Name: Cuantificación de la tasa de letalidad embrionaria en Caenorhabditis elegans (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T15:15:00.000+00:00
Duration: 11 min 35 s
Description: Aprende a cuantificar la letalidad embrionaria en Caenorhabditis elegus con un ensayo de bajo coste y sin equipo especializado. Este método accesible permite medir defectos del desarrollo causados por factores genéticos o ambientales de forma fiable.

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<table><tbody><tr><td>Ampicillin sodium salt</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9518</td><td></td></tr><tr><td>Bacteriological peptone</td><td>Fischer Scientific</td><td>DF0118-17-0</td><td></td></tr><tr><td>C. elegans N2</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td>N2</td><td>tipo salvaje</td></tr><tr><td>C. elegans NL2099</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td>NL2099</td><td>rrf-3(pk1426) II. Hipersensible a RNAi</td></tr><tr><td>Calcium chloride, anhydrous</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>746495</td><td></td></tr><tr><td>Cholesterol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3045</td><td></td></tr><tr><td>Conical tubes, 15 mL</td><td>VWR</td><td>60818-725</td><td></td></tr><tr><td>Culture tubes, 14 mL</td><td>VWR</td><td>470150-966</td><td></td></tr><tr><td>Diaphragm vacuum pump</td><td>Amazon</td><td>TC-100</td><td></td></tr><tr><td>Dissecting microscope</td><td>AmScope&nbsp;</td><td>SM-2</td><td></td></tr><tr><td>Escherichia coli HT115</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td></td><td>RNAse III-deficient, used for RNAi by feeding experiments</td></tr><tr><td>Escherichia coli OP50</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Granulated agar</td><td>Fischer Scientific</td><td>BP97445</td><td></td></tr><tr><td>Handheld tally counter</td><td>LabDepot</td><td>HTCP01</td><td></td></tr><tr><td>IPTG, dioxane free (Isopropyl-b-D-thiogalactoside)</td><td>US Biological</td><td>I8500</td><td></td></tr><tr><td>LB Broth (Miller)</td><td>US Biological</td><td>L1520</td><td>Para hacer medio LB disuelva 25 g de polvo LB en 1 L de agua destilada. Autoclave durante 20 min a 121,1 &deg;C.</td></tr><tr><td>Luer Lok disposable syringe</td><td>BH Supplies</td><td>BH20LL</td><td></td></tr><tr><td>Magnesium sulfate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M2643</td><td></td></tr><tr><td>Microscopy slides</td><td>Sail Brand</td><td>7101</td><td></td></tr><tr><td>Petri dishes, 100 mm</td><td>Tritech Research</td><td>T3371</td><td></td></tr><tr><td>Petri dishes, 35 mm</td><td>Tritech Research</td><td>T3501</td><td></td></tr><tr><td>Potassium Phosphate Buffer (PPB)</td><td></td><td></td><td>Para hacer buffer de fosfato de potasio (1 M), disuelva 98 g de fosfato de potasio monobásico y 48 g de fosfato de potasio dibásico en 1 L de agua destilada. Ajuste el pH a 6. Autoclave durante 20 min a 121 &deg;C.</td></tr><tr><td>Potassium phosphate dibasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>795496</td><td></td></tr><tr><td>Potassium phosphate monobasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>529568</td><td></td></tr><tr><td>Rocker (nutating mixer)</td><td>Corning LSE</td><td>6720</td><td></td></tr><tr><td>Serological pipettes, 25 mL&nbsp;</td><td>Corning</td><td>4489</td><td></td></tr><tr><td>Serological pipettes, 5 mL&nbsp;</td><td>Celltreat</td><td>229235</td><td></td></tr><tr><td>Shaking incubator Infors Multitron</td><td>INFORS HT</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Sodium chloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>Sodium hydroxide solution, 5 N</td><td>Fisher Scientific</td><td>&nbsp;SS256-500</td><td></td></tr><tr><td>Sodium hypochlorite, 5%</td><td>LabDepot</td><td>LC246302</td><td></td></tr><tr><td>Sodium phosphate dibasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9763</td><td></td></tr><tr><td>Sorvall ST1 Plus Centrifuge</td><td>Thermo Scientific</td><td>75016030</td><td></td></tr><tr><td>Stir plate</td><td>&nbsp;ONilab</td><td>ONi28-S</td><td></td></tr><tr><td>Syringe filters</td><td>Semmerfeld</td><td>JQP033022QE1</td><td></td></tr><tr><td>Water bath</td><td>FOUR E's Scientific</td><td>WB401</td><td></td></tr></tbody></table>

cuantificación de la tasa de letalidad embrionaria en caenorhabditis elegans

Quantifying Embryonic Lethality Rate in Caenorhabditis elegans

Cuantificación de la tasa de letalidad embrionaria en Caenorhabditis elegans

Embryonic lethality is a cornerstone phenotype used in Caenorhabditis elegans research to characterize developmental defects arising from factors such as ...

Our research focuses on measuring embryonic lethality in Caenorhabditis elegans and determining how strongly a perturbation affects development. This protocol can be applied to assess embryonic lethality caused by genetic mutations, RNAi knockdowns, drug treatment, nutritional supplementation, or environmental perturbations.To begin, gather the required reagents. Prepare 1 liter of nematode growth medium or NGM in a 2-liter bottle. Allow the medium to cool to 55 degrees Celsius in a water bath. After placing the bottle on a stir plate, aseptically add the required reagents. Pour approximately 25 milliliters of medium into each 100-milliliter plate. Inoculate 200 milliliters of LB medium with a single E. coli OP50 colony using a sterile inoculation loop. Place the flask on an orbital shaker at 200 revolutions per minute, and incubate overnight at 37 degrees Celsius. Transfer the E. coli OP50 culture into autoclaved centrifuge bottles. After centrifugation, resuspend the bacterial pellet in 1/20th of the original volume. Seed each 100-millimeter NGM plate with one to 1.5 milliliters of the concentrated culture, and incubate overnight at room temperature to allow the bacteria to grow.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Developmental Biology

Biología del Desarrollo

Este video describe un método tradicional basado en placas para medir la vida útil de C. elegans. El protocolo de ejemplo mide la vida útil de los gusanos tratados con ARNi.

Análisis de la esperanza de vida: medición de la longevidad de C. elegans

C. elegans El comportamiento de puesta de huevos puede proporcionar información importante en estudios de desarrollo, reproductivos y anatómicos. Este video presenta los pasos importantes de un ensayo de puesta de huevos y muestra un experimento de muestra en el que se prueba la toxicidad reproductiva de un medicamento.

Ensayo de puesta de huevos: un método para cuantificar el comportamiento de puesta de huevos de C. elegans

Fuente: Anderson, Q. L., et al. Un patosistema de C. elegans de alto rendimiento, alto contenido y base líquida. J. Vis. Exp. (2018)El video demuestra un ensayo a base de líquido donde las larvas de C. elegans modificadas genéticamente se exponen a bacterias patógenas en una microplaca. Las toxinas bacterianas secretadas en el medio inducen el estrés y la muerte del huésped. Un tinte fluorescente tiñe los gusanos muertos, lo que permite la cuantificación de la mortalidad basada en imágenes para...

Evaluación de la mortalidad inducida por bacterias patógenas en larvas de C. elegans

Un ensayo de huevo-en-gusano (EIW) es un método útil para cuantificar el comportamiento de puesta de huevos. Las alteraciones de la postura de huevos pueden ser una respuesta de comportamiento del organismo...

Medición de los efectos de las bacterias en<em&gt; C. Elegans</em&gt; Comportamiento El uso de un ensayo de retención de huevo

Describimos los pasos detallados de un ensayo químico de alto rendimiento en el nematodo Caenorhabditis elegans utilizado para evaluar la toxicidad de la línea germinal. En este ensayo, la interrupción de la función de la línea germinal después de la exposición química se monitorea utilizando un indicador fluorescente específico para embriones aneuploides.

Evaluación completa de la línea germinal Química de toxicidad de los nematodos<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Aquí detallamos protocolos específicamente diseñados para monitorear los defectos morfogénicos que ocurren durante las fases tempranas y tardías de la elongación embrionaria del nematodo Caenorhabditis elegans. En última instancia, estos protocolos están diseñados para identificar los genes que regulan estas fases y caracterizar sus requisitos diferenciales a lo largo del eje antero-posterior del embrión.

Las métricas para caracterizar nuevos embrionarias Alargamiento del nematodo<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Aquí describimos el método Replica Set, un enfoque cuantitativo medida vida útil/supervivencia de C. elegans y healthspan en forma robusta y de alto rendimiento, permitiendo la proyección de muchas condiciones sin sacrificar la calidad de los datos. Este protocolo detalla la estrategia y proporciona una herramienta de software para análisis de datos de conjunto de réplica.

El método de conjunto de réplica: Un enfoque de alto rendimiento para cuantitativamente medida Caenorhabditis elegans vida útil

Este trabajo describe un protocolo de semi-alto rendimiento que permite imágenes simultáneas de lapso de tiempo 3D de embriogénesis en embriones de 80-100 C. elegans en una sola carrera nocturna. Además, se incluyen herramientas de visualización y procesamiento de imágenes para agilizar el análisis de datos. La combinación de estos métodos con cepas de reportero personalizadas permite un seguimiento detallado de la embriogénesis.

Un método de imágenes de semi-alto rendimiento y un kit de herramientas de visualización de datos para analizar el desarrollo embrionario de C. elegans

Para estudiar las interacciones chaperona-chaperona y chaperona-sustrato, realizamos pantallas de interacción sintética en Caenorhabditis elegans utilizando interferencia de ARN en combinación con mutaciones leves o sobreexpresión de chaperonas y monitoreamos la disfunción proteica específica del tejido a nivel del organismo.

Uso de Caenorhabditis elegans para detectar interacciones de chaperonas específicas del tejido

Aquí, presentamos un método general para determinar la viabilidad embrionaria y el número total de embriones producidos (cría) utilizando el organismo modelo C. elegans.

Medición de la viabilidad embrionaria y el tamaño de la cría en Caenorhabditis elegans

Aprende a cuantificar la letalidad embrionaria en Caenorhabditis elegus con un ensayo de bajo coste y sin equipo especializado. Este método accesible permite medir defectos del desarrollo causados por factores genéticos o ambientales de forma fiable.

Cuantificación de la tasa de letalidad embrionaria en Caenorhabditis elegans

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