Name: Agua Morris laberinto Experimento (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-09-24T00:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 45 s
Description: Aprende a evaluar la memoria espacial en roedores mediante el laberinto de agua de Morris. Este método permite estudiar la función del hipocampo en procesos cognitivos y de aprendizaje.

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Configuración del laberinto de agua <ol><li> El principal componente del laberinto de agua establecido debe ser una piscina redonda, de unos 6 pies de diámetro y unos tres metros de profundidad. Si va a grabar la tarea con una cámara de vídeo, asegúrese de que todas las partes del laberinto está dentro del campo de la cámara de vista. </li><li> Rellene el laberinto de agua con agua del grifo, que debe estar cerca de 26 ° C. Este proceso puede tardar varias horas, por lo que se debe hacer con mucha antelación. Revise periódicamente la temperatura del agua para que sea dentro de un grado de 26 ° C. </li><li> Coloque la plataforma de escape en el centro de la piscina. Durante el entrenamiento, que debe ser expuesto, una pulgada por encima del agua. Esto le enseña a la rata que es una plataforma, y ​​que es la manera de salir del agua. Más tarde, después que el animal está entrenado y listo para la prueba, la plataforma de escape será justo debajo de la superficie del agua, y no será visible debido a que el agua será opaca con leche o con pintura no tóxica. Ahora, el laberinto de agua está listo para el entrenamiento de los animales. </li></ol> Pre-entrenamiento para el laberinto de agua <ol><li> Para la formación laberinto de agua, la plataforma debe estar en el centro de la piscina y se expone una pulgada sobre la superficie, por lo que el animal sabe que está allí. El agua debe estar dentro de un grado de 26 ° C. </li><li> Cada animal se someterá a tres pruebas consecutivas. Primero, coloque el animal en la plataforma durante veinte segundos. </li><li> El laberinto de agua con 4 posiciones de partida: norte, sur, este u oeste. Llevar al animal a una de estas posiciones. Baja del animal en el agua mediante el apoyo con la mano y llevándolo suavemente hacia abajo en el agua de cola final primera. No estresar al animal por mojando en la cabeza primero. </li><li> Dejar que la natación animal / búsqueda de la plataforma para un máximo de 60 segundos. En un primer momento, el animal puede nadar en el borde de la piscina en busca de una salida. Eventualmente, el animal aprende a buscar la plataforma y subir. </li><li> Una vez que el roedor llega a la plataforma, detener el cronómetro, y registrar el tiempo. Si no encuentra la plataforma en 60 segundos, y luego registrar el tiempo de esta prueba de un minuto. No recoja a los animales en caso de no llegar a la plataforma. Enseñar a los animales que deben nadar hacia la plataforma. Por lo tanto, dirigen suavemente al animal a la plataforma con la mano. Deje que el animal se siente en la plataforma durante 15 segundos. Si se cae o salta, suavemente guiará de vuelta. Esto capacitará a los animales que deben permanecer en la plataforma para ser rescatado de la piscina. </li><li> Repita el mismo procedimiento de dos pruebas más, a partir de una dirección diferente para cada ensayo. </li><li> Una vez que el animal ha completado las tres pruebas, se seca con una toalla. Repita el proceso de formación de tres ensayos de todos los animales en forma consecutiva. Mantenga las instrucciones de la misma para todos ellos, y registro de los tiempos. </li><li> Ahora que los animales son entrenados, que están listos para realizar la prueba del laberinto de agua. </li></ol> Análisis del agua laberinto <ol><li> Para comenzar con los ensayos experimentales con el laberinto de agua, llenar el tanque para que la plataforma es de una pulgada por debajo de la superficie del agua. Use leche descremada en seco, o 125 mililitros de productos no tóxicos blanco pintura al temple, para que el agua opaca. </li><li> La temperatura de la iluminación y el agua debe ser el mismo que en el proceso de formación. Cada animal se someterá a 12 pruebas, que serán tres ensayos para cada dirección de inicio. Cada ensayo tendrá una duración de 60 segundos. Antes de comenzar, elegir el orden de las direcciones de partida. No utilice la dirección de comienzo mismo dos veces seguidas, y no repetir el mismo orden para cualquiera de las direcciones </li><li> Frente a la pared de la piscina, el operario cuidador colocará al animal en el agua, y luego va a renunciar a la piscina y se sientan en un lugar designado, mientras que el animal realiza la tarea del laberinto. Un sistema de seguimiento de la conducta animal, como el sistema SMART (San Diego instrumentos) se puede utilizar para controlar el camino, así como otras variables. Grabación en vídeo de cada ensayo es un menos costoso, y conviene perfectamente, alternativa. </li><li> Vigilar el animal hasta que llega a la plataforma, y ​​registrar el tiempo que tomó. Si el animal no llega a la plataforma en 60 segundos, el controlador que guía a la plataforma, como en la formación. De cualquier manera, que el animal repose durante 10 segundos, y luego séquelo y devolver el animal a la jaula de retención. </li><li> Continuar con cada animal para los 12 ensayos, con el cuidador de animales que regresan al mismo lugar designado en cada ensayo. El orden de las pruebas debe ser: una prueba para todos los animales, el ensayo 2 para todos los animales, prueba de 3 para todos los animales, etc Debe haber un intervalo entre ensayos de al menos 2 minutos. Periódicamente, limpiar la piscina, asegúrese de que la plataforma está en su lugar, y comprobar que la temperatura del agua es la misma. </li><li> Después de todos los animales han completado 12 ensayos, que cada uno lleve a cabo una prueba de la sonda, en el quICH de la plataforma se retira de la piscina. El juicio se lleva a cabo la sonda para verificar la comprensión de los animales de la localización de la plataforma, y ​​observar la estrategia que sigue el animal cuando se descubre que la plataforma no está allí. El gestor liberar al animal a partir del norte. Anote el número de veces que el animal cruza el centro de la piscina durante los 30 segundos. </li><li> Cuando todos los ensayos de exploración se completa, se secan los animales y vaciar la piscina. </li></ol>

<ol><li>de Bruin, J. P., Swinkels, W. A., de Brabander, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+learning+of+rats+in+a+Morris+water+maze%3A+involvement+of+the+medial+prefrontal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Response learning of rats in a Morris water maze: involvement of the medial prefrontal cortex.</a> Behav. Brain Res. 85, 47-55 (1997).</li>
<li>Redish, A. D., Touretzky, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+hippocampus+in+solving+the+Morris+water+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Neural.+Comput%22%5BJournal%5D)">The role of the hippocampus in solving the Morris water maze.</a> Neural. Comput. 1, 73-111 (1998).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Res. Rev. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Kallai, J., Makany, T., Karadi, K., Jacobs, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+orientation+strategies+in+Morris-type+virtual+water+task+for+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Spatial orientation strategies in Morris-type virtual water task for humans.</a> Behav. Brain Res. 159, 187-196 (2005).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J. Neurosci. Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+Water+Maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris Water Maze in the study of learning and memory.</a> Int. J. Neurosci. 48, 26-69 (1989).</li>
<li>Kesner, R. P., Exans, R. B., Hunt, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+evidence+in+support+of+the+neurobiological+bases+of+an+attribute+model+of+memory%3A+role+of+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Further evidence in support of the neurobiological bases of an attribute model of memory: role of the hippocampus.</a> Int. J. Neurosci. 21-22, 21-22 (1987-8).</li>
<li>Jarrard, L. E., Okaichi, H., Steward, O., Goldschmidt, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+role+of+hippocampal+connections+in+the+performance+of+place+and+cue+tasks%3A+comparisons+with+damage+to+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">On the role of hippocampal connections in the performance of place and cue tasks: comparisons with damage to the hippocampus.</a> Behav. Neurosci. 98, 946-954 (1984).</li>
<li>Hodges, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maze+procedures%3A+the+radial-arm+and+water+maze+compared%5BTitle%5D)+AND+%22Cogn.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Maze procedures: the radial-arm and water maze compared.</a> Cogn. Brain Res. 3, 167-181 (1996).</li>
<li>Shumake, J., Gonzalez-Lima, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+systems+underlying+susceptibility+to+helplessness+and+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Cogn.+Neurosci.+Rev%22%5BJournal%5D)">Brain systems underlying susceptibility to helplessness and depression.</a> Behav. Cogn. Neurosci. Rev. 2, 198-221 (2003).</li>
<li>Owen, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+the+menstrual+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Physiology of the menstrual cycle.</a> Am. J. Clin. Nutr. 28, 333-338 (1975).</li>
<li>Everett, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+reproduction+in+the+female+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Monogr.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of reproduction in the female rat.</a> Monogr. Endocrinol. 32, 1-133 (1989).</li>
<li>Warren, S. G., Humphreys, A. G., Juraska, J. M., Greenough, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LTP+varies+across+the+estrous+cycle%3A+enhanced+synaptic+plasticity+in+proestrus+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">LTP varies across the estrous cycle: enhanced synaptic plasticity in proestrus rats.</a> Brain Res. 703, 26-30 (1995).</li>
<li>Warren, S. G., Juraska, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+and+nonspatial+learning+across+the+rat+estrous+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spatial and nonspatial learning across the rat estrous cycle.</a> Behav. Neurosci. 111, 259-266 (1997).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

La tarea del laberinto de agua de Morris fue el desarrollo 5. Esta tarea se puede modificar de varias maneras para investigar la memoria de trabajo, la memoria de referencia y la estrategia de la tarea 6. El procedimiento descrito aquí contiene dos variables críticas que representan una desviación de las otras versiones del laberinto de agua: pre-entrenamiento, y las pruebas en un solo día. Antes de la formación - el hipocampo está implicado en la memoria espacial / relacional 7.8. E...

<table><tbody><tr><td>Sistema SMART</td><td>San Diego Instruments</td><td></td><td></td><td>Este sistema no es un requisito &amp;#8211; existen muchos otros sistemas de comportamiento disponibles en el mercado.</td></tr></tbody></table>

agua morris laberinto experimento

Morris Water Maze Experiment

El laberinto acuático de Morris es ampliamente utilizado para estudiar la memoria espacial y el aprendizaje. Los animales se colocan en un charco de agua que es de color opaco con polvo de leche sin grasa o la pintura no tóxica al temple, en la que deben nadar hasta una plataforma de escape oculto. Porque están en el agua opaca, los animales no pueden ver la plataforma, y ​​no puede basarse en el olor para encontrar la ruta de escape. En su lugar, debe confiar en exteriores / extra-laberinto de pistas. Como los animales se familiaricen más con la tarea, que son capaces de encontrar la plataforma con mayor rapidez. Desarrollado por Richard G. Morris en 1984, este paradigma se ha convertido en una de las &quot;normas de oro&quot; de la revista Behavioral Neuroscience.

El laberinto acuático de Morris es una herramienta de gran aceptación para documentar la participación del hipocampo en una tarea de comportamiento.

Agua Morris laberinto Experimento

El laberinto acuático de Morris se utiliza ampliamente para estudiar la memoria espacial y el aprendizaje. Los animales se colocan en una piscina de agua que se ha vuelto opaca mediante la adición de polvo de...

En el laberinto acuático de Morris, los animales se colocan en piscinas de agua donde deben nadar hacia una plataforma de escape. Durante el entrenamiento, la plataforma puede estar expuesta aproximadamente una pulgada por encima del nivel del agua. El animal debe aprender a nadar hacia la plataforma y permanecer en ella para ser rescatado de la piscina.Después de que el animal se entrena, el agua se incrementa y se vuelve opaca con leche o pintura no tóxica. Así, la plataforma queda oculta. El animal debe entonces confiar en su memoria para encontrar la plataforma de escape.Hola, mi nombre es Joseph Nunez. Soy miembro del personal docente del programa de neurociencia en la Universidad Estatal de Michigan. Hoy demostraré el laberinto acuático de Morris.Voy a mostrarle cómo configurar el Mae, cómo entrenar a los animales y cómo evaluarlos. Bien, comencemos. El componente principal del montaje del laberinto acuático debe ser una piscina redonda, de aproximadamente seis pies de diámetro y unos tres pies de profundidad.Si está grabando la tarea con una cámara de video, asegúrese de que todos los lados del laberinto estén dentro del campo de visión de la cámara. Llene el laberinto de agua con agua del grifo, que debe estar cercana a 26 grados Celsius. Esto puede tardar varias horas, por lo que debe hacerse con suficiente antelación.Verifique periódicamente la temperatura del agua para que esté más o menos un grado por encima o por debajo de 26 grados Celsius. Coloque la plataforma de escape en el centro de la piscina. Durante el entrenamiento, puede dejarse expuesta aproximadamente una pulgada por encima del nivel del agua.Esto enseña a la rata. Hay una plataforma, y esa es la forma de salir del agua. Ahora estamos listos para comenzar el entrenamiento de los animales en el laberinto acuático.El laberinto acuático tiene cuatro posiciones de inicio: norte, sur, este u oeste. Lleve al animal a una de estas posiciones. Introduzca al animal en el agua sosteniéndolo con la mano y colóquelo suavemente en el agua por el extremo de la cola.Primero, no estrese al animal sumergiendo su cabeza en el agua. Deje que el animal nade durante un máximo de 60 segundos. Al principio, el animal puede nadar alrededor de los bordes de la piscina buscando una salida.Finalmente, el animal alcanzará una plataforma y subirá. Una vez que el roedor llegue a la plataforma, detenga el cronómetro y registre el tiempo. Si no encuentra la plataforma en 60 segundos, registre el tiempo correspondiente al ensayo.Como un minuto. No levante al animal. Si no logra alcanzar la plataforma, enséñele que debe nadar hasta la plataforma.Oriente al animal hacia la plataforma con su mano, de manera bastante suave. Deje que el animal permanezca sentado durante 15 segundos. Si cae o salta, rediríjalo suavemente de vuelta.Esto entrenará al animal para que se quede en la plataforma con el fin de ser rescatado de la piscina. Repita el mismo procedimiento para otros dos ensayos, comenzando en una ubicación diferente para cada uno. Una vez que deban completarse, seque al animal con una toalla tras los tres ensayos.Repita el proceso de entrenamiento de tres ensayos para todos los animales. Mantenga las direcciones iguales para todos ellos y registre sus tiempos. Ahora que los animales están entrenados, están listos para realizar la prueba del laberinto acuático.Para comenzar los ensayos experimentales del agua Mae, termine de llenar el tanque, de modo que la plataforma quede aproximadamente a una pulgada por debajo de la superficie del agua. Utilice leche descremada en polvo o temple blanco no tóxico para hacer el agua opaca.La iluminación y la temperatura del agua deben ser las mismas que en el proceso de entrenamiento. Cada animal realiza 12 ensayos, tres desde cada dirección de inicio. Cada ensayo durará 60 segundos.Antes de comenzar. Elija el orden de las direcciones iniciales. No utilice las mismas direcciones iniciales dos veces seguidas, y tampoco repita el mismo orden para ninguna de las direcciones.Siga al animal hasta que alcance una plataforma y registre el tiempo que tardó. Si el animal no alcanza la plataforma en 60 segundos, el manipulador lo guiará hasta ella como en el entrenamiento. En cualquier caso, deje que el animal permanezca sentado durante 10 segundos y luego séquelo.Continúe con cada animal durante los 12 ensayos, regresando el manipulador al mismo lugar designado. Durante cada ensayo, limpie directamente la piscina, asegúrese de que la plataforma esté en su lugar y verifique que la temperatura del agua sea la misma. Puede utilizar el sistema de software de seguimiento de video inteligente para detectar y analizar el comportamiento durante los ensayos de prueba. Eso es todo.Le mostraré cómo entrenar a los animales y cómo evaluarlos. Este es un paradigma conductual muy bien establecido. Buenas suerte con los experimentos.

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Investigación

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