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</ol>

<table><tbody><tr><td>10% Tween-20</td><td>Bio-Rad Laboratories</td><td>1662404</td><td>NA</td></tr><tr><td>20x PBS, pH7.4</td><td>Growcells.com</td><td>MRGF-6396</td><td>2.74M NaCl, 53.7 mM KCl, 20.3 mM Na2HPO4, 29.4 mM KH2PO4&nbsp;</td></tr><tr><td>20x SSC</td><td>Quality Biological</td><td>351-003-131</td><td>3M NaCl, 0.3M Sodium Citrate</td></tr><tr><td>37 &deg;C incubator</td><td>Fisher Scientific (Isotemp)</td><td>15-015-2633</td><td>NA</td></tr><tr><td>37 &deg;C water bath</td><td>Fisher Scientific</td><td>FSGPD15D</td><td>NA</td></tr><tr><td>Aluminum foil</td><td>Reynolds Wrap/Fisher Brand</td><td>15-078-291</td><td>NA</td></tr><tr><td>Antibody: Mouse-anti-Abrupt</td><td>DSHB</td><td>Abrupt; RRID: AB_528344&nbsp;</td><td>Dilution: 1:20</td></tr><tr><td>Antibody: Chicken anti-GFP</td><td>Millipore Sigma</td><td>Catalog# 06-896; RRID: AB-619712</td><td>Dilution: 1:500</td></tr><tr><td>Antibody: Rabbit anti-GFP</td><td>Life Technologies</td><td>#11122; RRID: AB_221569</td><td>Dilution: 1:500</td></tr><tr><td>Antibody: Rabbit anti-Dll</td><td>Genscript/Desplan lab</td><td>-</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antibody: Rat anti-NCadherin</td><td>DSHB</td><td>DN-Ex #8, RRID: AB_528121</td><td>Dilution: 1:50</td></tr><tr><td>Antibody: Rabbit anti-SoxN</td><td>Genscript/Desplan lab</td><td>-</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antibody: Guinea Pig anti-Traffic jam</td><td>Gift from D. Godt</td><td>-</td><td>Dilution: 1:2,000</td></tr><tr><td>Antibody: Donkey anti-Rat 405</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code # 712-475-150; RRID: AB_2340680</td><td>Dilution: 1:100</td></tr><tr><td>Antibody: Donkey anti-Chicken 488</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #703-545-155; RRID: AB_2340375</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antibody: Donkey anti-Mouse 488</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #715-545-151; RRID: AB_2341099</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antibody: Donkey anti-Rabbit 488</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #711-545-152; RRID: AB_2313584</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antibody: Donkey anti-Rabbit A555</td><td>Thermo Scientific</td><td>Catalog #A-31572; RRID: AB_162543</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antibody: Donkey anti-Rat Cy3</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #712-165-153; RRID: AB_2340667</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antibody: Donkey anti-Guinea Pig 647</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #706-605-148; RRID: AB_2340476</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antibody: Donkey anti-Rat 647</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #712-605-153; RRID: AB_2340694</td><td>Dilution: 1:200</td></tr><tr><td>Antifade mountant</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>S36940 (SlowFade Gold Antifade Mountant)</td><td>Other slowfades will work as well, including ones with DAPI (S36936)</td></tr><tr><td>Confocal Microscope</td><td>Zeiss</td><td>LSM-880</td><td>NA</td></tr><tr><td>Cover slips (22 x 30)</td><td>VWR</td><td>16004-332</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fly: D. melanogaster: ab-GFP-FLAG</td><td>BDSC</td><td>38626; RRID: BDSC_38626</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fly: D. melanogaster: Canton S</td><td>BDSC</td><td>64349; RRID: BDSC_64349</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fly: D. melanogaster: dpp-Gal4</td><td>BDSC</td><td>1553; RRID: BDSC_1553</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fly: D. melanogaster: ham-GFP.FPTB</td><td>BDSC</td><td>83660; RRID: BDSC_83660</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fly: D. melanogaster: yw; 10xUAS-myr-GFP;</td><td>BDSC</td><td>32198; RRID: BDSC_32198</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fly: D. melanogaster: UAS-Stinger</td><td>BDSC</td><td>84277; RRID: BDSC_84277</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fly: D. melanogaster:&nbsp; wit-KO-Gal4</td><td>BDSC</td><td>600136; RRID: BDSC_600136</td><td>NA</td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Dumont</td><td>#5 or #55s</td><td>NA</td></tr><tr><td>Glass slides</td><td>VWR</td><td>16005-106</td><td>NA</td></tr><tr><td>Glycine</td><td>Millipore Sigma</td><td>G7126-10MG</td><td>NA</td></tr><tr><td>HCR Amplification buffer</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>NA</td></tr><tr><td>HCR-Gold Amplifiers</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>NA</td></tr><tr><td>HCR HiFi Probes</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>NA</td></tr><tr><td>HCR Probe Hybridization Buffer</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>Contains formamide</td></tr><tr><td>HCR Probe Wash Buffer</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>Contains formamide</td></tr><tr><td>Nail polish (clear)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>72180</td><td>NA</td></tr><tr><td>Nuclease-free water (not DEPC-treated)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AM9937</td><td>NA</td></tr><tr><td>Nutating mixer</td><td>Corning/Fisher Scientific</td><td>10-320-100</td><td>NA</td></tr><tr><td>Paraformaldehyde, 16% (w/v)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15710</td><td>Toxic</td></tr><tr><td>PCR Machine/Thermal Cycler</td><td>Bio-Rad</td><td>1851148 (C1000 Touch Thermal Cycler)</td><td>NA</td></tr><tr><td>PCR pull-apart tube strips with dome cap strips (0.2 mL)&nbsp;</td><td>USA Scientific</td><td>#1402-2400</td><td>NA</td></tr><tr><td>Petri dishes (150 x 15 mm; for making dissecting dishes)</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB0875714</td><td>NA</td></tr><tr><td>RNase ZAP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>AM9780</td><td>NA</td></tr><tr><td>Slide spacer stickers</td><td>SUNJin</td><td>IS016 (iSpacer stickers (0.2 mm deep))</td><td>NA</td></tr><tr><td>Sylgard elastomer kit (for making dissecting dishes)</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9285739</td><td>NA</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Merck Millipore Sigma</td><td>X100</td><td>NA</td></tr></tbody></table>

reacción en cadena de hibridación fish en el lóbulo óptico en desarrollo de drosophila

Hybridization Chain Reaction FISH in the Developing Drosophila Optic Lobe

Reacción en cadena de hibridación FISH en el lóbulo óptico en desarrollo de Drosophila

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Todo el montaje utilizando In situ La hibridación de Enlace de Organismos y Biología Molecular

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El pez cebra, un pequeño pez tropical, se ha convertido en un modelo popular para el estudio de la función de genes durante el desarrollo de vertebrados y la enfermedad. La expresión temporal y espacial de los genes diana se puede determinar...

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La inmunotinción es una técnica eficaz para visualizar tipos específicos de células y proteínas dentro de los tejidos. Al utilizar la sonicación, el protocolo descrito aquí alivia la necesidad de diseccionar tejidos de Drosophila melanogaster de embriones y larvas en fase avanzada antes de la inmunotinción. Proporcionamos una metodología eficiente para la inmunotinción de larvas enteras fijadas en formaldehído.

La sonicación-facilitado Inmunofluorescencia tinción de etapa tardía embrionario y larval<em&gt; Drosophila</em&gt; Tejidos<em&gt; In Situ</em

Se describe un montaje de todo el hibridación in situ procedimiento multi-objetivo cromogénico (MC-DESEO) en embriones de Drosophila intactos permitiendo la detección simultánea y específica de tres patrones de distribución de ARNm diferentes contrastando precipitados de color.

Multi-objetivo Cromogénico Todo el montaje<em&gt; In Situ</em&gt; La hibridación para comparar dominios de expresión génica en<em&gt; Drosophila</em&gt; Los embriones

El RNA se describe en situ hibridación protocolo permite la detección de RNA en todo Drosophila embriones o tejidos disecados. Utilizando placas de microtitulación de 96 pocillos y amplificación de la señal tyramide, transcripciones pueden ser detectadas en el rendimiento, sensibilidad y alta resolución y a un costo relativamente bajo.

Alta resolución fluorescente In Situ hibridación en embriones de Drosophila y tejidos utilizando amplificación de la señal de Tyramide

Este manuscrito presenta un detallado método para la generación X-cromosoma brazo sondas y rendimiento en situ hibridación de la fluorescencia (pescado) para examinar el estado de la hermana cohesión de cromátidas hermanas en Prometafase y metafase detenido  Drosophila ovocitos. Este protocolo es adecuado para determinar si cohesión brazo meiótica es intacta o interrumpida en diferentes genotipos.

Con fluorescencia In Situ hibridación (pescado) para supervisar el estado de la cohesión de brazo en Prometafase y metafase I ovocitos de Drosophila

El artículo describe los métodos y reactivos necesarios para realizar la hibridación in situ de fluorescencia in situ de ARN de reacción en cadena de hibridación (HCR RNA WM-FISH) para revelar información sobre la resolución espacial y celular de los genes receptores quimiosensoriales en la antena del mosquito y el palpo maxilar.

Hibridación Reacción en cadena ARN Fluorescencia de montaje completo Hibridación in situ de genes quimiosensoriales en apéndices olfativos de mosquitos

La hibridación in situ iterativa de fluorescencia asistida por expansión (EASI-FISH) es una técnica robusta que combina la microscopía de expansión con la hibridación in situ de fluorescencia (FISH) para detectar la expresión de múltiples genes en tejido grueso. Este protocolo describe los avances recientes en el método y su adaptación para etiquetar el sistema nervioso central intacto de Drosophila.

Detección múltiple de la expresión génica en el cerebro intacto de Drosophila mediante hibridación in situ de fluorescencia iterativa asistida por expansión

New York University.  Este protocolo describe los pasos necesarios para realizar la hibridación de hibridación fluorescente fluorescente in situ (HCR-FISH) en los lóbulos ópticos larvales de Drosophila melanogaster . Se detallan procedimientos para el diseño de la sonda, hibridación, amplificación y montaje de tejidos para facilitar la visualización del lóbulo óptico en desarrollo.

Reacción en cadena de hibridación FISH en el lóbulo óptico en desarrollo de Drosophila

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