acelera la adquisición de imágenes al tiempo que reduce las fuentes de fondo, lo que permite análisis proteómicos espaciales robustos de múltiples rondas y altos parámetros.

Imágenes de alta plexación mediante microscopía confocal espectral para minimizar la fluorescencia tisular inespecífica

Este protocolo detalla las aplicaciones avanzadas de imagen y la gestión de recursos compartidos de un sistema de microscopio confocal de barrido láser integrado con un detector de matriz multiplexada para imágenes celulares y subcelulares de alta resolución. El flujo de trabajo permite la obtención de imágenes multimodales desde confocal hasta superresolución (~120 nm) dentro de una sola plataforma, haciendo que la visualización a escala nanométrica sea más accesible.

Imagen de superresolución y gestión compartida: un protocolo para microscopía confocal con detección multiplex

Enfermedad de la corteza de la haya es iniciada por la alimentación de las actividades de la cochinilla de haya que crear puntos de entrada de hongos en la corteza. Los árboles que son resistentes a la cochinilla son también resistentes a las enfermedades. Aquí presentamos el protocolo que hemos desarrollado para detectar árboles individuales de haya para la resistencia a escala de haya.

Una técnica a la pantalla haya americana para la resistencia al insecto Haya Scale (<em&gt; Fagisuga Cryptococcus</em&gt; Lind.)

Aprende a realizar apilamiento de enfoque para fotografía de insectos de alta resolución usando una cámara mirrorless de 61 MP con objetivos de microscopio. Este protocolo de bajo costo permite obtener imágenes sin artefactos con incrementos de enfoque submicrométricos para taxonomía y digitalización de biodiversidad.

Protocolo de apilamiento de enfoque para fotografía de insectos de alta resolución

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