Name: Caracterización funcional de parejas pre- y postsinápticas individuales en el sistema nervioso central larvario de Drosophila usando CaMPARI (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-16T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: Aprende a validar conectividad sináptica funcional en larvas de Drosophila usando optogenética con CsChrimson e imagen de calcio con CaMPARI. Este método permite estudiar señalización neuronal en vivo sin disecar.

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<table><tbody><tr><td>0.1 M Phosphate Buffered Saline (PBS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P5368-10PAK</td><td>Químico utilizado en solución para hidratar y montar larvas</td></tr><tr><td>All-trans-retinal (ATR)&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2500-500mg</td><td>Químico añadido al alimento para activar herramientas optogenéticas</td></tr><tr><td>Microscopio confocal</td><td>ZEISS&nbsp;</td><td>LSM900 Confocal</td><td>Microscopio confocal, Lente objetiva (40&times;/1.2 NA), Fuente de luz/láser (405, 488, 561 nm)</td></tr><tr><td>Láminas de cubreobjetos (18x18mm)</td><td>VWR</td><td>48366-205</td><td>Usado para montar animales para imagen</td></tr><tr><td>Etanol (95%)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E7023</td><td>Usado como solvente para el polvo ATR</td></tr><tr><td>Fiji (ImageJ)</td><td>Fuente abierta</td><td>RRID:SCR_002285&nbsp;</td><td>Usado para análisis de imágenes</td></tr><tr><td>Prism versión 10.4.1</td><td>GraphPad Software Inc.</td><td>RRID:SCR_002798</td><td>Usado para análisis estadístico</td></tr><tr><td>Diapositivas de microscopio</td><td>VWR</td><td>&nbsp;48300-041</td><td>Usado para montar animales para imagen</td></tr><tr><td>Arcilla de modelar</td><td>Flinn scientific</td><td>FB0600</td><td>Usado para sostener el portaobjetos de vidrio en la diapositiva del microscopio con las larvas en el medio</td></tr><tr><td>Pincel&nbsp;</td><td>Genesee scientific</td><td>59-204</td><td>Usado para transferir larvas entre ubicaciones</td></tr><tr><td>Agar medio de harina de maíz estándar</td><td>Genesee scientific</td><td>66-123</td><td>El alimento también se puede preparar utilizando recetas e ingredientes estándar similares</td></tr><tr><td>Viales de plástico estándar Drosophila (viales estrechos Drosophila de 25mm x 95mm)</td><td>Genesee scientific</td><td>32-109</td><td>También se pueden usar viales o botellas grandes</td></tr><tr><td>Placa de micro manchas de tres pozos</td><td>Electron Microscopy Sciences&nbsp;</td><td>71561-01</td><td>Placa utilizada para separar y limpiar larvas individuales</td></tr><tr><td>Drosophila stock (genotipo: w; Basin4-LexA/CyO-TwGFP; ppk-GAL4/ppk-GAL4)&nbsp;</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>RRID:BDSC_54899 &amp; RRID:BDSC_32079</td><td>Obtenido de la recombinación de RRID:BDSC_54899 y RRID:BDSC_32079</td></tr><tr><td>Drosophila stock (genotipo: w, UAS-IVS-CsChrimson.mVenus, LexAOp-CaMPARI2; Sp/CyO)</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>RRID:BDSC_81085</td><td>Obtenido de la recombinación de RRID:BDSC_81085 con marcadores del segundo cromosoma</td></tr></tbody></table>

caracterización funcional de parejas pre- y postsinápticas individuales en el sistema nervioso central larvario de drosophila usando campari

Functional Characterization of Individual Pre- and Postsynaptic Partners In the Drosophila Larval Central Nervous System Using CaMPARI

Caracterización funcional de parejas pre- y postsinápticas individuales en el sistema nervioso central larvario de Drosophila usando CaMPARI

Connectome studies have greatly expanded understanding of synaptic connectivity in the nervous systems of various species. While characterization of ...

functional-characterization-individual-pre-postsynaptic-partners

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Investigación

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Neuroscience

Neurociencia

Registro electrofisiológico en el Drosophila Embrión

La disección y la imagen de zonas activas en el Drosophila La unión neuromuscular

Análisis de microarrays se realizó para determinar los perfiles de expresión génica...

La determinación de perfiles genéticos de expresión en C. elegans Utilización de microarrays y PCR en tiempo real

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Análisis morfológico de Drosophila Larvas dendritas neurona sensorial periférica y axones Con mosaicos genéticos

Este protocolo demuestra cómo la proximidad Ligadura ensayo se puede usar para detectar in situ en las interacciones proteína-proteína en la unión neuromuscular Drosophila larval. Con esta técnica, los discos grandes y Hu-li shao tai se muestra para formar un complejo en la región postsináptica, una asociación identificado previamente a través de co-inmunoprecipitación.

Detección de In Situ Complejos proteína-proteína en la Drosophila Larval unión neuromuscular Usando proximidad Ligadura Ensayo

Aquí mostramos cómo cuantificar el número y la distribución espacial de las zonas activas sinápticas en los fotorreceptores de Drosophila melanogaster, resaltada con un marcador molecular codificada genéticamente, y su modulación después de la exposición prolongada a la luz.

Analizando Synaptic Modulación de<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Los fotorreceptores después de la exposición prolongada a la luz

Aquí, se presenta un protocolo para una técnica de etiquetado mosaico que permite la visualización de las neuronas derivadas de una célula progenitora común en dos colores distintos. Esto facilita el análisis de linaje neural con la capacidad de las neuronas individuales de nacimiento actualización y el estudio de la función de genes en las mismas neuronas de diferentes individuos.

Los análisis de linaje celular y el gen de Estudios de la función Uso MARCM Twin-situ

Las corrientes sinápticas pueden grabarse focal de visualizadas botones sinápticos en la Drosophila tercer instar larvas Unión neuromuscular. Esta técnica permite la monitorización de la actividad de una sola bouton sináptico.

Grabaciones de Macropatch focal de corrientes sinápticas de la Unión Neuromuscular larvaria de Drosophila

Aquí presentamos un protocolo con el que el calcio pre y/o postsináptico se puede visualizar en el contexto del aprendizaje y la memoria de Drosophila. La imagen de calcio in vivo utilizando sensores de calcio localizados sinaptically se combina con un paradigma de acondicionamiento olfativo clásico de tal manera que se puede determinar la plasticidad sináptica subyacente a este tipo de aprendizaje asociativo.

In Vivo Optical Calcium Imaging of Learning-Induced Synaptic Plasticity in Drosophila melanogaster

Describimos un método para el rastreo retrógrado de las neuronas motoras embrionarias Drosophila utilizando colorantes fluorescentes lipofílicos.

Seguimiento retrógrado de las neuronas motoras embrionarias de Drosophila utilizando colorantes fluorescentes lipofílicos

Describimos un protocolo para medir los contactos entre células en capas epiteliales adyacentes en discos imaginales de ala de Drosophila vivos utilizando un enfoque basado en la reconstitución de GFP.

Un sistema de expresión dual basado en la complementación de GFP para evaluar el contacto célula-célula mediado por citonemas en discos imaginales de ala de Drosophila vivos

Aprende a validar conectividad sináptica funcional en larvas de Drosophila usando optogenética con CsChrimson e imagen de calcio con CaMPARI. Este método permite estudiar señalización neuronal en vivo sin disecar.

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Caracterización funcional de parejas pre- y postsinápticas individuales en el sistema nervioso central larvario de Drosophila usando CaMPARI

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