5.1
- Les scientifiques peuvent désactiverou supprimer un gène chez les animaux, souvent une souris,pour en apprendre plus sur la fonction de ce gène,généralement en le remplaçant par un vecteur ciblant,un morceau d'ADN manipulé. Le vecteur ciblant a des séquences homologues,identiques aux séquences avant et après le gène. Il a aussi généralement un marqueur de sélection positive,comme un gène pour la résistance à la néomycine, ou NeoR,au milieu, et un marqueur de sélection négative,comme le gène pour la thymidine kinase, TK, à un bout.
Une fois introduit dans les cellules souches embryonnaires,il remplace la gène grâce à la recombinaison homologue,qui a naturellement lieu entre des bouts d'ADNaux séquences similaires. Les cellules où le gène a été correctement remplacécontiendront le marqueur positif, mais pas le négatif,ce qui permet de les identifier en culture. Ces cellules sont ensuite insérées dans un embryon de souriset implantée dans l'utérus d'une femelle.
La souris qui en résulte présente une combinaisonde cellules normales et de cellules au gène manquantsur un chromosome. Ces souris sont ensuite élevéespour générer ce qu'on appelle des souris "knock-out",qui sont homozygotes pour la suppressiondans toutes leurs cellules.
Pour en savoir plus sur la fonction d’un gène, les chercheurs peuvent observer ce qui se passe lorsque le gène est inactivé ou invalidé, en créant des…
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