Name: Aislamiento de pequeñas vesículas extracelulares del músculo esquelético murino y médula ósea mediante cromatografía de exclusión de tamaño (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-23T12:55:00.000+00:00
Duration: 7 min 26 s
Description: Aprende a aislar vesículas extracelulares pequeñas de músculo esquelético y médula ósea murina mediante digestión enzimática, centrifugación diferencial y cromatografía de exclusión de tamaño. Este método de alta pureza permite análisis moleculares y funcionales.

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<ol>
	<li>Whitham, M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles+provide+a+means+for+tissue+crosstalk+during+exercise.">Extracellular vesicles provide a means for tissue crosstalk during exercise.</a> Cell Metab. 27 (1), 237-251.e4 (2018).</li><li>Kumar, M. A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles+as+tools+and+targets+in+therapy+for+diseases.">Extracellular vesicles as tools and targets in therapy for diseases.</a> Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 27 (2024).</li><li>Fonseka, P., Mathivanan, S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles+biogenesis,+cargo+sorting+and+implications+in+disease+conditions.">Extracellular vesicles biogenesis, cargo sorting and implications in disease conditions.</a> Cells. 12 (2), (2023).</li><li>Taraboletti, G., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioavailability+of+VEGF+in+tumor-shed+vesicles+depends+on+vesicle+burst+induced+by+acidic+pH.">Bioavailability of VEGF in tumor-shed vesicles depends on vesicle burst induced by acidic pH.</a> Neoplasia. 8 (2), 96-103 (2006).</li><li>Dakup, P. P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Challenges+and+opportunities+in+state-of-the-art+proteomics+analysis+for+biomarker+development+from+plasma+extracellular+vesicles.">Challenges and opportunities in state-of-the-art proteomics analysis for biomarker development from plasma extracellular vesicles.</a> Proteomics. , (2025).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EV-origin:+Enumerating+the+tissue-cellular+origin+of+circulating+extracellular+vesicles+using+exLR+profile.">EV-origin: Enumerating the tissue-cellular origin of circulating extracellular vesicles using exLR profile.</a> Comput Struct Biotechnol J. 18, 2851-2859 (2020).</li><li>Shero, J. A., Lindholm, M. E., Sandri, M., Stanford, K. I. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+as+a+mediator+of+interorgan+crosstalk+during+exercise:+Implications+for+aging+and+obesity.">Skeletal muscle as a mediator of interorgan crosstalk during exercise: Implications for aging and obesity.</a> Circ Res. 136 (11), 1407-1432 (2025).</li><li>Vanhie, J. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+exercise-+and+high-fat+diet-induced+bone+marrow+extracellular+vesicles+in+stress+hematopoiesis.">The role of exercise- and high-fat diet-induced bone marrow extracellular vesicles in stress hematopoiesis.</a> Front Physiol. 13, 1054463 (2022).</li><li>Pinto, A. C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploiting+the+therapeutic+potential+of+contracting+skeletal+muscle-released+extracellular+vesicles+in+cancer:+Current+insights+and+future+directions.">Exploiting the therapeutic potential of contracting skeletal muscle-released extracellular vesicles in cancer: Current insights and future directions.</a> J Mol Med (Berl). 102 (5), 617-628 (2024).</li><li>Welsh, J. A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimal+information+for+studies+of+extracellular+vesicles+(MISEV2023):+From+basic+to+advanced+approaches.">Minimal information for studies of extracellular vesicles (MISEV2023): From basic to advanced approaches.</a> J Extracell Vesicles. 13 (2), e12404 (2024).</li><li>De Sousa, K. P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+extracellular+vesicles+and+future+directions+in+diagnosis+and+therapy.">Isolation and characterization of extracellular vesicles and future directions in diagnosis and therapy.</a> Wiley Interdiscip Rev Nanomed Nanobiotechnol. 15 (1), e1835 (2023).</li><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+simplified+dichotomic+size-exclusion+chromatography+for+isolating+extracellular+vesicles+toward+clinical+applications.">Establishment of a simplified dichotomic size-exclusion chromatography for isolating extracellular vesicles toward clinical applications.</a> J Extracell Vesicles. 10 (11), e12145 (2021).</li><li>Ahmadian, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+storage+and+freezing+protocols+for+extracellular+vesicles:+A+systematic+review.">Different storage and freezing protocols for extracellular vesicles: A systematic review.</a> Stem Cell Res Ther. 15 (1), 453 (2024).</li><li>Watanabe, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+releases+extracellular+vesicles+with+distinct+protein+and+microRNA+signatures+that+function+in+the+muscle+microenvironment.">Skeletal muscle releases extracellular vesicles with distinct protein and microRNA signatures that function in the muscle microenvironment.</a> PNAS Nexus. 1 (4), pgac173 (2022).</li><li>Magalhaes-Gama, F., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+cell-derived+extracellular+vesicles+in+peripheral+blood+and+bone+marrow+of+B-cell+acute+lymphoblastic+leukemia+pediatric+patients:+Proof-of-concept+study.">Exploring cell-derived extracellular vesicles in peripheral blood and bone marrow of B-cell acute lymphoblastic leukemia pediatric patients: Proof-of-concept study.</a> Front Immunol. 15, 1421036 (2024).</li><li>Potter, D. R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell-derived+extracellular+vesicles+attenuate+pulmonary+vascular+permeability+and+lung+injury+induced+by+hemorrhagic+shock+and+trauma.">Mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles attenuate pulmonary vascular permeability and lung injury induced by hemorrhagic shock and trauma.</a> J Trauma Acute Care Surg. 84 (2), 245-256 (2018).</li><li>Osteikoetxea, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+detergent+sensitivity+of+extracellular+vesicle+subpopulations.">Differential detergent sensitivity of extracellular vesicle subpopulations.</a> Org Biomol Chem. 13 (38), 9775-9782 (2015).</li><li>Kim, T., Hong, J. W., Lee, L. P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+methods+of+isolation+and+purification+of+extracellular+vesicles.">Efficient methods of isolation and purification of extracellular vesicles.</a> Nano Converg. 12 (1), 45 (2025).</li><li>Bracht, J. W. P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choice+of+size-exclusion+chromatography+column+affects+recovery,+purity,+and+miRNA+cargo+analysis+of+extracellular+vesicles+from+human+plasma.">Choice of size-exclusion chromatography column affects recovery, purity, and miRNA cargo analysis of extracellular vesicles from human plasma.</a> Extracell Vesicles Circ Nucl Acids. 5 (3), 497-508 (2024).</li><li>Mo, W., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicle-mediated+bidirectional+communication+between+the+liver+and+other+organs:+Mechanistic+exploration+and+prospects+for+clinical+applications.">Extracellular vesicle-mediated bidirectional communication between the liver and other organs: Mechanistic exploration and prospects for clinical applications.</a> J Nanobiotechnology. 23 (1), 190 (2025).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL centrifuge tube</td><td>Sarstedt</td><td>72.690.300</td><td>Tubo de microcentrifugación general utilizado en todo el protocolo</td></tr><tr><td>1.5 mL low-protein-binding tube</td><td>Sarstedt</td><td>72.706.600</td><td>Utilizado para el manejo de EV, recolección de fracciones SEC y almacenamiento</td></tr><tr><td>0.2 mL PCR tube</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-222-262</td><td>Utilizado para el montaje de extracción de médula ósea con tubo perforado</td></tr><tr><td>16 G needle</td><td>BD</td><td>305197</td><td>Utilizado para perforar el tubo PCR de 0.2 mL</td></tr><tr><td>30 &micro;m cell strainer</td><td>Miltenyi Biotec&nbsp;</td><td>130-098-458</td><td>Utilizado para la filtración de muestras de músculo esquelético</td></tr><tr><td>70% ethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1.11727</td><td>Utilizado para esterilizar pinzas</td></tr><tr><td>Biosafety cabinet</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Utilizado para el manejo estéril de tejidos</td></tr><tr><td>Bone cutting instrument</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-001-976</td><td>Utilizado para separar el fémur y la tibia y exponer la médula</td></tr><tr><td>Bovine serum albumin (BSA)</td><td>BioShop</td><td>ALB001</td><td>Utilizado para el bloqueo de Western blot y dilución de anticuerpos</td></tr><tr><td>Calcium chloride dihydrate (CaCl2&middot;2H2O)</td><td>BioShop</td><td>CCL302</td><td>Utilizado para la preparación del tampón HEPES</td></tr><tr><td>Carbon-coated copper grid, 200-mesh</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>930342</td><td>Utilizado para la preparación de muestras TEM</td></tr><tr><td>Centrifugal filter, 100 kDa MWCO</td><td>MilliporeSigma</td><td>UFC810096</td><td>Utilizado para la concentración de EV</td></tr><tr><td>Collagenase D</td><td>Roche</td><td>11088858001</td><td>Utilizado para la digestión enzimática del músculo esquelético</td></tr><tr><td>Cryovial</td><td>Sarstedt</td><td>72.690.300</td><td>Utilizado para el almacenamiento de tejidos y huesos</td></tr><tr><td>Deionized water (ultrapure)</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Utilizado para la preparación de tampones y pasos de lavado TEM</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Roche</td><td>11284932001</td><td>Utilizado para la digestión enzimática del músculo esquelético</td></tr><tr><td>Dry ice</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Utilizado para el enfriamiento y transporte de muestras</td></tr><tr><td>Enhanced chemiluminescence substrate</td><td>Biorad</td><td>1705061</td><td>Utilizado para la detección de Western blot</td></tr><tr><td>Filter unit, 0.22 &micro;m</td><td>Sarstedt</td><td>83.3941.501</td><td>Utilizado para filtrar el PBS cuando sea aplicable</td></tr><tr><td>Forceps / tweezers</td><td>MilliporeSigma</td><td>F3892</td><td>Utilizado para el manejo de tejidos</td></tr><tr><td>Glutaraldehyde</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Utilizado para la fijación TEM</td></tr><tr><td>Glycine</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Utilizado en los pasos de lavado de la rejilla TEM</td></tr><tr><td>Hank&rsquo;s Balanced Salt Solution (HBSS)</td><td>Gibco</td><td>14175-095</td><td>Utilizado para la preparación del stock de DNase I</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>BioShop</td><td>HEP001.500</td><td>Utilizado para la preparación del tampón HEPES-NaOH</td></tr><tr><td>Horseradish peroxidase-conjugated streptavidin</td><td>Thermo Fisher</td><td>S911</td><td>Utilizado para la detección de Western blot</td></tr><tr><td>Imaging system for chemiluminescence</td><td>Biorad</td><td>12003153</td><td>Utilizado para obtener imágenes de las membranas de Western blot</td></tr><tr><td>KCl</td><td>BioShop</td><td>POC308</td><td>Utilizado para la preparación del tampón HEPES</td></tr><tr><td>Magnesium chloride (MgCl2)</td><td>BioShop</td><td>MAG510.500</td><td>Utilizado para la preparación del tampón HEPES</td></tr><tr><td>2-Methylbutane</td><td>Thermo Fisher</td><td>78-78-4</td><td>Utilizado para la congelación instantánea del músculo esquelético</td></tr><tr><td>Milligram balance</td><td>MilliporeSigma</td><td>Z741359</td><td>Utilizado para el pesaje de tejidos y médula</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>BioShop</td><td>SOD004.1</td><td>Utilizado para la preparación del tampón HEPES</td></tr><tr><td>Nano-particle tracking analysis instrument</td><td>Malvern Panalytical</td><td>NanoSight NS300</td><td>NanoSight NS300 utilizado para el dimensionamiento y conteo de partículas</td></tr><tr><td>NaOH</td><td>BioShop</td><td>SHY500.500</td><td>Utilizado para el ajuste del pH</td></tr><tr><td>Nitrocellulose membrane</td><td>BioRad</td><td>1704271</td><td>Utilizado para la transferencia de Western blot</td></tr><tr><td>Nutating mixer</td><td>Labnet</td><td>&nbsp;S0500</td><td>Utilizado durante la digestión enzimática</td></tr><tr><td>P1000 pipette</td><td>MilliporeSigma</td><td>FA10006M-1EA</td><td>Utilizado para la transferencia de tejidos</td></tr><tr><td>Pipette tip, 1 mL</td><td>Sarstedt</td><td>70.3050.275</td><td>La punta está recortada para ampliar la abertura para la transferencia de fragmentos de tejido</td></tr><tr><td>Phosphate-buffered saline (PBS)</td><td>Wisent</td><td>INC 811.012-FL</td><td>Utilizado en todo el protocolo; también utilizado para la equilibración y elución de SEC</td></tr><tr><td>Phosphatase inhibitor</td><td>MilliporeSigma</td><td>4906845001</td><td>Utilizado para la preparación del lisado de Western blot</td></tr><tr><td>Petri dish</td><td>MilliporeSigma</td><td>CLS351146</td><td>Utilizado para la preparación de médula ósea</td></tr><tr><td>Polyacrylamide gel, 4&ndash;20% gradient stain-free</td><td>BioRad</td><td>4561094</td><td>Utilizado para la separación de Western blot</td></tr><tr><td>Protease inhibitor</td><td>MilliporeSigma</td><td>11697498001</td><td>Utilizado para la preparación del lisado de Western blot</td></tr><tr><td>RPMI-1640 medium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R7388-500ML</td><td>No suplementado; sin FBS o antibióticos</td></tr><tr><td>RIPA buffer, 10&times;</td><td>Merck</td><td>20-188</td><td>Utilizado para la extracción de proteínas para Western blotting</td></tr><tr><td>Scalpel, sterile disposable</td><td>Ultident Paragon</td><td>02-90000-10</td><td>Utilizado para picar el tejido muscular esquelético</td></tr><tr><td>SEC column, original 70 nm</td><td>IZON</td><td>ICO70P</td><td>Utilizado para SEC de músculo esquelético</td></tr><tr><td>SEC column, single 70 nm</td><td>IZON</td><td>ICS70P</td><td>Utilizado para SEC de médula ósea</td></tr><tr><td>Sodium azide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2002</td><td>Agregado al PBS para el lavado de la columna</td></tr><tr><td>Sodium cacodylate buffer</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Utilizado para el tampón de fijación TEM</td></tr><tr><td>Luer Slip Single Use Syringe without Needle&nbsp;</td><td>Medline</td><td>SYR101020</td><td>Utilizado durante la adquisición de NTA si es aplicable</td></tr><tr><td>Transmission electron microscope</td><td>FEI</td><td>NA</td><td>Tecnai G2 Spirit Twin 120 kV Cryo-TEM utilizado para imágenes TEM</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>BioShop</td><td>TWN508.1</td><td>Utilizado en PBS-T para Western blotting</td></tr><tr><td>Uranyl acetate</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Utilizado para el tinción negativa TEM</td></tr><tr><td>Whatman filter paper</td><td>

aislamiento de pequeñas vesículas extracelulares del músculo esquelético murino y médula ósea mediante cromatografía de exclusión de tamaño

Isolation of Small Extracellular Vesicles from Murine Skeletal Muscle and Bone Marrow by Size-Exclusion Chromatography

Aislamiento de pequeñas vesículas extracelulares del músculo esquelético murino y médula ósea mediante cromatografía de exclusión de tamaño

Small extracellular vesicles (sEVs) are nanosized, lipid-bound particles that mediate intercellular communication through the transfer of proteins, ...

isolation-small-extracellular-vesicles-from-murine-skeletal-muscle

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Fuente: Watson, D. C., et al. Aislamiento y purificación escalables de vesículas extracelulares de Escherichia coli y otras bacterias. J. Vis. Exp. (2021)Este video demuestra el uso de la cromatografía de exclusión por tamaño con perlas de resina porosa para aislar vesículas extracelulares (EV) bacterianas de un filtrado de cultivo bacteriano. Los EV más grandes eluyen temprano al evitar los poros de la resina, mientras que las proteínas más pequeñas ingresan a los poros y se eluyen más tarde.

Aislamiento de vesículas extracelulares bacterianas mediante cromatografía de exclusión por tamaño 

En este video, demostramos una técnica, la cromatografía de exclusión por tamaño, para separar una población heterogénea de vesículas de membrana externa o OMV derivadas de bacterias. Estas vesículas son estructuras esféricas de tamaño nanométrico y se separan en subpoblaciones grandes y pequeñas en función de su tamaño mediante cromatografía de exclusión por tamaño.

Separación de vesículas extracelulares bacterianas basadas en cromatografía de exclusión por tamaño: una técnica para separar poblaciones heterogéneas de vesículas de membrana externa bacterianas gramnegativas en función de su tamaño

Este video muestra la técnica de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) para purificar vesículas extracelulares (EV) bacterianas del filtrado de cultivo de Mycobacterium tuberculosis (Mtb). La técnica utiliza una columna porosa empaquetada de resina para obtener fracciones purificadas de EV. Las partículas porosas permiten selectivamente que las proteínas más pequeñas entren en los poros, lo que resulta en una elución más lenta. Al mismo tiempo, los EV están excluidos de entrar en los...

Una técnica de cromatografía de exclusión por tamaño para purificar vesículas extracelulares micobacterianas

Este protocolo ilustra 1) el aislamiento y cultivo de fibroblastos primarios del músculo gastrocnemio de ratón adulto, así como 2) la purificación y caracterización de exosomas utilizando un método de ultracentrifugación diferencial combinado con gradientes de densidad de sacarosa seguidos de análisis de Western blot.

Aislamiento y caracterización de exosomas de fibroblastos del músculo esquelético

Las vesículas bacterianas desempeñan un papel importante en la patogénesis y tienen aplicaciones biotecnológicas prometedoras. La heterogeneidad de las vesículas complica el análisis y el uso; por lo tanto, es necesario un método simple y reproducible para separar los diferentes tamaños de vesículas. Aquí, demostramos el uso de la cromatografía de exclusión de tamaño para separar vesículas heterogéneas producidas por Aggregatibacter actinomycetemcomitans.

Cromatografía de exclusión de tamaño para analizar la heterogeneidad de las vesículas de la membrana externa bacteriana

El protocolo aquí demuestra que las vesículas extracelulares pueden separarse adecuadamente de los medios de cultivo celular condicionados utilizando cromatografía de exclusión de tamaño.

Cromatografía de exclusión de tamaño para separar vesículas extracelulares de medios de cultivo celular condicionados

Este protocolo demuestra cómo aislar pequeñas vesículas extracelulares de células madre mesenquimales derivadas del cordón umbilical humano (hUC-MSC-sEV) con un entorno de laboratorio simple. La distribución del tamaño, la concentración de proteínas, los marcadores de sEV y la morfología de los hUC-MSC-sEV aislados se caracterizan por el análisis de seguimiento de nanopartículas, el ensayo de proteínas BCA, el western blot y el microscopio electrónico de transmisión, respectivamente.

Un método simple de filtración de sobremesa para aislar pequeñas vesículas extracelulares de células madre mesenquimales humanas

Este protocolo proporciona un método de aislamiento rápido y específico del tamaño para pequeñas vesículas extracelulares al optimizar el tamaño de la boquilla de pulverización de aire, la presión del fluido de la vaina, la presión del flujo de muestra, el voltaje, la ganancia y los parámetros del umbral de activación.

Optimización de los parámetros de clasificación por citometría de flujo para el aislamiento y purificación de alto rendimiento de pequeñas vesículas extracelulares

Las vesículas extracelulares son muy prometedoras para las aplicaciones biomédicas, pero los métodos de aislamiento actuales requieren mucho tiempo y no son prácticos para el uso clínico. En este estudio, presentamos un dispositivo microfluídico que permite el aislamiento directo de vesículas extracelulares de grandes volúmenes de biofluidos de forma continua y con pasos mínimos.

Aislamiento en un solo paso de vesículas extracelulares a partir de muestras de gran volumen con un dispositivo microfluídico A4F bifurcado

Este protocolo tiene como objetivo aislar y purificar vesículas extracelulares intersticiales del músculo esquelético (SkM-EVs) de tejidos musculares de roedores mediante desprendimiento mecánico, disociación enzimática, filtración y ultracentrifugación diferencial. Demuestra consistencia y confiabilidad. Los SkM-EV aislados proporcionan información sobre la homeostasis muscular y las enfermedades, con posibles aplicaciones como biomarcadores de diagnóstico o vehículos terapéuticos.

Aislamiento enzimático de vesículas extracelulares intersticiales del músculo esquelético

Aprende a aislar vesículas extracelulares pequeñas de músculo esquelético y médula ósea murina mediante digestión enzimática, centrifugación diferencial y cromatografía de exclusión de tamaño. Este método de alta pureza permite análisis moleculares y funcionales.

Aislamiento de pequeñas vesículas extracelulares del músculo esquelético murino y médula ósea mediante cromatografía de exclusión de tamaño (Video) | JoVE Journal

Aislamiento de pequeñas vesículas extracelulares del músculo esquelético murino y médula ósea mediante cromatografía de exclusión de tamaño

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