Name: Separación electroforética de las proteínas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-06-12T13:29:00.000+00:00
Duration: 8 min 17 s
Description: Aprende la separación electroforética de proteínas mediante electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE). Esta técnica permite analizar mezclas proteicas complejas según tamaño y carga eléctrica.

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El protocolo de texto completo de este enfoque experimental está disponible en <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471142720/cp/cpmb/article/mb1002a/current/abstract" target="_blank">Current Protocols in Molecular Biology</a> .

Los autores no tienen nada que revelar.

separación electroforética de las proteínas

Electrophoretic Separation of Proteins

Electroforesis se utiliza para separar mezclas complejas de proteínas (por ejemplo, a partir de células, fracciones subcelulares, las fracciones de la columna, o inmunoprecipitados), para investigar las composiciones de subunidades, y para verificar la homogeneidad de las muestras de proteínas. También puede servir para purificar las proteínas para su uso en otras aplicaciones. En la electroforesis en gel de poliacrilamida, las proteínas migran en respuesta a un campo eléctrico a través de los poros de una matriz de gel de poliacrilamida; tamaño de poro disminuye con la concentración de acrilamida en aumento. La combinación de tamaño de poro y la carga de proteínas, el tamaño y forma que determina la tasa de migración de la proteína. En esta unidad, el método estándar de Laemmli se describe, por electroforesis en gel discontinuo bajo condiciones de desnaturalización, es decir, en presencia de dodecil sulfato sódico (SDS).

En este vídeo, se demuestra un método para la separación electroforética de las proteínas usando poli-acrylimide electroforesis en gel (PAGE).

Separación electroforética de las proteínas

La electroforesis se utiliza para separar mezclas complejas de proteínas (p. ej., a partir de células, fracciones subcelulares, fracciones de columna o inmunoprecipitados), para...

La separación de proteínas individuales a partir de mezclas complejas de proteínas puede lograrse mediante electroforesis en gel de poliacrilamida, conocida también como PAGE. Las proteínas migran en respuesta a un campo eléctrico a través de los poros de la matriz del gel. La combinación del tamaño de los poros del gel y la carga, tamaño y forma de la proteína determina la velocidad de migración de esta. En este video, demostraremos un método para la separación electroforética de proteínas.Hola, soy el Dr. Bobul Chakravarti del Centro de Proteómica del Instituto Graduado Keck de Ciencias de la Vida Aplicadas. Hoy les mostraré un procedimiento para realizar electroforesis en gel 1D. Así que comencemos.Para comenzar, ensamble el sándwich de placas de vidrio del aparato de electroforesis según las instrucciones del fabricante, utilizando dos placas de vidrio limpias y dos espaciadores de 1,5 milímetros. Ahora fije el sándwich de placas de vidrio al soporte de vertido. A continuación, prepare la solución del gel de separación que se ha descrito en los protocolos actuales.Añada la cantidad especificada de sulfato de peramoniaco al 10% y TEMED a la solución y agite suavemente para mezcl

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Investigación

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Biology

Biología

Este video muestra una técnica de separación de proteínas basada en poliacrilamida desnaturalizante. Esta técnica ayuda en la identificación preliminar de proteínas en función de sus pesos moleculares.

Electroforesis en gel de poliacrilamida de dodecil sulfato de sodio para el análisis de proteínas: una técnica para separar y visualizar proteínas basada en el peso molecular

Este video describe PAGE multimérico para separar complejos de proteínas nativas de homogeneizados de tejidos. La técnica es un híbrido de las técnicas blue native-PAGE y SDS-PAGE. Los complejos separados pueden caracterizarse y estudiarse por su papel en el funcionamiento celular.

Multimer-PAGE para separar complejos de proteínas nativas: una técnica de separación híbrida que consiste en Blue Native-PAGE y SDS-PAGE para separar proteínas multiméricas intactas del lisado de tejidos.

En este video, demostramos un método de electroforesis en gel bidimensional que separa proteínas individuales de una mezcla compleja de proteínas obtenidas de tejidos tumorales de adenoma hipofisario humano no funcional (NFPA). Las proteínas se separan en función de su carga eléctrica en la primera dimensión y se separan aún más en función de los pesos moleculares en la segunda dimensión.

Electroforesis bidimensional en gel de poliacrilamida: una técnica de separación para el análisis de proteínas en mezclas complejas de proteínas basada en la carga y el peso molecular

Este protocolo describe cómo preparar y realizar la electroforesis de atrapamiento de fracción líquida clara nativa eluida en gel (CN-GELFrEE), una técnica de separación nativa para ensamblajes biomoleculares no covalentes y proteínas de muestras heterogéneas que es compatible con varias técnicas de análisis de proteínas posteriores.

CN-GELFrEE - eluida-gel transparente nativo fracción líquida atrapamiento de electroforesis

Después de la separación por métodos de electroforesis, las proteínas en un gel puede ser detectado por varios métodos de tinción. Tinción de las proteínas con azul de Coomassie, tinción de plata, naranja SYPRO, Ruby SYPRO se muestran en este video.

Tinción de proteínas en geles de

Impresión por microcontacto se utiliza ampliamente a las proteínas de patrones y otras moléculas en las superficies de material. Se demuestra los pasos básicos de este proceso, los patrones de estampación de la fibronectina sobre el cristal.

Microcontacto de impresión de las proteínas de Biología Celular

Apareamiento y la separación tétrada se requieren para el análisis genético...

El apareamiento y la separación de la Tétrada Chlamydomonas reinhardtii Para el análisis genético

Rata MSC fueron aisladas de fémur y la tibia y luego enriquecido por la clasificación de células magnéticas. Células seleccionadas fueron confirmados para la expresión de marcadores de superficie por citometría de flujo. Estas células fueron cultivadas a una densidad de clones para formar colonias aisladas y luego estas colonias fueron separados por cilindros de clonación.

Aislamiento y enriquecimiento de las células de rata madre mesenquimales (MSC) y la separación de una sola colonia Derivado MSC

Los protocolos describen los pasos esenciales para la obtención de cristales de difracción de la calidad de una proteína de membrana a partir de la reconstitución de la proteína en una fase lipídica cúbicos (LCP), la búsqueda de las condiciones iniciales con LCP-FRAP antes de la cristalización de los ensayos, el establecimiento de ensayos LCP cristalización y los cristales de la cosecha .

La cristalización de proteínas de membrana en mesofases lipídico

Calmodulina (CaM) pull-down de ensayo es una forma efectiva para investigar la interacción de la CAM con varias proteínas. Este método utiliza CAM-sepharose bolas para el análisis eficiente y específica de la CAM-proteínas de unión. Esta es una importante herramienta para explorar la señalización CAM en la función celular.

Desplegable de proteínas de unión a calmodulina

Aprende la separación electroforética de proteínas mediante electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE). Esta técnica permite analizar mezclas proteicas complejas según tamaño y carga eléctrica.

Separación electroforética de las proteínas

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