Name: En el etiquetado in vitro de células estaminales embrionarias humanas de Resonancia Magnética (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-08-03T14:45:00.000+00:00
Duration: 11 min 41 s
Description: Aprenda a etiquetar células estaminales embrionarias humanas con cloruro de manganeso para resonancia magnética. Este método permite evaluar la viabilidad celular mediante señales positivas de MRI, superando las limitaciones del óxido de hierro.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Etiquetado de manganeso de células estaminales embrionarias humanas <ol><li> Trypsinize los tallos de embriones humanos que se han cultivado en el alimentador sin condiciones durante 5 minutos. Neutralizar la tripsina mediante la adición de medios de cultivo. </li><li> Vuelta a las células por centrifugación a 800 rpm durante 5 minutos a 20 ° Celsius. Después de volver a suspender el pellet de células, contar el número de células por tinción con azul tripán. Con base en el recuento de células obtenidas, las células se dividen en cuatro alícuotas de 3 millones de células en tubos cónicos. Precipitar las células por centrifugación de nuevo. </li><li> Justo antes de comenzar el etiquetado de manganeso, cloruro de manganeso se disuelven fresco con una solución de cloruro de sodio al 0,9% para hacer una solución 0,1 mM de cloruro de manganeso. </li><li> Con el fin de observar la actividad de los canales de calcio, cuatro muestras se prepararon. La primera muestra es de nuestro control, que contiene las células incubadas en el 0,9% de cloruro sódico solo. La segunda muestra contiene células incubadas en el 0,1 mM MnCl2. Muestra 3 y 4 contienen las células se incubaron en mM MnCl 0,1 2, ya sea con 5 mM de Ca 2 +-canal agonista (s )-(-)- Bay K8644, o 250 M de la Ca 2 +-canal antagonista verapamilo. Incubar las cuatro muestras a 37 ° C con 5% de CO 2 durante 30 minutos. </li><li> Después de 30 minutos, centrifugar las células a 800 rpm durante 5 minutos a 20 ° Celsius. Y aspirar el sobrenadante y lavar las células marcadas dos veces con PBS. Después del lavado, vuelva a suspender cada pellet con 200 l de PBS y la transferencia en los tubos de PCR. Estas pastillas son generalmente de color blanco. </li></ol> Etiquetado de hierro de las células estaminales embrionarias <ol><li> Mix de grado clínico sulfato de protamina con agua destilada hasta obtener un 1 mg / ml de solución madre. </li><li> En un tubo madre de embriones humanos que contienen medio de cultivo celular, añadir ferumoxides a 100 mg / mL seguido por la adición de 12 mg / ml de sulfato de protamina. Mezcle la solución vigorosamente durante cinco minutos. </li><li> Añadir solución mixta a la misma cantidad de los medios de cultivo celular para lograr una concentración final de 50 mg / ml de ferumoxides y 6 mg / ml de sulfato de protamina a las células de la etiqueta. Se incuban las células en esta solución durante 12 horas. </li><li> Lavar las células dos veces con PBS, con el último lavado, que contiene heparina 10U/ml para disolver la matriz extracelular ferumoxides-protamina sulfato complejo. Después del lavado, trypsinize células para obtener una suspensión de células individuales. </li><li> Contar las células y la alícuota en el número requerido de muestras. Después del lavado, vuelva a suspender cada pellet con 200 l de PBS y la transferencia en los tubos de PCR. Estas pastillas deben ser de color marrón oscuro de color naranja. </li></ol> Realización de imágenes por resonancia magnética celular <ol><li> Hacer un fantasma con el fin de estabilizar los tubos que contienen los gránulos de las células y también para evitar los artefactos del aire circundante durante la exploración. Para ello, mezcla de 0,8% de agar y el 1% de sulfato de cobre en agua destilada y llevar a ebullición en el microondas durante 5-7 minutos. Enfriar esta mezcla por lo menos 1 hora antes de la exploración para obtener un gel. </li><li> Los tubos que contienen los gránulos de las células marcadas se coloca en el espectro para la exploración. Celular in vitro una resonancia magnética realizada en Signa HDx 3T MRI (GE Medical Systems) mediante el uso de la bobina de rodilla clínica. </li><li> Examinar las células de manganeso etiquetado para cada una de las tres muestras usando una secuencia de eco de espín: TR, el tiempo de repetición = 800 ms. TE: tiempo de eco = mínimo, FOV, campo de visión = 12 x 12 cm; matriz = 256x256, NEX 1. </li><li> Examinar las células de hierro etiquetados mediante el uso de una secuencia de eco de gradiente. Nosotros utilizamos los siguientes parámetros para esta imagen: TR = 100 ms, TE = 10 ms, FA, ángulo de inclinación = 30 °; FOV = 12 x 12 cm; matriz = 256 x 256, NEX 1. </li></ol> Análisis de los resultados de la RM <ol><li> Analizar las imágenes de resonancia magnética de 4 diferentes muestras de células de manganeso etiquetado: <ul><li> Muestra # 1 es de nuestro control, que contiene las células incubadas en el 0,9% de cloruro sódico solo. </li><li> Muestra N ° 2 contiene las células incubadas en el 0,1 mM MnCl2. </li><li> Muestra # 3 contiene las células incubadas en el 0,1 mM MnCl 2 con 5 M de Ca 2 +-canal agonista (s )-(-)- Bay K8644. </li><li> Muestra # 4 contiene las células incubadas en mM MnCl 0,1 2 con 250 M de la Ca 2 +-canal antagonista verapamilo. </li></ul></li><li> Como se predijo, las diferencias en la intensidad de señal de manganeso células marcadas son visibles. En comparación con las células marcadas únicamente con el manganeso, la intensidad de la señal con claridad el aumento de la presencia de los agonistas de los canales de calcio y disminuye en presencia de antagonistas de los canales de calcio. El área donde la intensidad de la señal se ha incrementado de manganeso células marcadas se miden mediante el uso de la imagen J (NIH, Bethesda, MD, EE.UU.). El mismo software se utiliza para analizar el área de la oscuridad fuera de resonancia de la señal del hierro células marcadas. El tamaño de la señal oscura de la plancha marcado células depende del número de células o el número de partículas de hierro contenido en las células. En este caso, Un millón de células muestra un área más pequeña de la señal oscura en comparación con la señal de los tres millones de células. </li></ol>

<ol><li>Bruvold, M., Nordhoy, W., Anthonsen, H. W., Brurok, H., Jynge, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manganese-calcium+interactions+with+contrast+media+for+cardiac+magnetic+resonance+imaging%3A+a+study+of+manganese+chloride+supplemented+with+calcium+gluconate+in+isolated+Guinea+pig+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Radiol%22%5BJournal%5D)">Manganese-calcium interactions with contrast media for cardiac magnetic resonance imaging: a study of manganese chloride supplemented with calcium gluconate in isolated Guinea pig hearts.</a> Invest Radiol. 40, 117-125 (2005).</li>
<li>Aoki, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+labeling+for+magnetic+resonance+imaging+with+the+T1+agent+manganese+chloride%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+Biomed%22%5BJournal%5D)">Cell labeling for magnetic resonance imaging with the T1 agent manganese chloride.</a> NMR Biomed. 19, 50-59 (2006).</li>
<li>Arbab, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+magnetic+cell+labeling+with+protamine+sulfate+complexed+to+ferumoxides+for+cellular+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Efficient magnetic cell labeling with protamine sulfate complexed to ferumoxides for cellular MRI.</a> Blood. 104, 1217-1223 (2004).</li>
<li>Arbab, A. S., Frank, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+MRI+and+its+role+in+stem+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Cellular MRI and its role in stem cell therapy.</a> Regen Med. 3, 199-215 (2008).</li>
</ol>

Estos resultados indican que el manganeso entra a través de los canales de calcio voltaje-dependientes, y el manganeso puede ser utilizado como agente de contraste MRI, que también puede mostrar la viabilidad de las células. Por lo tanto, sugerimos que el manganeso guiada por resonancia magnética puede ser útil para controlar la viabilidad celular después del trasplante de células madre embrionarias humanas en el miocardio.

<table><tbody><tr><td>Cloruro de manganeso tetrahidratado</td><td>Reactivo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M8054</td><td></td></tr><tr><td>(S)-(-)-Bay K8644 </td><td>Reactivo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B133</td><td></td></tr><tr><td>Clorhidrato de verapamilo (+), titulación mínima del 99,0 %</td><td>Reactivo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>V4629</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de sodio 0,85-0,90 % p/v</td><td>Reactivo</td><td>VWR international</td><td>VW 3257-1</td><td></td></tr><tr><td>Feridex I.V. </td><td>Reactivo</td><td>Berlex Laboratories</td><td>NDC 59338-7035-5</td><td>solución inyectable de ferumoxidas 11,2 mg de hierro/mL</td></tr><tr><td>Sulfato de protamina</td><td>Reactivo</td><td>American Pharmaceutical Partners</td><td>NDC 63323-229-05</td><td>50 mg (10 mg/mL)</td></tr><tr><td>Knockout SR (sustituto sérico para células ES)</td><td>Reactivo</td><td>GIBCO, por Life Technologies</td><td>10828</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12 (1:1)</td><td>Reactivo</td><td>GIBCO, por Life Technologies</td><td>11330</td><td></td></tr><tr><td>2-mercap&amp;#8211;etanol 98+%</td><td>Reactivo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M 3148</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamina 200 mM 100x</td><td>Reactivo</td><td>GIBCO, por Life Technologies</td><td>25030</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina-Estreptomicina 10.000 unidades/ml</td><td>Reactivo</td><td>GIBCO, por Life Technologies</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Solución 100x de aminoácidos no esenciales MEM</td><td>Reactivo</td><td>GIBCO, por Life Technologies</td><td>11140</td><td></td></tr><tr><td>Resonancia magnética Signa HDx 3T</td><td>Herramienta</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bobina clínica para rodilla</td><td>Herramienta</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Reactivo</td><td>GIBCO, por Life Technologies</td><td>14190</td><td></td></tr></tbody></table>

en el etiquetado in vitro de células estaminales embrionarias humanas de resonancia magnética

In vitro Labeling of Human Embryonic Stem Cells for Magnetic Resonance Imaging

Las células madre embrionarias (células madre) han demostrado la capacidad de restaurar el miocardio lesionado. La resonancia magnética (MRI) se ha convertido en una de las modalidades de imagen predominante para evaluar la restauración del miocardio lesionado. Por otra parte, ex-vivo agentes etiquetado, como las nanopartículas de óxido de hierro, se han empleado para rastrear y localizar las células madre trasplantadas. Sin embargo, este método no hace un seguimiento de una propiedad fundamental de la biología celular sobre la viabilidad de las células trasplantadas. Se ha sabido que el cloruro de manganeso (MnCl2) entra en las células a través de voltaje de calcio (Ca 2 +) de canal cuando las células son biológicamente activos, y se acumula intracelularmente para generar un efecto de acortamiento T. Por lo tanto, sugerimos que el manganeso guiada por resonancia magnética puede ser útil para controlar la viabilidad celular tras el trasplante de células madre de en el miocardio. En este video, vamos a mostrar cómo etiquetar células madre con MnCl2 y cómo esas células pueden verse claramente mediante el uso de resonancia magnética in vitro. Al mismo tiempo, la actividad biológica de Ca 2 +-los canales serán moduladas utilizando tanto Ca 2 +-canal de agonistas y antagonistas para evaluar los cambios concomitantes de la señal.

En este vídeo, se muestra como etiqueta de células madre embrionarias humanas (células madre) con cloruro de manganeso (MnCl<sub&gt; 2</sub&gt;) Que puede entrar en las células a través de los canales de calcio voltaje-dependientes cuando las células son biológicamente activos. Además, se muestra el uso de MnCl<sub&gt; 2</sub&gt; Como agente de cambio celular resonancia magnética para determinar la viabilidad de células madre in vitro de.

En el etiquetado in vitro de células estaminales embrionarias humanas de Resonancia Magnética

Las células madre embrionarias humanas (hESC) han demostrado la capacidad de restaurar el miocardio lesionado. La resonancia magnética (MRI) ha surgido como una de ...

La imagen por resonancia magnética o IRM ha surgido como una modalidad predominante de imagen para localizar células madre trasplantadas y comprender mejor el mecanismo de regeneración. Estos estudios de IRM suelen utilizar nanopartículas de óxido de hierro como agente de contraste por imagen. Sin embargo, las partículas de hierro pueden permanecer en el tejido tras la muerte de las células madre y pueden ser captadas por macrófagos, lo que genera condiciones subóptimas para el seguimiento de las células trasplantadas viables.Este video demostrará que el cloruro de manganeso es una alternativa eficaz. La marcación con agentes de contraste mediante cloruro de manganeso ofrece varias ventajas sobre la marcación con óxido de hierro. Por ejemplo, el manganeso produce una señal positiva, mientras que las partículas de hierro generan una señal negativa.Además, se sabe que el ion manganeso entra en las células a través de canales de calcio regulados por voltaje. Por lo tanto, su aparición en la resonancia magnética indica células viables y biológicamente activas. Hola, soy Uni Mother del laboratorio de Philip Yang en la división de Medicina Cardiovascular de la Universidad de Stanford.Hoy les mostraré cómo etiquetar células madre embrionarias humanas con manganeso para la imagen por resonancia magnética. Este procedimiento incluye los siguientes pasos: etiquetar células madre embrionarias humanas con agentes de contraste, realizar imágenes de resonancia magnética celular in vitro y analizar los resultados de la resonancia magnética. Así que comencemos.El primer paso en el procedimiento de etiquetado consiste en preparar células madre embrionarias humanas, que han sido cultivadas en condiciones libres de suero fetal. Para ello, se trata con tripsina a las células durante cinco minutos y luego se neutraliza la tripsina añadiendo medio de cultivo. A continuación, se centrifugan las células a 800 RRP M durante cinco minutos a 20 grados Celsius.Después de resuspender la paleta de células en PBS, cuente el número de células mediante tinción con tripan y azul según el recuento celular obtenido, y divida las células en el número requerido de alícuotas en tubos cónicos. En este caso, estoy dividiendo las células en cuatro alícuotas de 3 millones de células. Vuelva a paletar las células por centrifugación justo antes de comenzar la etiqueta con manganeso; disuelva cloruro de manganeso fresco en cloruro de sodio al 0,9 % para preparar una solución de cloruro de manganeso 0,1 milimolar.Con el fin de observar la actividad de los canales de calcio, preparamos las muestras. La primera muestra es nuestro control, que contiene células incubadas únicamente en cloruro de sodio al 0,9%. La segunda muestra contiene células incubadas en cloruro de manganeso 0,1 milimolar; las muestras tres y cuatro contienen células incubadas en cloruro de manganeso 0,1 milimolar con cinco micromolares del agonista de los canales de calcio AK 8 6 44 o 250 micromolares del antagonista de los canales de calcio.A continuación, incubar las cuatro muestras a 37 grados Celsius con 5%CO2 durante 30 minutos. Después de 30 minutos, centrifugar las células a 800 RPM durante cinco minutos a 20 grados Celsius. Luego aspirar el sobrenadante y lavar las células marcadas dos veces con PBS. Tras el lavado, suspender cada pellet con 200 microlitros de PBS y transferir a tubos PCR.Estos pallets suelen ser blancos. Muy bien, hemos terminado de preparar las células marcadas con manganeso con fines comparativos. También prepararemos células utilizando los métodos de marcado con hierro más tradicionales para comenzar el marcado con hierro.Disuelva el sulfato de protamina de grado clínico de Nick en agua destilada para obtener una solución stock de un miligramo por mililitro. A continuación, en el tubo que contiene el medio de cultivo de células madre embrionarias humanas, añada óxido de film a una concentración de cien microgramos por mililitro junto con el sulfato de protamina a 12 microgramos por mililitro. Luego, mezcle la solución durante cinco minutos.Después de mezclar la solución, añádala a sus células utilizando un volumen igual de la solución mezclada y del medio de cultivo celular para lograr una concentración final de 50 microgramos por mililitro de óxido y seis microgramos por mililitro de sulfato de protamina. Incube las células durante 12 horas; tras 12 horas, lave las células dos veces con PBS, realizando el último lavado con 10 unidades por mililitro de heparina para disolver el complejo extracelular de sulfato de óxido y proteína. Después del lavado, retire las células con tripsina para obtener una suspensión de células individuales, luego cuente las células y distribúyalas en el número requerido de muestras.En este caso, estoy preparando una muestra con un millón de células y la otra con tres millones de células. A continuación, las células P, estas pastillas deben tener un color naranja, marrón. Finalmente, resuspendemos cada pastilla con 200 µL de PBS y las transferimos a tubos de PCL.Vale, hemos terminado de marcar las células. Continuemos con la imagen por resonancia magnética celular. Para comenzar la adquisición de imágenes, primero preparamos un fantasma con el fin de estabilizar los tubos que contienen las paletas celulares y también para evitar artefactos provenientes del aire circundante durante el escaneo.Para ello, mezcle 1% de sulfato de cobre y 0,8% de agar en agua destilada y caliente hasta ebullición en el microondas durante cinco a siete minutos. Luego, esta mezcla se enfría durante al menos una hora para obtener un gel. A continuación, los tubos que contienen los pellet de células marcadas se colocan en el fantasma para la exploración.La RM celular in vitro se realiza con un escáner de 3,0 T utilizando una bobina clínica de rodilla. Utilizamos el Signa fabricado por GE Medical Systems para escanear las células marcadas con manganeso de cada una de las cuatro muestras mediante una secuencia de eco de espín. Los parámetros para la secuencia se han determinado a partir del mapeo de T previamente estudiado en las células marcadas.Utilizamos un tiempo de eco al mínimo, un tiempo de repetición de 800 milisegundos, un campo de visión de 12 por 12 centímetros y una matriz de 256 por 256. A continuación, escanee las células marcadas con hierro utilizando una secuencia de eco de gradiente.Utilizamos los siguientes parámetros para esta adquisición de imágenes: tiempo de eco de 10 milisegundos, tiempo de repetición de cien milisegundos, ángulo de giro de 30 grados, campo de visión de 12 por 12 centímetros, matriz de 256 por 256 y el siguiente.Vale, ya hemos terminado con la obtención de imágenes. Ahora veamos los resultados. A continuación se muestran los resultados del escaneo por resonancia magnética de cuatro muestras diferentes de células marcadas con manganeso.La muestra número uno es nuestro control, que contiene células incubadas únicamente en cloruro de sodio al 0,9 %. La muestra número dos contiene células incubadas en cloruro de manganeso 0,1 milimolar. La muestra número tres contiene células incubadas en cloruro de manganeso 0,1 milimolar con cinco micro de la agonista del canal de calcio vacay 8 6 4 4.La muestra número cuatro contiene células incubadas en 0,1 millones de MO de cloruro de manganeso con 250 micro mouro del antagonista del canal de calcio velo. En comparación con las células marcadas con manganeso solo, la intensidad de la señal aumenta en presencia del agonista del canal de calcio y disminuye en presencia del antagonista del canal de calcio. El área de aumento de la señal para las células marcadas con manganeso se mide utilizando Image J. Estos resultados indican que el manganeso entra a través del canal de calcio regulado por voltaje.Ahora comparemos estos resultados con los resultados de las células marcadas con hierro. Observe la diferencia entre la señal positiva brillante de las células marcadas con manganeso frente a la señal negativa oscura de las células marcadas con hierro. Acabamos de mostrarle cómo realizar el marcado con manganeso de células madre embrionarias humanas para la obtención de imágenes por resonancia magnética celular in vitro.Este procedimiento es un método eficaz para rastrear células madre porque uno, el manganeso puede introducirse fácilmente en las células mediante una incubación simple de 30 minutos. Dos, las células marcadas con manganeso proporcionan imágenes nítidas con una señal positiva, y tres, el manganeso entra en las células a través del canal de calcio regulado por voltaje, como se ha demostrado mediante el uso de agonistas y antagonistas de los canales de calcio, y por lo tanto solo penetra en células viables. Por consiguiente, consideramos que la marcación con manganeso de células madre embrionarias humanas tiene un gran potencial para la resonancia magnética celular in vivo precisa, con el fin de rastrear el efecto de células madre embrionarias humanas trasplantadas en áreas dañadas por isquemia.Así que eso es todo. Gracias por ver este video y buena suerte con sus experimentos.

in-vitro-labeling-human-embryonic-stem-cells-for-magnetic-resonance

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Para la evaluación de nuevas terapias con células madre es importante no invasiva vía las células inyectadas en vivo. Este video le mostrará cómo etiquetar células madre mesenquimales humanas embrionarias y con los agentes de contraste basados ​​en óxido de hierro en vivo para su posterior RM en vivo.

Etiquetado y hESCs hMSCs con nanopartículas de óxido de hierro para no invasivo en el seguimiento in vivo mediante RM

Este video muestra las técnicas para el etiquetado de las células madre embrionarias y células madre mesenquimales con tintes fluorescentes. Esta técnica se puede utilizar para un seguimiento in vivo de las células madre trasplantadas con técnicas de imagen óptico y de las correlaciones histopatológico con microscopía de fluorescencia.

Etiquetado de las células madre con tintes fluorescentes para la detección no invasiva con imágenes ópticas

Con el creciente interés en terapias con células madre, las técnicas de imagen molecular son ideales para el comportamiento de las células madre de seguimiento tras el trasplante. Genes luciferase reportero le han permitido no invasiva, la evaluación repetida de la supervivencia celular, la ubicación y la proliferación in vivo. Este vídeo demuestra cómo realizar el seguimiento proliferación de células madre en un ratón vivo.

In vitro e in vivo de imágenes de bioluminiscencia gen reportero de células estaminales embrionarias humanas

Objetivo de la presentación es mostrar un método altamente reproducible para generar la matriz asociada implantes de células madre en los defectos del cartílago, que puede ser visualizado con RM. Las células madre son etiquetados con aprobación de la FDA Ferumoxides, mezclado con agarosa, se implantan en los defectos del cartílago y la imagen con un escáner de MR 7T.

Implantación de Ferumoxides Etiquetada células madre mesenquimales humanas en los defectos del cartílago

Se describe una técnica para el etiquetado y el seguimiento de las células madre aprobados por la FDA, superparamagnéticas de óxido de hierro (SPIO), ferumoxytol (Feraheme). Esta técnica de imagen celular que utiliza la resonancia magnética (RM) para la visualización, es fácilmente accesible para su seguimiento a largo plazo y el diagnóstico de engraftments células madre con o sin éxito en los pacientes.

Etiquetado de las células madre con Ferumoxytol, uno de nanopartículas de hierro aprobada por la FDA de óxido

En este artículo se describe una secuencia optimizada de eventos para obtener imágenes multimodal de los injertos celulares en el cerebro de los roedores por medio de: (i) en la bioluminiscencia in vivo y la resonancia magnética, y (ii) el análisis post mortem histológico. La combinación de estas modalidades de imágenes en un solo animal permite la evaluación del injerto celular con alta resolución, sensibilidad y especificidad.

Imagen multimodal de implante de células madre en el sistema nervioso central de ratones

El seguimiento de las células utilizando MRI ha ganado la atención notable en los últimos años. Este protocolo describe el etiquetado de las células dendríticas con flúor...

De las Migraciones células dendríticas mediante resonancia 19F / 1H Magnetic

Se describe un protocolo general para el seguimiento de las células in vivo mediante resonancia magnética en un modelo de ratón con ex vivo las células marcadas. Un protocolo típico para el etiquetado de células, el procesamiento de adquisición de imágenes y la cuantificación se incluye.

In vivo MRI de 19F para el seguimiento de la célula

Se describe una serie de métodos para inyectar colorantes, vectores de ADN, virus, y células con el fin de supervisar tanto el destino celular y el fenotipo de las células endógenas y injertados derivados de células embrionarias o pluripotentes dentro de embriones de ratón en el día embrionario (E) 9,5 y etapas posteriores de desarrollo.

Etiquetado de la célula y de inyección en Desarrollo de embriones de ratón Corazones

Condrogénesis de células madre requiere un ajuste fino de las condiciones de cultivo. A continuación, presentamos un enfoque magnético para la condensación de las células, un paso esencial para iniciar la condrogénesis. Además, mostramos que la maduración dinámica en un biorreactor se aplica estimulación mecánica a las construcciones celulares y mejora la producción de la matriz extracelular cartilaginosa.

3D agregación magnética Stem Cell y biorreactor de maduración para la regeneración del cartílago

Aquí se presenta un protocolo para la entrega y seguimiento de células madre mesenquimales no invasivas (MSC) en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática. Las nanopartículas de óxido de hierro superparamagnético se emplean como una sonda de resonancia magnética (RM) para el etiquetado de MSC y el seguimiento in vivo no invasivo después de la administración intranasal mediante RMN en tiempo real.

Seguimiento de células madre mesenquimales con etiqueta de óxido de hierro superparamagnético mediante RMN después de la entrega intranasal en un modelo de murino de lesión cerebral traumática

Aprenda a etiquetar células estaminales embrionarias humanas con cloruro de manganeso para resonancia magnética. Este método permite evaluar la viabilidad celular mediante señales positivas de MRI, superando las limitaciones del óxido de hierro.

En el etiquetado in vitro de células estaminales embrionarias humanas de Resonancia Magnética

Explorar más videos