Name: Visualización de la activación del genoma cigótico en células individuales de embriones tempranos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-03T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: Aprende a visualizar la activación del genoma cigótico en células individuales de embriones tempranos de Xenopus laevis mediante marcaje con 5-EU y microscopía confocal. Este método permite estudiar la dinámica espaciotemporal de la transcripción en desarrollo.

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<ol><li>Kojima, M. L., Hoppe, C., Giraldez, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maternal-to-zygotic+transition%3A+Reprogramming+of+the+cytoplasm+and+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">The maternal-to-zygotic transition: Reprogramming of the cytoplasm and nucleus.</a> Nat Rev Genet. 26 (4), 245-267 (2025).</li>
<li>Vastenhouw, N. L., Cao, W. X., Lipshitz, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maternal-to-zygotic+transition+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The maternal-to-zygotic transition revisited.</a> Development. 146 (11), dev161471(2019).</li>
<li>Jukam, D., Shariati, S. A. M., Skotheim, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zygotic+genome+activation+in+vertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Zygotic genome activation in vertebrates.</a> Dev Cell. 42 (4), 316-332 (2017).</li>
<li>Palfy, M., Joseph, S. R., Vastenhouw, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+timing+of+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">The timing of zygotic genome activation.</a> Curr Opin Genet Dev. 43, 53-60 (2017).</li>
<li>Chen, H., Einstein, L. C., Little, S. C., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+patterning+of+zygotic+genome+activation+in+a+model+vertebrate+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal patterning of zygotic genome activation in a model vertebrate embryo.</a> Dev Cell. 49 (6), 852-866.e7 (2019).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nascent+transcriptome+reveals+orchestration+of+zygotic+genome+activation+in+early+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Nascent transcriptome reveals orchestration of zygotic genome activation in early embryogenesis.</a> Curr Biol. 32 (19), 4314-4324.e7 (2022).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+nascent+transcription+in+whole-mount+vertebrate+embryos+to+characterize+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Imaging nascent transcription in whole-mount vertebrate embryos to characterize zygotic genome activation.</a> Methods Enzymol. 638, 139-165 (2020).</li>
<li>Jao, C. Y., Salic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+RNA+transcription+and+turnover+in+vivo+by+using+click+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Exploring RNA transcription and turnover in vivo by using click chemistry.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (41), 15779-15784 (2008).</li>
<li>Chan, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brd4+and+P300+confer+transcriptional+competency+during+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Brd4 and P300 confer transcriptional competency during zygotic genome activation.</a> Dev Cell. 49 (6), 867-881.e8 (2019).</li>
<li>Adar-Levor, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokinetic+abscission+is+part+of+the+midblastula+transition+in+early+zebrafish+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Cytokinetic abscission is part of the midblastula transition in early zebrafish embryogenesis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 118 (15), e2021210118(2021).</li>
<li>Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+nascent+transcription+in+early+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Quantifying nascent transcription in early embryogenesis.</a> Methods Mol Biol. 2923, 143-162 (2025).</li>
<li>Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+hybridization%3A+An+improved+whole-mount+method+for+Xenopus+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">In situ hybridization: An improved whole-mount method for Xenopus embryos.</a> Methods Cell Biol. 36, 685-695 (1991).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16% Paraformaldehído (PFA)</td><td>EMS</td><td>15710-S</td><td>Para crear la solución fijadora</td></tr><tr><td>20 y más veces; SSC</td><td>Mediatech</td><td>MT46-020-CM</td><td>Para fabricar la solución blanqueadora</td></tr><tr><td>Mezclador nutador 3D</td><td>VWR</td><td>76595-802</td><td>Para embriones nutadores</td></tr><tr><td>Frascos roscados de 9 mm (2 mL)</td><td>VWR</td><td>46610-722</td><td>Para procesar embriones</td></tr><tr><td>Anticuerpo H3 antihistona</td><td>Abcam</td><td>a.1791</td><td>Para la inmunotinción</td></tr><tr><td>Ácido ascórbico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7506</td><td>Para hacer la reacción de clic</td></tr><tr><td>Alcohol benzílico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>305197</td><td>Para eliminar embriones</td></tr><tr><td>Benzoato de benzil</td><td>ACROS Organics</td><td>105860010</td><td>Para eliminar embriones</td></tr><tr><td>Albúmina sérica bovina (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A3059</td><td>Para crear la solución de bloqueo</td></tr><tr><td>Tapones para viales roscados de 9 mm (2 mL)</td><td>VWR</td><td>46610-712</td><td>Para procesar embriones</td></tr><tr><td>Tapadera (24 mm y multiplicada por 40 mm)</td><td>VWR</td><td>48393-060</td><td>Para fabricar una cámara de imagen</td></tr><tr><td>CuSO4</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>61230</td><td>Para hacer la reacción de clic</td></tr><tr><td>Ácido tetraacético (oxietilenenitrilo) etilenenitrilo (EGTA)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AC409915000</td><td>Para crear la solución fijadora</td></tr><tr><td>Fiji ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td>Para el procesamiento de imágenes</td></tr><tr><td>Formamida</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AC181090010</td><td>Para fabricar la solución blanqueadora</td></tr><tr><td>Pipetas Pasteur de vidrio</td><td>VWR</td><td>14673-010</td><td>Para transferir el BABB</td></tr><tr><td>Anticuerpo secundario anticonejo Alex Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A27034</td><td>Para la inmunotinción</td></tr><tr><td>Suero de cabra</td><td>Abcam</td><td>ab7481</td><td>Para crear la solución de bloqueo</td></tr><tr><td>Peróxido de hidrógeno</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1009</td><td>Para fabricar la solución blanqueadora</td></tr><tr><td>Sulfato de magnesio (MgSO4)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>M65-500</td><td>Para crear la solución fijadora</td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A4524</td><td>Para deshidratar embriones</td></tr><tr><td>Metanol, anhidro</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>322415</td><td>Para deshidratar embriones</td></tr><tr><td>MOPS</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AC172631000</td><td>Para crear la solución fijadora</td></tr><tr><td>Mezclador nutador multimodo</td><td>VWR</td><td>76595-812</td><td>Para embriones nutadores</td></tr><tr><td>Pipeta de transferencia de plástico</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>13-711-9AM</td><td>Para transferir embriones</td></tr><tr><td>Cuchilla de afeitar</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>18-100-970</td><td>Para cortar cintas</td></tr><tr><td>Agua libre de RNasa</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>BP561-1</td><td>Para crear soluciones libres de Rnase</td></tr><tr><td>Roto-Mini PLUS (rotador)</td><td>VWR</td><td>470313-912</td><td>Para la rotura de embriones</td></tr><tr><td>Tetrametilrodamina (TAMRA)-azida</td><td>Abcam</td><td>ab146486</td><td>Para hacer la reacción de clic</td></tr><tr><td>TO-PRO-3</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>T3605</td><td>Para teñir ADN</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10789704001</td><td>Para fabricar el tampón de lavado</td></tr><tr><td>Base Trizma (Base Tris)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T1503</td><td>Para crear el tampón Tris</td></tr><tr><td>Cintas VHB 3M GPH-110GF (45 mil.)</td><td>VWR</td><td>76524-608</td><td>Para fabricar una cámara de imagen</td></tr><tr><td>Microscopio confocal Zeiss LSM 700</td><td>Zeiss</td><td></td><td>Para imagen confocal</td></tr></tbody></table>

visualización de la activación del genoma cigótico en células individuales de embriones tempranos

Visualizing Zygotic Genome Activation In Single Cells of Early Embryos

Visualización de la activación del genoma cigótico en células individuales de embriones tempranos

Early embryogenesis requires the maternal-to-zygotic transition (MZT) that necessitates the zygotic genome activation (ZGA). During ZGA, hundreds to ...

visualizing-zygotic-genome-activation-in-single-cells-of-early-embryos

Research

Investigación

JoVE Journal

Developmental Biology

Biología del Desarrollo

En este vídeo, que muestran un método para analizar el cerebro de los vertebrados en desarrollo en embriones de pez cebra en vivo con una resolución única célula mediante microscopía confocal. Esto incluye el método por el cual se inyecta el embrión del pez cebra de una sola célula y, posteriormente, montar y obtener imágenes del cerebro en desarrollo.

Imágenes en vivo del cerebro del embrión de pez cebra mediante microscopía confocal

Este protocolo describe imágenes de las neuronas individuales o de las células de la cresta neural en embriones de pez cebra de vida. Este método se utiliza para examinar los comportamientos celulares y la localización de actina mediante fluorescencia confocal time-lapse microscopía.

Imágenes en directo de la motilidad celular y citoesqueleto de actina de las neuronas individuales y las células de la cresta neural en embriones de pez cebra

El vídeo de la actualidad muestra un método que aprovecha las ventajas de la combinación de electroporación y la microscopía confocal para realizar las imágenes en vivo en cada células progenitoras neurales en el cerebro anterior pez cebra en desarrollo.

Time-lapse de imágenes en vivo de la relación clonal con células progenitoras neurales en el cerebro anterior El desarrollo de pez cebra

En este artículo se describe una técnica para la visualización de los primeros eventos de la embriogénesis en el...

Time-lapse microscopía de embriogénesis temprana en Caenorhabditis elegans

el seguimiento en directo de la retina progenitores WT individuales en los antecedentes genéticos distintos permite la evaluación de la contribución de la señalización no autónomo celular durante la neurogénesis. Aquí, una combinación de gen desmontables, la generación de quimera a través de la transferencia de embriones y la imagen de lapso de tiempo confocal in vivo se utilizó para este propósito.

En vivo de imágenes de transgénicos de la Expresión Génica en el Estimado de retina progenitores en embriones de pez cebra quiméricos para estudiar celulares Influencias no autónomos

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In Vitro Cultivo de óvulos para la proyección de imagen de cigoto polarización de Live-celular y patrones del embrión en Arabidopsis thaliana

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La proyección de imagen de lapso tiempo multi-Photon para visualizar el desarrollo en tiempo real: visualización de la migración de las células de cresta Neural en embriones de pez cebra

Este trabajo describe un protocolo de semi-alto rendimiento que permite imágenes simultáneas de lapso de tiempo 3D de embriogénesis en embriones de 80-100 C. elegans en una sola carrera nocturna. Además, se incluyen herramientas de visualización y procesamiento de imágenes para agilizar el análisis de datos. La combinación de estos métodos con cepas de reportero personalizadas permite un seguimiento detallado de la embriogénesis.

Un método de imágenes de semi-alto rendimiento y un kit de herramientas de visualización de datos para analizar el desarrollo embrionario de C. elegans

Se describe una estrategia de preparación de muestras para obtener imágenes de embriones tempranos de pez cebra dentro de un corion intacto utilizando un microscopio de lámina de luz. Analiza las diferentes orientaciones que adquieren los embriones dentro del corion en las etapas de epibolia y yema del 70% y detalla estrategias de imagen para obtener una resolución a escala celular en todo el embrión utilizando el sistema de lámina de luz.

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Este artículo establece una línea para suspensiones de células individuales y núcleos de alta calidad de embriones de ratón gastrulados para la secuenciación de células individuales y núcleos.

Secuenciación de ARN unicelular de embriones enteros de ratón mutantes: desde el epiblasto hasta el final de la gastrulación

Proporcionamos métodos detallados para marcar y purificar metabólicamente los transcritos nacientes para el análisis transcriptomático en embriones tempranos de Xenopus utilizando 5-etinil-uridina (5-EU).

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Aprende a visualizar la activación del genoma cigótico en células individuales de embriones tempranos de Xenopus laevis mediante marcaje con 5-EU y microscopía confocal. Este método permite estudiar la dinámica espaciotemporal de la transcripción en desarrollo.

Visualización de la activación del genoma cigótico en células individuales de embriones tempranos

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