Generación de neuronas GABAérgicas a partir de células madre pluripotentes inducidas por humanos utilizando la expresión de ASCL1/DLX2 inducible por doxiciclina en AAVS1

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09:14 min.

31 de julio de 2026

10.3791/71804-v

31 de julio de 2026

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 , 

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Este protocolo describe un método para generar neuronas GABAérgicas a partir de células madre pluripotentes inducidas por humanos mediante la integración de transgenes inducibles por doxiciclina en el locus de puerto seguro AAVS1 . La expresión estable y homogénea del transgénico proporciona un enfoque eficiente para la diferenciación directa en neuronas GABAérgicas, limitando al mismo tiempo el silenciamiento del transgénico, un problema común en los enfoques lentivirales.

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Neurociencia

Chapters in this video

0:00

Introducción

0:26

Preparación del medio de congelación y de las placas de cultivo recubiertas con BME

1:33

Mantenimiento y pasaje de hiPSC

3:16

Nucleofección de hiPSC

5:25

Selección y validación de hiPSC con edición genómica

6:08

Diferenciación directa de hiPSC en neuronas GABAérgicas

7:53

Resultados

8:40

Conclusión

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